动物营养学报 >

2023 , Vol. 35 >Issue 5: 3201 - 3212

DOI: https://doi.org/10.12418/CJAN2023.298

研究论文

角毛藻营养及其不同添加量对凡纳滨对虾育苗水质以及仔虾生长、非特异性免疫和抗逆性能的影响

  • 黄永春 , 1 ,
  • 蔡惠君 1 ,
  • 王伟 1 ,
  • 陈强 1 ,
  • 黎中宝 1 ,
  • 康顺元 2 ,
  • 程子阳 2
展开
  • 1 集美大学水产学院,福建省海洋渔业资源与生态环境重点实验室,厦门 361021
  • 2 厦门龙程水产科技有限公司,厦门 361101

黄永春(1966—),男,福建长汀人,教授,博士,从事水产健康养殖和对虾抗WSSV良种选育。E-mail:

Copy editor: 陈 鑫

收稿日期: 2022-08-26

  网络出版日期: 2023-05-11

基金资助

福建省科技项目(2017N5012)

福建省科技特派员候补项目(2021S2001)

福建省星火项目(2020S0044)

福建省对虾种业(2017FJSC2Y02)

收起

Nutrition of Chaetoceros muelleri and Effects on Breeding Water Quality, Growth,Non-Specific Immunity and Resistant Capability of Shrimp Larvae of Litopenaeus vannamei in Different Addition Amount

  • HUANG Yongchun , 1 ,
  • CAI Huijun 1 ,
  • WANG Wei 1 ,
  • CHEN Qiang 1 ,
  • LI Zhongbao 1 ,
  • KANG Shunyuan 2 ,
  • CHENG Ziyang 2
Expand
  • 1 Fujian Provincial Key Laboratory of Marine Fishery Resources and Eco-Environment Fujian, Fisheries College, Jimei University, Xiamen 361021, China
  • 2 Xiamen Longcheng Aquatic Technology Co., Ltd., Xiamen 361101, China

HUANG Yongchun, professor, E-mail:

Received date: 2022-08-26

  Online published: 2023-05-11

Fold

摘要

本试验旨在研究角毛藻营养及其不同添加量对凡纳滨对虾育苗水质以及仔虾生长、非特异性免疫和抗逆性能的影响。本试验首先检测了牟氏角毛藻的营养成分,然后从对虾溞状幼体开始,每组分别添加0(对照组)、0.5×105(试验组Ⅰ)、1.0×105(试验组Ⅱ)、2.0×105(试验组Ⅲ)和4.0×105个细胞/mL(试验组Ⅳ)的牟氏角毛藻进行育苗试验,直至糠虾Ⅱ期,每组将15万尾凡纳滨对虾健康无节幼体放置在1 000 L的黑桶中培育,每组3个重复。结果表明:1)牟氏角毛藻水分、粗蛋白质、粗脂肪和粗灰分含量分别为75.23%、14.30%、2.97%和7.50%;必需氨基酸含量占氨基酸总量的46.82%,鲜味氨基酸含量占氨基酸总量的40.42%;牟氏角毛藻含18种脂肪酸,其中饱和脂肪酸(SFA)8种,占脂肪酸总量的39.40%,不饱和脂肪酸(UFA)10种,占脂肪酸总量的50.29%。2)牟氏角毛藻可改善育苗池水质,促进虾苗生长、提高出苗率,其中试验组Ⅲ、试验组Ⅳ优势明显,与其他各组差异显著(P<0.05),但二者差异不显著(P>0.05)。试验组饵料消耗量随着牟氏角毛藻添加量的增加而下降,除试验组Ⅰ外,其余试验组饵料消耗量与对照组差异显著(P<0.05)。3)试验组仔虾淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶活性随着牟氏角毛藻添加量的提高而增加,试验组Ⅳ仔虾淀粉酶活性与对照组差异显著(P<0.05),其余各组间差异不显著(P>0.05);试验组仔虾脂肪酶和蛋白酶活性与对照组差异显著(P<0.05),试验组Ⅱ、试验组Ⅲ和试验组Ⅳ间无显著差异(P>0.05)。4)试验组仔虾总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)的活性随着牟氏角毛藻添加量的提高而增加,与对照组差异显著(P<0.05);试验组仔虾酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)的活性与对照组间无显著差异(P>0.05)。5)各组间的仔虾在3.0×10-4 mL/L甲醛质量密度的应激下,随应激时间的增加存活率逐步下降,24 h后试验组仔虾的存活率分别比对照组提高11.45%、22.90%、24.41%和37.40%,组间差异显著(P<0.05)。综上所述,牟氏角毛藻个体较小,运动弱,营养丰富,是适合作为对虾幼体的开口料和育苗期间的良好饵料。牟氏角毛藻可以降低水中氨氮、亚硝酸盐氮等有害因子的含量和化学需氧量,消除应激因素,保持水质稳定,有利于对虾的生长。牟氏角毛藻添加量在1.0×105~2.0×105个细胞/mL可提高消化酶活性和免疫性能,提高虾仔的出苗率。

关键词： 牟氏角毛藻; 营养; 凡纳滨对虾; 水质; 生长消化; 非特异性免疫; 抗逆性能

本文引用格式

黄永春 , 蔡惠君 , 王伟 , 陈强 , 黎中宝 , 康顺元 , 程子阳 . 角毛藻营养及其不同添加量对凡纳滨对虾育苗水质以及仔虾生长、非特异性免疫和抗逆性能的影响[J]. 动物营养学报, 2023 , 35(5) : 3201 -3212 . DOI: 10.12418/CJAN2023.298

Abstract

The experiment was aimed to study the nutrition of Chaetoceros muelleri and effects of Chaetoceros muelleri on the breeding water quality, growth, non-specific immunity and resistant capability of Litopenaeus vannamei in different addition amount. In this experiment, the nutrition composition of Chaetochetes mouti was detected firstly, and then 0 (control group), 0.5×105(test group Ⅰ), 1.0×105(test group Ⅱ), 2.0×105(test group Ⅲ)and 4.0×105 cell/mL (test group Ⅳ)of Chaetoceros mouterii were added in each group to carry out seedling test from zoea to mysis Ⅱ period. A total of 1.5×105 healthy nauplii of Litopenaeus vannamei in each group was placed in 1 000 L black barrel, with 3 replicates per group. The results showed as follows: 1) the contents of water, corde protein, crude fat and ash were 75.23%, 14.30%, 2.97% and 7.50% in Chaetoceros muelleri, respectively. The contents of essential amino acids accounted for 46.82% of total amino acids, and those of umami amino acids accounted for 40.42% of total amino acids. There were 18 kinds of fatty acids in Chaetoceros muelleri, among which 8 kinds of saturated fatty acids accounted for 39.40% of total fatty acid content and 10 kinds of unsaturated fatty acids accounted for 50.29% of total fatty acid content. 2) Chaetoceros muelleri could improve breeding water quality, promote growth, improve the germination rate of young shrimps, test groups Ⅳ and Ⅲ had obvious advantages, and had significant differences from other groups (P<0.05), but feed difference between those two group was not significant (P>0.05). The diet consumption of test groups decreased with the increase of the supplemental level of Chaetoceros muelleri. Except for test group Ⅰ, the feed consumption of other test groups was significantly different from that of control group (P<0.05). 3) The activities of amylase, lipase and proteinase in the test groups were increased with the increase of the addition of Chaetoceros muellerii, respectively. The amylase activity of larvae in test group Ⅳ was significantly different from that in control group (P<0.05), but there was no significant difference among other groups (P>0.05). Lipase and protease activities of shrimp in test groups were significantly different from those in control group (P<0.05), but there were no significant differences among test groups Ⅱ, Ⅲ and Ⅳ (P>0.05). 4) The total antioxidant capacity (T-AOC) and the activities of superoxide dismutase (SOD) and peroxidase (POD) in the test groups were increased with the increase of the addition of Chaetoceros muellerii, respectively, which were significantly different from the control group (P<0.05), respectively. The activities of acid phosphatase (ACP) and alkaline phosphatase (AKP) in the test groups were no significantly different from the control group (P>0.05). 5) Under the stress of formaldehyde at 3.0×10-4 mL/L, the survival rate of post-larval in each group gradually decreased with the increase of stress time. After 24 h, the survival rate of larvae in test groups was 11.45%, 22.90%, 24.41% and 37.40% higher than that in control group, respectively, and the difference among groups was significant (P<0.05). Chaetoceros muelleri is suitable initial feeding for shrimp larvae and good feed during seedling raising because of its small size, weak exercise ability and abundant nutrition. Chaetoceros muelleri can reduce the contents of harmful factors such as ammonia nitrogen, nitrite nitrogen and chemical oxygen demand in water, eliminate stress factors and maintain stable water quality and conducive to the growth of shrimp. In summary, Chaetoceros muelleri can improve the activity of digestive enzymes, immune factors and the emergence rate of shrimp post-larvae at 1.0×105 to 2.0×105 cell/mL addition amount of Chaetoceros muelleri.

Key words： Chaetoceros muelleri; nutrition; Litopenaeus vannamei; water quality; growth; non-specific immunity; resistant capability

凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)又称南美白对虾,原产于南美太平洋沿岸水域,为世界三大养殖对虾之一,其养殖产量占我国对虾养殖总产量的80%以上,是我国对虾养殖的优势品种[1]。随着凡纳滨对虾养殖规模的不断增大,对优质虾苗的需求量越来越大,育苗密度也不断提高,苗池残饵、代谢产物和其他有机物增加,水中氨氮、亚硝酸盐含量迅速上升,导致虾苗出品率低、生产不稳定。特别是育苗过程中采用高水温、高密度和滥用药物等手段造成育苗生态环境恶化、虾苗质量下降,以致在养殖过程中,虾苗成活率低,从而制约了我国对虾育苗和养殖业的健康可持续发展[2⇓-4]。
微藻分布广泛,不仅蛋白质含量高、氨基酸组成合理,而且富含二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)等多不饱和脂肪酸,对幼苗变态发育具有重要作用[5⇓⇓-8]。牟氏角毛藻(Chaetoceros muelleri)是一种小型的海洋浮游硅藻,其繁殖快、耐高温、细胞小、运动弱,具有丰富的不饱和脂肪酸,是对虾、蟹、贝等海水养殖品种育苗幼体前期的优良饵料[9]。目前,有关牟氏角毛藻促进对虾幼体变态[10⇓⇓⇓-14]、提高育苗效果[14⇓-16]、改善对虾育苗水质和提高抗逆性能[15⇓⇓-18]的研究已有报道,但牟氏角毛藻营养分析及其对凡纳滨对虾仔虾生长、消化酶活性及免疫性能的影响研究鲜见报道。因此,本试验将开展牟氏角毛藻营养及其对凡纳滨对虾育苗水质以及仔虾生长消化、免疫和抗逆性能影响的研究,从营养生理、育苗生态、消化和免疫生理等方面研究产生的机制,为凡纳滨对虾健康生态育苗技术提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

凡纳滨对虾健康无节幼体、牟氏角毛藻分别来自厦门龙程水产科技有限公司幼体培育场和藻类培育场。

1.2 牟氏角毛藻营养成分测定

1.2.1 常规营养成分测定

将生长到稳定的牟氏角毛藻收起过滤,4 500 r/min离心15 min,取沉淀物于吸水纸上,吸取表面水分,分3份平行样品按GB 5009.3—2016、GB 5009.4—2016、GB 5009.5—2016、GB 5009.6—2016、GB 5009.124—2016和GB 5009.168—2016方法分别测定其水分、粗灰分、粗蛋白质、粗脂肪、氨基酸和脂肪酸含量。

1.2.2 氨基酸的评价方法

氨基酸评分(AAS)=试验样品氨基酸含量(mg/g)/FAO/WHO评分标准模式中同种氨基酸含量(mg/g);
化学评分(CS)=试验样品氨基酸含量(mg/g)/鸡蛋蛋白中同种氨基酸含量(mg/g);
必需氨基酸指数(EAAI)=n 100 A A E × 100 B B E × 100 C C E × … … 100 I I E。
式中:A,B,C,...,I为待评价蛋白质的必需氨基酸含量(mg/g);AE,BE,CE,...,IE为全鸡蛋蛋白质中必需氨基酸含量(mg/g);n为比较必需氨基酸数。

1.3 育苗试验

1.3.1 试验设计

试验设置对照组、试验组Ⅰ、试验组Ⅱ、试验组Ⅲ和试验组Ⅳ,每组凡纳滨对虾健康无节幼体15万尾,放置在1 000 L的黑桶中培育。从对虾溞状幼体开始每组分别添加0、0.5×105、1.0×105、2.0×105和4.0×105个细胞/mL的牟氏角毛藻进行育苗试验,直至糠虾幼体Ⅱ期,每组3个重复。每桶配备控温仪1台(精确度为±1 ℃),电热棒(1 000 W)1根,气石3个;试验期间水温控制在28~31 ℃,盐度28.5~30.3,连续充气,试验至仔虾期第10天结束。

1.3.2 水质理化检测

分别在无节幼体期、溞状幼体Ⅱ期、糠虾幼体Ⅱ期和仔虾期(第5天)采集育苗水样,检测pH及溶解氧(D.O)、活性磷酸盐(P O 4 3 --P)、硝酸盐氮(N O 3 --N)、亚硝酸盐氮(N O 2 --N)、铵态氮(N H 4 +-N)含量和化学需氧量(COD)。pH采用pH计测定,D.O含量采用YSI550A溶氧仪测定,P O 4 3 --P等水质理化因子含量及COD参照GB/T 12763.4—2007测定。

1.3.3 出苗率和饵料消耗量计算

在育苗过程中,早期只加水至糠虾幼体Ⅱ期开始换水,日换水量为10%~20%,记录每次加水量、换水量、饵料消耗量并计算出苗率。
出苗率(%)=100×收获数(第10天)/放苗数。
饵料消耗量(g/万尾):生产1万尾仔虾(第10天)消耗的虾片量(g)。

1.3.4 仔虾生长、消化酶和免疫因子活性检测

试验结束时每桶随机取1 050尾仔虾(第10天),其中50尾测全长(0.01 mm游标尺),另外1 000尾低温匀浆后分成2份,其中一份测定消化酶(蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶)和碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性以及总抗氧化能力(T-AOC),上述指标均采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒检测,另一份-40 ℃保存备用,以备需要重新检测。

1.3.5 应激试验

试验结束时每试验桶随机捞取50尾仔虾(第10天),分别置于15个盛有甲醛质量密度为3.0×10-4 mL/L的塑料桶(3 L)中观察24 h,逐尾记录试验对虾的死亡时间和存活数量。

1.4 数据分析与处理

试验数据以平均值±标准差表示,采用SPSS 10.0软件对数据进行单因子方差分析(one-way ANOVA),用Duncan氏法进行组间多重比较,差异显著水平为P<0.05。

2 结果

2.1 牟氏角毛藻营养成分

2.1.1 常规营养成分

牟氏角毛藻中水分、粗蛋白质、粗脂肪和粗灰分含量分别为(75.23±1.21)%、(14.30±0.57)%、(2.97±0.21)%和(7.50±0.63)%。

2.1.2 氨基酸组成、含量与评价

牟氏角毛藻所含的17种氨基酸(表1)中含量排名前5位的是谷氨酸、天冬氨酸、丙氨酸、亮氨酸和赖氨酸;9种必需氨基酸(未包括色氨酸)含量占氨基酸总量的46.82%;4种鲜味氨基酸(谷氨酸、赖氨酸、天冬氨酸和丙氨酸)含量占氨基酸总量的40.42%。
表1 牟氏角毛藻氨基酸组成和含量(干物质基础)

Table 1 Amino acid compositions and contents of Chaetoceros muelleri (DM basis) %

氨基酸
Amino acids		 含量
Content		 氨基酸
Amino acids		 含量
Content		 氨基酸
Amino acids		 含量
Content
天门冬氨酸Asp 2.83±0.16 半胱氨酸Cys 0.15±0.03 苯丙氨酸Phe 1.47±0.10
苏氨酸Thr 1.26±0.09 缬氨酸Val 1.58±0.07 赖氨酸Lys 1.59±0.12
丝氨酸Ser 1.28±0.11 蛋氨酸Met 0.44±0.05 组氨酸His 0.45±0.03
谷氨酸Glu 3.53±0.20 异亮氨酸Ile 1.47±0.08 精氨酸Arg 1.32±0.08
甘氨酸Gly 1.54±0.08 亮氨酸Leu 2.12±0.09 脯氨酸Pro 1.13±0.07
丙氨酸Ala 2.15±0.17 酪氨酸Tyr 0.68±0.04
以AAS和CS为评价指标,牟氏角毛藻的第一限制性氨基酸为蛋氨酸和半胱氨酸, 第二限制
性氨基酸为赖氨酸(表2)。
表2 牟氏角毛藻必需氨基酸组成的评价

Table 2 Evaluation of essential amino acid composition of Chaetoceros muelleri

必需氨基酸
Essential amino acids		 牟氏角毛藻
Chaetoceros
muelleri/(mg/g)		 全鸡蛋蛋白质
Egg protein/
(mg/g)		 FAO/WHO评分模式
FAO/WHO scoring
pattern		 氨基酸评分
AAS		 化学评分
CS
异亮氨酸Ile 91.875 331 250 0.368 0.278
亮氨酸Leu 132.500 534 440 0.301 0.248
赖氨酸Lys 99.375 441 340 0.292 0.225
苏氨酸Thr 78.750 292 250 0.315 0.270
缬氨酸Val 98.750 411 310 0.319 0.240
蛋氨酸+半胱氨酸Met+Cys 36.785 386 220 0.167 0.095
苯丙氨酸+酪氨酸Phe+Tyr 134.285 565 380 0.353 0.238
总计Total 672.320 2 960 2 190

2.1.3 脂肪酸组成和含量

牟氏角毛藻含有18种脂肪酸,其中饱和脂肪酸(SFA)8种:C12∶0、C14∶0、C15∶0、C16∶0、C17∶0、C18∶0、C20∶0和C24∶0,占氨基酸总量的39.40%;不饱和脂肪酸(UFA)10种,占氨基酸总量的50.20%;单不饱和脂肪酸3种:C16∶1n7c、C17∶1n7c和C18∶1n9c,PUFA 7种:C18∶2n6c、C18∶3n6c、C18∶3n3c、C20∶3n6c、C20∶4n6c、C20∶5n3c和C22∶6n3c(表3)。18种脂肪酸中,C16∶1n7c含量最高,达36.64%,C20∶5n3c和C17∶1n7c含量比较丰富,含量分别为4.70%和5.21%。
表3 牟氏角毛藻脂肪酸组成和含量

Table 3 Fatty acid compositions and contents of Chaetoceros muelleri %

脂肪酸
Fatty acids		 含量
Content		 脂肪酸
Fatty acids		 含量
Content		 脂肪酸
Fatty acids		 含量
Content
C12∶0 0.10±0.00 C24∶0 0.10±0.00 C20∶3n6c 0.20±0.00
C14∶0 16.02±0.58 C16∶1n7c 36.64±1.23 C20∶4n6c 0.50±0.01
C15∶0 0.96±0.01 C17∶1n7c 5.21±0.06 C20∶5n3c 4.70±0.06
C16∶0 17.41±0.45 C18∶1n9c 0.52±0.03 C22∶6n3c 0.20±0.00
C17∶0 4.30±0.05 C18∶2n6c 1.20±0.12 其他Other 10.31±0.38
C18∶0 0.41±0.00 C18∶3n6c 0.20±0.00 ∑SFA 39.40±1.03
C20∶0 0.10±0.00 C18∶3n3c 0.92±0.02 ∑UFA 50.29±2.06

SFA:饱和脂肪酸saturated fatty acids;UFA:不饱和脂肪酸unsaturated fatty acids。

2.2 不同牟氏角毛藻添加量对育苗水质的影响

对虾无节幼体尚未开口摄食,仅消耗自身营养,各试验组和对照组育苗池水中pH及D.O、P O 4 3 --P、N O 3 --N、N O 2 --N、N H 4 +-N含量和COD基本一致,组间无显著差异(P>0.05)。但随着幼体开口摄食,试验组和对照组育苗池水中D.O含量和pH随幼体的生长而显著下降(P<0.05),各组D.O含量和pH表现为试验组Ⅳ>试验组Ⅲ>试验组Ⅱ>试验组Ⅰ>对照组;P O 4 3 --P、N O 3 --N、N O 2 --N、N H 4 +-N含量和COD随幼体的生长而显著上升(P<0.05),表现为试验组Ⅳ<试验组Ⅲ<试验组Ⅱ<试验组Ⅰ<对照组(表4)。
表4 牟氏角毛藻对育苗水质的影响

Table 4 Effects of Chaetoceros muelleri on breeding water quality

项目
Items		 组别
Groups		 无节幼体
Nauplius		 溞状幼体Ⅱ期
Zoea Ⅱ period		 糠虾幼体Ⅱ期
Mysis Ⅱ period		 仔虾期(第5天)
Postlavae period (day 5)
溶解氧
D.O/
(mg/L)		 对照组Control group 6.72±0.11A 6.23±0.12B 5.62±0.10C 5.18±0.09D
试验组Ⅰ Test group Ⅰ 6.72±0.09A 6.25±0.11B 5.65±0.11C 5.20±0.11D
试验组Ⅱ Test group Ⅱ 6.73±0.10A 6.31±0.11B 5.70±0.12C 5.19±0.10D
试验组Ⅲ Test group Ⅲ 6.73±0.10A 6.51±0.13B 5.73±0.12C 5.21±0.12D
试验组Ⅳ Test group Ⅳ 6.72±0.09A 6.45±0.13B 5.75±0.12C 5.20±0.11D
pH 对照组Control group 8.23±0.07A 8.15±0.03B 7.95±0.04C 7.78±0.03D
试验组Ⅰ Test group Ⅰ 8.21±0.05A 8.14±0.03B 7.96±0.04C 7.80±0.03D
试验组Ⅱ Test group Ⅱ 8.22±0.07A 8.15±0.02B 8.01±0.05C 7.81±0.05D
试验组Ⅲ Test group Ⅲ 8.23±0.06A 8.16±0.02B 8.06±0.03C 7.82±0.05D
试验组Ⅳ Test group Ⅳ 8.25±0.04A 8.15±0.03B 8.03±0.05C 7.76±0.04D
活性磷酸盐
P O 4 3 --P/
(mg/L)		 对照组Control group 0.003±0.002A 0.022±0.008aB 0.040±0.010aC 0.071±0.012aD
试验组Ⅰ Test group Ⅰ 0.003±0.002A 0.020±0.008aB 0.037±0.010aC 0.064±0.016abD
试验组Ⅱ Test group Ⅱ 0.003±0.002A 0.021±0.007aB 0.032±0.009abC 0.052±0.013bD
试验组Ⅲ Test group Ⅲ 0.003±0.002A 0.017±0.009bB 0.028±0.008bC 0.050±0.015bD
试验组Ⅳ Test group Ⅳ 0.003±0.002A 0.016±0.009bB 0.030±0.009bC 0.051±0.014bD
硝酸盐氮
N O 3 --N/
(mg/L)		 对照组Control group 0.168±0.043A 0.295±0.042bB 0.543±0.061aC 0.662±0.045D
试验组Ⅰ Test group Ⅰ 0.163±0.051A 0.287±0.038abB 0.521±0.073aC 0.673±0.048D
试验组Ⅱ Test group Ⅱ 0.164±0.051A 0.251±0.033aB 0.506±0.070bC 0.663±0.047D
试验组Ⅲ Test group Ⅲ 0.165±0.050A 0.242±0.032aB 0.475±0.076bC 0.653±0.053D
试验组Ⅳ Test group Ⅳ 0.167±0.050A 0.245±0.035aB 0.497±0.083bC 0.641±0.057D
亚硝酸盐氮
N O 2 --N/
(mg/L)		 对照组Control group 0.017±0.007A 0.033±0.013aB 0.052±0.015aC 0.065±0.011aD
试验组Ⅰ Test group Ⅰ 0.017±0.007A 0.030±0.010aB 0.049±0.018aC 0.061±0.013aD
试验组Ⅱ Test group Ⅱ 0.018±0.006A 0.028±0.011aB 0.045±0.017abC 0.053±0.013abD
试验组Ⅲ Test group Ⅲ 0.017±0.007A 0.027±0.014bB 0.041±0.010bC 0.050±0.013bD
试验组Ⅳ Test group Ⅳ 0.018±0.005A 0.027±0.012bB 0.039±0.018bC 0.049±0.013bD
铵态氮
N H 4 +-N/
(mg/L)		 对照组Control group 0.031±0.008A 0.092±0.029aB 0.140±0.022aC 0.168±0.041aD
试验组Ⅰ Test group Ⅰ 0.030±0.009A 0.085±0.025aB 0.133±0.023aC 0.159±0.051aD
试验组Ⅱ Test group Ⅱ 0.031±0.009A 0.071±0.019bB 0.120±0.026bC 0.143±0.040bD
试验组Ⅲ Test group Ⅲ 0.032±0.009A 0.070±0.021bB 0.110±0.026cC 0.140±0.038bD
试验组Ⅳ Test group Ⅳ 0.029±0.010A 0.070±0.022bB 0.108±0.026cC 0.138±0.039bD
化学需氧量
COD/
(mg/L)		 对照组Control group 2.252±0.271A 4.321±0.315aB 5.538±0.671aC 6.742±0.428aD
试验组Ⅰ Test group Ⅰ 2.301±0.365A 3.805±0.356bB 5.067±0.546bC 6.031±0.435bD
试验组Ⅱ Test group Ⅱ 2.284±0.372A 3.324±0.330cB 4.841±0.357bC 5.831±0.423bD
试验组Ⅲ Test group Ⅲ 2.249±0.381A 3.273±0.325cB 4.423±0.221cC 5.331±0.411cD
试验组Ⅳ Test group Ⅳ 2.241±0.392A 3.011±0.310cB 4.383±0.254cC 5.237±0.403cD

同列数据肩标不同小写或同行数据肩标不同大写字母表示差异显著(P<0.05),无字母或相同字母表示差异不显著(P>0.05)。

In the same column, values with different small letter superscripts or in the same row, values with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.05),and no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05).

D.O含量除试验组Ⅲ、试验组Ⅳ在溞状幼体Ⅱ期与其他各组差异显著(P<0.05)外,其他时期各组间无显著差异(P>0.05);各组pH在不同时期均无显著差异(P>0.05);除试验组Ⅰ外,其余试验组 PO 4 3 --P含量与对照组差异显著(P<0.05);除试验组Ⅰ外,其余试验组 NO 3 --N含量在溞状幼体Ⅱ期、糠虾幼体Ⅱ期与对照组差异显著(P<0.05),在仔虾期时各组 NO 3 --N含量无显著差异(P>0.05);除试验组Ⅰ和试验组Ⅱ外,其余试验组 NH 4 +-N含量在不同时期与对照组差异显著(P<0.05);除试验组Ⅰ外,其余试验组 NH 4 +-N含量在不同时期与对照组差异显著(P<0.05);各试验组COD在不同时期与对照组均差异显著(P<0.05),但试验组Ⅰ与试验组Ⅱ、试验组Ⅲ与试验组Ⅳ间无显著差异(P>0.05)。

2.3 不同牟氏角毛藻添加量对仔虾生长、出苗率和饵料消耗量的影响

试验组仔虾全长分别比对照组增加0.70%、0.94%、3.16%和3.75%,其中试验组Ⅲ和试验组Ⅳ与试验组Ⅰ、试验组Ⅱ和对照组差异显著(P<0.05),其余各组间差异不显著(P>0.05);试验组仔虾出苗率分别比对照组增加10.20%、19.30%、35.78%和39.76%,试验组Ⅲ与试验组Ⅳ间无显著差异(P>0.05),其余各组差异显著(P<0.05)。试验组饵料消耗量分别比对照组减少3.39%、17.00%、17.50%和18.45%,除试验组Ⅰ外,其余各组与对照组差异显著(P<0.05)(表5)。
表5 牟氏角毛藻对仔虾生长、出苗率和饵料消耗量的影响

Table 5 Effects of Chaetoceros muelleri on growth, emergence rate and feed consumption of shrimp larvae

组别
Groups		 全长
Full length/mm		 出苗率
Emergence rate/%		 饵料消耗量
Feed consumption/(g/万尾)
对照组Control group 8.54±0.70b 50.37±8.28d 26.82±4.25b
试验组Ⅰ Test group Ⅰ 8.60±0.78b 55.51±6.57c 25.91±5.12b
试验组Ⅱ Test group Ⅱ 8.62±0.82b 60.09±7.00b 22.26±4.37a
试验组Ⅲ Test group Ⅲ 8.81±0.65a 68.39±5.12a 22.14±4.83a
试验组Ⅳ Test group Ⅳ 8.86±0.58a 70.39±9.86a 21.87±4.65a

同列数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。表6、表7同。

In the same colum, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as Table 6 and Table 7.

2.4 不同牟氏角毛藻添加量对仔虾消化酶活性的影响

与对照组相比,试验组仔虾淀粉酶活性分别增加0.78%、1.35%、2.36%和8.15%;脂肪酶活性分别增加9.43%、27.19%、31.76%和33.25%;蛋白酶活性分别增加9.14%、13.17%、15.07%和17.14%(表6),除试验组Ⅳ外,试验组仔虾淀粉酶活性与对照组无显著差异(P>0.05);试验组仔虾脂肪酶和蛋白酶活性与对照组差异显著(P<0.05),试验组Ⅱ、试验组Ⅲ和试验组Ⅳ间无显著差异(P>0.05)。
表6 牟氏角毛藻对仔虾消化酶活性的影响

Table 6 Effects of Chaetoceros muelleri on digestive enzyme activities of shrimp larvae U/mg prot

组别
Groups		 淀粉酶
Amylase		 脂肪酶
Lipase		 蛋白酶
Protease
对照组Control group 38.51±1.26b 13.57±1.58c 175.24±15.24c
试验组Ⅰ Test group Ⅰ 38.81±1.53ab 14.85±2.16b 191.25±12.31b
试验组Ⅱ Test group Ⅱ 39.03±1.53ab 17.26±2.23a 198.32±12.31a
试验组Ⅲ Test group Ⅲ 39.42±1.53ab 17.88±2.58a 201.64±12.31a
试验组Ⅳ Test group Ⅳ 41.65±1.53a 18.08±1.86a 205.27±12.31a

2.5 不同牟氏角毛藻添加量对仔虾抗氧化酶和免疫酶活性的影响

与对照组相比,试验组仔虾中T-AOC活性分别增加了26.33%、29.00%、44.08%和49.70%;SOD活性分别增加了7.45%、21.34%、22.84%和26.32%;POD活性分别增加了25.14%、53.31%、56.08%和57.73%;ACP活性分别增加了1.40%、2.79%、3.14%和6.27%;AKP活性分别增加了1.81%、2.71%、3.31%和3.92%(表7)。试验组仔虾T-AOC、SOD和POD活性与对照组差异显著(P<0.05),其中试验组Ⅰ和试验组Ⅱ,试验组Ⅲ和试验组Ⅳ之间无显著差异(P>0.05);试验组仔虾ACP和AKP的活性与对照组间无显著差异(P>0.05)。
表7 牟氏角毛藻对仔虾抗氧化酶和免疫酶活性的影响

Table 7 Effects of Chaetoceros muelleri on antioxidative and immune enzyme activities of shrimp larvae U/mL

组别
Groups		 总抗氧化能力
T-AOC		 超氧化物歧化酶
SOD		 过氧化物酶
POD		 酸性磷酸酶
ACP		 碱性磷酸酶
AKP
对照组Control group 3.38±2.12c 22.68±2.25c 3.62±1.27c 2.87±0.12 3.32±0.16
试验组ⅠTest group Ⅰ 4.27±1.72b 24.37±2.62b 4.53±1.45b 2.91±0.17 3.38±0.25
试验组Ⅱ Test group Ⅱ 4.36±1.68b 27.52±2.62a 5.55±1.45a 2.95±0.25 3.41±0.24
试验组Ⅲ Test group Ⅲ 4.87±1.51a 27.86±2.62a 5.65±1.45a 2.96±0.27 3.43±0.21
试验组Ⅳ Test group Ⅳ 5.06±1.85a 28.65±2.62a 5.71±1.45a 3.05±0.29 3.45±0.19

2.6 不同牟氏角毛藻添加量对仔虾抗逆性能的影响

各组间的仔虾在3.0×10-4 mL/L甲醛的应激下,随应激时间的增加存活率逐步下降,试验组仔虾24 h后的存活率分别比对照组提高11.45%、22.90%、24.41%和37.40%(表8),差异显著(P>0.05)。
表8 甲醛应激下仔虾存活率比较

Table 8 Comparison of survival rate under formaldehyde stress of shrimp larvae %

时间
Time/h		 对照组
Control group		 试验组Ⅰ
Test group Ⅰ		 试验组Ⅱ
Test group Ⅱ		 试验组Ⅲ
Test group Ⅲ		 试验组Ⅳ
Test group Ⅳ
0 100.00±0.00 100.00±0.00 100.00±0.00 100.00±0.00 100.00±0.00
2 100.00±0.00 100.00±0.00 100.00±0.00 100.00±0.00 100.00±0.00
4 96.67±2.63b 100.00±0.00a 100.00±0.00a 100.00±0.00a 100.00±0.00a
6 91.67±2.37c 96.67±2.25b 100.00±0.00a 100.00±0.00a 100.00±0.00a
8 85.00±2.59d 91.67±2.36c 95.00±5.00b 96.33±2.65b 100.00±0.00a
10 78.33±5.77c 87.33±1.35b 90.00±7.36b 91.67±6.73b 96.67±3.51a
12 73.33±0.40d 83.33±7.64c 86.33±2.89b 87.67±2.89b 91.67±2.89a
14 70.00±5.00d 80.00±8.32c 83.33±4.23b 83.33±5.65b 86.67±2.35a
16 65.33±2.21c 72.67±5.31b 76.67±7.64b 78.67±2.08b 81.33±2.39a
18 58.33±2.89d 65.33±1.55c 69.33±2.89b 70.67±7.24b 78.33±5.35a
20 53.33±5.77d 60.33±5.27c 65.00±2.31b 66.33±5.21b 71.67±7.64a
22 50.00±5.00d 55.67±3.77b 58.00±5.00b 58.67±5.77b 66.33±5.21a
24 43.67±7.64d 48.67±2.34c 53.67±2.35b 54.33±5.26b 60.00±5.31a

同行数据肩标不同小写字母表示差异显著 (P<0.05)。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant differences (P<0.05).

3 讨论

3.1 牟氏角毛藻营养特性

牟氏角毛藻蛋白质含量高,营养丰富,氨基酸组成全面,氨基酸总量为24.99%,高于小球藻(Chlorella sp.)(22.76%)和锤状钟鼓藻(Belerrochea malleus)(9.49%)[19],低于钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)(49.87%)[19];在氨基酸组成中牟氏角毛藻、钝顶螺旋藻、小球藻和锤状钟鼓藻的谷氨酸含量最高,其次为天冬氨酸、丙氨酸、亮氨酸(小球藻是赖氨酸)和赖氨酸,半胱氨酸(锤状钟鼓藻脯氨酸最低)含量最低。4种藻类的9种必需氨基酸含量占氨基酸总量的比例分别为46.82%、46.33%、47.86%和46.40%;4种鲜味氨基酸含量占总氨基酸含量的比例分别为40.42%、37.62%、39.35%和42.30%。根据FAO/WHO(1973)提出的理想蛋白质中人体必需氨基酸含量的模式,质量较佳的蛋白质其氨基酸组成为必需氨基酸/总氨基酸在40%左右[16],牟氏角毛藻符合较佳的蛋白质氨基酸组成范围,且氨基酸组成比较均衡,并富含鲜味氨基酸,因此从营养结构和实践应用表明牟氏角毛藻是对虾早期幼体较为理想的生物饵料之一[9,12⇓⇓-15]。
根据本研究结果显示,牟氏角毛藻含有C12∶0、C14∶0、C15∶0、C16∶0、C17∶0、C18∶0、C20∶0、C24∶0、C16∶1n7c、C17∶1n7c、C18∶1n9c、C18∶2n6c、C18∶3n6c、C18∶3n3c、C20∶3n6c、C20∶4n6c、C20∶5n3c和C22∶6n3c,其中C16∶1n7c和EPA含量较高,这与与李荷芳等[20]、蒋霞敏等[21]、王海英等[22]和王蒙等[23]等研究结果基本相似,出现个别差异可能与牟氏角毛藻产生、提取方法和检测条件有关系。与其他微藻细胞脂肪酸中的EPA和DHA含量相比(表9),牟氏角毛藻的EPA和DHA含量逊于三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum Bohlin),优于小球藻、青岛大扁藻(Platymonas helgolandica)和亚心形扁藻(Platymonas subcordiformis)。
表9 牟氏角毛藻与其他微藻EPA和DHA的比较

Table 9 Comparison of EPA and DHA of Chaetoceros muelleri with the other microalgae %

项目
Items		 牟氏角毛藻
Chaetoceros
muelleri		 三角褐指藻
Phaeodactylum
tricornutum Bohlin		 小球藻
Clorellas sp.		 青岛大扁藻
Platymonas
helgolandica		 亚心形扁藻
Platymonas
subcordiformis
二十碳五烯酸
EPA		 4.7、7.48[24]、23.8[20]、
13.04[21]、7.8[22]		 16.63[24]、29.7[20])、
27.03[21]、11.7[22]		 10.95[24]、
29.3[20]		 5.8[24]、9.7[20] 5.40[24]、5.1[20]、
4.33[21]
二十二碳六烯酸
DHA		 0.2、0.58[24]、1.4[20]、
0.94[21]、0.3[22]		 4.61[24]、1.8[20]、
1.46[21]、0.46[22]

3.2 牟氏角毛藻在凡纳滨对虾育苗中的应用

3.2.1 开口饵料

牟氏角毛藻营养丰富、个体较小,大多数为单个细胞,且细胞壁薄。壳面椭圆形或圆形,壳环面成长方形至四角形,环面通常宽3.45~4.6 μm,长4.6~9.2 μm。角毛细而长,末端尖,自细胞四角生出,几乎与纵轴平行,一般长20.7~34.5 μm。牟氏角毛藻运动能力弱,均匀地悬浮于水体中,易于海产动物幼体捕获[9]。另外,鲜味氨酸含量比较丰富,这特有的海鲜风味提高对虾幼体的诱食性和摄食率,成为对虾幼体的适合开口饵料[13⇓-15]。

3.2.2 促生长

牟氏角毛藻营养物质(蛋白质、脂肪酸、碳水化合物)和不饱和脂肪酸等生物活性物质含量丰富、均衡,有利于幼体的消化吸收,满足对虾幼苗期生长发育的营养需求,研究发现投喂牟氏角毛藻,对虾幼体存活率最高,达到82.79%,幼体变态正常、活力强[10⇓⇓⇓-14]。消化酶活性的增强反映了幼体对特定营养物质的吸收能力加强,微藻所含的营养成分或分泌的微量营养元素,如聚酰胺、精胺和氨基酸等,不仅可作为仔虾摄食的高效诱导物,而且能刺激特定消化酶的分泌,调节仔虾的消化生理,提高消化酶的活性[25⇓-27]。研究结果表明,试验组仔虾消化酶(淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶)活性分别高于比对照组,且随着牟氏角毛藻添加量的提高,其消化性能提高,促进幼体变态与生长,从而减少饲料的消耗。本研究发现,1×105~2×105个细胞/mL牟氏角毛藻添加量能较好地促进仔虾消化和出苗率,与李色东等[15]和黄翔鹄等[17]报道牟氏角毛藻在20×104个细胞/mL和0.6×108~1×108个细胞/L添加量时取得良好的育苗效果一致。
研究发现,在牟氏角毛藻添加量低于4×105个细胞/mL时仔虾淀粉酶活性与对照组无显著差异,由于淀粉酶活性反映动物对摄食植物性饵料的消化吸收能力,这是否与仔虾期后停止藻类投放,而已转入投喂动物性为主的丰年虫有关,还有待进一步研究。

3.2.3 改善水质

牟氏角毛藻作为水体生态系统的初级生产力,通过光合作用,吸收水体中多余的氨氮、磷等物质,降低水质污染因素,提供充足的氧,有效抑制有害藻和有害菌的滋生,进一步改善水质,保持养殖生态系良性循环,由此起到稳定和改善水质的作用[17]。叶志娟等[28]研究了牟氏角毛藻对海水养殖废水中氮、磷的去除作用,研究结果显示,随着牟氏角毛藻添加量的增加,试验组pH及D.O、P O 4 3 --P、N O 3 --N、N O 2 --N、N H 4 +-N含量和COD明显优于对照组。特别是牟氏角毛藻添加量达到1×105个细胞/mL时,效果明显,这与俞建中等[12]、陈倩伶等[16]、黄翔鹄等[17]和陆家昌[18]在凡纳滨对虾育苗水体中引入不同浓度的牟氏角毛藻以及曾国权等[29]应用海链藻(Thalassiosira pseudonana)明显提高D.O含量、降低氨氮、亚硝酸盐氮含量和COD,改善对虾育苗水体水质的结果一致。另外,陈倩伶等[16]、陆家昌[18]和姚雪梅等[30]研究发现,牟氏角毛藻可抑制弧菌繁殖,减少病原侵染和病原爆发,促进虾苗生长,提高出苗率。需要注意的是仔虾期间(育苗后期),牟氏角毛藻的停止添加后,水质理化因子逐渐趋于一致,后期缺少藻类净化后,需要使用微生态制剂加以控制。

3.2.4 提高抗氧化和免疫性能

T-AOC、SOD和POD是机体重要的抗氧化酶,减少虾体自由基的产生或加速自由基的清除,增强对虾的抗病力,降低水产动物的发病率。另外,ACP和AKP是动物体内物质代谢过程中的重要调控酶,在细胞调节和营养物质的消化、吸收及转运过程中都起着重要作用,并在动物解毒体系中发挥重要作用。研究发现,牟氏角毛藻含有幼虾生长发育所需的5种必需不饱和脂肪酸能有效提高对虾幼体机体的免疫力[13]。黄翔鹄等[31]将固定化波吉卵囊藻(Oocystis borgei)和微绿球藻(Nannochloris oculata)引入凡纳滨对虾养殖环境中,发现凡纳对虾的血细胞数目、血清蛋白的含量以及酚氧化酶、溶菌酶、抗菌酶的活性都较对照组显著提高。崔青曼等[32]在饲料中添加1%小球藻显著提高南美白对虾SOD、一氧化氮合酶(NOS)、酚氧化酶(PO)、溶菌酶(LZM)、ACP、ALP活性和T-AOC,明显降低对虾的攻毒死亡率,提高对虾的存活率。黄翔鹄等[17]在凡纳滨对虾育苗水体中使用不同浓度的牟氏角毛藻发现:试验组幼虾在N H 4 +-N、N O 2 --N、硫化氢含量及甲醛抗逆性试验中存活率分别为75%~80%、75%、75%~85%、65%~70%,均显著高于对照组。陆家昌[18]发现使用牟氏角毛的幼虾在N H 4 +-N、N O 2 --N、甲醛和高锰酸钾胁迫下,24 h后幼虾存活率最高,本试验结果也表明牟氏角毛藻能提高仔虾抗氧化能力、免疫功能及甲醛应激抗逆性能。

4 结论

牟氏角毛藻个体小、运动弱、营养丰富,氨基酸组成全面,不饱和脂肪酸含量高,适合对虾幼体开口饵料和育苗过程中幼体的优良饵料;在育苗期间添加1.0×105~2.0×105个细胞/mL牟氏角毛藻可降低育苗池水体中N H 4 +-N、N O 2 --N等有害因子含量和COD,促进生长,提高仔虾消化、抗氧化性能、免疫功能和出苗率。

参考文献

原文顺序 | 文献年度倒序 | 文中引用次数倒序
[1]
黄永春, 艾华水, 殷志新, 等. 第四代凡纳滨对虾抗WSSV选育家系的抗病及免疫特性研究[J]. 水产学报, 2010, 34(10):1549-1558.

HUANG Y C, AI H S, YIN Z X, et al. Studies on WSSV-resistant and immune characteristics of the 4th generation selective breeding families for resistance to the white spot syndrome virus (WSSV) of Litopenaeus vannamei[J]. Journal of Fisheries of China, 2010, 34(10):1549-1558. (in Chinese)

DOI

[2]
刘建勇. 复合微生物制剂在凡纳滨对虾育苗中的应用[J]. 海洋科学, 2005, 29(4):36-40.

LIU J Y. Effect of microecological compound agent on breeding of Litopenaeus vannamei Boon[J]. Marine Sciences, 2005, 29(4):36-40. (in Chinese)

[3]
李爱华. 水产养殖中使用的抗菌药物及细菌耐药性[J]. 中国水产科学, 2002, 9(1):87-91.

LI A H. Antibacterial drugs used in aquaculture and drug resistance of fish bacterial pathogens[J]. Journal of Fishery Sciences of China, 2002, 9(1):87-91. (in Chinese)

[4]
骆大鹏, 何玉贵, 杨明秋, 等. 凡纳滨对虾室内生态育苗技术[J]. 现代农业科技, 2015(10):256-257,262.

LUO D P, HE Y G, YANG M Q, et al. Indoor ecological breeding technologies of Litopenaeus vannamei[J]. Modern Agricultural Science and Technology, 2015(10):256-257,262. (in Chinese)

[5]
RENAUD S M, THINH L V, PARRY D L. The gross chemical composition and fatty acid composition of 18 species of tropical Australian microalgae for possible use in mariculture[J]. Aquaculture, 1999, 170(2):147-159.

DOI

[6]
FUJII K, NAKASHIMA H, HASHIDZUME Y, et al. Potential use of the astaxanthin-producing microalga,Monoraphidium sp. GK12,as a functional aquafeed for prawns[J]. Journal of Applied Phycology, 2010, 22(3):363-369.

DOI

[7]
COUTTEAU P, GEURDEN I, CAMARA M R, et al. Review on the dietary effects of phospholipids in fish and crustacean larviculture[J]. Aquaculture, 1997, 155(1/2/3/4):149-164.

DOI

[8]
ROY S S, PAL R. Microalgae in aquaculture:a review with special references to nutritional value and fish dietetics[J]. Proceedings of the Zoological Society, 2015, 68(1):1-8.

DOI

[9]
郑忠明, 金春华, 冯坚. 牟氏角毛藻的生产性培养技术[J]. 水产科学, 2002, 21(6):20-21.

ZHENG Z M, JIN C H, FENG J. The technique for industrial rearing of Chaetoceros muelleri[J]. Fisheries Science, 2002, 21(6):20-21. (in Chinese)

[10]
张翠英. 投喂牟氏角毛藻对对虾幼体变态的效果[J]. 水产科技情报, 1982(5):18-20.

ZHANG C Y. Effect on juvenile metamorphosis of prawns larvae with feeding Chaetoceros muellerii[J]. Fisheries Sicence & Technology Information, 1982(5):18-20. (in Chinese)

[11]
梁华芳, 龙建艺, 林小彬, 等. 5种单胞藻培育南美白对虾溞状幼体的饵料效果[J]. 海洋科学, 2001, 25(7):9-10,21.

LIANG H F, LONG J Y, LIN X B, et al. The feeding effects of five species unicellular algae to zoeae of Penaeus vannamei[J]. Marine Sciences, 2001, 25(7):9-10,21. (in Chinese)

[12]
俞建中, 梁欣欣, 魏东, 等. 三种饵料微藻在凡纳滨对虾育苗中的饲喂效果评价[J]. 现代食品科技, 2013, 29(4):762-767.

YU J Z, LIANG X X, WEI D, et al. Feeding effect evaluation of three microalgae in the larval rearing of Litopenaeus vannamei[J]. Modern Food Science and Technology, 2013, 29(4):762-767.. (in Chinese)

[13]
王家伟, 戴习林, 谢剑, 等. 不同饵料搭配对凡纳滨对虾幼体与仔虾的影响[J]. 湖南农业科学, 2011(15):157-161.

WANG J W, DAI X L, XIE J, et al. Effects of different diet combinations on larval and post-larval of Litopenaeus vannamei[J]. Hunan Agricultural Sciences, 2011(15):157-161. (in Chinese)

[14]
陈标, 雷小婷, 卓瑞群, 等. 两种微藻对凡纳滨对虾幼体成活率的影响[J]. 生态科学, 2017, 36(6):78-82.

CHEN B, LEI X T, ZHUO R Q, et al. Effects of two microalgae on the survival rate of Litopenaeus vannamei larvae[J]. Ecological Science, 2017, 36(6):78-82. (in Chinese)

[15]
李色东, 刘涛. 饵料微藻在南美白对虾育苗中的应用[J]. 海洋与渔业, 2014(11):62-63.

LI S D, LIU T. Application of food microalgae in the breeding of Penaeus vannamei[J]. Ocean and Fishery, 2014(11):62-63. (in Chinese)

[16]
陈倩伶, 赵永贞, 张瑞杰, 等. 不同微藻饵料对生物絮团育苗系统水质和凡纳滨对虾虾苗生长的影响[J]. 水产科技情报, 2018, 45(2):108-113.

CHEN Q L, ZHAO Y Z, ZHANG R J, et al. Effects of different microalgae bait on water quality of biofloc culture system and young shrimps of Litopenaeus vannamei[J]. Fisheries Science & Technology Information, 2018, 45(2):108-113. (in Chinese)

[17]
黄翔鹄, 李活, 李长玲, 等. 牟氏角毛藻对对虾育苗水质及抗逆性的影响[J]. 广东海洋大学学报, 2008, 28(6):46-50.

HUANG X H, LI H, LI C L, et al. Effect of Chaetoceros muelleri on water quality and anti-stress ability of larval prawn[J]. Journal of Guangdong Ocean University, 2008, 28(6):46-50. (in Chinese)

[18]
陆家昌. 菌、藻改善水体环境提高凡纳滨对虾幼虾免疫指标和抗逆性的研究[D].硕士学位论文. 湛江: 广东海洋大学, 2010.

LU J C. Improvement of aquatic environment by algae and bacteria for the enhancements of stress resistance and immunization capacity of larval Litopenaeus vannamei[D].Master’s Thesis. Zhenjiang: Guangdong Ocean University, 2010. (in Chinese)

[19]
王大志, 朱友芳, 李少菁, 等. 七种微藻蛋白质含量和氨基酸组成的比较[J]. 台湾海峡, 1999, 18(3):297-302.

WANG D Z, ZHU Y F, LI S J, et al. Studies on protein content and amino acid composition of seven microalgae[J]. Journal of Oceanography in Taiwan Strait, 1999, 18(3):297-302. (in Chinese)

[20]
李荷芳, 周汉秋. 海洋微藻脂肪酸组成的比较研究[J]. 海洋与湖沼, 1999, 30(1):34-40.

LI H F, ZHOU H Q. Comparative studies on fatty acid compostion of marine microalgae[J]. Oceanologia Et Limnologia Sinica, 1999, 30(1):34-40. (in Chinese)

[21]
蒋霞敏, 郑亦周. 14种微藻总脂含量和脂肪酸组成研究[J]. 水生生物学报, 2003, 27(3):243-247.

JIANG X M, ZHENG Y Z. Total lipid and fatty acid composition of 14 species of mircoalgae[J]. Acta Hydrobiologica Sinica, 2003, 27(3):243-247. (in Chinese)

[22]
王海英, 曾晓波. 三种硅藻产多不饱和脂肪酸分析[J]. 中国油脂, 2007, 32(7):76-78.

WANG H Y, ZENG X B. Composition of polyunsaturated fatty acids produced by three strains of diatoms[J]. China Oils and Fats, 2007, 32(7):76-78. (in Chinese)

[23]
王蒙, 李纯厚, 戴明, 等. CO2/空气比值对牟氏角毛藻生长和总脂含量的影响[J]. 湖南农业科学, 2010(17):134-138.

WANG M, LI C H, DAI M, et al. Effects of different CO2/air ratios on the growth and total lipid content of Chaetoceros muelleri[J]. Hunan Agricultural Sciences, 2010(17):134-138. (in Chinese)

[24]
徐继林, 严小军, 周成旭, 等. 19种(株)海洋微藻脂肪酸组成及充气产生的影响[J]. 宁波大学学报(理工版), 2006, 19(2):180-185.

XU J L, YAN X J, ZHOU C X, et al. The effects of air bubbling condition on fatty acid composition in 19 strains of marine microalgae[J]. Journal of Ningbo University (Natural Science & Engineering Edition), 2006, 19(2):180-185. (in Chinese)

[25]
CAHU C L, INFANTE J L Z, PÉRES A, et al. Algal addition in sea bass (Dicentrarchus labrax) larvae rearing:effect on digestive enzymes[J]. Aquaculture, 1998, 161(1/2/3/4):479-489.

DOI

[26]
HJELMELAND K, PEDERSEN B H, NILSSEN E M. Trypsin content in intestines of herring larvae,Clupea harengus,ingesting inert polystyrene spheres or live crustacea prey[J]. Marine Biology, 1988, 98(3):331-335.

DOI

[27]
LAZO J P, DINIS M T, HOLT G J, et al. Co-feeding microparticulate diets with algae:toward eliminating the need of zooplankton at first feeding in larval red drum (Sciaenops ocellatus)[J]. Aquaculture, 2000, 188(3/4):339-351.

DOI

[28]
叶志娟, 刘兆普, 王长海. 牟氏角毛藻在海水养殖废水中的生长及其对废水的净化作用[J]. 海洋环境科学, 2006, 25(3):9-12.

YE Z J, LIU Z P, WANG C H. Effects of aquafarm wastewater on growth and the uptake ratio of nutrition in Chaetoceros mulleri[J]. Marine Environmental Science, 2006, 25(3):9-12. (in Chinese)

[29]
曾国权, 黄晨, 蒋霞敏, 等. 海链藻定向培养对凡纳滨对虾生长、存活及养殖水质的影响[J]. 宁波大学学报(理工版), 2021, 34(1):1-7.

ZENG G Q, HUANG C, JIANG X M, et al. Effects of directional cultivation of Thalassiosira pseudonana on growth and survival of Penaeus vannamei and water quality[J]. Journal of Ningbo University (Natural Science & Engineering Edition), 2021, 34(1):1-7. (in Chinese)

[30]
姚雪梅, 王珺, 王思, 等. 人工培养牟氏角毛藻对弧菌抑制效果研究[J]. 南方水产, 2005, 1(4):41-46.

YAO X M, WANG J, WANG S, et al. Study on the inhibitory effect of artificial culture Chaetoceros muelleri to vibrio[J]. South China Fisheries Science, 2005, 1(4):41-46. (in Chinese)

[31]
黄翔鹄, 冯奕成, 李长玲, 等. 虾池微藻定向培育及其对养殖环境因子的影响[J]. 湛江海洋大学学报, 2005, 25(6):25-31.

HUANG X H, FENG Y C, LI C L, et al. Directive breeding of microalgae and effects of it on environment factors in prawn pond[J]. Journal of Zhanjiang Ocean University, 2005, 25(6):25-31. (in Chinese)

[32]
崔青曼, 吴佩佩, 张旭, 等. 小球藻对南美白对虾生长性能及免疫功能的影响[J]. 饲料工业, 2018, 39(20):11-15.

CUI Q M, WU P P, ZHANG X, et al. Effects of chlorella vulgaris on growth performance and immune functions of Litopenaeus vannamei[J]. Feed Industry, 2018, 39(20):11-15. (in Chinese)

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