动物营养学报 >

2023 , Vol. 35 >Issue 7: 4287 - 4300

DOI: https://doi.org/10.12418/CJAN2023.399

研究论文

低代谢能饲粮添加叶绿素和维生素B12对黄羽肉鸡生长性能、肉品质、血常规指标和养分利用率的影响

  • 阮栋 , 1 ,
  • 林厦菁 1 ,
  • 张赛 1 ,
  • 刘平祥 2 ,
  • 刘金萍 2 ,
  • 叶金玲 1 ,
  • 丁发源 1 ,
  • 程镜蓉 3 ,
  • 郑春田 1 ,
  • 蒋守群 , 1, *
展开
  • 1 广东省农业科学院动物科学研究所,畜禽育种国家重点实验室,农业农村部华南动物营养与饲料重点实验室,广东省畜禽育种与营养重点实验室,广州 510640
  • 2 广东驱动力生物科技集团股份有限公司,广州 510640
  • 3 广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所,农业农村部功能食品重点实验室,广东省农产品加工重点实验室,广州 510640
* 蒋守群,研究员,硕士生导师,E-mail:

阮 栋(1983—),男,湖北咸宁人,副研究员,博士,从事家禽营养与饲料研究。E-mail:

Office editor: 田艳明

收稿日期: 2022-12-21

  网络出版日期: 2023-07-11

基金资助

广东省农业科学院食品营养与健康研究中心建设运行经费(XTXM202205)

广东省自然科学基金项目(2019A1515010912)

广东省重点领域研发计划项目(2020B0202090004)

国家重点研发专项(2021YFD300404)

国家肉鸡产业技术体系项目(CARS-41-G10)

广东省科技计划项目(2019A050505007)

广东省农业科学院科技计划项目(202106TD)

广东省农业科学院高水平科技创新战略建设专项资金(R2019PY-QF008)

收起

Effects of Low Metabolizable Energy Diet Supplemented with Chlorophyll and Vitamin B12 on Growth Performance, Meat Quality, Blood Routine Indices and Nutrient Utilization of Yellow-Feathered Chickens

  • RUAN Dong , 1 ,
  • LIN Xiajing 1 ,
  • ZHANG Sai 1 ,
  • LIU Pingxiang 2 ,
  • LIU Jinping 2 ,
  • YE Jinling 1 ,
  • DING Fayuan 1 ,
  • CHENG Jingrong 3 ,
  • ZHENG Chuntian 1 ,
  • JIANG Shouqun , 1, *
Expand
  • 1 Guangdong Provincial Key Laboratory of Animal Breeding and Nutrition, Key Laboratory of Animal Nutrition and Feed Science in South China, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, State Key Laboratory of Livestock and Poultry Breeding, Institute of Animal Science, Guangdong Academy of Agricultural Sciences, Guangzhou 510640, China
  • 2 Guangdong Drive Bio-Tech Group Co., Ltd., Guangzhou 510640, China
  • 3 Guangdong Provincial Key Laboratory of Agricultural Product Processing, Key Laboratory of Functional Foods, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Sericultural and Agri-Food Research Institute, Guangdong Academy of Agricultural Sciences, Guangzhou 510640, China
* professor, E-mail:

Received date: 2022-12-21

  Online published: 2023-07-11

Fold

摘要

本试验旨在研究低代谢能饲粮添加天然植物来源的叶绿素和维生素B12对快速型黄羽肉鸡生长性能、肉品质、血常规指标和养分利用率的影响。试验选用720羽22日龄快速型黄羽肉鸡母鸡,按体重一致原则随机分为4个组,每组6个重复,每个重复30只鸡。对照组饲喂基础饲粮,低代谢能Ⅰ组饲喂基础饲粮代谢能降低0.42 MJ/kg的低代谢能Ⅰ饲粮,低代谢能Ⅰ+叶绿素和维生素B12复合物组饲喂在低代谢能Ⅰ饲粮中添加40 mg/kg叶绿素和0.04 mg/kg维生素B12的饲粮,低代谢能Ⅱ+叶绿素和维生素B12复合物组饲喂在基础饲粮代谢能降低0.84 MJ/kg的低代谢能Ⅱ饲粮中添加40 mg/kg叶绿素和0.04 mg/kg维生素B12的饲粮。试验期28 d,分为22~42日龄和43~49日龄2个阶段。试验鸡地面平养,自由采食和饮水。结果表明:1)与对照组相比,低代谢能Ⅰ组黄羽肉鸡22~49日龄平均日增重和50日龄体重显著降低(P<0.05)。与低代谢能Ⅰ组相比,低代谢能Ⅰ+叶绿素和维生素B12复合组22~49日龄平均日增重和50日龄体重显著提高(P<0.05),且与对照组相比差异不显著(P>0.05)。2)与对照组相比,低代谢能Ⅰ组黄羽肉鸡全净膛率显著降低(P<0.05),而低代谢能Ⅰ+叶绿素和维生素B12复合组和低代谢能Ⅱ+叶绿素和维生素B12复合组全净膛率则无显著差异(P>0.05)。与对照组和低代谢能Ⅰ组相比,低代谢能Ⅰ+叶绿素和维生素B12复合组胸肌45 min pH和24 h红度(a*)值显著提高(P<0.05),胸肌滴水损失显著降低(P<0.05)。3)与对照组和低代谢能Ⅰ组相比,低代谢能Ⅰ+叶绿素和维生素B12复合组黄羽肉鸡血液血红蛋白(HGB)含量和红细胞压积(HCT)显著提高(P<0.05)。与对照组相比,低代谢能Ⅰ+叶绿素和维生素B12复合组红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)显著提高(P<0.05)。4)与低代谢能Ⅰ组相比,低代谢能Ⅰ+叶绿素和维生素B12复合组黄羽肉鸡血浆丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05)。5)与低代谢能Ⅰ组相比,低代谢能Ⅰ+叶绿素和维生素B12复合组黄羽肉鸡饲粮能量表观利用率显著提高(P<0.05),且与对照组相比无显著差异(P>0.05)。综上所述,在本试验条件下,低代谢能饲粮添加叶绿素和维生素B12可改善黄羽肉鸡生长性能和肉品质,提高饲粮能量表观利用率,达到与基础饲粮一样的饲喂效果。

关键词： 叶绿素; 维生素B12; 黄羽肉鸡; 生长性能; 血常规指标; 养分利用率

本文引用格式

阮栋 , 林厦菁 , 张赛 , 刘平祥 , 刘金萍 , 叶金玲 , 丁发源 , 程镜蓉 , 郑春田 , 蒋守群 . 低代谢能饲粮添加叶绿素和维生素B12对黄羽肉鸡生长性能、肉品质、血常规指标和养分利用率的影响[J]. 动物营养学报, 2023 , 35(7) : 4287 -4300 . DOI: 10.12418/CJAN2023.399

Abstract

This experiment was conducted to investigate the effects of low metabolizable energy (ME) diet supplemented with natural plant source chlorophyll and vitamin B12 (VB12) on growth performance, meat quality, blood routine indices and nutrient utilization of fast-growing type yellow-feathered chickens. A total of 720 fast-growing type female yellow-feathered chickens of 22-day-old were randomly divided into 4 groups with 6 replicates per group and 30 chickens per replicate according to the same body weight. Chickens in the control group were fed a basal diet, those in low ME group Ⅰ were fed the low ME Ⅰ diet which reduced ME by 0.42 MJ/kg in the basal diet, those in low ME Ⅰ+chlorophyll and VB12 compound group were fed the low ME Ⅰ diet supplemented with 40 mg/kg chlorophyll and 0.04 mg/kg VB12, and those in low ME Ⅱ+chlorophyll and VB12 compound group were fed the low ME Ⅱ diet supplemented with 40 mg/kg chlorophyll and 0.04 mg/kg VB12, which reduced ME by 0.84 MJ/kg in the basal diet, respectively. The experiment lasted for 28 days and was divided into 22 to 42 days of age and 43 to 49 days of age. During the experiment, chickens were raised flat on the ground and fed pellet feed and drank freely. The results showed as follows: 1) compared with the control group, the average daily gain from 22 to 49 days of age and body weight of yellow-feathered chickens at 50 days of age in low ME Ⅰ group were significantly decreased (P<0.05). Compared with low ME Ⅰ group, the average daily gain from 22 to 49 days of age and body weight at 50 days of age in low ME Ⅰ+chlorophyll and VB12 compound group were significantly increased (P<0.05), but there were no significant differences compared with the control group (P>0.05). 2) Compared with the control group, the eviscerated yield rate of yellow-feathered chickens in low ME Ⅰ group was significantly decreased (P<0.05), but there was no significant difference in the eviscerated yield rate in low ME Ⅰ+chlorophyll and VB12 compound group and low ME Ⅱ+chlorophyll and VB12 compound group (P>0.05). Compared with the control group and low ME Ⅰ group, the 45 min pH and 24 h redness (a*) value of breast muscle in low ME Ⅰ+chlorophyll and VB12 compound group were significantly increased (P<0.05), while the drip loss of breast muscle was significantly decreased (P<0.05). 3) Compared with the control group and low ME group Ⅰ, the blood hemoglobin (HGB) content and hematocrit (HCT) of yellow-feathered chickens in low ME group Ⅰ+chlorophyll and VB12 compound group were significantly increased (P<0.05). Compared with the control group, the mean red blood cell hemoglobin concentration (MCHC) in low ME Ⅰ+chlorophyll and VB12 compound group were significantly increased (P<0.05). 4) Compared with low ME Ⅰ group, the plasma malondialdehyde (MDA) content of yellow-feathered chickens in low ME Ⅰ+chlorophyll and VB12 compound group was significantly decreased (P<0.05). 5) Compared with low ME Ⅰ group, dietary energy apparent utilization of yellow-feathered chickens in low ME Ⅰ+chlorophyll and VB12 compound group was significantly increased (P<0.05), and there was no significant difference compared with the control group (P>0.05). In conclusion, under the conditions of this experiment, low ME diet supplemented with chlorophyll and VB12 can improve the growth performance and meat quality of yellow-feathered chickens, improve dietary energy apparent utilization, and achieve the same feeding effect as the basal diet.[Chinese Journal of Animal Nutrition, 2023, 35(7):4287-4300]

Key words： chlorophyll; vitamin B12; yellow-feathered chickens; growth performance; blood routine indices; nutrient utilization

近年来,我国家禽养殖业发展迅速,规模化、集约化、产业化水平不断提升,这带动了饲料需求的快速增长。饲料是家禽养殖生产中影响成本的重要因素之一,在养殖总成本中占比最大。能量是家禽饲粮第一限制性营养物质,占饲料成本的50%~60%。受能量原料价格上涨压力、蛋白质原料国际贸易波动和行业竞争压力等因素影响,养殖成本始终处于高位,这给养殖及饲料企业带来巨大压力。因此,建立适合我国国情的资源节约型多元化饲料配制技术,进一步提高饲料利用效率,降低饲料成本,有利于推进家禽养殖业高效、绿色和健康可持续发展。
叶绿素来源于植物光合作用,主要有叶绿素a和叶绿素b 2种,是丰富的自然资源,其与机体血红蛋白分子结构极其相似,能够提高正常红细胞生长,增加机体含氧量,促进养分输送与吸收,具有改善贫血、降血糖、抗氧化、抗炎和促进新陈代谢等多种功能,在动物的生长发育和健康中发挥重要作用[1⇓-3]。Li等[4]通过模拟小鼠体外消化和结肠发酵研究叶绿素的生物转化,结果发现在生命早期和成年期有利于叶绿素向脱叶绿素生物转化和氧化反应形成脱镁叶绿素,而脱镁叶绿素可调节肠道菌群结构,增加短链脂肪酸含量。维生素B12是动物体内重要的水溶性维生素之一,可促进血红素合成以及红细胞的发育和成熟,参与机体造血功能。维生素B12作为一种辅助因子,在线粒体中辅助甲基丙二酰辅酶A异构酶将甲基丙二酰辅酶A转化为琥珀酰辅酶A,参与三羧酸循环,促进脂肪酸代谢,实现脂肪、碳水化合物为机体供能。此外,维生素B12具有促进红细胞脱氧核酸生物合成和活化氨基酸的作用,可以增加核酸和蛋白质的合成[5]。缺乏维生素B12可能导致机体造血机能受阻和生长缓慢。饲粮添加0.016 mg/kg维生素B12或种蛋注射20~40 μg/(枚·d)维生素B12能显著改善肉鸡造血功能,提高肉鸡平均日增重和饲料转化率[6-7]。有研究报道,饲粮添加0.012 6~0.013 4 mg/kg维生素B12可促进五龙鹅小肠发育,提高盲肠优势菌群的相对丰度,改善养分利用率。在新生大鼠生命早期补充维生素B12可提高海马神经元细胞超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性,减少丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,抵抗β淀粉样蛋白毒性应激[8]。
目前,有关于叶绿素和维生素B12共同作用的研究报道较少。笔者推测饲粮添加适宜剂量的叶绿素和维生素B12可能通过改善机体造血功能提升饲粮中营养物质的利用率和畜禽产品品质。因此,本试验拟以快速型黄羽肉鸡母鸡为试验动物,旨在研究低代谢能饲粮添加叶绿素和维生素B12对黄羽肉鸡生长性能、肉品质、血常规指标及养分利用率的影响,探讨叶绿素和维生素B12在肉鸡低代谢能饲粮中的应用效果,为黄羽肉鸡降本增效、资源节约型养殖提供数据支撑和理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

快速型黄羽肉鸡麻黄鸡母鸡购自佛山市高明区新广农牧有限公司。天然叶绿素和维生素B12复合物由广东某生物科技集团股份有限公司提供,叶绿素从菠菜中提取,叶绿素和维生素B12复合物在饲粮中的添加剂量(1 000 g/t)参照杨广明[9],即本试验全价饲料中叶绿素含量为40 mg/kg、维生素B12含量为0.04 mg/kg。

1.2 试验动物和分组

试验选用720羽22日龄健康的快速型黄羽肉鸡母鸡,依据体重一致原则将试验鸡分为4个组,每组6个重复,每个重复30只鸡。对照组饲喂基础饲粮,低代谢能Ⅰ组饲喂基础饲粮代谢能降低0.42 MJ/kg的低代谢能Ⅰ饲粮,低代谢能Ⅰ+叶绿素和维生素B12复合物组饲喂在低代谢能Ⅰ饲粮中添加40 mg/kg叶绿素和0.04 mg/kg维生素B12的饲粮,低代谢能Ⅱ+叶绿素和维生素B12复合物组饲喂在基础饲粮代谢能降低0.84 MJ/kg的低代谢能Ⅱ饲粮中添加40 mg/kg叶绿素和0.04 mg/kg维生素B12的饲粮。试验期28 d,分为2个阶段,分别为第1阶段22~42日龄和第2阶段43~49日龄。

1.3 试验饲粮

试验采用玉米-豆粕-菜籽粕型饲粮,参考《鸡饲养标准》(NY/T 33—2004)[10]与广东省农业科学院动物科学研究所建立的黄羽肉鸡饲养标准配制,营养水平按《中国饲料成分及营养价值表(2020年第31版)》[11]计算,22~42日龄和43~49日龄黄羽肉鸡各组饲粮组成及营养水平分别见表1和表2。
表1 22~42日龄饲粮组成及营养水平(风干基础)

Table 1 Composition and nutrient levels of diets during 22 to 42 days of age (air-dry basis) %

项目
Items		 对照组
Control
group		 低代谢能Ⅰ组
Low ME
group Ⅰ		 低代谢能Ⅰ+叶绿素和
维生素B12复合组
Low ME Ⅰ+chlorophyll
and VB12
compound group		 低代谢能Ⅱ+叶绿素和
维生素B12复合组
Low ME Ⅱ+chlorophyll
and VB12
compound group
原料Ingredients
玉米Corn 48.80 48.80 48.80 48.80
豆粕Soybean meal 27.50 27.50 27.50 27.50
次粉Wheat middling 1.60 1.60 1.60 1.60
麸皮Wheat bran 5.00 5.00 5.00 5.00
菜籽粕Rapeseed meal 3.70 3.70 3.70 3.70
米糠Rice bran 3.00 3.00 3.00 3.00
大豆油Soybean oil 3.00 1.84 1.84 0.68
L-赖氨酸盐酸盐L-lysine·HCl (98.5%) 0.25 0.25 0.25 0.25
DL-蛋氨酸DL-methionine (99%) 0.20 0.20 0.20 0.20
L-苏氨酸L-threonine (99%) 0.12 0.12 0.12 0.12
石粉Limestone 0.86 0.86 0.86 0.86
磷酸氢钙CaHPO4 1.80 1.80 1.80 1.80
氯化钠NaCl 0.30 0.30 0.30 0.30
沸石粉Zeolite powder 1.19 2.35 2.35 3.51
玉米芯粉Corncob powder 1.68 1.68 1.68 1.68
预混料Premix1) 1.00 1.00 1.00 1.00
合计Total 100.00 100.00 100.00 100.00
营养水平Nutrient levels2)
代谢能ME/(MJ/kg) 11.51 11.09 11.09 10.67
粗蛋白质CP 19.55 19.63 19.85 19.51
钙Ca 0.85 0.85 0.85 0.85
总磷TP 0.72 0.72 0.72 0.72
非植酸磷NPP 0.41 0.41 0.41 0.41
赖氨酸Lys 1.15 1.15 1.15 1.15
蛋氨酸Met 0.48 0.48 0.48 0.48
蛋氨酸+半胱氨酸Met+Cys 0.85 0.85 0.85 0.85
苏氨酸Thr 0.81 0.81 0.81 0.81
饲料成本Feed cost/(元/t) 3 575 3 442 3 507 3 374

1)预混料为每千克饲粮提供 The premix provided the following per kg of diets:VA 9 000 IU,VD3 500 IU,VE 35 mg,VK3 2.2 mg,VB1 2.3 mg,VB2 5.0 mg,VB6 2.4 mg,VB12 0.04 mg,烟酸 niacin 35 mg,泛酸钙 calcium pantothenate 10 mg,生物素 biotin 0.10 mg,叶酸 folic acid 0.7 mg,氯化胆碱 choline chloride 1 000 mg,Cu 7 mg,Mn 60 mg,Zn 80 mg,I 0.60 mg,Se 0.15 mg。

2)粗蛋白质为实测值,其他为计算值。CP was a measured value, while the others were calculated values.

表2 43~49日龄饲粮组成及营养水平(风干基础)

Table 2 Composition and nutrient levels of diets during 43 to 49 days of age (air-dry basis) %

项目
Items		 对照组
Control
group		 低代谢能Ⅰ组
Low ME
group Ⅰ		 低代谢能Ⅰ+叶绿素和
维生素B12复合组
Low ME Ⅰ+chlorophyll
and VB12
compound group		 低代谢能Ⅱ+叶绿素和
维生素B12复合组
Low ME Ⅱ+chlorophyll
and VB12
compound group
原料Ingredients
玉米Corn 49.50 49.50 49.50 49.50
豆粕Soybean meal 22.50 22.50 22.50 22.50
次粉Wheat middling 2.00 2.00 2.00 2.00
麸皮Wheat bran 6.00 6.00 6.00 6.00
菜籽粕Rapeseed meal 6.00 6.00 6.00 6.00
米糠Rice bran 3.00 3.00 3.00 3.00
大豆油Soybean oil 4.00 2.84 2.84 1.60
L-赖氨酸盐酸盐L-lysine·HCl (98.5%) 0.13 0.13 0.13 0.13
DL-蛋氨酸DL-methionine (99%) 0.13 0.13 0.13 0.13
L-苏氨酸L-threonine (99%) 0.02 0.02 0.02 0.02
石粉Limestone 0.87 0.87 0.87 0.87
磷酸氢钙CaHPO4 1.51 1.51 1.51 1.51
氯化钠NaCl 0.30 0.30 0.30 0.30
沸石粉Zeolite powder 0.76 1.92 1.92 3.16
玉米芯粉Corncob powder 2.28 2.28 2.28 2.28
预混料Premix1) 1.00 1.00 1.00 1.00
合计Total 100.00 100.00 100.00 100.00
营养水平Nutrient levels2)
代谢能ME/(MJ/kg) 11.77 11.35 11.35 10.93
粗蛋白质CP 18.08 17.56 18.15 17.74
钙Ca 0.78 0.78 0.78 0.78
总磷TP 0.67 0.67 0.67 0.67
非植酸磷NPP 0.36 0.36 0.36 0.36
赖氨酸Lys 0.96 0.96 0.96 0.96
蛋氨酸Met 0.40 0.40 0.40 0.40
蛋氨酸+半胱氨酸Met+Cys 0.71 0.71 0.71 0.71
苏氨酸Thr 0.67 0.67 0.67 0.67
饲料成本Feed cost/(元/t) 3 547 3 414 3 479 3 346

1)预混料为每千克饲粮提供 The premix provided the following per kg of diets:VA 6 000 IU,VD3 500 IU,VE 25 mg,VK3 1.7 mg,VB1 1.0 mg,VB2 4.0 mg,VB6 0.6 mg,VB12 0.04 mg,烟酸 niacin 20 mg,泛酸钙 calcium pantothenate 12 mg,生物素 biotin 0.02 mg,叶酸 folic acid 0.30 mg,氯化胆碱 choline chloride 1 300 mg,Cu 7 mg,Mn 55 mg,Zn 75 mg,I 0.50 mg,Se 0.15 mg。

2)粗蛋白质为实测值,其他为计算值。CP was a measured value, while the others were calculated values.

1.4 饲养管理

动物饲养试验在广东省农业科学院动物科学研究所试验场肉鸡舍开展。试验开始前对鸡舍冲洗和消毒,试验鸡采用地面平养,地面铺放干燥稻壳,每个重复试验栏均采用镀锌铁丝网间隔。饲养管理和常规免疫程序参照《黄羽肉鸡饲养管理技术流程》进行。试验鸡自由采食颗粒饲料、自由饮水,各组饲养管理和环境条件基本一致。

1.5 测定指标及方法

1.5.1 生长性能

每个饲养阶段开始和结束时,于次日08:00以重复为单位对试验鸡进行空腹称重,统计耗料量,计算平均日增重、平均日采食量和料重比。每天记录各组试验鸡死亡及淘汰情况,计算死亡率。

1.5.2 血常规指标及血浆生化指标

试验结束时,从每个重复选取2只接近平均体重的试验鸡,翅静脉采集2管全血约5 mL于肝素钠抗凝管。其中,一管全血立即采用全自动动物血液细胞分析仪(Mindray BC-5000VET,深圳迈瑞动物医疗科技股份有限公司)测定血常规指标;另一管全血在3 000 r/min离心10 min,分离血浆后,于-80 ℃保存。血浆乳酸(lactic acid,LA)、尿酸(uric acid,UA)和MDA含量采用南京建成生物工程研究所研发的试剂盒测定,在多功能酶标仪(SpectraMax M-5,Molecular Devices,美国)上读数,各指标具体检测方法按照试剂盒说明书进行。

1.5.3 胴体性状

在第2阶段试验结束时(50日龄),每个重复选取2只接近平均体重的试验鸡称活体重,颈静脉放血致死后进行屠宰,分别剖离胸肌、腿肌、腹脂、肝脏、心脏、脾脏、胸腺及肠道并称重。根据《家禽生产性能名词术语和度量统计方法》(NY/T 823—2004)测定屠体重、半净膛重、全净膛重、胸肌重、腿肌重和腹脂重,以屠体重为基础计算半净膛率、全净膛率、胸肌率、腿肌率和腹脂率。

1.5.4 肉品质

参照林厦菁等[12]的方法,将已剖离2侧无皮无骨的完整胸肌,去除胸肌表面的脂肪组织,测定胸肌45 min和24 h的pH、肉色[亮度(L*)、红度(a*)和黄度(b*)值]、嫩度(剪切力)和滴水损失。

1.5.5 养分利用率

采用全收粪法代谢试验测定饲粮养分表观利用率。50日龄时,从每个组随机选取接近重复平均体重的24只试验鸡移入代谢笼,每组6个重复,每个重复4只鸡,分别饲喂各组饲粮,并采集饲粮样品于-20 ℃保存。试验鸡预饲3 d,然后禁食空腹48 h后开展正式试验,正试期准确记录当天采食量,准确收集每只鸡的排泄物,去除羽毛皮屑等杂质,并盐酸固氮。收集48 h后,将粪样烘干后粉碎,于-20 ℃保存。饲粮和粪样中干物质和粗蛋白质含量分别参照GB/T 6435—2014和GB/T 6432—2018测定,能量值采用全自动氧弹量热仪(6400,Parr Instrument Company,美国)进行测定。养分表观利用率计算公式如下:
DC(%)= F × N F - f × N f F × N F×100。
式中:DC为饲粮中某养分表观利用率(%);F为饲粮采食量(g);f为粪便排泄量(g);NF为饲粮中该养分含量(%);Nf为排泄物中该养分含量(%)。

1.6 数据统计分析

试验数据采用Excel 2016整理,采用SAS 9.3软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA),并采用Duncan氏法进行多重比较,P<0.05表示差异显著,0.05<P<0.10表示差异有显著趋势,试验结果以平均值和均值标准误(SEM)表示。

2 结果

2.1 低代谢能饲粮添加叶绿素和维生素B12对22~49日龄快速型黄羽肉鸡生长性能的影响

由表3可知,22~49日龄,与对照组相比,低代谢能Ⅰ组黄羽肉鸡平均日增重和50日龄体重显著降低(P<0.05)。与低代谢能Ⅰ组相比,低代谢能Ⅰ+叶绿素和维生素B12复合组平均日增重和50日龄体重显著提高(P<0.05),且与对照组相比差异不显著(P>0.05)。各组之间平均日采食量、料重比和死亡率差异均不显著(P>0.05)。此外,低代谢能Ⅱ+叶绿素和维生素B12复合组平均日增重和50日龄体重与对照组相比也无显著差异(P>0.05)。本试验中,低代谢能Ⅰ组黄羽肉鸡增重成本最高为9.67元/kg,而低代谢能Ⅰ+叶绿素和维生素B12复合组增重成本最低为9.17元/kg,与对照组相比降低了0.29元/kg。
表3 低代谢能饲粮添加叶绿素和维生素B12对22~49日龄快速型黄羽肉鸡生长性能的影响

Table 3 Effects of low ME diet supplemented with chlorophyll and VB12 on growth performance of fast-growing type yellow-feathered chickens during 22 to 49 days of age

项目
Items		 对照组
Control
group		 低代谢
能Ⅰ组
Low ME
group Ⅰ		 低代谢能Ⅰ+叶绿素和
维生素B12复合组
Low ME Ⅰ+
chlorophyll and VB12
compound group		 低代谢能Ⅱ+叶绿素和
维生素B12复合组
Low ME Ⅱ+
chlorophyll and VB12
compound group		 均值
标准误
SEM		 P值
P-value
22~42日龄22 to 42 days of age
初重Initial BW/g 455.00 455.00 455.83 455.83 0.48 0.551
末重Final BW/g 1 079.36 1 042.50 1 088.33 1 079.72 13.92 0.094
平均日采食量ADFI/(g/d) 80.70 82.37 81.41 82.12 0.68 0.660
平均日增重ADG/(g/d) 29.73 27.98 30.12 29.71 0.67 0.217
料重比F/G 2.78 2.86 2.71 2.76 0.06 0.163
死亡率Mortality rate/% 0.56 0.00 0.00 0.00 0.40 0.222
22~49日龄22 to 49 days of age
初重Initial BW/g 455.00 455.00 455.83 455.83 0.48 0.551
末重Final BW/g 1 449.05a 1 404.70b 1 461.39a 1 428.89ab 14.75 0.044
平均日采食量ADFI/(g/d) 96.13 96.93 96.40 96.32 0.74 0.081
平均日增重ADG/(g/d) 34.28a 32.75b 34.67a 33.55ab 0.51 0.041
料重比F/G 2.83 2.92 2.78 2.87 0.04 0.128
死亡率Mortality rate/% 1.67 0.56 0.00 0.00 0.48 0.129
增重成本
Weight gain cost/(元/kg)		 9.46 9.67 9.17 9.52

同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05),相同小写字母或无字母表示差异不显著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts indicated significant difference (P<0.05), while with the same small letter or no letter superscripts indicated no insignificant difference (P>0.05). The same as below.

2.2 低代谢能饲粮添加叶绿素和维生素B12对50日龄快速型黄羽肉鸡胴体性状的影响

由表4可知,与对照组相比,低代谢能Ⅰ组黄羽肉鸡全净膛率显著降低(P<0.05),而低代谢能Ⅰ+叶绿素和维生素B12复合组和低代谢能Ⅱ+叶绿素和维生素B12复合组全净膛率则无显著差异(P>0.05)。各组之间屠宰率、半净膛率、胸肌率、腿肌率和腹脂率均无显著差异(P>0.05)。
表4 低代谢能饲粮添加叶绿素和维生素B12对50日龄快速型黄羽肉鸡胴体性状的影响

Table 4 Effects of low ME diet supplemented with chlorophyll and VB12 on carcass traits of fast-growing type yellow-feathered chickens at 50 days of age %

项目
Items		 对照组
Control
group		 低代谢
能Ⅰ组
Low ME
group Ⅰ		 低代谢能Ⅰ+叶绿素和
维生素B12复合组
Low ME Ⅰ+
chlorophyll and VB12
compound group		 低代谢能Ⅱ+叶绿素和
维生素B12复合组
Low ME Ⅱ+
chlorophyll and VB12
compound group		 均值
标准误
SEM		 P值
P-value
屠宰率Carcass rate 87.30 86.15 86.07 85.95 0.99 0.610
半净膛率
Half-eviscerated yield rate		 79.26 77.43 78.69 80.23 1.48 0.445
全净膛率
Eviscerated yield rate		 65.45a 63.85b 64.73ab 64.44ab 0.57 0.036
胸肌率Breast muscle rate 13.46 12.77 12.61 12.65 0.43 0.192
腿肌率Leg muscle rate 15.56 15.72 16.37 15.72 0.42 0.268
腹脂率Abdominal fat rate 1.46 1.27 1.50 1.31 0.25 0.554

2.3 低代谢能饲粮添加叶绿素和维生素B12对50日龄快速型黄羽肉鸡肉品质的影响

由表5可知,与对照组相比,低代谢能Ⅰ组黄羽肉鸡胸肌肉色、pH、滴水损失和剪切力均无显著差异(P>0.05)。与对照组和低代谢能Ⅰ组相比,低代谢能Ⅰ+叶绿素和维生素B12复合组胸肌45 min pH和24 h a*值显著提高(P<0.05),胸肌滴水损失显著降低(P<0.05);低代谢能Ⅱ+叶绿素和维生素B12复合组胸肌45 min pH显著提高(P<0.05)。各组之间胸肌L*值、b*值和剪切力均无显著差异(P>0.05)。
表5 低代谢能饲粮添加叶绿素和维生素B12对50日龄快速型黄羽肉鸡肉品质的影响

Table 5 Effects of low ME diet supplemented with chlorophyll and VB12 on meat quality of fast-growing type yellow-feathered chickens at 50 days of age

项目
Items		 对照组
Control
group		 低代谢
能Ⅰ组
Low ME
group Ⅰ		 低代谢能Ⅰ+叶绿素和
维生素B12复合组
Low ME Ⅰ+
chlorophyll and VB12
compound group		 低代谢能Ⅱ+叶绿素和
维生素B12复合组
Low ME Ⅱ+
chlorophyll and VB12
compound group		 均值
标准误
SEM		 P值
P-value
肉色
Meat
color		 45 min亮度 L 45 m i n * 63.20 48.23 49.99 49.46 9.38 0.490
45 min红度 a 45 m i n * 12.17 12.96 12.33 12.48 0.79 0.867
45 min黄度 b 45 m i n * 8.15 10.13 8.37 7.89 0.97 0.175
24 h亮度 L 24   h * 52.90 53.83 53.73 53.71 1.04 0.367
24 h红度 a 24   h * 10.73b 11.33b 14.23a 11.09b 2.09 0.042
24 h黄度 b 24   h * 9.10 10.31 9.48 9.09 0.52 0.118
pH pH45 min 5.90b 5.85b 6.12a 6.05a 0.09 0.030
pH24 h 5.75 5.77 5.70 5.82 0.06 0.279
滴水损失Drip loss/% 2.70a 2.60a 2.21b 2.51ab 0.32 0.011
剪切力Shear force/N 40.17 41.83 38.05 38.15 4.09 0.364

2.4 低代谢能饲粮添加叶绿素和维生素B12对50日龄快速型黄羽肉鸡血常规指标的影响

由表6可知,与对照组相比,低代谢能Ⅰ组黄羽肉鸡血液红细胞(RBC)数量、血红蛋白(HGB)含量、红细胞压积(HCT)、红细胞平均血红蛋白含量(MCH)和红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)均无显著差异(P>0.05)。与对照组和低代谢能Ⅰ组相比,低代谢能Ⅰ+叶绿素和维生素B12复合组血液HGB含量和HCT显著提高(P<0.05)。与对照组相比,低代谢能Ⅰ+叶绿素和维生素B12复合组血液MCHC显著提高(P<0.05)。各组之间其他血常规指标均无显著差异(P>0.05)。
表6 低代谢能饲粮添加叶绿素和维生素B12对50日龄快速型黄羽肉鸡血常规指标的影响

Table 6 Effects of low ME diet supplemented with chlorophyll and VB12 on blood routine indices of fast-growing type yellow-feathered chickens at 50 days of age

项目
Items		 对照组
Control
group		 低代谢
能Ⅰ组
Low ME
group Ⅰ		 低代谢能Ⅰ+叶绿素和
维生素B12复合组
Low ME Ⅰ+
chlorophyll and VB12
compound group		 低代谢能Ⅱ+叶绿素和
维生素B12复合组
Low ME Ⅱ+
chlorophyll and VB12
compound group		 均值
标准误
SEM		 P值
P-value
红细胞RBC/(×1012个/L) 1.559 1.553 1.598 1.668 0.09 0.064
血红蛋白HGB/(g/L) 106.17b 107.25b 123.25a 116.55ab 6.15 0.047
红细胞压积HCT/% 18.46b 18.30b 21.22a 19.93ab 1.02 0.034
平均红细胞体积MCV/fL 118.38 117.98 119.11 119.45 1.79 0.932
红细胞平均血红蛋白含量
MCH/pg		 68.08 69.04 70.94 69.79 0.95 0.052
红细胞平均血红蛋白浓度
MCHC/(g/L)		 575.33b 585.42ab 595.83a 584.73ab 6.56 0.039
红细胞分布宽度变异系数
RDW-CV/%		 12.10 12.76 12.12 11.91 0.53 0.563
红细胞分布宽度标准差
RDW-SD/fL		 60.77 64.26 61.60 60.39 2.69 0.629
血小板PLT/(×109个/L) 5.00 5.75 5.67 4.64 0.58 0.302
平均血小板体积MPV/fL 6.28 6.64 6.21 6.72 0.44 0.441
血小板分布宽度PDW/% 19.28 20.11 19.34 20.82 0.66 0.135
降钙素PCT/% 0.003 0.004 0.004 0.003 <0.001 0.617

2.5 低代谢能饲粮添加叶绿素和维生素B12对50日龄快速型黄羽肉鸡血浆生化指标的影响

由表7可知,与对照组相比,低代谢能Ⅰ组黄羽肉鸡血浆MDA含量有提高趋势(P>0.05)。与低代谢能Ⅰ组相比,低代谢能Ⅰ+叶绿素和维生素B12复合组血浆MDA含量显著降低(P<0.05)。各组之间血浆LA和UA含量差异均不显著(P>0.05)。
表7 低代谢能饲粮添加叶绿素和维生素B12对50日龄快速型黄羽肉鸡血浆生化指标的影响

Table 7 Effects of low ME diet supplemented with chlorophyll and VB12 on plasma biochemical indices of fast-growing type yellow-feathered chickens at 50 days of age

项目
Items		 对照组
Control
group		 低代谢
能Ⅰ组
Low ME
group Ⅰ		 低代谢能Ⅰ+叶绿素和
维生素B12复合组
Low ME Ⅰ+
chlorophyll and
VB12 compound group		 低代谢能Ⅱ+叶绿素和
维生素B12复合组
Low ME Ⅱ+
chlorophyll and
VB12 compound group		 均值
标准误
SEM		 P值
P-value
乳酸LA/(nmol/L) 4.39 4.57 4.59 4.67 0.27 0.936
尿酸UA/(mg/L) 56.03 56.68 53.70 46.09 3.54 0.225
丙二醛MDA/(nmol/mL) 0.96ab 1.49a 0.66b 1.50a 0.19 0.013

2.6 低代谢能饲粮添加叶绿素和维生素B12对快速型黄羽肉鸡养分利用率的影响

由表8可知,与对照组相比,低代谢能Ⅰ组黄羽肉鸡能量表观利用率显著降低(P<0.05),低代谢能Ⅰ+叶绿素和维生素B12复合组能量和粗蛋白质表观利用率无显著差异(P>0.05)。与低代谢能Ⅰ组相比,低代谢能Ⅰ+叶绿素和维生素B12复合组能量表观利用率显著提高(P<0.05)。然而,与对照组和低代谢能Ⅰ组相比,低代谢能Ⅱ+叶绿素和维生素B12复合组能量和粗蛋白质表观利用率均显著降低(P<0.05)。
表8 低代谢能饲粮添加叶绿素和维生素B12对快速型黄羽肉鸡养分利用率的影响

Table 8 Effects of low ME diet supplemented with chlorophyll and VB12 on nutrient utilization of fast-growing type yellow-feathered chickens

项目
Items		 对照组
Control
group		 低代谢
能Ⅰ组
Low ME
group Ⅰ		 低代谢能Ⅰ+叶绿素和
维生素B12复合组
Low ME Ⅰ+
chlorophyll and
VB12 compound group		 低代谢能Ⅱ+叶绿素和
维生素B12复合组
Low ME Ⅱ+
chlorophyll and
VB12 compound group		 均值
标准误
SEM		 P值
P-value
总能GE/(MJ/kg) 16.56 16.12 16.06 15.84
代谢能实测值
Measured ME/(MJ/kg)		 11.78 11.06 11.60 11.03
能量表观利用率
Energy apparent utilization/%		 71.20a 69.36b 72.94a 67.75c 1.10 0.019
粗蛋白质表观利用率
CP apparent utilization/%		 63.97a 63.61a 65.31a 59.71b 2.52 0.031

3 讨论

3.1 低代谢能饲粮添加叶绿素和维生素B12对快速型黄羽肉鸡生长性能的影响

能量需要量是家禽营养需要量和精准供给的第一要素,对肉鸡生长健康及胴体品质非常重要。家禽具有为能而食的特性,通常随着饲粮代谢能水平的提高,鸡的采食量相对减少,料重比降低[13]。叶绿素和维生素B12参与造血功能、营养物质运输和储存以及机体供能等多种代谢活动,对体内蛋白质合成和能量代谢产生重要作用。大多数研究表明,饲粮添加天然叶绿素可改善动物生长性能。杨广明[9]研究发现,饲粮添加300 mg/kg富含叶绿素的菠菜提取物能够显著提高蛋鸡产蛋率,降低料蛋比,但对平均日采食量无显著影响。饲粮添加维生素B12能显著改善肉鸡造血功能,提高肉鸡平均日增重和饲料转化率[5]。黄苇等[14]研究表明,无论在高代谢能还是低代谢能条件下,在爱拔益加(AA)肉鸡饲粮中添加0.008~0.024 mg/kg维生素B12均能有效提高肉仔鸡的体重和饲料转化率。本试验结果发现,低代谢能饲粮添加40 mg/kg叶绿素和0.04 mg/kg维生素B12显著影响22~49日龄黄羽肉鸡平均日增重,低代谢能Ⅰ+叶绿素和维生素B12复合组50日龄体重比对照组和低代谢能Ⅰ组分别提高了12.34和56.69 g,增重成本分别降低了0.25和0.50元/kg。这与以上试验结果基本一致,说明在低代谢能饲粮中添加叶绿素和维生素B12可改善饲料利用率,提高肉鸡平均日增重和经济效益。不过,本试验并未发现饲粮低代谢能添加叶绿素和维生素B12对肉鸡平均日采食量和料重比有显著影响,这可能与本试验只设置了2个能量梯度,基本能够满足肉鸡能量需要有关。

3.2 低代谢能饲粮添加叶绿素和维生素B12对快速型黄羽肉鸡胴体性状和肉品质的影响

胴体性状作为评价家禽产肉性能的的重要指标,一般认为半净膛率、全净膛率、胸肌率和腿肌率越高,表明肉鸡产肉性能和胴体品质良好[15]。饲粮代谢能水平过低导致肉鸡胴体品质下降,肉质粗糙。大多数研究报道,饲粮添加液态的叶绿素或富含叶绿素的小球藻、绿藻等对畜禽的全净膛率、胸肌率、腿肌率和畜产品品质均有显著影响[16⇓-18]。维生素B12作为一碳代谢的辅酶,促进多种DNA、RNA合成等反应。王宝维等[19]研究表明,饲粮添加2 mg/kg叶酸和0.009 mg/kg维生素B12能够提高五龙鹅胸肌率,降低腹脂率,改变肉鹅的胴体组织成分构成。本试验研究发现,在低代谢能饲粮添加叶绿素和维生素B12对50日龄黄羽肉鸡全净膛率有提高趋势,但对屠宰率、胸肌率和腿肌率均无显著影响,这可能与叶绿素添加水平有关,低叶绿素水平和维生素B12之间的互作对肉鸡胴体性状调节效果可能不明显[18]。
畜禽肉的肉色主要由肌红蛋白和血红蛋白决定的。叶绿素a和血红素都属于卟啉色素,机体摄入叶绿素a可立即转为血红素,从而提高血红蛋白的合成,这不仅对肉色的形成具有重要作用,而且叶绿素及叶绿素衍生物作为抗氧化物对维持肌肉细胞膜完整性具有重要作用,能够保护亚油酸免受氧化或防止氢过氧化物的分解[20]。维生素B12可以以辅酶的形式促进碳水化合物、脂肪和蛋白质的代谢,对畜产品品质起调控作用。王贺泽等[1]报道,从桑叶渣中提取的脱镁叶绿素与富马酸亚铁结合使用可降低鸡肉肌纤维直径,增加肌苷酸含量,改善鸡肉品质、风味和口感。刘平祥等[21]研究报道,饲粮添加1%菠菜提取物显著提高了鸡蛋的哈氏单位,延长了蛋品货架期。在反刍动物中,叶绿素的叶绿醇基与瘤胃微生物发生作用可释放植烷酸可提高牛奶品质[22]。武笑天等[23]研究表明,叶酸和维生素B12互作显著提高了鸡蛋哈氏单位,改善了鸡蛋蛋品质。本试验研究结果表明,低代谢能饲粮添加叶绿素和维生素B12可提高肉鸡胸肌24 h a*值和45 min pH,降低滴水损失,其中a*值提高了25.60%,滴水损失降低了15.00%。以上结果表明,低代谢能饲粮添加叶绿素和维生素B12对黄羽肉鸡的肉品质具有一定改善作用。

3.3 低代谢能饲粮添加叶绿素和维生素B12对快速型黄羽肉鸡血常规指标和血浆生化指标的影响

血液中各组分是新陈代谢的物质基础,其含量的变化可反映动物机体新陈代谢机能和生理活动规律,血常规指标可以反映动物健康状况或疾病状态[24]。血浆生化指标常用来反映动物机体营养物质代谢和组织器官机能的变化情况[25]。RBC是血液中数量最多的一种血细胞,内含运输氧的HGB,而HCT代表一定体积全血中RBC体积的相对比例,是反映动物是否贫血的重要指标之一。叶绿素参与造血功能,主要参加血红蛋白和铁蛋白的合成。Viera等[26]给小鼠饲喂添加50 mg/d叶绿素的饲粮研究叶绿素的首过代谢,结果发现肝脏中叶绿素的活性代谢物脱镁叶绿酸、热衍生物、植基二氢卟吩的生成和吸收在叶绿素精确的首过代谢中发生,参与机体造血功能。研究报道,饲粮添加不同来源的叶绿素可提高雄性大鼠血液RBC数量、HGB含量和HCT[18]。本研究中,低代谢能饲粮添加叶绿素和维生素B12能在不同程度上提高黄羽肉鸡血液中HGB含量、HCT和MCHC,这与前人研究结果基本一致,说明叶绿素和维生素B12共同作用可改善黄羽肉鸡的运氧功能、促进造血和微循环功能。
LA是动物肌肉无氧代谢的产物,在应激、缺氧或剧烈运动状态下肌肉中LA的生成量增加,随后导致血浆LA含量上升。血浆UA是家禽蛋白质分解后的终产物,由肾脏排出体外,可以较准确地反映动物体内蛋白质的代谢和氨基酸之间的平衡状况,饲粮粗蛋白质水平过高或者过低都不利于机体对氮沉积和蛋白质的利用[27]。血液中丰富的血红蛋白和肌肉细胞中的肌红蛋白是重要的缓冲物质,具有一定的对LA缓冲能力,使血液的pH维持在7.35~7.45。富含叶绿素的菠菜提取物摄取可能对乳酸脱氢酶具有一定的抑制效应,限制丙酮酸催化生成LA[28]。在本试验中,低代谢能饲粮添加叶绿素和维生素B12对50日龄黄羽肉鸡血浆LA和UA含量并无显著影响,这可能与叶绿素的添加剂量和肉鸡日龄有关。MDA是膜脂质过氧化终产物之一,动物在氧化应激状态下会导致血浆MDA含量上升。叶绿素及叶绿素衍生物作为抗氧化物对维持细胞膜完整性具有重要作用,能够保护亚油酸免受氧化或防止氢过氧化物的分解[2]。同时,叶绿素可加速红细胞形成并促进小肠黏膜对微量元素铁的吸收,铁与许多酶和氧载体蛋白有关,具有调控机体抗氧化状态的功能[1,19-20]。Suparmi等[19]研究发现,给小鼠注射叶绿素可以提高血红蛋白和铁蛋白含量,降低细胞分裂率和MDA含量,在缺铁性贫血治疗中具有有益作用。有研究报道,生命早期补充维生素B12可提高海马神经元细胞超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性,降低MDA含量,抵抗β淀粉样蛋白毒性作用[8]。上述研究结果与本研究结果基本一致,这说明低代谢能饲粮补充叶绿素和维生素B12基本满足了黄羽肉鸡的能量代谢需求,从而保障组织器官正常功能的发挥,同时可改善机体的抗氧化功能。

3.4 低代谢能饲粮添加叶绿素和维生素B12对快速型黄羽肉鸡养分利用率的影响

养分利用率是判断畜禽是否能够充分吸收和利用饲粮营养以及畜禽健康状况的一项重要指标[30]。叶绿素作为细胞色素的组成部分参与动物细胞内的氧化还原供能过程。维生素B12作为线粒体重要辅酶,参与细胞能量代谢,对能量生成非常重要。此外,维生素B12具有活化氨基酸和促进核酸生物合成的作用,可促进蛋白质合成。本试验结果表明,低代谢能Ⅰ+叶绿素和维生素B12复合组肉鸡对饲粮能量表观利用率显著高于低代谢能Ⅰ组,提高了5.16%,但与对照组相当。Li等[4]研究发现,叶绿素的代谢物脱镁叶绿素可调节动物肠道菌群结构,提高短链脂肪酸含量。龙建华等[31]研究表明,饲粮添加适宜水平的维生素B12可促进五龙鹅空肠发育,调节盲肠优势菌群的相对丰度,改善养分利用率。本试验结果与此报道基本一致。然而,有研究报道,在体外模拟胃肠消化过程中发现,高水平的叶绿素可抑制胰脂肪酶的活性,改变大豆油乳状液的游离脂肪酸组成,增大油滴的粒径,使游离脂肪酸释放率降低,从而减少脂类消化[32]。因此,在肉鸡饲粮中添加适宜剂量的叶绿素和维生素B12用于节约部分能量是可行的。但是,叶绿素、维生素B12及其代谢物的作用效果是否存在剂量效应,叶绿素和维生素B12与肠道微生物之间互作机制有待进一步研究。

4 结论

低代谢能饲粮添加40 mg/kg叶绿素和0.04 mg/kg维生素B12可提高快速型黄羽肉鸡饲粮能量表观利用率和平均日增重,提高血液HGB含量、HCT和MCHC,改善胸肌a*值和滴水损失,达到与基础饲粮一样的饲喂效果。

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