动物营养学报 >

2023 , Vol. 35 >Issue 8: 5250 - 5260

DOI: https://doi.org/10.12418/CJAN2023.485

研究论文

复合益生菌对哺乳羔羊生长性能及断奶应激的影响

  • 王海玉 , 1 ,
  • 郭云霞 2, * ,
  • 段春辉 , 1, ** ,
  • 丁亚伟 1 ,
  • 张英杰 1 ,
  • 刘月琴 1 ,
  • 纪守坤 1 ,
  • 严慧 1
展开
  • 1 河北农业大学动物科技学院,保定 071000
  • 2 河北农业大学生命科学学院,保定 071000
**段春辉,讲师,硕士生导师,E-mail:

*同等贡献作者

王海玉(1996—),女,安徽宿州人,硕士研究生,动物营养与饲料科学专业。E-mail:

Office editor: 武海龙

收稿日期: 2023-02-27

  网络出版日期: 2023-08-10

基金资助

河北省重点研发专项(21322907D)

河北省重点研发专项(21322910D)

国家肉羊产业技术体系项目(CARS-38)

农业科技推广项目(22054)

收起

Effects of Compound Probiotics on Growth Performance and Weaning Stress of Lactating Lambs

  • WANG Haiyu , 1 ,
  • GUO Yunxia 2 ,
  • DUAN Chunhui , 1, ** ,
  • DING Yawei 1 ,
  • ZHANG Yingjie 1 ,
  • LIU Yueqin 1 ,
  • JI Shoukun 1 ,
  • YAN Hui 1
Expand
  • 1 College of Animal Science and Technology, Hebei Agricultural University, Baoding 071000, China
  • 2 College of Life Sciences, Hebei Agricultural University, Baoding 071000, China
**lecturer, E-mail:

*Contributed equally

Received date: 2023-02-27

  Online published: 2023-08-10

Fold

摘要

本试验旨在研究复合益生菌对哺乳羔羊生长性能及断奶应激的影响。选择体重为(13.05±0.32) kg、健康的36日龄湖羊哺乳羔羊48只,随机分为4组,每组3个重复,每个重复4只羊。Ⅰ组(对照组)饲喂羔羊料(不添加复合益生菌),Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组分别在羔羊料中添加0.5%、1.0%和1.5%的复合益生菌。所有羔羊60日龄(第0天)断奶,羔羊断奶前随母哺乳并补饲羔羊料,断奶后饲喂羔羊料。预试期10 d,正试期22 d。结果表明:1)第-14~0天,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组干物质采食量(DMI)、平均日增重(ADG)显著高于对照组(P<0.05);第1~7天,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组DMI显著高于Ⅰ组(P<0.05)。2)各组第7天血液白细胞数量显著低于第-14天(P<0.05),第0、3天血液淋巴细胞数量显著高于第-14天(P<0.05)。第-7天,Ⅱ、Ⅲ组血液白细胞数量显著低于Ⅰ组(P<0.05);第3天,Ⅲ组血液白细胞和粒细胞数量显著低于Ⅰ组(P<0.05)。3)Ⅰ组第0、3天血清肾上腺素(EPI)含量显著高于第-14、-7、7天(P<0.05),Ⅳ组第0天血清EPI含量显著高于第-14、-7、3、7天(P<0.05)。第0、3、7天,Ⅲ、Ⅳ组血清皮质醇(COR)含量显著低于Ⅰ组(P<0.05),Ⅱ、Ⅲ组血清EPI含量显著低于Ⅰ组(P<0.05)。4)Ⅱ、Ⅲ组第7天血清内毒素(LPS)含量显著低于第-14天(P<0.05),Ⅱ、Ⅲ组第0、7天血清D-乳酸(D-LA)含量显著低于第3天(P<0.05),Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ组第3天血清二胺氧化酶(DAO)含量显著高于第-14天(P<0.05)。第0、3、7天,Ⅱ、Ⅲ组血清LPS含量显著低于Ⅰ组(P<0.05)。由此可见,羔羊料中添加复合益生菌可促进哺乳羔羊生长,缓解断奶应激。本试验条件下,羔羊料中复合益生菌的适宜添加水平为1.0%。

关键词： 复合益生菌; 断奶应激; 生长性能; 血液指标

本文引用格式

王海玉 , 郭云霞 , 段春辉 , 丁亚伟 , 张英杰 , 刘月琴 , 纪守坤 , 严慧 . 复合益生菌对哺乳羔羊生长性能及断奶应激的影响[J]. 动物营养学报, 2023 , 35(8) : 5250 -5260 . DOI: 10.12418/CJAN2023.485

Abstract

This experiment was conducted to study the effects of compound probiotics on growth performance and weaning stress of lactating lambs. Forty-eight healthy Hu sheep lactating lambs at 36 days of age with body weight of (13.05±0.32) kg were randomly divided into 4 groups with 3 replicates in each group and 12 lambs in each replicate. Lambs in the group Ⅰ (control group) were fed a lamb feed (without compound probiotics), and others in groups Ⅱ, Ⅲ and Ⅳ were fed lamb feeds supplemented with 0.5%, 1.0% and 1.5% compound probiotics, respectively. All lambs were weaned at 60 days of age (day 0), the lambs were supplemented with lamb feed in addition to suckling with mother, and fed with lamb feed after weaning. The adaptation period was 10 days, and the experimental period was 22 days. The results showed as follows: 1) during days -14 to 0, the dry matter intake (DMI) and average daily gain (ADG) of groups Ⅱ, Ⅲ and Ⅳ were significantly higher than those of group Ⅰ (P<0.05); during days 1 to 7, the DMI of groups Ⅱ, Ⅲ and Ⅳ was significantly higher than that of group Ⅰ (P<0.05). 2) The blood white blood cells count of all groups on day 7 was significantly lower than that on day -14 (P<0.05), and the blood lymphocytes count on days 0 and 3 was significantly higher than that on day -14 (P<0.05). On day -7, the blood white blood cells count of groups Ⅱ and Ⅲ was significantly lower than that of group Ⅰ (P<0.05); on day 3, the counts of white blood cells and granulocytes in blood of group Ⅲ were significantly lower than those of group Ⅰ (P<0.05). 3) The serum epinephrine (EPI) content of group Ⅰ on days 0 and 3 was significantly higher than that on days -14, -7 and 7 (P<0.05), and the serum EPI content of group Ⅳ on day 0 was significantly higher than that on days -14, -7, 3 and 7 (P<0.05). On days 0, 3 and 7, the serum cortisol (COR) content of groups Ⅲ and Ⅳ was significantly lower than that of group Ⅰ (P<0.05), and the serum EPI content of groups Ⅱ and Ⅲ was significantly lower than that of group Ⅰ (P<0.05). 4) The serum lipopolysaccharide (LPS) content of groups Ⅱ and Ⅲ on day 7 was significantly lower than that on day -14 (P<0.05), the serum D-lactic acid (D-LA) content of groups Ⅱ and Ⅲ on days 0 and 7 was significantly lower than that on day 3 (P<0.05), and the serum diamine oxidase (DAO) content of groups Ⅰ, Ⅱ and Ⅲ on day 3 was significantly higher than that on day -14 (P<0.05). On days 0, 3 and 7, the serum LPS content of groups Ⅱ and Ⅲ was significantly lower than that of group Ⅰ (P<0.05). In conclusion, adding compound probiotics in lamb feed can promote the growth of lactating lambs and alleviate the weaning stress. Under the conditions of this experiment, the suitable supplemental level of compound probiotics in lamb feed is 1.0%.

Key words： compound probiotics; weaning stress; growth performance; blood indexes

断奶应激不仅导致羔羊腹泻率升高、饲料转化率降低,同时还会因生长发育缓慢影响羔羊后续育肥,降低养殖效益,尤其在饲料端禁抗的大环境下,缓解羔羊断奶应激成为了养殖业的巨大挑战。益生菌作为抗生素的替代品备受关注,其作为安全的饲料添加剂被广泛应用于动物生产中[1]。益生菌可以通过调节消化道菌群平衡、维护肠道屏障、加速营养物质消化吸收等促进动物生长[2]。益生菌及其代谢产物短链脂肪酸(SCFAs)、生物胺和小肽类在缓解畜禽应激、修复机体损伤、提高免疫力方面有显著效果[3]。研究表明,益生菌可促进断奶期犊牛生长,增强其抗氧化应激能力,并提高机体免疫力[4-5]。复合益生菌可显著增加羔羊瘤胃纤维素降解菌的数量,提高瘤胃pH,增强瘤胃消化能力[6]。研究发现,复合益生菌在提高羔羊生长性能的同时,还可改善血液生化指标,促进脏器和胃肠道的发育[7]。目前关于复合益生菌在缓解羔羊断奶应激上的研究鲜有报道。羔羊断奶后7 d内消化道菌群失衡最为明显,是炎症反应最多的阶段,断奶后1~3 d是断奶应激最严重的阶段[8]。因此,本试验选用哺乳羔羊,在断奶前14 d开始研究羔羊料中添加不同水平复合益生菌对羔羊生长性能、血常规、血清应激指标及肠道损伤指标的影响,为应用益生菌缓解羔羊断奶应激提供理论基础和技术支撑。

1 材料与方法

1.1 试验材料

复合益生菌由河北农业大学生命科学学院制药工程系实验室配制,粉剂,乳酸杆菌RSG-1∶枯草芽孢杆菌B-1∶地衣芽孢杆菌Y5-39=1∶1∶4,总活菌数≥1.0×108 CFU/g。

1.2 试验设计

选取体重为(13.05±0.32) kg、健康的36日龄湖羊哺乳羔羊48只,随机分为4组,每组3个重复,每个重复4只羊(公母各占1/2)。Ⅰ组(对照组)饲喂羔羊料(不添加复合益生菌),Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组分别在羔羊料中添加0.5%、1.0%和1.5%的复合益生菌。所有羔羊60日龄断奶时记为第0天,羔羊断奶前随母哺乳并补饲羔羊料,羔羊断奶后饲喂羔羊料。预试期10 d,正试期22 d。

1.3 羔羊料

羔羊料参照《肉羊饲养标准》(NY/T 816—2004)配制,其组成及营养水平见表1。
表1 羔羊料的组成及营养水平(风干基础)

Table 1 Composition and nutrient levels of lamb feed (air-dry basis) %

原料Ingredients 含量Content 营养水平Nutrient levels2) 含量Content
玉米Corn 41.50 干物质DM 87.32
小麦麸Wheat bran 8.00 代谢能ME/(MJ/kg) 9.30
次粉Wheat middling 10.00 粗蛋白质CP 18.35
玉米胚芽粕Corn germ meal 7.00 粗脂肪EE 7.49
豆粕Soybean meal 16.00 粗灰分Ash 9.24
干酒糟及其可溶物DDGS 8.50 中性洗涤纤维NDF 19.50
乳清粉Dried whey 2.00 酸性洗涤纤维ADF 11.40
甜菜粕Sugar beet pulp 3.00 钙Ca 0.72
预混料Premix1) 4.00 总磷TP 0.38
合计Total 100.00

1)预混料为每千克饲粮提供 The premix provided the following per kg of the diet:VA 8 000 IU,VD3 800 IU,VE 16 mg,Cu (as copper sulfate) 4 mg,Fe (as ferrous sulfate) 20 mg,Mn (as manganese sulfate) 30 mg,Zn (as zinc sulfate) 30 mg,I (as potassium iodide) 0.6 mg,Se (as sodium selenite) 0.4 mg,Co (as cobalt selenite) 0.2 mg,Ca (as calcium sulfate) 0.8 g,P (as phosphorus sulfate) 0.08 g。

2)代谢能为计算值,其余均为实测值。ME was a calculated value, while the others were measured values.

1.4 饲养管理

试验时间为2021年8月28日至2021年10月4日,在河北省衡水志豪畜牧科技有限公司进行。试验开始前,所有羔羊均登记耳号并按照羊场正常免疫程序进行免疫、驱虫。在湖羊母子舍(半开放式圈舍,采光通风条件良好)进行试验。试验前对母子舍进行清理消毒,并检查修整料槽、饮水设施。母子舍中在母羊栏相邻的圈舍设置羔羊补饲栏,仅羔羊可以自由进出补饲栏。羔羊料每日饲喂2次(06:30和16:30),自由采食和饮水,每次饲喂前将复合益生菌与羔羊料充分混匀。羔羊60日龄断奶,转移母羊,羔羊原圈饲养。

1.5 检测指标及方法

1.5.1 生长性能

记录每组羔羊每天投喂量和剩料量,记录羔羊第-14、0、7天体重,计算每个阶段干物质采食量(DMI)和平均日增重(ADG)。计算公式如下:
DMI=[(每组投喂量-每组剩料量)×干物质含量]/每组羔羊数;
ADG=(末重-初重)/试验天数。

1.5.2 血液指标分析

第-14、-7、0、3、7天晨饲前,羔羊颈静脉穿刺取血液样品,立即使用全自动血液分析仪检测血常规指标:白细胞(WBC)、淋巴细胞(LYM)、中间细胞(MID)、粒细胞(GRAN)、红细胞(RBC)数量和血红蛋白(HGB)含量。
血液样品常温静置6 h,3 000 r/min离心15 min,分离血清,测定丙二醛(MDA)、皮质醇(COR)、肾上腺素(EPI)、D-乳酸(D-LA)、二胺氧化酶(DAO)、内毒素(LPS)含量,使用全自动酶标仪(Labsystems Multiskan MS325,芬兰)检测,试剂盒购自江苏酶免实业有限公司,严格按照试剂盒的说明进行操作。

1.6 数据分析

试验数据用Excel 2019软件进行整理,采用SPSS 27.0软件进行统计分析,采用一般线性模型(GLM)进行多因素方差分析,并用Duncan氏法进行多重比较,数据以平均值±标准误表示,显著水平为P<0.05。

2 结果

2.1 复合益生菌对羔羊生长性能的影响

由表2可知,处理×时间、处理、时间显著影响羔羊DMI、ADG(P<0.05),时间显著影响羔羊体重(P<0.05)。各组羔羊断奶后(第1~7天)DMI显著高于断奶前(第-14~0天)(P<0.05),羔羊第7天体重显著高于第-14天(P<0.05);Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组羔羊第-14~0天ADG显著高于第1~7天(P<0.05)。
表2 复合益生菌对羔羊生长性能的影响

Table 2 Effects of compound probiotics on growth performance of lambs

项目
Items		 组别Groups P值P-value
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ 处理
Treatment		 时间
Time		 处理×时间
Treatment×
time
干物质采食量
DMI/(g/d)		 第-14~0天
Days -14 to 0		 82.27
±4.33by		 94.49
±3.13ay		 101.5
±2.05ay		 98.55
±5.06ay		 <0.01 <0.01 <0.01
第1~7天
Days 1 to 7		 205.89
±18.43bx		 263.89
±9.82ax		 251.28
±26.53ax		 272.30
±15.26ax
体重
BW/kg		 第-14天
Day -14		 13.67
±0.48y		 13.25
±0.76y		 12.78
±0.67y		 13.39
±0.92y		 0.82 0.01 0.96
第0天
Day 0		 14.96
±0.0.47xy		 14.94
±0.76xy		 14.51
±0.64xy		 14.71
±0.78xy
第7天
Day 7		 15.55
±0.46x		 15.59
±0.65x		 16.30
±0.76x		 15.55
±0.77x
平均日增重
ADG/(g/d)		 第-14~0天
Days -14 to 0		 91.82
±3.84b		 120.48
±4.01ax		 122.78
±4.10ax		 113.59
±2.25ax		 <0.01 <0.01 <0.01
第1~7天
Days 1 to 7		 81.67
±5.71		 81.86
±4.86y		 86.39
±4.78y		 84.59
±2.76y

同行数据肩标不同字母a、b、c表示不同组别之间差异显著(P<0.05),相同或无字母表示差异不显著(P≥0.05);同列数据肩标不同字母x、y、z表示不同时间之间差异显著(P<0.05),相同或无字母表示差异不显著(P≥0.05)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts a, b and c mean significant difference among different groups (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P≥0.05); in the same column, values with different small letter superscripts x, y and z mean significant differences among different time (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P≥0.05). The same as below.

第-14~0天和第1~7天,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组羔羊DMI显著高于Ⅰ组(P<0.05),Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组之间差异不显著(P>0.05)。第-14、0、7天,各组之间羔羊体重差异不显著(P>0.05)。第-14~0天,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组羔羊ADG显著高于Ⅰ组(P<0.05),Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组之间差异不显著(P>0.05);第1~7天,各组之间羔羊ADG差异不显著(P>0.05),相较于Ⅰ组,Ⅲ、Ⅳ组羔羊ADG分别提高了5.78%、3.58%。

2.2 复合益生菌粉对羔羊血常规指标的影响

由表3可知,处理×时间显著影响血液白细胞、淋巴细胞、粒细胞数量(P<0.05),处理显著影响白细胞、粒细胞数量(P<0.05),时间显著影响白细胞、淋巴细胞数量(P<0.05)。各组第7天血液白细胞数量显著低于第-14天(P<0.05),第0、3天淋巴细胞数量显著高于第-14天(P<0.05)。第-7天,Ⅱ、Ⅲ组血液白细胞数量显著低于Ⅰ组(P<0.05);第3天,Ⅲ组血液白细胞和粒细胞数量显著低于Ⅰ组(P<0.05)。
表3 复合益生菌粉对羔羊血常规指标的影响

Table 3 Effects of compound probiotics on blood routine indexes of lambs

项目
Items		 组别Groups P值P-value
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ 处理
Treatment		 时间
Time		 处理×时间
Treatment×
time
白细胞
WBC/
(×109个/L)		 第-14天
Day -14		 36.01
±0.88x		 35.78
±1.35x		 35.50
±3.12x		 34.93
±3.34x		 <0.01 0.02 0.01
第-7天
Day -7		 34.12
±0.60ax		 29.90
±1.01by		 28.45
±1.02by		 30.60
±1.75axy
第0天
Day 0		 36.68
±1.31x		 33.27
±2.47x		 30.25
±2.11xy		 31.86
±2.16x
第3天
Day 3		 35.92
±1.04ax		 35.50
±3.12ax		 28.72
±1.94by		 31.62
±1.78ax
第7天
Day 7		 24.70
±1.42y		 25.90
±0.97z		 25.57
±1.29y		 25.53
±0.32y
红细胞
RBC/
(×1012个/L)		 第-14天
Day -14		 2.76
±0.77		 2.79
±0.56		 3.48
±0.6		 3.09
±0.12		 0.37 0.17 0.09
第-7天
Day -7		 4.13
±0.25		 4.76
±0.53		 3.48
±0.60		 3.92
±0.49
第0天
Day 0		 3.29
±0.18		 3.03
±0.16		 2.96
±0.36		 3.20
±0.19
第3天
Day 3		 3.29
±0.17		 3.30
±0.18		 3.20
±0.28		 2.88
±0.20
第7天
Day 7		 3.03
±0.10		 2.56
±0.21		 2.61
±0.15		 3.01
±0.25
淋巴细胞
LYM/
(×109个/L)		 第-14天
Day -14		 18.43
±1.16y		 20.62
±1.64y		 18.10
±1.40y		 17.33
±1.15y		 0.54 0.01 0.02
第-7天
Day -7		 23.53
±0.91x		 21.73
±0.66y		 20.77
±0.26xy		 22.95
±3.16xy
第0天
Day 0		 25.50
±1.62x		 24.25
±0.90x		 23.66
±2.34x		 24.28
±1.24x
第3天
Day 3		 24.85
±1.03x		 23.12
±0.61x		 22.90
±1.82x		 24.46
±1.00x
第7天
Day 7		 23.53
±0.91x		 21.73
±0.66y		 18.43
±1.16y		 21.30
±1.23xy
中间细胞
MID/
(×109个/L)		 第-14天
Day -14		 3.90
±0.47		 4.67
±0.98		 4.22
±0.46		 4.72
±0.76		 0.05 0.11 0.19
第-7天
Day -7		 3.92
±0.31		 2.98
±0.20		 3.00
±0.19		 3.67
±0.28
第0天
Day 0		 4.60
±0.24		 3.90
±0.47		 4.22
±0.32		 4.72
±0.59x
第3天
Day 3		 5.08
±0.30		 4.28
±0.14		 4.20
±0.36		 4.00
±0.09
第7天
Day 7		 3.93
±0.15		 3.13
±0.02		 3.77
±0.21		 3.37
±0.10
粒细胞
GRAN/
(×109个/L)		 -第14天
Day -14		 5.94
±1.42		 5.83
±0.39		 5.8
±1.21		 5.26
±0.29		 0.01 0.67 0.01
第-7天
Day -7		 4.92
±0.29		 4.67
±0.41		 4.15
±0.16		 4.06
±0.38
第0天
Day 0		 5.83
±0.39		 5.94
±0.26		 5.00
±0.40		 5.06
±0.38
第3天
Day 3		 5.32
±0.32a		 4.70
±0.33ab		 4.18
±0.39b		 4.60
±0.26ab
第7天
Day 7		 5.03
±0.22		 4.13
±0.12		 4.60
±0.28		 4.53
±0.46
血红蛋白
HGB/(g/L)		 第-14天
Day -14		 91.50
±2.05		 93.50
±15.14		 98.67
±9.33		 106.00
±7.36		 0.91 0.09 0.05
第-7天
Day -7		 114.83
±4.21		 110.17
±2.49		 101.67
±3.85		 109.83
±4.80
第0天
Day 0		 130.33
±4.20		 114.17
±4.26		 115.67
±6.23		 124.20
±6.29
第3天
Day 3		 116.60
±5.08		 107.00
±3.10		 107.80
±2.84		 108.80
±4.56
第7天
Day 7		 112.33
±3.79		 113.33
±2.05		 118.33
±1.84		 111.33
±7.79

2.3 复合益生菌对羔羊血清应激指标的影响

由表4可知,处理×时间显著影响血清COR、EPI含量(P<0.05),处理显著影响血清COR、EPI含量(P<0.05),时间显著影响血清EPI含量(P<0.05)。Ⅰ组第0、3天血清EPI含量显著高于第-14、-7、7天(P<0.05),Ⅳ组第0天血清EPI含量显著高于第-14、-7、3、7天(P<0.05)。第0、7天,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组血清COR含量显著低于Ⅰ组(P<0.05);第3天,Ⅲ、Ⅳ组血清COR含量显著低于Ⅰ组(P<0.05)。第0天,Ⅱ、Ⅲ组血清EPI含量显著低于Ⅰ组(P<0.05);第3、7天,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组血清EPI含量显著低于Ⅰ组(P<0.05)。
表4 复合益生菌粉对羔羊血清应激指标的影响

Table 4 Effects of compound probiotics on serum stress indexes of lambs

项目
Items		 组别Groups P值P-value
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ 处理
Treatment		 时间
Time		 处理×时间
Treatment×
time
丙二醛
MDA/
(nmol/mL)		 第-14天Day -14 0.83±0.01 0.84±0.01 0.83±0.01 0.82±0.02 0.79 0.71 0.47
第-7天Day -7 0.79±0.02 0.84±0.04 0.88±0.04 0.89±0.04
第0天Day 0 0.79±0.02 0.85±0.04 0.77±0.02 0.81±0.04
第3天Day 3 0.82±0.02 0.83±0.04 0.83±0.03 0.77±0.02
第7天Day 7 0.90±0.02 0.85±0.03 0.84±0.02 0.83±0.04
皮质醇
COR/(ng/mL)		 第-14天
Day -14		 432.26
±4.24		 433.01
±8.42		 431.97
±5.40		 431.16
±4.24		 <0.01 0.32 <0.01
第-7天
Day -7		 433.12
±9.72		 436.76
±8.00		 427.18
±8.96		 431.97
±8.75
第0天
Day 0		 486.96
±7.53a		 447.87
±6.21b		 445.76
±6.95b		 442.32
±4.62b
第3天
Day 3		 457.45
±6.00a		 439.06
±11.34ab		 431.01
±5.82b		 432.88
±8.52b
第7天
Day 7		 495.02
±3.76a		 460.35
±6.69b		 418.77
±8.78c		 405.65
±10.83c
肾上腺素
EPI/(ng/L)		 第-14天
Day -14		 179.12
±2.23y		 173.77
±1.89		 173.06
±2.10		 176.91
±2.77y		 <0.01 <0.01 <0.01
第-7天
Day -7		 176.20
±2.41y		 160.86
±2.20		 165.89
±1.26		 176.28
±4.47y
第0天
Day 0		 202.73
±3.26ax		 177.16
±3.49b		 175.16
±2.57b		 192.74
±3.29abx
第3天
Day 3		 202.49
±1.56ax		 167.45
±3.26c		 165.00
±0.45c		 174.46
±2.18by
第7天
Day 7		 183.23
±2.52ay		 160.87
±2.29c		 165.59
±1.53c		 178.15
±1.88by

2.4 复合益生菌对羔羊肠道损伤指标的影响

由表5可知,处理×时间显著影响血清LPS、D-LA、DAO含量(P<0.05),处理显著影响血清LPS含量(P<0.05),时间显著影响血清LPS、D-LA、DAO含量(P<0.05)。Ⅱ、Ⅲ组第7天血清LPS含量显著低于第-14天(P<0.05),Ⅱ、Ⅲ组第0、7天血清D-LA含量显著低于第3天(P<0.05),Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ组第3天血清DAO含量显著高于第-14天(P<0.05)。第0、3天,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组血清LPS含量显著低于Ⅰ组(P<0.05);第7天,Ⅱ、Ⅲ组血清LPS含量显著低于Ⅰ组(P<0.05)。
表5 复合益生菌粉对羔羊肠道损伤指标的影响

Table 5 Effects of compound probiotics on intestinal injury indexes of lambs

项目
Items		 组别Groups P值P-value
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ 处理
Treatment		 时间
Time		 处理×时间
Treatment×
time
内毒素
LPS/(ng/L)		 第-14天
Day -14		 431.36
±6.162z		 427.51
±8.62x		 424.68
±7.71x		 430.33
±10.80		 0.01 <0.01 <0.01
第-7天
Day -7		 427.83
±8.32z		 397.71
±5.97y		 425.27
±8.92x		 429.50
±5.33
第0天
Day 0		 451.52
±9.23ay		 422.79
±5.33bx		 397.24
±6.36cx		 423.14
±3.84b
第3天
Day 3		 487.58
±5.78ax		 434.07
±6.01cx		 416.03
±4.58cx		 456.32
±6.11b
第7天
Day 7		 462.63
±3.39ay		 376.12
±4.26by		 364.01
±3.38by		 455.80
±4.12a
D-乳酸
D-LA/(μg/L)		 第-14天
Day -14		 383.44
±3.22		 377.17
±4.29xy		 370.95
±7.27x		 372.93
±6.20		 0.36 <0.01 <0.01
第-7天
Day -7		 394.90
±5.28		 387.84
±2.42x		 369.85
±5.63xy		 395.53
±5.65
第0天
Day 0		 393.91
±4.46		 354.96
±4.50y		 359.49
±5.40y		 375.56
±3.72
第3天
Day 3		 420.96
±6.02		 402.24
±6.48x		 398.02
±5.40x		 384.97
±6.81
第7天
Day 7		 412.60
±2.70		 343.34
±4.28y		 347.25
±8.18y		 397.87
±7.74
二胺氧化酶
DAO/(pg/mL)		 第-14天
Day -14		 262.90
±3.99y		 253.12
±4.78		 248.79
±4.13y		 254.78
±3.98y		 0.13 0.04 <0.01
第-7天
Day -7		 252.67
±6.71y		 244.27
±2.12		 252.32
±6.15xy		 254.28
±4.74y
第0天
Day 0		 265.56
±3.16y		 249.68
±4.08		 264.12
±3.49x		 266.35
±5.80y
第3天
Day 3		 298.68
±3.46x		 261.76
±3.82		 272.58
±4.45x		 283.39
±5.63x
第7天
Day 7		 293.86
±1.50x		 266.82
±3.67		 222.54
±2.68z		 249.02
±1.73y

3 讨论

3.1 复合益生菌对羔羊生长性能的影响

陈治徽等[9]研究发现,断奶应激导致犊牛营养和能量的摄入减少,且机体脂肪动员和蛋白质分解加速。10、30、49日龄断奶羔羊与未断奶羔羊相比,断奶后1周采食量显著升高,但体重和ADG显著下降[10-11]。本试验中,羔羊断奶后DMI升高,ADG下降,说明断奶应激影响了羔羊对营养物质的消化利用。研究表明,断奶后持续补充复合益生菌可提高营养物质摄入量,且血清促生长因子含量明显增加[12]。本试验中,断奶前后(第-14~7天),0.5%、1.0%、1.5%复合益生菌组羔羊DMI、ADG显著高于对照组,第7天1.0%复合益生菌组羔羊体重相较于对照组提高了4.82%。这说明复合益生菌能够提高羔羊断奶前后的生长性能。益生菌可有效降解饲料中难消化的大分子物质及抗营养因子,使营养物质更易于消化吸收[13]。幼畜补充益生菌可以显著提高纤维、脂肪、蛋白质的消化利用率[14]。因此,断奶前后使用复合益生菌提高羔羊生长性能可能与营养物质的消化利用提高有关。

3.2 复合益生菌对羔羊血常规指标的影响

断奶应激会使外周血常规指标改变[15]。白细胞是免疫系统的重要成员,淋巴细胞、粒细胞参与机体主要的免疫反应[16⇓-18]。O’loughlin等[19]研究发现,犊牛断奶后第1~2天血液白细胞数量、断奶后第1天血液中性粒细胞数量及断奶后第2天血液嗜酸性粒细胞数量显著高于断奶前。
Kim等[15]研究发现,羔羊断奶后第1~3天血液淋巴细胞、中性粒细胞数量显著高于断奶前第4天和断奶后第7、14天。本试验发现,各组第0、3天血液白细胞、淋巴细胞数量较第-7天有不同程度地升高,第7天下降。这说明断奶应激影响了血液白细胞、淋巴细胞数量,且在断奶后3 d内最明显。有研究表明,羔羊对饲料消化能力弱,造成断奶后摄入营养减少,营养供应不足阻碍免疫系统发育是断奶应激机体动员更多免疫细胞的原因之一[18]。研究表明,益生菌可提高血液免疫球蛋白含量,维持体液免疫水平,抵御病原体入侵[20]。本试验发现,与对照组相比,羔羊断奶前0.5%、1.0%复合益生菌组血液白细胞数量显著降低;断奶后第3天1.0%复合益生菌组血液白细胞、粒细胞数量显著降低,且1.0%复合益生菌组第-7、0、3天血液白细胞、淋巴细胞、粒细胞数量差异不显著。这说明羔羊料中添加0.5%、1.0%复合益生菌有助于缓解羔羊断奶应激对外周血液水平的刺激。研究表明,补充外源益生菌可提高幼畜肠道优势菌群丰度,抑制病原菌增殖[5]。因此,羔羊料中补充复合益生菌除了提高免疫水平外,还可能有助于维护肠道内环境。

3.3 复合益生菌对羔羊血清应激指标的影响

羔羊断奶可使血清EPI、COR、MDA等含量升高[17,21]。在EPI的作用下,动物心跳、呼吸加快,肌肉紧张度升高,活动增强,血清COR含量升高;COR动员机体储藏的糖原、蛋白质、脂肪提供能量,同时抑制蛋白质合成,抑制免疫,使动物体受炎症损伤的威胁[17,22]。MDA是动物细胞损伤的标志物之一。常用血清EPI、COR、MDA等含量衡量动物应激反应的程度。研究表明,10和30日龄断奶的羔羊在断奶后血清COR含量显著高于断奶前[11]。断奶应激会显著提高羔羊血清COR、EPI含量[17,22]。本试验中,对照组第0、3天血清EPI含量高于第-14、-7、7天,说明断奶使羔羊产生应激反应。研究发现,微生态制剂有助于幼龄反刍动物提前断奶[23]。本研究中,羔羊断奶后第0、3、7天,0.5%、1.0%、1.5%复合益生菌组血清COR、EPI含量低于对照组,说明补充复合益生菌可以缓解羔羊断奶应激。综合羔羊断奶应激期内DMI、ADG及血常规指标,羔羊料中添加1.0%复合益生菌为宜,与生长性能及健康状况结果相一致。

3.4 复合益生菌对羔羊肠道损伤指标影响

李冲[8]研究发现,羔羊断奶后第5天肠上皮细胞出现大量损伤导致细胞坏死。LPS是大多数致病菌细胞壁的成分,大量LPS损伤肠壁黏膜细胞;D-LA完全由肠道微生物产生,且哺乳动物机体不具备代谢D-LA的酶;DAO是肠上皮绒毛细胞中的细胞酶,幼畜断奶应激肠道细胞受损导致DAO进入血液[24⇓-26]。研究表明,羔羊经历断奶应激肠道屏障结构被破坏,肠壁致病菌数量显著升高,LPS、D-LA透过肠道屏障进入血液循环,血清中LPS、D-LA含量升高[27]。血清DAO活性常被作为幼畜断奶后肠道完整性的标志物[28]。羔羊21日龄断奶后1周内腹泻率及LPS、D-LA含量升高,且腹泻率与LPS、D-LA含量呈对应关系[29]。以上研究说明,断奶应激使幼畜肠壁菌群失衡,肠壁受损,血清LPS、D-LA、DAO含量升高。本试验中,对照组断奶后第3、7天血清LPS、D-LA、DAO含量升高,与史晨迪等[27]研究结果一致,说明羔羊断奶应激会导致肠道损伤。研究表明,益生菌在缓解幼畜断奶应激炎症性肠病效果显著,断奶前后补充丁酸梭菌可通过增强幼畜肠道免疫功能、改善肠道微生物菌群来缓解断奶应激[30]。本研究中,羔羊断奶后第0、3天0.5%、1.0%、1.5%复合益生菌组血清LPS含量低于对照组。这说明复合益生菌可降低断奶应激期致病菌对肠壁细胞的损伤,维护肠道屏障。李稳稳[31]对肠道菌群测序发现,高剂量益生菌对羔羊肠道微生物种类影响不显著,肠道优势菌群是肠道屏障结构的重要组成部分。因此复合益生菌对断奶应激期肠道屏障的保护作用与添加剂量有关,具体调节方式和肠道菌群结构变化需进一步探究。

4 结论

羔羊料中添加复合益生菌(乳酸杆菌RSG-1∶枯草芽孢杆菌B-1∶地衣芽孢杆菌Y5-39=1∶1∶4)能够提高断奶期内羔羊的生长性能,缓解断奶应激造成的外周血细胞和激素水平的改变。本试验条件下,羔羊料中复合益生菌的适宜添加水平为1.0%。

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