我国是食用菌大国,随着工厂化食用菌生产的发展,产生了大量的食用菌废弃培养基——菌糠。菌糠含有丰富的生物活性物质及蛋白质、脂肪、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、钙、磷等营养物质,具有独特的香味和良好的适口性,其作为非常规饲料原料开发利用成为近几年的热点课题,可作为动物饲料原料利用,避免菌糠废料造成的资源浪费和环境污染,也能解决我国当前饲料资源紧缺、人畜争粮等问题。金针菇菌糠是一种常见菌糠,其在动物饲粮中添加不仅可提高生长性能、机体免疫力,而且能改善屠宰性能、畜禽产品品质和养殖环境,同时降低生产成本[1]。朱波等[2]研究表明,草鱼饲料中添加5%的金针菇菌渣可提高其生长性能,改善肠道组织结构,提高肠道消化酶活性。王霞等[3]研究了金针菇菌渣对羔羊生长性能等指标的影响,结果发现,在粗饲料中添加30%的金针菇菌渣可促进羔羊的生长发育、采食行为及反刍行为。张彤瑶[4]研究发现,肉鸡饲粮中添加2%~6%的金针菇菌糠能显著提高其生长性能和免疫水平。Lee等[5]认为蛋鸡饲粮中添加4%的金针菇菌糠可改善蛋品质,抑制肠道病原菌的增殖和减少粪便中氨气(NH3)的排放。然而,目前有关金针菇菌糠在蛋鸭养殖生产中的应用研究尚未见报道。因此,本试验以临武鸭为试验对象,通过饲喂添加不同水平金针菇菌糠的饲粮,研究其对22~31周龄临武鸭产蛋性能、蛋品质及血清生化、抗氧化指标的影响,为金针菇菌糠作为饲料资源在蛋鸭养殖中安全和高效利用提供理论依据。
1 材料与方法 1.1 试验材料于湖南某食用菌生产公司购买无污染、无腐败的金针菇培养基,撕去外包膜,用工具将其分割成小块,经晒干粉碎后,过60目筛制成金针菇菌糠。采用105 ℃恒重法测定金针菇菌糠的干物质含量,采用凯氏定氮法测定粗蛋白质含量,采用索氏提取法测定粗脂肪含量,采用酸碱处理法测定粗纤维含量,采用灰化法测定粗灰分含量,采用高锰酸钾滴定法测定钙含量,采用钼黄比色法测定总磷含量,使用全自动氧弹式量热仪(5E-C5500,长沙开元仪器有限公司)测定总能,使用氨基酸分析仪(S-433D,赛卡姆公司,德国)测定氨基酸含量,金针菇菌糠常规营养成分含量见表 1,金针菇菌糠氨基酸含量见表 2。
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表 1 金针菇菌糠常规营养成分含量(风干基础) Table 1 Routine nutrient contents of Flammulina velutipes bran (air-dry basis) |
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表 2 金针菇菌糠氨基酸含量(风干基础) Table 2 Amino acid contents of Flammulina velutipes bran (air-dry basis) |
选取300只健康、产蛋率接近的22周龄临武鸭,随机分为5组,每组6个重复,每个重复均10只鸭。饲粮参照NRC(1994)[6]及《临武鸭营养需要》[7]进行配制,对照组饲喂不添加金针菇菌糠的饲粮,试验组分别饲喂添加3%、6%、9%和12%金针菇菌糠的饲粮。各组饲粮均制成颗粒料,试验期为63 d。试验饲粮组成及营养水平见表 3。
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表 3 试验饲粮组成及营养水平(风干基础) Table 3 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis) |
饲养试验在湖南省畜牧兽医研究所蛋鸭试验场进行。试验前对鸭舍和器具进行消毒,试验鸭分上、下2层阶梯笼养,单笼饲养,各组均匀分布于鸭舍。各组的鸭舍温度、相对湿度、通风等基本相同,试验鸭自由采食和饮水。自然光照与人工光照相结合。每日清理鸭粪1次,按常规程序进行栏舍消毒和日常管理。
1.4 测定指标与方法 1.4.1 产蛋性能试验期间每天10:00按重复收集鸭蛋,记录产蛋总数和不合格蛋数(包括软壳蛋、破壳蛋、畸形蛋、沙壳蛋),并称量总蛋重和耗料量。以组为单位计算整个试验期平均蛋重、日产蛋量、产蛋率、合格蛋率、平均日采食量和料蛋比。
1.4.2 蛋品质试验结束前1天每重复抽取接近平均蛋重的鸭蛋3枚,使用蛋品质测定仪(EA-01,ORKA公司,美国)测定鸭蛋蛋重、蛋白高度、蛋黄颜色和哈氏单位;使用蛋壳强度测定仪(KQ-1A,北京天翔飞域科技有限公司)测定蛋壳强度;使用蛋壳厚度测定仪(TQ-1A,北京天翔飞域科技有限公司)测定蛋壳厚度;用蛋液分离器将蛋黄与蛋清分离,称量蛋黄重,计算蛋黄占全蛋的百分比(蛋黄比例);使用游标卡尺测量鸭蛋纵经和横径,并计算蛋形指数(纵经/横径)。
1.4.3 血清生化指标试验期末,每个重复随机选取体重相近、采食正常的试验鸭1只,自由饮水、禁食12 h后,使用一次性负压采血管(普通管)翅下静脉采血5 mL,放试管架静置,待所有鸭只采血完毕,于离心机中3 000 r/min离心15 min,分离并收集血清,-20 ℃保存。血清总蛋白(TP)含量采用双缩脲法测定,白蛋白(ALB)含量采用溴甲酚绿法测定,尿素氮(UN)含量采用脲酶偶联速率法测定,葡萄糖(GLU)含量采用己糖激酶法测定,甘油三酯(TG)含量采用甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶(GPO-PAP)法测定,总胆固醇(TC)含量采用总胆固醇测定试剂盒(CHOD-PAP法)测定,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量采用直接法-过氧化氢酶清除法测定,低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量采用直接法-表面活力剂清除法测定。以上试剂盒均购自南京建成生物工程研究所,使用全自动生化分析仪(URIT 8000,优利特公司,美国)进行测定。
1.4.4 血清抗氧化指标采用比色法检测血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。
1.5 数据统计分析试验数据利用Excel 2019进行整理,并用SPSS 19.0软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA),然后通过Duncan氏法进行多重比较。产蛋性能、蛋品质及血清生化、抗氧化指标的结果用“平均值±标准差”表示,P < 0.05为差异显著。采用SAS 19.0软件中的非线性模拟程序中的二次曲线模型拟合蛋鸭各敏感指标与饲粮金针菇菌糠添加水平的二次曲线方程,求导得出适宜的金针菇菌糠添加水平。
2 结果 2.1 饲粮金针菇菌糠添加水平对临武鸭产蛋性能的影响由表 4可知,饲粮金针菇菌糠添加水平对临武鸭产蛋率、合格蛋率、平均蛋重、日产蛋重、平均日采食量均无显著影响(P>0.05)。随饲粮金针菇菌糠添加水平的增加,料蛋比逐渐升高,且12%金针菇菌糠组料蛋比显著高于对照组和3%、6%金针菇菌糠组(P < 0.05)。
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表 4 饲粮金针菇菌糠添加水平对临武鸭产蛋性能的影响 Table 4 Effects of dietary Flammulina velutipes bran supplemental level on laying performance of Linwu ducks |
由表 5可知,饲粮金针菇菌糠添加水平对临武鸭蛋壳厚度、蛋形指数、蛋黄比率、蛋黄颜色和哈氏单位均无显著影响(P>0.05)。与对照组相比,试验组蛋壳强度显著升高(P < 0.05);6%金针菇菌糠组获得最大蛋壳强度,且各试验组之间无显著差异(P>0.05)。
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表 5 饲粮金针菇菌糠添加水平对临武鸭蛋品质的影响 Table 5 Effects of dietary Flammulina velutipes bran supplemental level on egg quality of Linwu ducks |
由表 6可知,饲粮金针菇菌糠添加水平对临武鸭血清总蛋白、白蛋白、尿素氮、葡萄糖、高密度脂蛋白胆固醇和低密底脂蛋白胆固醇含量均无显著影响(P>0.05)。与对照组相比,6%、9%和12%金针菇菌糠组血清总胆固醇含量显著降低(P < 0.05),9%金针菇菌糠组血清甘油三酯含量显著降低(P < 0.05)。
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表 6 饲粮金针菇菌糠添加水平对临武鸭血清生化指标的影响 Table 6 Effects of dietary Flammulina velutipes bran supplemental level on serum biochemical indexes of Linwu ducks |
由表 7可知,饲粮金针菇菌糠添加水平对临武鸭血清超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性均无显著影响(P>0.05)。与对照组相比,3%、6%和9%金针菇菌糠组血清丙二醛含量显著降低(P < 0.05)。
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表 7 饲粮金针菇菌糠添加水平对临武鸭血清抗氧化指标的影响 Table 7 Effects of dietary Flammulina velutipes bran supplemental level on serum antioxidant indexes of Linwu ducks |
由表 8可知,随饲粮金针菇菌糠添加水平的增加,蛋壳强度呈先升高后降低的二次曲线变化(P < 0.05),而血清总胆固醇和丙二醛含量呈先降低后升高的二次曲线变化(P < 0.05),而其他差异指标(料蛋比和血清甘油三酯含量)均未呈现显著的二次曲线变化(P>0.05)。因此,以蛋壳强度、血清总胆固醇和丙二醛含量为评价指标,通过二次曲线模型估测22~31周龄临武鸭的饲粮金针菇菌糠适宜添加水平分别为8.10%、4.49%和7.22%。
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表 8 22~31周龄临武鸭饲粮金针菇菌糠适宜添加水平 Table 8 Dietary optimal supplemental levels of Flammulina velutipes bran of Linwu ducks aged from 22 to 31 days of age |
菌糠含丰富的营养物质,且具有独特的菌香味和良好的适口性,在畜禽饲粮中按适宜比例添加可以提高生产性能[8]。黄璇等[9]研究认为,灵芝菌糠在蛋鸭饲粮中的添加水平不超过6%时对蛋鸭产蛋性能无不良影响。Mahfuz等[10]和Na等[11]认为,饲粮中添加金针菇菌糠对蛋鸡的产蛋性能均未见显著影响。本试验结果表明,在保持各组营养水平一致的基础下,饲粮金针菇菌糠添加水平为12%时,料蛋比显著增加,可见饲粮中金针菇菌糠添加水平不宜超过9%。该结果与上述研究结果基本一致。但王法盈等[12]研究发现,用蛹虫草菌糠替代10%基础饲粮饲喂蛋鸡,可提高产蛋率、蛋重和日产蛋量。Lee等[5]有关发酵金针菇菌糠饲喂蛋鸡的研究结果与之类似。造成试验结果差异的原因可能是菌糠原料组成和试验动物消化吸收能力不同造成的。
从蛋品质指标看,饲粮金针菇菌糠添加水平对蛋壳厚度、蛋形指数、蛋黄比例、蛋黄颜色和哈氏单位均无显著影响,但能显著提高蛋壳强度。有研究认为,蛋壳强度不但与碳酸钙的聚集有关,而且也与蛋壳的结构密不可分[13-14]。本试验中,蛋鸭平均日采食量随金针菇菌糠添加水平的增加而升高,蛋鸭摄入的钙含量相应增加,会提高蛋壳强度。另有研究认为,蛋壳强度的提高可能与金针菇菌糠中较高浓度的矿物元素和维生素有关[15-16],其具体作用机理有待进一步研究。
3.2 饲粮金针菇菌糠添加水平对临武鸭血清生化和抗氧化指标的影响金针菇菌糠中含有较多的活性物质,其中金针菇多糖、亚麻酸、朴菇素和黄酮类化合物具有降低胆固醇[17-19]、提高机体免疫力[20]和抗氧化能力[21-23]的作用。本试验结果显示,随饲粮金针菇菌糠添加水平的增加,临武鸭血清甘油三酯和总胆固醇含量降低,该结果与梁凤[24]报道的在肉鸡饲粮中添加2%和6%金针菇菌糠能显著降低血清甘油三酯和总胆固醇含量的结果,以及Mahfuz等[25]和周家生等[26]的研究结果一致。另有研究发现,饲粮纤维水平能降低血清甘油三酯和总胆固醇含量[27],这也是本试验血清甘油三酯和总胆固醇含量下降的另一原因。有研究认为,不同膳食脂肪酸构成可影响动物机体血脂水平[28]。本试验饲粮添加金针菇菌糠后改变了饲粮粗脂肪中脂肪酸的构成,有可能影响血清甘油三酯和总胆固醇含量,有关金针菇菌糠脂肪酸构成和对血脂水平影响的机理有待进一步研究。丙二醛是脂质氧化的最终产物,其含量是反映机体抗氧化潜在能力的重要参数。本试验中,与对照组相比,试验组血清丙二醛含量下降,说明饲粮中添加金针菇菌糠能提高蛋鸭的抗氧化能力,该结果与李志涛[29]、邵乐等[30]和刘冬等[31]的研究结果相似。
3.3 22~31周龄临武鸭饲粮金针菇菌糠适宜添加水平菌糠用作动物饲料原料,不仅避免了菌糠废料造成的资源浪费和环境污染,而且解决了我国当前饲料资源紧缺、人畜争粮等问题[32]。因菌糠品种、原料组成、营养成分及试验动物品种和生长阶段等差异,其在家禽实际生产中的添加水平也有所不同。灵芝菌糠在产蛋高峰期蛋鸭饲粮中推荐添加水平为2.38%~2.99%[9],在35~43周龄洛岛红蛋鸡饲粮中推荐添加水平为3.00%[33];鸡腿菇菌糠在1~28日龄天府肉鸭饲粮中适宜添加水平为2.00%[34];稻草菌糠在爱拔益加肉鸡饲粮中适宜添加水平为0.50%[35];金针菇菌糠在肉鸡饲粮中推荐添加水平为2%~6%[4, 24, 36-37],发酵金针菇菌渣在蛋鸡饲粮中推荐添加水平为4.00%[5]。本试验结果发现,饲粮中添加水平不超过9%的金针菇菌糠对蛋鸭的产蛋性能无不良影响,因此主观上判定9%为金针菇菌糠的最高添加水平。通过二次曲线模型分析金针菇菌糠添加水平与蛋壳强度及血清总胆固醇、丙二醛含量相关性,计算出22~31周龄临武鸭饲粮中金针菇菌糠适宜添加水平为4.49%~8.10%。
4 结论① 饲粮中添加0~9%的金针菇菌糠对22~31周龄临武鸭产蛋性能无不良影响。
② 以蛋壳强度及血清总胆固醇、丙二醛含量为评价指标,得出22~31周龄临武鸭饲粮中金针菇菌糠适宜添加水平分别为8.10%、4.49%和7.22%。综合考虑,22~31周龄临武鸭饲粮金针菇菌糠适宜添加水平为4.49%~8.10%。
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