动物营养学报 >

2015 , Vol. 27 >Issue 4: 1270 - 1277

DOI: https://doi.org/10.3969/j.issn.1006-267x.2015.04.034

研究简报 Short Communications

茶皂素对奶牛乳腺上皮细胞增殖及乳脂合成关键酶的影响

展开
  • 奶牛营养学北京市重点实验室, 北京农学院动物科学技术学院, 北京 102206
严淑红(1987-),女,山东日照人,硕士研究生,研究方向为反刍动物营养与免疫。E-mail:yanshuhong20096@163.com

收稿日期: 2014-11-21

  网络出版日期: 2015-04-21

基金资助

2012年度北京市人力社保局"新世纪百千万人才工程资助项目";2011—2014年北京市自然科学基金委员会"北京市自然科学基金"(6122006);2014年度北京市教育委员会"北京市属高等学校高层次人才引进与培养计划项目"(CIT&TCD20130324);北京市农业局"北京市现代农业产业技术体系奶牛创新团队"

收起

Effects of Tea Saponin on Proliferation and Milk Fat Synthesis Key Enzymes of Bovine Mammary Epithelial Cells

Expand
  • Key Laboratory for Dairy Cow Nutrition, College of Animal Science and Technology, Beijing University of Agriculture, Beijing 102206, China

Received date: 2014-11-21

  Online published: 2015-04-21

Fold

摘要

本试验旨在研究茶皂素对乳腺上皮细胞增殖、乳脂合成关键酶的影响。采用酶消化法分离获取乳腺上皮细胞,经免疫荧光鉴定后,分别添加不同浓度[0(对照)、0.05、0.25、0.50、1.00、5.00、10.00、20.00、40.00、60.00、80.00、100.00 μg/mL]的茶皂素溶液培养,然后进行如下操作:1)采用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度的茶皂素对乳腺上皮细胞增殖的影响;2)采用酶联免疫分析(ELISA)试剂盒测定细胞中乙酰辅酶A羧化酶(ACACA)、脂肪酸合成酶(FASN)、硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)的含量;3)采用实时荧光定量PCR的方法测定FASN、ACACA、SCD基因mRNA相对表达水平。结果显示:1)茶皂素浓度为0.05~20.00 μg/mL对细胞增殖无显著影响(P>0.05),浓度为20.00~100.00 μg/mL时显著抑制细胞增殖(P<0.05);2)细胞FASN、ACACA、SCD的含量在对照组和0.50、5.00、20.00 μg/mL浓度组间无显著差异(P>0.05);3)细胞与茶皂素共育24、48 h后,与对照组相比,0.50、5.00、20.00 μg/mL浓度组SCD基因mRNA相对表达水平显著降低(P<0.05)。综合以上,茶皂素对奶牛乳腺上皮细胞增殖及乳脂合成关键酶SCD基因mRNA表达具有一定抑制作用。

关键词： 茶皂素; 乳脂; 乳腺上皮细胞; 关键酶

本文引用格式

严淑红, 邢文丽, 方洛云, 王俊杰, 刘续航, 蒋林树 . 茶皂素对奶牛乳腺上皮细胞增殖及乳脂合成关键酶的影响[J]. 动物营养学报, 2015 , 27(4) : 1270 -1277 . DOI: 10.3969/j.issn.1006-267x.2015.04.034

Abstract

This experiment was conducted to study the effects of tea saponin on proliferation and milk fat synthesis key enzymes of bovine mammary epithelial cells. Mammary epithelial cells were obtained by the method of enzyme digestion. After immunofluorescence identification was done, mammary epithelial cells were cultured in tea saponin solution of different concentrations [0 (control), 0.05, 0.25, 0.50, 1.00, 5.00, 10.00, 20.00, 40.00, 60.00, 80.00 and 100.00 μg/mL]. 1) Thiazolyl blue tetrazolium bromide (MTT) method was used to detect the effects of tea saponin on the proliferation of cells. 2) Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kit was used to measure acetyl-CoA carboxylase (ACACA), fatty acid synthase (FASN) and stearoyl-coenzyme A desaturase (SCD) contents in cells. 3) Fluorescence-based quantitative real-time PCR method was used to measure the relative expression level of mRNA of ACACA, FASN and SCD. The results showed as follows: 1) compared with control group, there was no significant effect of tea saponin at concentration of 0.05 to 5.00 μg/mL (P>0.05), but the cell proliferation was significantly inhibited by tea saponin at concentration of 10.00 to 100.00 μg/mL (P<0.05); 2) the contents of FASN, ACACA and SCD in cells didn't significantly change among control group and 0.50, 5.00 and 20.00 μg/mL concentration groups (P>0.05); 3) compared with control group, the relative expression level of SCD mRNA in 0.50, 5.00 and 20.00 μg/mL concentration groups was significantly decreased (P<0.05). In conclusion, tea saponin plays a role in inhibition of proliferation and the relative expression level of fat synthesis key enzyme gene SCD mRNA of bovine mammary epithelial cells.

Key words： tea saponin; milk fat; mammary epithelial cells; key enzymes

参考文献

[1] 孙妍.不同中短链与长链脂肪酸比例对奶牛乳脂含量及组成的影响[D].硕士学位论文.北京:中国农业科学院, 2012:5-42.

[2] 李俊, 张爱玉, 齐永杰, 等.茶树油粕中茶皂素研究进展[J].食品科学, 2012, 33(1):276-279.

[3] 张开慧.茶皂素的国内外研究进展[J].西部大开发, 2011(2):33-34.

[4] LAI Z F, SHAO Z Q, CHEN Y Z, et al.Effects of sasanquasaponin on ischemia and reperfusion injury in mouse hearts[J].Journal of Pharmacological Sciences, 2004, 94(3):313-324.  

[5] WANG J K, YE J A, LIU J X.Effects of tea saponins on rumen microbiota, rumen fermentation, methane production and growth performance-a review[J].Tropical Animal Health and Production, 2012, 44(4):697-706.  

[6] 叶均安, 刘建新, 板桥久雄.茶皂素对瘤胃原虫的抑制效果[J].中国饲料, 2001, 1(2):30-32.

[7] 来海良, 王一义.茶皂素对湖羊瘤胃培养物发酵的影响[J].现代农业科技, 2010(23):300-302.

[8] 苑文珠.茶皂素对湖羊生产性能及瘤胃发酵的影响[D].硕士学位论文.杭州:浙江大学, 2002:1-32.

[9] 彭春雨, 孟庆翔, 任丽萍, 等.植物提取物对奶牛产奶性能和血液指标的影响[J].饲料研究, 2011(7):8-10.

[10] 王亨, 吴培福, 邱昌伟, 等.荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞的体外培养[J].畜牧与兽医, 2007, 39(4):41-43.

[11] 李喜艳, 王加启, 魏宏阳, 等.奶牛乳腺上皮细胞的体外培养方法及其应用概述[J].华北农学报, 2010, 25(增刊):31-35.

[12] HU H, WANG J Q, BU D P, et al.In vitro culture and characterization of a mammary epithelial cell line from Chinese Holstein dairy cow[J].PLoS One, 2009, 4(11):e7636.

[13] TONG H L, LI Q Z, GAO X J, et al.Establishment and characterization of a lactating dairy goat mammary gland epithelial cell line[J].In Vitro Cellular & Developmental Biology-Animal, 2012, 48(3):149-155.  

[14] 陈建晖, 佟慧丽, 李庆章, 等.奶牛乳腺上皮细胞系的建立[J].畜牧兽医学报, 2009, 40(5):743-747.

[15] 朱丽丽, 李惠芬.重楼皂苷对SGC-7901细胞增殖抑制及诱导凋亡的实验研究[J].时珍国医国药, 2009, 20(6):1501-1502.

[16] 吴葆华, 陈喆, 吕望, 等.桔梗皂苷D抑制人结肠癌SW620细胞增殖及其机制的研究[J].中国药学杂志, 2013, 48(增刊):354-358.

[17] 彭春燕.苷类物质对山羊乳腺上皮细胞增殖及酪蛋白基因表达的影响[D].硕士学位论文.江苏:扬州大学, 2011:2-54.

[18] 王红芳.外源反-10, 顺-12共轭亚油酸对牛乳腺上皮细胞脂肪合成的影响及其分子机制[D].硕士学位论文.泰安:山东农业大学, 2011:8-60.

[19] 庞坤, 韩立强.油脂对反刍动物乳腺脂肪关键合成酶分子调控的研究进展[J].中国农学通报, 2012, 28(8):1-5.

[20] 茅慧玲, 陈雪君, 林嘉, 等.日粮中添加茶皂素和豆油对羔羊生长性能以及肌肉脂肪酸的影响[C]//中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十次学术研讨会论文集.北京:中国畜牧兽医学会动物营养学分会, 2008, 327-330.

[21] 王延芳.油茶皂素及其水解产物的分离及降血脂抗氧化活性研究[D].硕士学位论文.广州:华南理工大学, 2012:5-74.

[22] 夏春华, 杨钟鸣, 朱伯荣, 等.茶皂素在农药工业中应用研究进展[J].茶叶科学, 2000, 20(2):82-88.

[23] 张国运, 曹丽云, 吴建鹏, 等.茶皂素提取工艺及其应用研究进展[J].日用化学工业, 2006, 36(3):174-177.

[24] 杨强, 张石蕊.茶皂素在动物生产中的应用[J].中国饲料, 2007(8):8-10.

[25] 周奕毅.茶皂素抑制湖羊甲烷生成的微生物学机制研究[D].硕士学位论文.杭州:浙江大学, 2009:1-66.

[26] HU W L, LIU J X, YE J A, et al.Effect of tea Saponin on rumen fermentation in vitro[J].Animal Feed Science and Technology, 2005, 120(3/4):333-339.

[27] 王加启.牛奶乳脂肪和乳蛋白的合成与调控机理[J].饲料与畜牧, 2011(2):8-14.
Options
文章导航

/

〈 〉

    联系我们

  • 地址：北京市海淀区圆明园西路2号
    　　　中国农业大学动科动医大楼153室
  • 邮编：100193
  • 电话：010－62817823
  • 网址：http://www.chinajan.com
  • E-mail：cjan@chinajan.com
京公网安备 11010802041926号    京ICP备17050989号-2