随着经济的发展和人们生活水平的提高，对肉类的需要从数量向质量发生转变。2015年中国全年猪、牛、羊、禽肉产量8 625.0万t，其中猪肉产量5 486.5万t[1]，占总肉类产量的60%以上，但由于生产者过度追求生长速度、饲料转化效率和瘦肉率，导致猪肉品质下降[2]。畜牧生产中提高生长性能的同时也要关注猪肉品质。
支链氨基酸包括亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸，是主要在肝外组织氧化的必需氨基酸，主要氧化部位在肌肉[3]。大量研究表明支链氨基酸对体内能量平衡和脂质代谢发挥重要作用[4-6]，但是关于支链氨基酸之一的异亮氨酸的研究较少，而且以往的研究主要关注其需要量。研究表明，饲粮中异亮氨酸缺乏时显著降低肥育猪的生长性能[7-10]，但进一步添加异亮氨酸对肥育猪生长性能没有显著影响[7-8]。生产中肥育猪饲粮中异亮氨酸常常缺乏，但饲粮异亮氨酸水平对猪胴体性状和肉品质的影响鲜有报道。Dean等[8]发现玉米-豆粕饲粮中添加异亮氨酸后呈二次曲线模式增加肥育猪背膘厚、总脂肪含量和体脂百分比，但异亮氨酸对猪肉品质的影响目前还尚不清楚。因此，本研究通过在饲粮中添加不同水平的异亮氨酸，研究异亮氨酸缺乏或超量添加对肥育猪生长性能、胴体性状和肉品质的影响，为改善猪肉品质提供理论依据。
1 材料与方法 1.1 试验设计与饲粮选取体重为(77.0±0.1) kg的杜×长×大三元杂交去势公猪72头，根据初始体重随机分为3个组，每组6个重复，每个重复4头。3组试验猪分别饲喂含0.25%(低异亮氨酸水平，表现为异亮氨酸缺乏，L-Ile组)、0.39%(NRC推荐异亮氨酸水平，N-Ile组，作为对照组)和0.53%标准回肠可消化异亮氨酸(高异亮氨酸水平，表现为异亮氨酸超量添加，H-Ile组)的试验饲粮。试验饲粮以玉米-豆粕型饲粮配方为基础，通过添加合成氨基酸，使除异亮氨酸外的其他所有必需氨基酸及氮水平满足NRC(2012) 肥育猪(75~100 kg)饲养标准推荐量，并通过调节饲粮丙氨酸含量使3种试验饲粮处于等氮水平。试验饲粮组成及营养水平见表 1。
|
表 1 试验饲粮组成及营养水平(饲喂基础) Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (as-fed basis) |
试验在农业部饲料工业中心动物试验基地(河北丰宁)进行。采用全封闭式猪舍饲养，试验前对猪舍进行彻底消毒和清理，并对试验猪进行常规驱虫和免疫。猪舍内采用人工控制温度、湿度和通风强度，舍内温度保持在20 ℃左右。试验猪以重复为单位随机分配到18个栏(2.6 m×1.8 m×0.9 m)中，每个栏内设备和条件一致，采用不锈钢可调式料槽，乳头式饮水器，试验猪自由采食和饮水。整个试验过程严格按照猪场饲养管理制度和中国农业大学动物福利相关标准执行。试验期为28 d。
1.3 样品采集饲养试验结束时，试验猪禁食12 h，每栏选取接近平均体重的猪1头，前腔静脉采血，静置0.5 h后在4 ℃、3 500 r/min离心10 min制备血清，置于-20 ℃冷冻保存，用于血清生理生化指标和氨基酸含量分析。次日，将18头(每组6头)猪运输45 min至屠宰场，休息2 h后电击致晕放血屠宰，测定胴体品质和肉品质。
1.4 检测指标 1.4.1 饲粮营养组分测定按照AOAC(2003) 标准测定饲料原料和饲粮中粗蛋白质、钙、磷和氨基酸含量。粗蛋白质、钙和磷的含量分别采用凯氏定氮法、乙二胺四乙酸(EDTA)滴定法和钼酸铵分光光度法测定。氨基酸含量测定方法为：样品经盐酸水解用氨基酸自动分析仪(L-8800，日本)测定15种氨基酸含量；经甲酸氧化用氨基酸自动分析仪测定含硫氨基酸含量，经氢氧化钠水解用反相液相色谱仪(Waters2690，MA，美国)测定色氨酸含量。
1.4.2 生长性能测定于试验开始和结束时对试验猪逐个称重，计算平均日增重(average daily gain，ADG)；每周以栏为单位结料，称重后计算平均日采食量(average daily feed intake，ADFI)，根据平均日增重和平均日采食量计算料重比(feed/gain，F/G)。
1.4.3 胴体性状测定将18头猪屠宰去头、蹄、毛、尾和内脏(留板油和肾脏)后，参照《瘦肉型猪胴体性状测定技术规范》(NY/T 825—2004) 方法测定屠宰率、热胴体重和背膘厚(用游标卡尺测量肩部最厚处、最后肋和腰荐结合处3点背膘厚度，取3点平均值)，用游标卡尺测量最后肋处背最长肌横截面的长度和宽度，眼肌面积按照以下公式计算：
眼肌面积(cm2)=最后肋处背最长肌横截面长度(cm)×最后肋处背最长肌横截面宽度(cm)×0.7。
1.4.4 肉品质测定肥育猪屠宰后现场测定肉色、大理石纹评分、肉色评分和pH45 min(屠宰后45 min的pH)。取第10~12肋骨处背最长肌样，置于4 ℃冰箱，测定肉样的pH24 h(屠宰后24 h的pH)和滴水损失，另取50 g背最长肌样-20 ℃保存，用于测定肌内脂肪含量。
分别于屠宰后45 min和24 h时将pH计(DK-2730，SFK-Technology，丹麦)电极探头完全包埋于背最长肌中，深度不小于1 cm，待数值稳定后读取pH；将背最长肌平置于白色瓷盘中，用大理石纹评分卡和肉色标准评分卡(oficial color and marbling standards，NPPC，美国)对背最长肌大理石纹和肉色进行评分；采用肉色仪(CR410，Minolta，日本)测定背最长肌肉色[亮度(L*)、红度(a*)、黄度(b*)]值。
参照《猪肌肉品质测定技术规范》(NY/T 821—2004) 方法测定肉样的滴水损失；切取1 cm厚100 g左右肉样放在密封袋中置于70 ℃水浴，待肉中心温度达到70 ℃时，用吸水纸吸取肉表面附着水，测定烹饪前后背肌重量，计算烹饪损失；另取100 g左右肉样于70 ℃水浴20 min后，用1.27 cm取样器沿肌纤维走向取10个1 cm厚的肉样，用肌肉嫩度仪(C-LM3B, Tenovo, 中国)测定肉样剪切力，以10个肉样平均值表示为剪切力值。
将-20 ℃保存的背最长肌(约50 g)切成2~3 mm薄片状，置于真空冷冻干燥器(Model 4.5, Labconco Corp，美国)中冷冻干燥72 h，然后碾磨成粉末状，采用索氏提取法测定肌内脂肪含量。
1.4.5 血清生理生化指标和游离氨基酸含量测定血清中总胆固醇(total cholesterol，TC)、甘油三酯(triglyceride，TG)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein，HDL)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein，LDL)、游离脂肪酸(free fatty acid，FFA)和胰岛素含量，利用中生北控科技有限公司试剂盒在全自动生化仪(BS-420，Beckman，美国)上测定；血清中乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase，LDH)、肌酸激酶(creatine jubase，CK)和脂肪酶(lipase，LPS)活性以及尿素氮、葡萄糖含量采用南京建成生物工程研究所的试剂盒测定，严格按照说明书操作。
血清中游离氨基酸浓度采用经典茚三酮柱后衍生法原理用氨基酸分析仪(S-433D，Sykam，德国)测定，具体操作如下：取0.5 mL血清于离心管中，加入1.5 mL 4%磺基水杨酸振荡摇匀并冰浴20 min，加入0.175 mL氢氧化锂振荡摇匀，电子秤配平后于4 ℃下110 000 r/min离心30 min，取上清液用0.1 μm滤膜过滤后上机测定血清游离氨基酸浓度。
1.5 数据统计分析试验数据采用SAS 9.4统计软件中一般线性模型(GLM)进行线性和二次回归分析，差异显著时采用Duncan氏法进行多重比较；P < 0.05为差异显著，0.05 ≤ P < 0.10为有差异显著趋势。
2 结果与分析 2.1 饲粮异亮氨酸水平对肥育猪生长性能的影响由表 2可知，饲粮异亮氨酸水平对肥育猪的平均日增重和平均日采食量均无显著影响(P > 0.05)，但随着异亮氨酸水平的增加，料重比呈线性(P < 0.05) 和二次(P < 0.05) 降低。与对照组相比，采食异亮氨酸缺乏饲粮的肥育猪料重比显著升高(P < 0.05)。
|
|
表 2 饲粮异亮氨酸水平对肥育猪生长性能的影响 Table 2 Effects of dietary Ile level on growth performance of finishing pigs |
由表 3可知，随着饲粮异亮氨酸水平的增加，肥育猪热胴体重呈线性(P < 0.05) 和二次(P < 0.05) 增加，背膘厚、屠宰率和眼肌面积呈二次增加(P < 0.05)。与对照组相比，采食异亮氨酸缺乏饲粮的肥育猪的热胴体重、屠宰率、背膘厚和眼肌面积均显著降低(P < 0.05)，采食异亮氨酸超量添加饲粮的肥育猪的热胴体重和屠宰率也显著降低(P < 0.05)。
|
|
表 3 饲粮异亮氨酸水平对肥育猪胴体性状的影响 Table 3 Effects of dietary Ile level on carcass traits of finishing pigs |
由表 4可知，饲粮异亮氨酸水平对肥育猪的背最长肌pH45 min、pH24 h、烹饪损失和大理石纹评分均无显著影响(P>0.05)。随着饲粮异亮氨酸水平的增加，肥育猪的背最长肌肌内脂肪含量线性提高(P < 0.05)、剪切力线性下降(P < 0.05)，肉色评分、黄度值和滴水损失呈二次增加(P < 0.05)。与对照组相比，采食异亮氨酸缺乏饲粮的肥育猪的背最长肌肉色评分、黄度值和滴水损失显著降低(P < 0.05)，采食异亮氨酸超量添加饲粮的肥育猪的背最长肌黄度值和滴水损失显著降低(P < 0.05)。
|
|
表 4 饲粮异亮氨酸水平对肥育猪肉品质的影响 Table 4 Effects of dietary Ile level on meat quality of finishing pigs |
由表 5可知，随着饲粮异亮氨酸水平的增加，血清TG含量呈线性增加(P < 0.05)，血清尿素氮含量呈线性降低(P < 0.05)，血清LPS活性有线性增加趋势(P=0.08)，血清TC、HDL和LDL含量呈二次增加(P < 0.05)。与对照组相比，采食异亮氨酸缺乏或超量添加饲粮的肥育猪血清中TC、HDL和LDL含量均显著降低(P < 0.05)，采食异亮氨酸超量添加饲粮的肥育猪血清葡萄糖含量显著增加(P < 0.05)。饲粮异亮氨酸水平对肥育猪血清中FFA、胰岛素含量及LDH、CK活性均没有产生显著影响(P > 0.05)。
|
|
表 5 饲粮异亮氨酸水平对肥育猪血清生理生化指标的影响 Table 5 Effects of dietary Ile level on serum physiological and biochemical indexes of finishing pigs |
由表 6可知，饲粮异亮氨酸水平对血清中游离氨基酸浓度影响较大，随着饲粮异亮氨酸水平的增加，血清中组氨酸、异亮氨酸、半胱氨酸和丝氨酸浓度呈线性增加(P < 0.05)，血清中苏氨酸、丙氨酸和脯氨酸的浓度呈二次增加(P < 0.05)，而血清中亮氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸、甘氨酸和酪氨酸的浓度呈线性(P < 0.05) 和二次(P < 0.05) 增加。对血清游离氨基酸进行分类汇总分析发现，随着饲粮异亮氨酸水平的增加，血清中必需氨基酸、非必需氨基酸和总氨基酸的浓度呈线性(P < 0.05) 和二次(P < 0.05) 增加。
|
|
表 6 饲粮异亮氨酸水平对肥育猪血清游离氨基酸浓度的影响 Table 6 Effects of dietary Ile level on free amino acid concentrations in serum of finishing pigs |
本次试验动物选取(77.0±0.1) kg的三元杂交去势公猪，国内《猪饲养标准》(NY/T 65—2004) 中瘦肉型生长肥育猪饲粮营养标准只推荐到60~90 kg生长阶段，因此试验营养水平参照NRC(2012) 肥育猪(75~100 kg)饲养标准推荐量。如表 1所示，3种试验饲粮中除异亮氨酸外其余必需氨基酸的有效含量及氮水平基本一致且满足NRC(2012) 营养需要推荐水平，试验效应主要来源于饲粮中异亮氨酸水平的差异。
3.1 饲粮异亮氨酸水平对肥育猪生长性能的影响以玉米-豆粕型饲粮配方配制基础饲粮时，异亮氨酸一般不缺乏，当豆粕含量较少、蛋白质水平降低或采用血粉作为部分蛋白质来源时常常发生异亮氨酸缺乏的情况。大量研究表明，以玉米、血粉配制异亮氨酸缺乏的基础饲粮时，随着异亮氨酸水平的增加，肥育猪平均日增重、平均日采食量和肉料比(G/F)显著提高[7, 8, 11-12]；以玉米、豆粕配制基础饲粮时，异亮氨酸缺乏显著降低料重比[8]、平均日增重和平均日采食量[7]，但在满足异亮氨酸需要量的基础上再添加异亮氨酸则对生长性能没有显著影响[7-8]。本试验中，饲粮异亮氨酸水平对肥育猪的平均日增重和平均日采食量没有产生显著影响，但料重比随饲粮异亮氨酸水平的增加表现为线性和二次降低，与Dean等[8]的研究结果一致。因此，异亮氨酸缺乏会导致肥育猪的料重比下降，但异亮氨酸超量添加没有进一步改善料重比。
3.2 饲粮异亮氨酸水平对肥育猪胴体性状的影响本试验发现，随着饲粮异亮氨酸水平的增加，肥育猪的热胴体重和背膘厚呈线性和二次增加，屠宰率和眼肌面积呈二次增加，这与Dean等[8]在玉米-豆粕型饲粮中添加异亮氨酸的结果部分一致，其发现增加饲粮异亮氨酸水平可以二次增加肥育猪背膘厚、总脂肪含量和体脂百分比，但对眼肌面积和屠宰率没有显著影响。然而，Figueroa等[13]发现在低蛋白质饲粮中添加异亮氨酸显著降低小母猪第10肋背膘厚和眼肌面积，与上述结果不一致，可能与猪的品种、性别、生长阶段、对异亮氨酸的需要和利用不同有关。本试验结果表明，饲粮中异亮氨酸缺乏会降低肥育猪的胴体性状，而超量添加异亮氨酸也会对胴体性状产生不利影响，但不如异亮氨酸缺乏时严重。
3.3 饲粮异亮氨酸水平对肥育猪肉品质的影响肉品质最关键的特性为肉色、风味、嫩度、多汁性和持水力。Fernandez等[14]指出，当肌内脂肪含量增加到2.5%左右时，嫩度、多汁性和风味也大幅度提高；Font-I-Furnols等[15]发现，当肌内脂肪含量增加时消费者对猪肉的接受性也会提高。本试验发现，增加饲粮异亮氨酸水平提高了肥育猪肌内脂肪含量，降低剪切力，增加了肌肉嫩度。Khliji等[16]指出肉色是肉品质及肉新鲜度的一个重要指标，而消费者购买肉的决定取决于肉色。本试验发现，异亮氨酸缺乏或超量添加对育肥猪背最长肌的红度值没有显著影响，但显著降低了肉色评分和黄度值。另外，系水力也是肉品质指标之一，表现了屠宰后肉对水分的束缚能力[17]。Savage等[18]发现随着肉中水分的流失，肌肉中蛋白质和可溶性风味物质也会流失，影响肉品质。Pearce等[19]也指出水分的存在对肌肉的物理形态、风味、肉色等具有重要的意义。系水力通常通过滴水损失大小来反映，本试验发现饲粮中异亮氨酸缺乏或超量添加都显著降低了肥育猪背最长肌滴水损失，提高了肌肉的系水力。以上结果表明，饲粮异亮氨酸缺乏虽然降低了滴水损失，但同时也降低了肌内脂肪含量、肌肉嫩度和肉色评分，对肉品质有不利影响；当饲粮异亮氨酸超量添加时，表现出最高肌内脂肪含量、最低剪切力和滴水损失，虽然肉色评分较低，但相对具有较好肉品质。
3.4 饲粮异亮氨酸水平对肥育猪血清生理生化指标的影响血液生理生化指标可以反映机体生理机能及代谢状况。血清尿素氮是机体蛋白质、氨基酸代谢的终产物，可以较准确地反映机体蛋白质代谢和氨基酸间的平衡，当氨基酸更平衡时，血清尿素氮含量较低[20]。本试验发现，饲粮异亮氨酸水平的增加线性降低了肥育猪血清尿素氮含量，说明本试验条件下，异亮氨酸超量添加的饲粮氨基酸可能更平衡。血脂含量可以反映机体脂类代谢的情况，LDL能将肝脏合成的内源性胆固醇运到肝外组织，保证组织细胞对胆固醇的需求，而HDL能将肝外细胞释放的胆固醇转运到肝脏，防止胆固醇在血中聚积，防止动脉粥样硬化[21]。Sink等[22]发现血清TC的含量与机体脂肪沉积以及人类冠心病的发病率正相关，Anderson等[23]也指出血清中TC或低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量增加1%将会增加2%~3%患冠心病的风险。本试验中，饲粮异亮氨酸缺乏或超量添加都显著降低了血清中TC、HDL和LDL含量，但异亮氨酸水平的增加线性增加了血清TG含量，且LPS活性有增加趋势，说明饲粮异亮氨酸水平影响了机体脂肪代谢，肥育猪背膘厚以及肌内脂肪含量发生变化可能与此有关。另外，饲粮异亮氨酸缺乏或超量添加增加了血清中葡萄糖含量，对机体糖代谢也产生了影响。
3.5 饲粮异亮氨酸水平对肥育猪血清游离氨基酸浓度的影响血清中氨基酸主要来源于组织蛋白质的降解以及肠道对饲粮营养物质的吸收摄入[24]，餐后2.5 h血清氨基酸浓度被认为可以反映饲粮氨基酸吸收情况[25]，餐后8 h血清游离氨基酸浓度被认为可以一定程度反映机体氨基酸代谢状况[26]，当饲粮氨基酸满足动物需要时，氨基酸进一步平衡可以降低血清游离氨基酸浓度。本试验结果发现，异亮氨酸缺乏显著降低血清中游离的必需氨基酸、非必需氨基酸和总氨基酸浓度，具体表现为降低了组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、丝氨酸、丙氨酸、脯氨酸、甘氨酸和酪氨酸的浓度。涉及支链氨基酸的研究往往会考虑3种氨基酸(亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸)之间的关系，以往研究指出支链氨基酸结构相似，代谢过程中共用支链氨酸转氨酶和脱氢酶使得3种氨基酸之间存在拮抗作用[27-28]。大量研究也表明，饲粮中超量添加亮氨酸会显著降低血清中异亮氨酸和缬氨酸的含量[27-28]，Wiltafsky等[27]指出这种影响是由于超量添加亮氨酸激活肝脏支链酮酸脱氢酶活性引起的。本试验中，与对照组相比，异亮氨酸超量添加降低了血清中亮氨酸和缬氨酸的浓度，与Cervantes等[29]的结果一致，但异亮氨酸缺乏时，血清中亮氨酸和缬氨酸的浓度也显著降低，推测可能是异亮氨酸缺乏时机体对支链氨基酸的需要增强，从而增加亮氨酸和缬氨酸的代谢来满足机体需要。Cervantes等[29]还发现饲粮异亮氨酸超量添加能够显著增加阳离子氨基酸转运载体1(CAT-1) 的表达，降低血清中苏氨酸的浓度。本试验中，饲粮中异亮氨酸的超量添加同样引起血清中苏氨酸浓度显著降低，与Cervantes等[29]所得结果一致。以上结果表明，饲粮异亮氨酸缺乏降低了机体内氨基酸池，由此对机体蛋白质周转可能产生的影响有待于进一步研究。
4 结论① 饲粮异亮氨酸缺乏对肥育猪生长性能、胴体性状和肉品质有负面影响；饲粮异亮氨酸超量添加显著降低血清尿素氮含量、背最长肌的剪切力和滴水损失，增加肌内脂肪含量，但会以降低胴体重、屠宰率为代价。
② 饲粮异亮氨酸水平对机体三大营养物质代谢产生了影响，异亮氨酸缺乏时显著降低血清中游离的必需氨基酸、非必需氨基酸和总氨基酸浓度以及脂类代谢相关指标，增加血清葡萄糖含量；异亮氨酸超量添加显著降低了血清中TC、HDL和LDL含量，增加了血清中TG和葡萄糖含量。
| [1] | 国家统计局. 中国统计年鉴2016[M]. 北京: 中国统计出版社, 2016: 12-14. |
| [2] | 尹靖东, 李德发. 猪肉质形成的分子机制与营养调控[J]. 动物营养学报, 2014, 26(10) :2979–2985. DOI: 10.3969/j.issn.1006-267x.2014.10.009 |
| [3] | 刘春生, 张大鹏, 刘文宽, 等. 支链氨基酸及其在泌乳母猪营养中的研究现状[J]. 饲料工业, 2006, 27(1) :25–26. |
| [4] | DUAN Y H, DUAN Y M, LI F N, et al. Effects of supplementation with branched-chain amino acids to low-protein diets on expression of genes related to lipid metabolism in skeletal muscle of growing pigs[J]. Amino Acids, 2016, 48(9): 2131–2144. DOI: 10.1007/s00726-016-2223-2 |
| [5] | GOICHON A, CHAN P, LECLEIRE S, et al. An enteral leucine supply modulates human duodenal mucosal proteome and decreases the expression of enzymes involved in fatty acid beta-oxidation[J]. Journal of Proteomics, 2013, 78: 535–544. DOI: 10.1016/j.jprot.2012.10.024 |
| [6] | ARAKAWA M, MASAKI T, NISHIMURA J, et al. The effects of branched-chain amino acid granules on the accumulation of tissue triglycerides and uncoupling proteins in diet-induced obese mice[J]. Endocrine Journal, 2011, 58(3): 161–170. DOI: 10.1507/endocrj.K10E-221 |
| [7] | FU S X, KENDALL D C, FENT R W, et al. True ileal digestible (TID) isoleucine:lysine ratio of late-finishing barrows fed corn-blood cell or corn-amino acid diets[J]. Journal of Animal Science, 2005, 82: 67. |
| [8] | DEAN D W, SOUTHERN L L, KERR B J, et al. Isoleucine requirement of 80-to 120-kilogram barrows fed corn-soybean meal or corn-blood cell diets[J]. Journal of Animal Science, 2005, 83(11): 2543–2553. DOI: 10.2527/2005.83112543x |
| [9] | KENDALL D C, KERR B J, FENT R W, et al. Determination of the true ileal digestible isoleucine requirement for 90 kg barrows[J]. Journal of Animal Science, 2004, 82(Suppl.2): 67. |
| [10] | 郑春田. 低蛋白质日粮补充异亮氨酸对猪蛋白质周转代谢和免疫机能的影响[D]. 博士学位论文. 北京: 中国农业大学, 2000: 92-104. |
| [11] | WILTAFSKY M K, BARTELT J, RELANDEAU C, et al. Estimation of the optimum ratio of standardized ileal digestible isoleucine to lysine for eight-to twenty-five-kilogram pigs in diets containing spray-dried blood cells or corn gluten feed as a protein source[J]. Journal of Animal Science, 2009, 87(8): 2554–2564. DOI: 10.2527/jas.2008-1320 |
| [12] | KENDALL D C.Opportunities and limitations for low-protein diet formulation in swine[D].Ph.D.Thesis.Columbia:University of Missouri-Columbia, 2004. |
| [13] | FIGUEROA J L, LEWIS A J, MILLER P S, et al. Growth, carcass traits, and plasma amino acid concentrations of gilts fed low-protein diets supplemented with amino acids including histidine, isoleucine, and valine[J]. Journal of Animal Science, 2003, 81(6): 1529–1537. DOI: 10.2527/2003.8161529x |
| [14] | FERNANDEZ X, MONIN G, TALMANT A, et al. Influence of intramuscular fat content on the quality of pig meat-1.Composition of the lipid fraction and sensory characteristics of m.longissimus lumborum[J]. Meat Science, 1999, 53(1): 59–65. DOI: 10.1016/S0309-1740(99)00037-6 |
| [15] | FONT-I-FURNOLS M, TOUS N, ESTEVE-GARCIA E, et al. Do all the consumers accept marbling in the same way? The relationship between eating and visual acceptability of pork with different intramuscular fat content[J]. Meat Science, 2012, 91(4): 448–453. DOI: 10.1016/j.meatsci.2012.02.030 |
| [16] | KHLIJI S, VAN DE VEN R, LAMB T A, et al. Relationship between consumer ranking of lamb colour and objective measures of colour[J]. Meat Science, 2010, 85(2): 224–229. DOI: 10.1016/j.meatsci.2010.01.002 |
| [17] | HUFF-LONERGAN E, LONERGAN S M. Mechanisms of water-holding capacity of meat:the role of postmortem biochemical and structural changes[J]. Meat Science, 2005, 71(1): 194–204. DOI: 10.1016/j.meatsci.2005.04.022 |
| [18] | SAVAGE A W J, WARRISS P D, JOLLEY P D. The amount and composition of the proteins in drip from stored pig meat[J]. Meat Science, 1990, 27(4): 289–303. DOI: 10.1016/0309-1740(90)90067-G |
| [19] | PEARCE K L, ROSENVOLD K, ANDERSEN H J, et al. Water distribution and mobility in meat during the conversion of muscle to meat and ageing and the impacts on fresh meat quality attributes-A review[J]. Meat Science, 2011, 89(2): 111–124. DOI: 10.1016/j.meatsci.2011.04.007 |
| [20] | COMA J, ZIMMERMAN D R, CARRION D. Relationship of rate of lean tissue growth and other factors to concentration of urea in plasma of pigs[J]. Journal of Animal Science, 1995, 73(12): 3649–3656. DOI: 10.2527/1995.73123649x |
| [21] | 计成. 动物营养学[M]. 北京: 高等教育出版社, 2008. |
| [22] | SINK J D, WILSON L L, MCCARTHY R D, et al. Interrelationships between serum lipids, energy intake, milk-production, growth and body characteristics in Angus-Holstein cows and their progeny[J]. Journal of Animal Science, 1973, 36(2): 313–317. DOI: 10.2527/jas1973.362313x |
| [23] | ANDERSON J W, KONZ E C. Obesity and disease management:effects of weight loss on comorbid conditions[J]. Obesity Research, 2001, 94(Suppl.11): 326S–334S. |
| [24] | ADIBI S A, MERCER D W. Protein digestion in human intestine as reflected in luminal, mucosal, and plasma amino-acid concentrations after meals[J]. Journal of Clinical Investigation, 1973, 52(7): 1586–1594. DOI: 10.1172/JCI107335 |
| [25] | YEN J T, KERR B J, EASTER R A, et al. Difference in rates of net portal absorption between crystalline and protein-bound lysine and threonine in growing pigs fed once daily[J]. Journal of Animal Science, 2004, 82(4): 1079–1090. DOI: 10.2527/2004.8241079x |
| [26] | LANGER S, FULLER M F. Interactions among the branched-chain amino acids and their effects on methionine utilization in growing pigs:effects on nitrogen retention and amino acid utilization[J]. British Journal of Nutrition, 2000, 83(1): 43–48. |
| [27] | WILTAFSKY M K, PFAFFL M W, ROTH F X. The effects of branched-chain amino acid interactions on growth performance, blood metabolites, enzyme kinetics and transcriptomics in weaned pigs[J]. British Journal of Nutrition, 2010, 103(7): 964–976. DOI: 10.1017/S0007114509992212 |
| [28] | GATNAU R, ZIMMERMAN D R, NISSEN S L, et al. Effects of excess dietary leucine and leucine catabolites on growth and immune-responses in weanling pigs[J]. Journal of Animal Science, 1995, 73(1): 159–165. DOI: 10.2527/1995.731159x |
| [29] | CERVANTES-RAMÍREZ M, MÉNDEZ-TRUJILLO V, ARAIZA-PIÑA B A, et al. Supplemental leucine and isoleucine affect expression of cationic amino acid transporters and myosin, serum concentration of amino acids, and growth performance of pigs[J]. Genetics and Molecular Research, 2013, 12(1): 115–126. DOI: 10.4238/2013.January.24.3 |