动物营养学报 >

2026 , Vol. 38 >Issue 1: 533 - 545

DOI: https://doi.org/10.12418/CJAN2026.042

研究论文

复合无机微量元素预混料对美洲鳗鲡幼鱼生长性能、血清生化指标及矿物质蓄积的影响

  • 陈志泽 , 1 ,
  • 彭志闰 1 ,
  • 徐一闯 1 ,
  • 卢文标 2 ,
  • 翟少伟 , 1, *
展开
  • 1 集美大学水产学院,鳗鲡现代产业技术教育部工程研究中心,厦门 361021
  • 2 福建深纳生物工程有限公司,福州 350700
* 翟少伟,教授,博士生导师,E-mail:

陈志泽(1999—),男,福建漳州人,硕士研究生,从事水产动物营养与饲料研究。E-mail:

收稿日期: 2025-06-26

  网络出版日期: 2026-01-13

基金资助

国家现代农业产业技术体系专项资金(CARS-46)

收起

Effects of Compound Micro-Minerals Premix on Growth Performance,Serum Biochemical Indices and Minerals Accumulation of Juvenile American Eel (Anguilla rostrata)

  • CHEN Zhize , 1 ,
  • PENG Zhirun 1 ,
  • XU Yichuang 1 ,
  • LU Wenbiao 2 ,
  • ZHAI Shaowei , 1, *
Expand
  • 1 Engineering Research Center of Modern Industry Technology for Eel, College of Fisheries, Jimei University,Xiamen 361021, China
  • 2 Fujian Syno Biotech Co., Ltd., Fuzhou 350700, China
* professor, E-mail:

Received date: 2025-06-26

  Online published: 2026-01-13

Fold

摘要

本试验旨在探究饲料中添加不同水平复合无机微量元素(IMM)预混料对美洲鳗鲡幼鱼生长性能、血清生化指标及矿物质蓄积的影响,初步确定复合IMM预混料在饲料中的适宜添加水平。选择500尾平均体重为(22.99±0.15) g美洲鳗鲡幼鱼,随机分为5个组,每组4个重复,每个重复25尾鱼。各组分别饲喂复合IMM预混料添加水平为0(IMM0组)、600(IMM600组)、1 200(IMM1200组)、1 800(IMM1800组)和2 400 mg/kg(IMM2400组)的试验饲料。试验期70 d。结果表明:1)IMM600组和IMM1200组的终末体重(FBW)、增重率(WGR)、特定生长率(SGR)和摄食量(FI)显著高于其他各组(P<0.05)。饲料中复合IMM预混料添加水平为1 040 mg/kg时,试验鱼获得最佳WGR。2)IMM1200组的血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量及谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)活性显著低于IMM0组(P<0.05),血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、免疫球蛋白M(IgM)、补体3(C3)含量及溶菌酶(LZM)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)活性均显著高于IMM0组(P<0.05)。3)与IMM0组相比,IMM1200组的全鱼钙、磷、铁、锰和锌含量显著升高(P<0.05),全鱼钙、磷和铁蓄积率显著升高(P<0.05),脊椎骨钙、磷、铁、锰和锌含量显著升高(P<0.05)。由此可见,本试验条件下,饲料中复合IMM预混料的适宜添加水平为1 040~1 200 mg/kg。

关键词： 美洲鳗鲡; 微量元素; 适宜添加水平; 生长性能; 矿物质蓄积

本文引用格式

陈志泽 , 彭志闰 , 徐一闯 , 卢文标 , 翟少伟 . 复合无机微量元素预混料对美洲鳗鲡幼鱼生长性能、血清生化指标及矿物质蓄积的影响[J]. 动物营养学报, 2026 , 38(1) : 533 -545 . DOI: 10.12418/CJAN2026.042

Abstract

This experiment was conducted to study the effects of dietary different levels of compound micro-minerals (IMM) premix on growth performance, serum biochemical indices and minerals accumulation of juvenile American eel (Anguilla rostrata), and preliminarily determined the appropriate supplemental level of compound IMM premix in the diet. A total of 500 juvenile American eels with an average body weight of (22.99±0.15) g were randomly divided into 5 groups with 4 replicates per group and 25 fish per replicate. Fish in 5 groups were fed experimental diets which the compound IMM premix supplemental levels were 0 (IMM0 group), 600 (IMM600 group), 1 200 (IMM1200 group), 1 800 (IMM1800 group) and 2 400 mg/kg (IMM2400 group), respectively. The experiment lasted for 70 days. The results showed as follows: 1) the final body weight (FBW), weight gain rate (WGR), specific growth rate (SGR) and feed intake (FI) of IMM600 group and IMM1200 group were significantly higher than those of other groups (P<0.05). When the dietary compound IMM premix supplemental level was 1 040 mg/kg, the experimental fish obtained the best WGR. 2) The contents of triglycerides (TG), total cholesterol (TC), low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C) and the activities of glutamic oxaloacetic transaminase (GOT) and glutamic pyruvic transaminase (GPT) in serum of IMM1200 group were significantly lower than those of IMM0 group (P<0.05), and the contents of high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C), immunoglobulin M (IgM), complement 3 (C3) and the activities of lysozyme (LZM), acid phosphatase (ACP), alkaline phosphatase (AKP) in serum were significantly higher than those of IMM0 group (P<0.05). 3) Compared with IMM0 group, the contents of calcium, phosphorus, iron, manganese and zinc in whole fish of IMM1200 group were significantly increased (P<0.05), the accumulation rates of calcium, phosphorus and iron in whole fish were significantly increased (P<0.05), and the contents of calcium, phosphorus, iron, manganese and zinc in vertebrae were significantly increased (P<0.05). In conclusion, under the conditions of this experiment, the appropriate supplemental level of compound IMM premix in the diet is 1 040 to 1 200 mg/kg.

Key words： Anguilla rostrata; micro-minerals; appropriate supplemental level; growth performance; minerals accumulation

微量元素指生物体内含量低于体重0.01%的元素,其在生物体内不能产生与合成,需由食物或环境提供[1]。目前,鱼类饲料中微量元素的添加以无机形式为主,常添加的必需微量元素主要有铁、铜、锰、锌、硒、碘和钴7种[2],其作为鱼体内许多生物酶和蛋白质的辅助因子或结构成分,在能量代谢、免疫应答、骨骼发育以及繁殖等关键生理过程中发挥着重要作用[1,3-4]。一般来说,动物对微量元素需要量主要采用饲料中添加不同水平单一微量元素开展养殖试验的方法确定,再根据确定的饲料中各单一微量元素需要量配制成复合微量元素预混料添加在饲料中应用[5]。而近年来在爱拔益加(AA)肉仔鸡[6-7]和罗曼褐壳蛋鸡[8-9]等家禽微量元素营养的研究中发现,采用上述方法配制的复合微量元素预混料并未获得最佳添加效果。这可能是单一微量元素的方法忽略了不同微量元素之间复杂的协同或拮抗作用,所估测某一微量元素的需要量易受到其他微量元素添加水平的影响所致[10]。考虑到不同微量元素的相互作用对估测其需要量的影响,最近在妊娠母猪[11]、生长育肥猪[12]、云南半细毛羊[13]、汶上芦花鸡[14]、黄羽肉鸡[15]和肉种鸡[16]等动物的微量元素需要量研究中,则采用饲粮中添加复合微量元素预混料的方法,多种微量元素比例差异较小,可能更有利于协同作用的发挥,更接近机体实际的营养需求,该方法得到越来越多的动物营养研究者的认可[10]。
目前,还鲜见采用复合微量元素预混料的方法估测鱼类饲料中微量元素需要量的报道。鳗鲡(Anguilla spp.),又称鳗鱼、白鳝,属降海洄游鱼类,是我国重要养殖经济鱼类之一[17]。在鳗鲡养殖的主要品种中,原产于美国、加拿大和海地等国家的美洲鳗鲡(Anguilla rostrata),是我国南方福建、广东、广西和江西等地区的主导品种[18]。因此,本试验将不同水平的复合无机微量元素(inorganic micro-minerals,IMM)预混料添加在美洲鳗鲡幼鱼饲料中,探究其对试验鱼生长性能、血清生化指标及矿物质蓄积的影响,初步确定饲料中不同微量元素添加水平,为鳗鲡微量元素需要量的研究及饲料配方优化提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

无机形式的微量元素碱式氯化铜(铜含量58.50%)、一水硫酸亚铁(铁含量30.50%)、一水硫酸锰(锰含量32.00%)、一水硫酸锌(锌含量35.00%)、碘酸钙(碘含量62.00%)、亚硒酸钠(硒含量35.00%)和一水硫酸钴(钴含量33.00%)均由福建某生物工程有限公司提供。

1.2 试验设计与试验饲料

本研究获得了集美大学科技伦理委员会批准(批准号:JMU202410081)。选择500尾平均体重为(22.99±0.15) g美洲鳗鲡幼鱼,随机分为5个组,每组4个重复,每个重复25尾鱼。各组分别饲喂复合IMM预混料添加水平为0(IMM0组)、600(IMM600组)、1 200(IMM1200组)、1 800(IMM1800组)和2 400 mg/kg(IMM2400组)的试验饲料。其中,IMM1200组复合IMM预混料添加水平参考马德英等[19]鳗鲡饲料中微量元素推荐量,即铜12.0 mg/kg、铁180 mg/kg、锰40 mg/kg、锌100 mg/kg、碘5.00 mg/kg、硒0.80 mg/kg和钴0.80 mg/kg。试验期70 d。
试验饲料组成及营养水平见表1,各组饲料中主要微量元素(铜、铁、锰和锌)含量见表2。饲料原料使用超碎粉碎机(ZFJ-300,江阴市睿宗机械制造有限公司)粉碎,过80目筛网,再根据饲料配方比例采用逐级混匀法混合均匀后于4 ℃保存备用,具体的操作步骤参照马德英[20]的研究。
表1 试验饲料组成及营养水平(风干基础)

Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis) %

项目
Items		 组别Groups
IMM0 IMM600 IMM1200 IMM1800 IMM2400
原料Ingredients
白鱼粉White fish meal 40.00 40.00 40.00 40.00 40.00
红鱼粉Brown fish meal 27.00 27.00 27.00 27.00 27.00
α-淀粉α-starch 25.00 25.00 25.00 25.00 25.00
酵母粉Yeast powder 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00
膨化大豆Expanded soybean 1.85 1.85 1.85 1.85 1.85
氯化胆碱Choline chloride 0.50 0.50 0.50 0.50 0.50
磷酸二氢钙Ca(H2PO4)2 0.50 0.50 0.50 0.50 0.50
七水合硫酸镁MgSO4·7H2O 0.50 0.50 0.50 0.50 0.50
复合维生素预混料Compound vitamin premix1) 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40
复合无机微量元素预混料
Compound inorganic micro-minerals premix2)		 0.06 0.12 0.18 0.24
沸石粉Zeolite powder 0.25 0.19 0.13 0.07 0.01
合计Total 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00
营养水平Nutrient levels3)
粗蛋白质CP 47.20 47.50 47.44 47.86 47.47
粗脂肪EE 6.03 6.05 6.02 6.03 6.00
粗灰分Ash 12.65 12.74 12.62 12.74 12.60

1)每千克复合维生素预混料含 One kilogram of compound vitamin premix contained the following:VA 3 333 333.33 IU,VB1 2.67 g,VB2 5.00 g,VB6 2.00 g,VB12 0.01 g,VC 33.33 g,VD3 416 666.67 IU,VE 15.00 g,VK3 15.00 g,D-泛酸 D-pantothenic acid 10.00 g,烟酸 nicotinic acid 23.33 g,叶酸 folic acid 0.33 g,D-生物素 D-biotin 0.05 g,肌醇 inositol 33.33 g。

2)每千克复合无机微量元素预混料含 One kilogram of compound inorganic micro-minerals premix contained the following:Cu2(OH)3Cl 17.09 g,FeSO4·H2O 491.80 g,MnSO4·H2O 104.17 g,ZnSO4·H2O 238.10 g,Ca(IO3)2 6.72 g, Na2SeO3 1.48 g,CoSO4·H2O 2.02 g,沸石粉 zeolite powder 138.62 g。

3)营养水平为实测值。Nutrient levels were measured values.

表2 各组饲料中主要微量元素(铜、铁、锰和锌)含量

Table 2 Main micro-minerals (copper, iron, manganese and zinc) contents in diets of each group mg/kg

项目
Items		 组别Groups
IMM0 IMM600 IMM1200 IMM1800 IMM2400
铜Cu 2.50 8.56 14.45 20.66 26.60
铁Fe 273.75 364.80 455.21 541.53 631.49
锰Mn 7.73 26.51 47.39 68.22 86.18
锌Zn 64.36 114.09 167.32 215.98 265.35

实测值 Measured values。

1.3 饲养管理

养殖试验在集美大学产学研水产试验基地开展。将800尾美洲鳗鲡幼鱼在2个圆形养殖缸(直径110 cm,高80 cm)中暂养28 d,每天将鳗鲡商业配合饲料与水按1.0∶1.3混合搓成团状并定时(06:00和18:00)饲喂,饲喂25 min后捞出残饵和粪便。暂养28 d并确认试验鱼摄食和健康状况稳定后,将试验鱼禁食24 h。挑选规格相近的健康幼鱼500尾,随机分于20个圆形养殖缸(直径60 cm,高100 cm,注水量约为320 L)中,采用循环水养殖,每个养殖缸24 h充氧。正式试验期间饲喂试验饲料,根据实际饱食情况调整饲喂量,饲喂30 min后捞出残饵,记录摄食量和鱼死亡状况,根据养殖缸水质情况,每2 d更换养殖缸实际水体的20%~30%。暂养及正式试验期间水温控制在25~27 ℃,pH维持在7.0~8.0,溶解氧浓度>7.7 mg/L,氨氮浓度<0.2 mg/L。

1.4 样品采集

正式试验开始前,取20尾鱼测定初始鱼体的矿物质含量。试验结束后,将试验鱼禁食24 h,对所有试验鱼称重并记录,用于计算生长性能。每缸随机挑选14尾鱼,用丁香酚(0.1 g/L)麻醉10 min后进行采血。血液样本于4 ℃条件下过夜后,845×g离心10 min,取上清液用于血清生化指标的测定。每缸另取5尾鱼,测定全鱼体成分和主要矿物质含量。

1.5 生长性能测定

各指标计算公式如下:
增重率(WGR,%)=100×(Wt-W0)/W0;
特定生长率(SGR,%/d)=100×(lnWt-lnW0)/t;
摄食量(FI,g/尾)=100×FC/Nf;
饲料效率(FE,%)=100×(Wt-W0)/Wt;
成活率(SR,%)=100×Nf/Ni。
式中:Wt为平均每尾鱼终末体重;W0为平均每尾鱼初始体重;t为饲喂天数;FC为每缸鱼摄食饲料总量;Ni和Nf分别为初始鱼尾数和终末鱼尾数。

1.6 血清生化指标测定

采用COD-PAP酶法测定总胆固醇(TC)含量,GPO-PAP酶法测定甘油三酯(TG)含量,微板法测定高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量,微板法测定谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)活性,酶联免疫竞争法测定补体3(C3)和免疫球蛋白M(IgM)含量,微量酶标法测定碱性磷酸酶(AKP)和酸性磷酸酶(ACP)活性,比浊法测定溶菌酶(LZM)活性。上述指标均使用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒测定。

1.7 全鱼及饲料的常规营养成分测定

全鱼和饲料水分、粗蛋白质、粗脂肪和粗灰分含量的测定参照AOAC(1995)[21],采用105 ℃干燥法测定水分含量,凯氏定氮法测定粗蛋白质含量,索氏抽提法测定粗脂肪含量,马弗炉550 ℃高温灼烧法测定粗灰分含量。

1.8 全鱼、脊椎骨及饲料的矿物质含量测定

将保存于-20 ℃冰箱中的全鱼样品取出解冻后,每缸随机取3尾鱼并将其剪成小块,再取2尾鱼分离出脊椎骨,用冷冻干燥机(LGJ-100F,北京松源华兴科技发展有限公司)将全鱼及脊椎骨样品冻干72 h。冻干好的全鱼和脊椎骨样品经粉碎、称重和消解后,用电感耦合等离子光谱仪(Prodigy7,LEEMAE LABS,美国)测定矿物质含量,具体操作步骤和全鱼矿物质蓄积率计算公式参照陈桂红[22]的研究。

1.9 数据统计与分析

试验数据经过齐性检验后,使用SPSS 25.0软件进行单因素方差分析,百分比数据经反正弦变换后再进行分析,运用Duncan氏法进行多重比较,P<0.05表示差异显著,结果均以平均值±标准差表示。

2 结果

2.1 复合IMM预混料对美洲鳗鲡幼鱼生长性能的影响

由表3可知,随着饲料中复合IMM预混料添加水平的升高,试验鱼终末体重(FBW)、WGR、SGR、FI和FE均呈先升高后下降趋势,且在IMM1200组达到最高。IMM600组和IMM1200组的FBW、WGR、SGR和FI显著高于其他各组(P<0.05),且IMM600组和IMM1200组之间无显著差异(P>0.05);IMM1800组的FBW、WGR、SGR和FI显著高于IMM2400组(P<0.05),但与IMM0组无显著差异(P>0.05);IMM2400组的FBW、WGR、SGR和FI均与IMM0组无显著差异(P>0.05)。IMM2400组的FE显著低于其他各组(P<0.05),且其他各组之间无显著差异(P>0.05)。各组之间SR均无显著差异(P>0.05)。如图1所示,饲料中复合IMM预混料添加水平为1 040 mg/kg时,试验鱼获得最佳WGR。
表3 复合IMM预混料对美洲鳗鲡幼鱼生长性能的影响

Table 3 Effects of compound IMM premix on growth performance of juvenile American eels

项目
Items		 组别Groups
IMM0 IMM600 IMM1200 IMM1800 IMM2400
初始体重IBW/g 22.91±0.09 22.99±0.10 22.91±0.12 23.12±0.22 22.92±0.21
终末体重FBW/g 56.45±1.90ab 65.32±3.11c 69.26±4.03c 59.08±3.82b 51.85±3.02a
增重率WGR/% 146.45±8.17ab 184.19±13.23c 202.29±16.04c 155.43±14.13b 126.23±13.05a
特定生长率SGR/(%/d) 1.29±0.05ab 1.49±0.67c 1.58±0.76c 1.34±0.78b 1.16±0.08a
摄食量FI/(g/尾) 38.73±1.05ab 48.93±3.37c 51.36±3.52c 42.15±2.47b 37.17±0.96a
饲料效率FE/% 86.58±2.72b 86.52±1.22b 90.19±1.74b 85.16±3.47b 77.78±7.04a
成活率SR/% 96.00±0.00 100.00±0.00 100.00±0.00 97.33±4.62 97.33±2.31

同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05),相同或无字母表示差异不显著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

图1 复合IMM预混料添加水平与美洲鳗鲡幼鱼WGR的关系

Fig.1 Relationship between compound IMM premix supplemental level and WGR of juvenile American eels

2.2 复合IMM预混料对美洲鳗鲡幼鱼血清生化指标的影响

由表4可知,随着饲料中复合IMM预混料添加水平的升高,试验鱼血清TG、TC、LDL-C含量及GOT、GPT活性均呈先下降后升高趋势,且在IMM1200组达到最低;血清HDL-C、IgM、C3含量及LZM、ACP、AKP活性均呈先升高后下降趋势,且在IMM1200组达到最高(除ACP活性外)。IMM1200组的血清TC、LDL-C含量显著低于其他各组(P<0.05),血清TG含量显著低于IMM0组(P<0.05),血清GOT活性显著低于IMM0组、IMM600组和IMM2400组(P<0.05),血清GPT活性显著低于IMM0组、IMM1800组和IMM2400组(P<0.05)。IMM1200组的血清IgM含量及LZM、AKP活性显著高于其他各组(P<0.05),血清HDL-C含量显著高于IMM0组、IMM600组和IMM2400组(P<0.05),血清C3含量显著高于IMM0组、IMM1800组和IMM2400组(P<0.05)。IMM600组和IMM1200组的血清ACP活性显著高于IMM0组(P<0.05)。
表4 复合IMM预混料对美洲鳗鲡幼鱼血清生化指标的影响

Table 4 Effects of compound IMM premix on serum biochemical indices of juvenile American eels

项目
Items		 组别Groups
IMM0 IMM600 IMM1200 IMM1800 IMM2400
甘油三酯TG/(mmol/L) 15.91±1.07c 9.45±1.28ab 8.04±1.33a 9.95±0.84ab 11.10±0.29b
总胆固醇TC/(mmol/L) 13.99±0.10c 11.13±0.60b 9.49±0.55a 13.28±0.15c 15.24±0.09d
高密度脂蛋白胆固醇
HDL-C/(mmol/L)		 11.60±0.53a 12.50±1.19ab 14.62±0.94c 13.79±0.48bc 11.54±0.39a
低密度脂蛋白胆固醇
LDL-C/(mmol/L)		 8.83±1.44b 7.83±0.04b 5.56±0.82a 9.07±0.47bc 10.46±0.70c
谷草转氨酶GOT/(U/L) 21.40±0.91d 19.17±0.38c 17.22±0.35a 17.81±1.00ab 18.86±0.49bc
谷丙转氨酶GPT/(U/L) 7.94±0.62b 3.64±0.73a 2.50±0.41a 7.50±0.89b 7.11±0.41b
溶菌酶LZM/(U/mL) 153.25±2.52b 203.66±4.39c 228.17±11.56d 159.44±14.45b 120.03±6.37a
酸性磷酸酶ACP/(U/dL) 6.30±0.91a 7.80±0.81b 7.62±0.40b 6.87±0.44ab 6.71±0.57ab
碱性磷酸酶AKP/(U/dL) 4.41±0.05a 4.79±0.56ab 6.11±0.33c 5.25±0.08b 4.89±0.62ab
免疫球蛋白M IgM/(μg/mL) 199.38±20.17ab 208.74±32.27ab 320.80±39.06c 228.17±39.13b 165.60±18.56a
补体3 C3/(μg/mL) 803.29±39.67b 856.40±41.19bc 904.86±59.00c 461.31±22.64a 426.38±30.64a

2.3 复合IMM预混料对美洲鳗鲡幼鱼全鱼体成分的影响

如图2所示,各组之间试验鱼全鱼水分、粗蛋白质、粗脂肪和粗灰分含量均无显著差异(P>0.05)。
图2 复合IMM预混料对美洲鳗鲡幼鱼全鱼体成分的影响

数据柱无字母表示差异不显著(P>0.05)。

Fig.2 Effects of compound IMM premix on whole fish body composition of juvenile American eels

Value columns with no letter mean no significant difference (P>0.05).

2.4 复合IMM预混料对美洲鳗鲡幼鱼全鱼矿物质蓄积的影响

由表5可知,与IMM0组相比,IMM1200组的全鱼钙含量显著升高(P<0.05),IMM2400组的全鱼钙含量显著降低(P<0.05);IMM600组、IMM1200组和IMM1800组的全鱼磷含量显著升高(P<0.05);IMM1800组和IMM2400组的全鱼铜含量显著升高(P<0.05);IMM600组、IMM1200组、IMM1800组和IMM1800组的全鱼铁和锰含量显著升高(P<0.05);IMM1200组、IMM1800组和IMM2400组的全鱼锌含量显著升高(P<0.05)。
表5 复合IMM预混料对美洲鳗鲡幼鱼全鱼矿物质含量的影响(湿样基础)

Table 5 Effects of compound IMM premix on whole fish mineral contents of juvenile American eels (wet sample basis)

项目
Items		 组别Groups
IMM0 IMM600 IMM1200 IMM1800 IMM2400
钙Ca/(g/kg) 3.72±0.06b 3.81±0.10bc 3.93±0.10c 3.67±0.11ab 3.52±0.12a
磷P/(g/kg) 3.61±0.04a 3.77±0.08b 3.83±0.01b 3.82±0.07b 3.59±0.08a
铜Cu/(mg/kg) 0.34±0.01a 0.37±0.02a 0.37±0.01a 0.41±0.04b 0.58±0.01c
铁Fe/(mg/kg) 7.99±0.29a 9.51±0.16b 9.74±0.36b 9.73±0.28b 11.29±0.38c
锰Mn/(mg/kg) 0.61±0.02a 0.86±0.01b 1.04±0.05c 1.16±0.17c 1.18±0.03c
锌Zn/(mg/kg) 19.83±0.44a 21.13±1.76ab 21.68±0.36bc 23.22±0.90cd 23.88±0.43d
由表6可知,与IMM0组相比,IMM1200组的全鱼钙蓄积率显著升高(P<0.05),IMM2400组的全鱼钙蓄积率显著降低(P<0.05);IMM1200组和IMM1800组的全鱼磷蓄积率显著升高(P<0.05),IMM2400组的全鱼磷蓄积率显著降低(P<0.05);IMM600组、IMM1200组、IMM1800组和IMM2400组的全鱼铜蓄积率显著降低(P<0.05);IMM600组和IMM1200组的全鱼铁蓄积率显著升高(P<0.05);IMM600组的全鱼锰蓄积率显著升高(P<0.05),IMM1200组、IMM1800组和IMM2400组的全鱼锰蓄积率显著降低(P<0.05);IMM600组的全鱼锌蓄积率显著升高(P<0.05),IMM1800组和IMM2400组的全鱼锌蓄积率显著降低(P<0.05)。
表6 复合IMM预混料对美洲鳗鲡幼鱼全鱼矿物质蓄积率的影响(湿样基础)

Table 6 Effects of compound IMM premix on whole fish mineral accumulation rates of juvenile American eels (wet sample basis) %

项目
Items		 组别Groups
IMM0 IMM600 IMM1200 IMM1800 IMM2400
钙Ca 9.49±0.28bc 10.29±0.45cd 10.80±0.46d 9.04±0.54b 6.89±0.52a
磷P 12.71±0.24b 13.31±0.43bc 14.40±0.09d 13.79±0.44cd 10.64±0.47a
铜Cu 11.19±0.76d 4.65±0.10c 2.61±0.10b 1.68±0.10a 1.62±0.08a
铁Fe 2.44±0.23a 6.63±0.95c 4.14±0.23b 1.99±0.02a 1.95±0.18a
锰Mn 2.71±0.88d 3.27±0.17e 2.29±0.03c 1.86±0.08b 0.98±0.07a
锌Zn 17.22±0.50c 29.13±2.16d 16.65±0.40c 10.87±0.83b 8.39±0.62a

2.5 复合IMM预混料对美洲鳗鲡幼鱼脊椎骨矿物质含量的影响

由表7可知,与IMM0组相比,IMM600组、IMM1200组和IMM1800组的脊椎骨钙含量显著升高(P<0.05);IMM600组、IMM1200组、IMM1800组和IMM2400组的脊椎骨磷、铁、锰和锌含量均显著升高(P<0.05);IMM2400组的脊椎骨铜含量显著升高(P<0.05)。
表7 复合IMM预混料对美洲鳗鲡幼鱼脊椎骨矿物质含量的影响(湿样基础)

Table 7 Effects of compound IMM premix on vertebrae mineral content of juvenile American eels(wet sample basis)

项目
Items		 组别Groups
IMM0 IMM600 IMM1200 IMM1800 IMM2400
钙Ca/(g/kg) 54.33±3.75a 58.39±1.21b 69.90±3.71c 57.48±0.42b 55.63±0.75ab
磷P/(g/kg) 35.98±2.82a 39.27±1.28bc 46.79±1.56d 41.12±0.40c 38.68±0.53b
铜Cu/(mg/kg) 8.02±0.53a 8.29±0.78ab 8.47±0.64ab 9.00±0.86ab 9.25±0.48b
铁Fe/(mg/kg) 30.05±1.60a 32.74±0.92b 39.54±2.27c 41.83±0.59d 41.45±1.26d
锰Mn/(mg/kg) 13.95±1.15a 18.98±0.96b 30.65±0.51c 31.89±0.38d 31.28±0.88cd
锌Zn/(mg/kg) 68.45±2.23a 71.10±0.70b 76.45±1.43c 76.53±0.89c 77.63±1.02c

3 讨论

3.1 复合IMM预混料对美洲鳗鲡幼鱼生长性能的影响

本试验中,饲料中添加不同水平的复合IMM预混料影响了美洲鳗鲡幼鱼的生长性能,且添加1 200 mg/kg复合IMM预混料时促生长效果最佳,低于或高于该添加水平时,促生长效果变差。这与美洲鳗鲡幼鱼[23]和草鱼(Ctenopharyngodon idella)[24]饲料中添加不同水平包被复合微量元素预混料后生长性能的变化趋势一致。在尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)[25]、大菱鲆(Scophthalmus maximus)[26]和黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)[27]饲料中添加不同水平复合氨基酸微量元素螯合物预混料,也得到了类似研究结果。但是,草鱼的生长性能随着饲料中复合氨基酸微量元素螯合物预混料添加水平的升高呈先上升后平稳趋势[28],与本试验结果存在差异。这可能与草鱼饲料中复合氨基酸微量元素螯合物预混料添加水平范围较小或微量元素预混料配方比例不同有关[2]。上述研究结果表明,基础饲料中微量元素不能满足鱼体的生长需求,添加适宜水平微量元素可改善试验鱼生长,而不足或过量添加则可能导致试验鱼生长性能下降。

3.2 复合IMM预混料对美洲鳗鲡幼鱼血清生化指标的影响

血液系统作为重要的代谢转运系统,参与了鱼类脂质代谢的调控,血清中TG、TC、LDL-C和HDL-C等脂类统称为血脂,其含量可以反映鱼体脂肪代谢情况[29-30]。本试验中,饲料中添加不同水平复合IMM预混料影响了美洲鳗鲡幼鱼血清TG、TC、LDL-C和HDL-C含量,饲料中添加1 200 mg/kg复合IMM预混料时血脂含量明显降低,低于或高于该添加水平的降血脂效果变差。这与美洲鳗鲡幼鱼饲料中添加不同水平包被复合微量元素预混料后血脂含量的变化趋势[23]一致。研究表明,微量元素如锌、铁、铜和锰具有调节血脂作用[4-5],其中有关适宜水平锌或铁降低鱼类血脂含量的报道较多[31-32]。试验鱼血脂含量降低可能是饲料中提供的适宜水平锌、铁、铜和锰元素共同作用的结果,但上述微量元素降血脂的具体作用途径仍需进一步研究。
LZM是鱼类免疫系统的重要防御因子,对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都具有溶菌活性[33]。ACP和AKP作为巨噬细胞溶酶体的标志酶,其活性可反映机体非特异性免疫功能[34]。IgM是鱼类血清免疫球蛋白中的成分,主要负责识别和结合特异性抗原,并激活鱼体补体系统,维持其健康状态[35-36]。C3是补体系统的核心效应物质,在抵抗病原感染中起着重要作用[37]。本试验中,饲料中添加1 200 mg/kg复合IMM预混料提高了美洲鳗鲡幼鱼血清LZM、AKP、ACP活性和IgM、C3含量。总体来看,IMM1200组上述指标数值高于其他各组。这与美洲鳗鲡幼鱼饲料中添加适宜水平(600 mg/kg)包被复合微量元素预混料,提高鱼体非特异性免疫力的研究结果[23]类似。研究表明,锌、硒、铁、锰、铜等微量元素均能参与调节鱼体免疫[3-5,38],其中锌、硒和铁适量添加提高了鱼类免疫能力,不足或过量添加导致免疫功能失调[31-32,39]。美洲鳗鲡幼鱼非特异性免疫力的提高,可能是饲料中添加的适宜水平锌、硒、铁、锰、铜共同调节的结果,而具体的调节机制还需进一步探究。
血清GOT和GPT活性可用于评价鱼体的肝脏功能,这2种转氨酶存在于线粒体中,可在肝脏受损或肝功能失调时释放到血清中[40-41]。本试验中,饲料中添加1 200 mg/kg复合IMM预混料降低了美洲鳗鲡幼鱼血清GOT和GPT活性,低于或高于该添加水平都会导致血清GOT和GPT活性升高。这与在美洲鳗鲡幼鱼饲料中添加适宜水平(600 mg/kg)包被复合微量元素预混料降低了血清GOT和GPT活性的研究结果[23]一致,说明饲料中添加适宜水平微量元素有利于改善美洲鳗鲡幼鱼肝脏功能。

3.3 复合IMM预混料对美洲鳗鲡幼鱼全鱼体成分及矿物质蓄积的影响

本试验中,饲料中添加复合IMM预混料对美洲鳗鲡幼鱼全鱼体成分无显著影响。这与在饲料中添加不同水平复合氨基酸微量元素螯合物预混料后,草鱼[28,42]、大菱鲆[26]和黄颡鱼[27]全鱼体成分无显著变化的结果一致。
全鱼和脊椎骨微量元素含量以及蓄积率可反映鱼体对微量元素的吸收和利用效率[4]。本试验条件下,饲料中添加复合IMM预混料影响了美洲鳗鲡幼鱼全鱼和脊椎骨铜、铁、锰和锌的含量,且随着复合IMM预混料添加水平的升高,上述指标数值均呈逐渐升高趋势。这与草鱼和尼罗罗非鱼全鱼铜、铁、锰和锌含量随饲料中复合氨基酸微量元素螯合物预混料添加水平升高而逐渐升高的结果[42-43]类似。在草鱼和黄颡鱼饲料中添加不同水平复合氨基酸微量元素螯合物预混料后,脊椎骨铜、铁、锰和锌含量也有类似的变化趋势[27,42]。本试验中,饲料中添加不同水平复合IMM预混料影响了美洲鳗鲡幼鱼全鱼铜、铁、锰和锌的蓄积率,且添加水平越高,上述微量元素的蓄积率越低。研究表明,随着饲料中铁、锌添加水平升高,美洲鳗鲡幼鱼全鱼铁、锌的蓄积率均呈逐渐降低趋势[22,44],与本试验结果一致。在大口黑鲈(Micropterus salmoides)饲料中添加不同水平锰、锌后,全鱼锰、锌蓄积率也有类似的变化趋势[45-46]。这说明鱼体对微量元素存在有效的调节机制,当饲料中微量元素添加水平较低时,鱼体会积极吸收微量元素以满足营养需求;而当饲料中微量元素添加水平过高时,鱼体可能通过减少吸收或增加排泄的方式来维持体内微量元素的平衡,避免其过量蓄积对机体造成不利影响[4-5],具体的调节机制还有待研究。
本试验条件下,饲料中添加1 200 mg/kg复合IMM预混料提高了美洲鳗鲡幼鱼全鱼钙、磷含量和蓄积率以及脊椎骨钙、磷含量,复合IMM预混料添加水平低于或高于添加水平,全鱼钙、磷含量和蓄积率以及脊椎骨钙、磷含量均降低。这与美洲鳗鲡幼鱼饲料中添加不同水平复合包被无机微量元素预混料后,全鱼钙和磷含量以及蓄积率的结果变化结果[23]一致。这说明饲料中添加适宜水平微量元素有利于提高鱼体对饲料中钙和磷的蓄积,可能与饲料中添加适宜水平锌、锰、铜、铁、碘、钴等微量元素促进骨骼矿化,间接提高了钙和磷在骨骼中的沉积有关[1,3,5]。本试验中,饲料中复合IMM预混料添加水平超过1 200 mg/kg导致全鱼和脊椎骨钙和磷含量降低,说明饲料中过量添加微量元素不利于饲料中钙和磷在鱼体中的蓄积。研究表明,二价微量元素离子与钙离子在肠道内的吸收,均通过二价阳离子转运体蛋白1(divalent metal transporter 1,DMT1)进行转运,过量的微量元素如铜、铁、锰和锌等可能结合了较多的DMT1,而减少钙离子与DMT1结合,降低钙离子的吸收及其在鱼体中的蓄积[5];过量二价微量元素离子易与磷在肠道内形成难溶性磷盐,使磷的吸收率降低[38],饲料钙吸收的减少也可能导致钙磷比例失衡,导致磷在鱼体内蓄积降低。

3.4 美洲鳗鲡幼鱼饲料中复合IMM预混料适宜添加水平

本试验条件下,美洲鳗鲡幼鱼获得最佳WGR时,饲料中复合IMM预混料添加水平为1 040 mg/kg。从不同添加水平复合IMM预混料对美洲鳗鲡幼鱼生长性能、血脂含量、血清非特异性免疫力、全鱼和脊椎骨主要矿物质蓄积的改善效果来看,饲料中添加1 200 mg/kg复合IMM预混料的效果最佳,笔者认为复合IMM预混料在美洲鳗鲡幼鱼饲料中的适宜添加水平为1 040~1 200 mg/kg,推荐在美洲鳗鲡幼鱼饲料中添加1 120 mg/kg复合IMM预混料,即饲料中添加铜11.2 mg/kg、铁168 mg/kg、锰38 mg/kg、锌94 mg/kg、碘4.67 mg/kg、硒0.75 mg/kg、钴0.75 mg/kg。
在饲料中添加不同水平单一微量元素的研究表明,美洲鳗鲡幼鱼对无机铁的需要量为190 mg/kg[22],对无机锌的需要量为134 mg/kg[44],明显高于本试验推荐的无机铁和锌添加水平。这可能与采用复合微量元素的方法添加更有利于微量元素间协同作用的发挥,从而提高微量元素的吸收利用率有关[5]。研究发现,随着饲料中铁添加水平的升高(0~150 mg/kg),美洲鳗鲡幼鱼全鱼铜和锰含量逐渐增加[22];随着饲料中锌添加水平的升高(0~100 mg/kg),美洲鳗鲡幼鱼全鱼铜含量逐渐增加[44]。这表明铁和铜、铁和锰、锌和铜之间可能具有协同作用。因此,采用复合微量元素,多种微量元素同时且以相对平衡的比例添加,可能更有利于提高微量元素的吸收效率,从而使微量元素添加水平更接近鱼体营养需求。
此外,需要注意的是,本试验中的硒适宜添加水平明显高于我国现行的农业部公告第2625号《饲料添加剂安全使用规范》中规定水产动物配合饲料中硒的最高限量0.50 mg/kg[47]。为了保障饲料产品质量安全,鳗鲡饲料中硒的添加水平应严格控制,必须遵守饲料中硒的总水平最高限量的有关规定,避免饲料硒的总水平超标。

4 结论

综合考虑饲料中添加不同水平复合IMM预混料对美洲鳗鲡幼鱼生长性能、血脂含量、血清非特异性免疫力、全鱼矿物质蓄积和脊椎骨矿物质含量的影响,初步确定其在饲料中的适宜添加水平为1 040~1 200 mg/kg,推荐添加水平为1 120 mg/kg,即饲料中添加铜11.2 mg/kg、铁168 mg/kg、锰38 mg/kg、锌94 mg/kg、碘4.67 mg/kg、硒0.75 mg/kg、钴0.75 mg/kg,但需注意严格控制硒的添加水平,使鳗鲡饲料硒的总水平低于有关规定中的最高限量。

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