动物营养学报 >

2023 , Vol. 35 >Issue 10: 6374 - 6386

DOI: https://doi.org/10.12418/CJAN2023.585

研究论文

沙棘果渣提取物对氧化应激黄羽肉鸡生长性能、抗氧化能力及免疫功能的影响

  • 冯志鹏 ,
  • 李露宇 ,
  • 刘孟健 ,
  • 张萧 ,
  • 李璇玥 ,
  • 卢妍 ,
  • 陈勇 , **
展开
  • 新疆农业大学动物科学学院,乌鲁木齐 830052
**陈勇,教授,博士生导师,E-mail:

*同等贡献作者

冯志鹏(1996—),男,新疆伊犁人,硕士研究生,研究方向为动物营养与饲料科学。E-mail:

Office editor: 陈鑫

收稿日期: 2023-05-04

  网络出版日期: 2023-10-12

基金资助

中央引导地方科技发展专项资金项目(ZYYD2023B09)

收起

Effects of Sea Buckthorn Pomace Extract on Growth Performance, Antioxidant Capacity and Immune Function of Yellow-Feathered Broilers under Oxidative Stress

  • FENG Zhipeng ,
  • LI Luyu ,
  • LIU Mengjian ,
  • ZHANG Xiao ,
  • LI Xuanyue ,
  • LU Yan ,
  • CHEN Yong , **
Expand
  • College of Animal Science, Xinjiang Agricultural University, Urumqi 830052, China
**professor, E-mail:

*Contributed equally

Received date: 2023-05-04

  Online published: 2023-10-12

Fold

摘要

本试验旨在研究沙棘果渣提取物(SBPE)对氧化应激黄羽肉鸡生长性能、抗氧化能力及免疫功能的影响。试验选取400只1日龄健康的黄羽肉鸡,将其随机分为2个对照组和3个试验组,分别为空白对照组(BC组)、氧化对照组(OX组)和3个试验组,每组10个重复,每个重复8只。BC组饲喂基础饲粮,OX组将基础饲粮中的普通大豆油更换为氧化大豆油,试验组分别在OX组饲粮基础上添加0.1%、0.2%和0.4%的SBPE。试验期63 d。结果表明:1)与BC组相比,OX组42日龄体重(BW)、1~21日龄平均日采食量(ADFI)、22~42日龄平均日增重(ADG)显著降低(P<0.05)。与BC组相比,添加SBPE后,BW、ADFI和ADG均无显著差异(P>0.05)。各组间料重比(F/G)无显著差异(P>0.05)。2)与BC组相比,OX组16~21日龄粗蛋白质(CP)表观代谢率显著降低(P<0.05)。与OX组相比,添加0.2%的SBPE可显著提高有机物(OM)表观代谢率(P<0.05)。SBPE组营养物质的表观代谢率与BC组无显著差异(P>0.05)。3)BC组和OX组脾脏、法氏囊、胸腺指数均无显著差异(P>0.05)。添加0.4%的SBPE可使21日龄脾脏指数显著降低(P<0.05)。4)与BC组相比,OX组血浆中免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)含量均极显著升高(P<0.01)。与OX组相比,添加0.1%的SBPE使血浆IgA、IgG、IgM含量显著下降(P<0.05)。添加0.2%和0.4%的SBPE使血浆IFN-γ和IL-2含量显著下降(P<0.05)。5)与BC组相比,OX组血浆中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性和总抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)含量极显著升高(P<0.01)。与OX组相比,添加0.1%的SBPE可极显著降低血浆SOD、GSH-Px、CAT活性和T-AOC(P<0.01),SBPE增加到0.4%后,血浆MDA含量极显著降低(P<0.01)。由此可见,氧化大豆油可以降低黄羽肉鸡的生长性能和饲粮营养物质表观代谢率,并诱导抗体和抗氧化水平升高,添加0.1%的SBPE可有效缓解肉鸡因氧化大豆油诱发的抗体水平和抗氧化酶活性的升高,添加0.2%和0.4%的SBPE则可以提高肉鸡的生长性能、免疫功能和抗氧化能力。

关键词： 植物提取物; 氧化大豆油; 采食量; 脾脏; 免疫球蛋白; 炎症因子; 抗氧化酶

本文引用格式

冯志鹏 , 李露宇 , 刘孟健 , 张萧 , 李璇玥 , 卢妍 , 陈勇 . 沙棘果渣提取物对氧化应激黄羽肉鸡生长性能、抗氧化能力及免疫功能的影响[J]. 动物营养学报, 2023 , 35(10) : 6374 -6386 . DOI: 10.12418/CJAN2023.585

Abstract

The aim of this experiment was to investigate the effects of sea buckthorn pomaceextract (SBPE) on the growth performance, antioxidant capacity and immune function of yellow-feathered broilers under oxidative stress. Four hundred 1-day-old healthy yellow-feathered broilers were selected and randomly divided into a blank control group (BC group), an oxidation control group (OX group), and 3 experimental groups. Each group consisted of 10 replicates, with 8 broilers per replicate. The BC group was fed a basal diet, while the OX group fed the basal diet which ordinary soybean oil replaced with oxidized soybean oil. The 3 experimental groups were supplemented with 0.1%, 0.2% and 0.4% of SBPE to the OX diet, respectively. The experiment lasted for 63 days. The results showed as follows: 1) compared with the BC group, the body weight (BW) at 42 days of age, average daily feed intake (ADFI) at 1 to 21 days of age, and average daily gain (ADG) at 22 to 42 days of age in OX group significantly decreased (P<0.05). Compared with the BC group, after adding SBPE, the BW, ADFI, and ADG were no significant difference (P>0.05). There was no significant difference in the feed to gain ratio (F/G) within groups (P>0.05). 2) Compared with the BC group, the apparent metabolism of crude protein (CP) at 16 to 21 days of age in the OX group significantly reduced (P<0.05). Compared with the OX group, the addition of SBPE increased the apparent metabolism of organic matter (OM) (P<0.05). There was no significant difference in the apparent digestibility of nutrients between the SBPE group and in the BC group (P>0.05). 3) There was no significant difference in spleen, bursa of Fabricius and thymus indexes between BC group and OX group (P>0.05). The addition of 0.4% SBPE significantly reduced the spleen index at 21 days of age (P<0.05). 4) Compared with the BC group, the contents of immune globulin G (IgG), immune globulin A (IgA), immune globulin M (IgM), and interferon-γ (IFN-γ) and interleukin-2 (IL-2) in plasma in the OX group significantly increased (P<0.01). Adding 0.1% SBPE resulted in a significant decrease in plasma IgA, IgG, and IgM contents (P<0.05), while adding 0.2% SBPE resulted in plasma IFN-γ and IL-2 contents significant decrease (P<0.05). As the level of SBPE addition increasing, the contents of IFN-γ and IL-2 in plasma gradually decreased (P<0.05). 5) Compared with BC group, the activities of superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GSH-Px), catalase (CAT), total antioxidant capacity (T-AOC), and malondialdehyde (MDA) content in plasma in OX group significantly increased (P<0.01). After adding 0.1% SBPE, the activities of SOD, GSH-Px, CAT and T-AOC in plasma significantly reduced (P<0.01). After SBPE increased to 0.4%, the content of MDA in plasma decreased significantly (P<0.01). In summary, oxidized soybean oil can reduce growth performance and apparent metabolic rate of dietary nutrients, and induce antibody and antioxidant levels elevated. The addition of 0.1% SBPE can effectively alleviate the increase in antibody levels and antioxidant enzyme activities induced by oxidized soybean oil in broilers, while adding 0.2% and 0.4% SBPE can significantly improve the growth performance, immune function and antioxidant capacity.

Key words： plant extracts; oxidized soybean oil; feed intake; spleen; immunoglobulin; inflammatory factors; antioxidant enzymes

沙棘(sea buckthorn)属于胡颓子科,是一种多年生落叶灌木。早在8世纪,沙棘就被蒙药和藏药所记录,其含有丰富的黄酮、多酚、多糖等抗氧化物质,具有祛痰、健脾、养胃、止血等功效,在医药领域被广泛应用,作为抗衰老的保健品[1]。近年来,沙棘籽油和沙棘果渣等副产品被应用于动物生产中作为抗氧化饲料添加剂[2]。研究表明,沙棘黄酮对家畜具有抗菌和抗氧化等作用,能够显著提高生长发育、饲料转化率和免疫功能,同时降低血脂和血糖含量,减轻肝脏氧化损伤,预防血脂代谢紊乱。沙棘的副产品能够提高机体对超氧阴离子的清除能力和抗氧化能力,降低丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量[3]。研究表明,添加沙棘提取物不会影响肉鸡的生长性能[4],但能显著提高肝脏中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione-peroxidase,GSH-Px)活性和总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC),降低MDA含量。当前,针对沙棘在动物生产中的研究,主要聚焦于沙棘黄酮的应用方面,而从沙棘副产品中提取的混合物在动物生产中的应用研究较为缺乏。本实验室前期研究显示,沙棘果渣提取物(SBPE)含有丰富的总酚,并具有较强的自由基清除能力。在氧化应激条件下,添加SBPE对黄羽肉鸡生长性能、免疫功能和抗氧化能力有何作用尚未见报道。因此,本研究在饲喂氧化大豆油的基础上添加不同剂量的SBPE,以研究其对黄羽肉鸡生长性能、免疫功能和抗氧化能力的影响,为沙棘副产品在肉鸡生产中的应用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 SBPE的制备

自然风干的沙棘果渣(沙棘果榨汁后的副产物)经100目筛粉碎,按1∶20的料液比加入去离子水,置入水浴摇床中,75 ℃,180 r/min提取2.5 h,重复提取2次后使用8层纱布过滤除去大颗粒残渣,2次所得滤液混匀,置入5~10 μm滤布正压过滤器中过滤1次,得到的提取液转移到旋转蒸仪中65 ℃浓缩至糖浆状,再转移至烘箱中65 ℃烘干,制成粉末状,-20 ℃冰箱备用。SBPE中总黄酮、总酚、总还原性糖含量和自由基清除力分别采用硝酸铝显色法、Folin-Ciocalteu比色法、硫酸-苯酚法和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼清除试验进行测定[5]。经测定,本方法制备的SBPE总酚含量为94.54 mg/g,总还原性糖含量为585.32 mg/g,总黄酮含量为26.75 mg/g,自由基清除力为95.69%。

1.2 氧化大豆油的制备

新鲜大豆油置于广口瓶中,并通过通入空气的方式,暴露于90 ℃水浴中持续加热24 h。在此期间,每隔2 h,进行过氧化值(peroxide value,POV)和MDA含量的测定。当POV>120 meq/kg时,制备完成。将氧化大豆油密封,室温、避光保存。氧化大豆油POV参照LS/T 6106—2012 《动植物油脂过氧化值测定自动滴定分析仪法》[6]测定,MDA含量参照GB 5009.181—2016[7]中方法测定。经测定,氧化大豆油的POV为125.78 meq/kg,MDA含量为3.77 mg/kg;新鲜大豆油POV<12 meq/kg,MDA含量为0.23 mg/kg。

1.3 试验设计

选取400只1日龄健康的黄羽肉鸡(快速型),将其随机分为2个对照组和3个试验组,分别为空白对照组(BC组)、氧化对照组(OX组)和3个试验组,每组10个重复,每个重复8只,公母各占1/2。BC组饲喂基础饲粮,OX组将基础饲粮中的普通大豆油全部更换为氧化大豆油,试验组饲喂OX组的饲粮,并在此基础上分别添加0.1%、0.2%和0.4%的SBPE。基础饲粮参考《中国饲料成分及营养价值表(2019年第30版)》[8]和《鸡饲养标准》(NY/T 33—2004)[9]进行配制,其组成及营养水平见表1。试验期63 d。
表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)

Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets (DM basis)%

项目
Items		 含量 Content
0~3周龄
0 to 3 weeks of age		 4~6周龄
4 to 6 weeks of age		 7~9周龄
7 to 9 weeks of age
原料 Ingredients
玉米 Corn 53.88 59.81 69.40
麸皮 Wheat middlings 2.20 2.47 1.83
豆粕 Soybean meal 22.53 22.28 15.66
全脂大豆 Full fat soybean 6.00 3.80 2.97
大豆油 Soybean oil 2.00 2.50 3.00
棉籽粕 Cottonseed meal 9.00 5.10 3.37
磷酸氢钙 CaHPO4 2.19 2.00 1.70
石粉 Limestone 1.23 1.10 1.05
食盐 NaCl 0.35 0.35 0.35
预混料 Premix1) 0.50 0.50 0.50
DL-蛋氨酸 DL-Met 0.12 0.09 0.07
L-赖氨酸 L-Lys 0.10
合计 Total 100.00 100.00 100.00
营养水平 Nutrient levels2)
代谢能 ME/(MJ/kg) 12.12 12.54 12.96
粗蛋白质 CP 20.45 18.46 16.03
钙 Ca 1.29 1.40 1.22
总磷 TP 0.81 0.82 0.72
DL-蛋氨酸 DL-Met 0.46 0.38 0.34
蛋氨酸+半胱氨酸 Met+Cys 0.85 0.72 0.65
L-赖氨酸 L-Lys 1.05 0.98 0.85

1)预混料为每千克饲粮提供 The premix provided the following per kg of diets:VD3 1 250 IU,VA 7 500 IU,VK3 0.6 mg,DL-α-生育酚乙酸酯 DL-alpha-tocopherol acetate 30 mg,盐酸硫胺 thiamine hydrochloride 3 mg,核黄素 riboflavin 6 mg,叶酸 folic acid 0.75 mg,烟酸 niacin 35 mg,Zn 75 mg,Mn 100 mg,Fe 400 mg,Cu 2.25 mg。

2)粗蛋白质、钙和总磷为实测值,其余为计算值。CP, Ca and TP were measured values, while the others were calculated values.

1.4 饲养管理

试验前对地面和墙面进行清洗,采用甲醛-高锰酸钾熏蒸法进行3 d的消毒。消毒后通风5 d,并使用4%碘溶液对鸡笼擦拭,使用5%新洁尔灭对食盘和水线浸泡消毒,确保鸡笼卫生状况。试验采用3层笼养,雏鸡入笼后,圈舍内保持38 ℃温度和40%~60%相对湿度,24 h人工照明。3日龄后,每隔24 h温度下调1 ℃,光照每日减少1 h。试验期间,雏鸡自由采食和饮水。按照严格的免疫程序对肉鸡进行疫苗接种。饲养流程按照《黄羽肉鸡饲养管理技术规程》[10]进行。

1.5 样品采集与指标测定

1.5.1 生长性能测定

1日龄的雏鸡入笼前称取空腹体重,每日记录采食量,于21、42、63日龄时全群禁食给水12 h称量空腹重,并计算平均日采食量、平均日增重及料重比。

1.5.2 营养物质表观代谢率测定

分别在16、37、58日龄连续收集5 d各重复的全部粪便。收集粪便时,清理羽毛、皮屑和饲粮残渣。将样本均匀喷洒10 mL 10%盐酸固氮,并置于干净通风的室内自然阴干,粉碎并过100目筛,室温密封保存以测定粪便中干物质(dry matter,DM)、有机物(organic matter,OM)、粗蛋白质(crude protein,CP)、钙(calcium,Ca)、磷(phosphorus,P)、粗脂肪(ether extract,EE)的含量。每阶段采集饲粮样本200 g进行常规营养物质含量的测定,并计算营养物质表观代谢率[11],计算公式如下:
营养物质表观代谢率(%)=100×[饲粮采食量(g)×饲粮中营养物质含量(%)-粪排泄量(g)×粪中营养物质含量(%)]/[饲粮采食量(g)×饲粮中营养物质含量(%)]。

1.5.3 血浆采集及相关指标测定

分别在21、42、63日龄时,从每个重复中挑选体重相当的肉仔鸡公、母各1只,采用翅下静脉采血法采集5 mL血液,肝素钠抗凝制备血浆,用于测定T-AOC、SOD、过氧化氢酶(catalase,CAT)和GSH-Px的活性及MDA含量,以及血清中的免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)、免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)和免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA)及干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)和白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)的含量。所有指标均使用北京华英生物技术研究所试剂盒进行测定,并用Infinite M200全波长酶标仪进行测定。

1.5.4 免疫器官指数测定

肉鸡生长至21、42、63日龄时,每个重复屠宰公、母各1只鸡,称取胸腺、脾脏和法氏囊的重量并计算各免疫器官指数,计算公式如下:
免疫器官指数(%)=[免疫器官重量(g)/活重(g)]×100。

1.6 数据整理与分析

数据使用SPSS 20.0统计软件中的单因素方差分析(one-way ANOVA)进行统计分析,并采用Duncan氏法进行多重比较,检验组间差异显著性,结果以平均值±标准差表示,显著水平为P<0.05,极显著水平为P<0.01。

2 结果与分析

2.1 SBPE对氧化应激黄羽肉鸡生长性能的影响

由表2可知,与BC组相比,OX组1~21日龄的ADFI和ADG、42日龄的BW、22~42日龄的ADG显著降低(P<0.05)。与OX组相比,添加0.1%的SBPE可显著提高1~21日龄肉鸡的ADFI(P<0.05),添加0.2%和0.4%的SBPE可显著提高21日龄的BW以及1~21日龄肉鸡的ADFI和ADG(P<0.05),添加0.4%的SBPE可显著提高22~42日龄肉鸡的ADFI(P<0.05)。氧化大豆油及添加SBPE对各阶段F/G、63日龄的BW、43~63日龄ADFI和ADG均无显著影响(P>0.05)。SBPE各组与BC组各指标均无显著差异(P>0.05)。
表2 SBPE对氧化应激黄羽肉鸡生长性能的影响

Table 2 Effects of SBPE on growth performance of yellow-feathered broilers under oxidative stress

项目
Items		 时间
Time		 BC组
BC group		 OX组
OX group		 SBPE添加量 SBPE addition level/%
0.1 0.2 0.4
体重
BW/g		 1日龄
1 day of age		 39.32±0.69 39.50±0.40 39.45±0.80 39.22±0.51 39.48±0.36
21日龄
21 days of age		 410.79±23.87ab 396.86±28.17b 411.68±15.42ab 422.22±30.29a 423.76±14.49a
42日龄
42 days of age		 1 228.38±52.92a 1 167.74±62.52b 1 211.16±22.44ab 1 198.47±76.67ab 1 195.09±69.31ab
63日龄
63 days of age		 1 925.54±132.04 1 905.27±168.40 1 969.28±130.91 1 973.81±168.37 1 991.10±142.64
平均日
采食量
ADFI/g		 1~21日龄
1 to 21 days of age		 28.93±0.91a 27.65±1.24b 29.15±1.28a 29.82±1.13a 29.59±1.39a
22~42日龄
22 to 42 days of age		 78.74±4.07ab 75.82±5.52b 79.46±3.06ab 78.13±4.55ab 80.85±6.82a
43~63日龄
43 to 63 days of age		 102.62±7.54 100.64±11.59 104.36±10.44 101.13±12.44 104.03±13.99
平均日增重
ADG/g		 1~21日龄
1 to 21 days of age		 18.19±1.52a 16.54±1.25b 17.50±1.03ab 18.23±1.44a 18.13±1.00a
22~42日龄
22 to 42 days of age		 38.76±2.20a 34.84±5.62b 38.21±3.73ab 37.47±3.65ab 38.07±2.71ab
43~63日龄
43 to 63 days of age		 34.53±3.52 35.39±12.23 35.63±4.69 36.42±6.58 38.82±11.19
料重比
F/G		 1~21日龄
1 to 21 days of age		 1.60±0.12 1.68±0.11 1.65±0.10 1.63±0.19 1.62±0.14
22~42日龄
22 to 42 days of age		 2.03±0.10 2.17±0.29 2.13±0.08 2.09±0.13 2.12±0.08
43~63日龄
43 to 63 days of age		 2.99±0.29 3.17±1.66 2.94±0.17 2.91±0.39 2.72±0.81

同行数据肩标相同字母或无字母表示差异不显著(P>0.05),不同小写字母表示差异显著(P<0.05),不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)。下表同。

In the same row, values with the same letter or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean extremely significant difference (P<0.01). The same as below.

2.2 SBPE对氧化应激黄羽肉鸡营养物质表观代谢率的影响

由表3可知,与BC组相比,OX组16~21日龄CP表观代谢率显著降低(P<0.05)。与OX组相比,添加0.2%的SBPE可显著提高OM表观代谢率(P<0.05)。氧化大豆油及添加SBPE对16~21日龄DM、EE、Ca、P以及37~42日龄、58~63日龄营养物质表观代谢率均无显著影响(P>0.05)。0.1%、0.2%和0.4% SBPE添加组营养物质的表观代谢率与BC组无显著差异(P>0.05)。
表3 SBPE对氧化应激黄羽肉鸡营养物质表观代谢率的影响

Table 3 Effects of SBPE on nutrient apparent metabolic rates of yellow-feathered broilers under oxidative stress%

项目
Items		 BC组
BC group		 OX组
OX group		 SBPE添加量 SBPE addition level/%
0.1 0.2 0.4
16~21日龄 16 to 21 days of age
干物质 DM 71.20±2.81 69.74±2.89 70.25±0.92 71.29±1.89 71.99±2.41
有机物 OM 75.09±3.79ab 72.95±2.52b 73.34±0.93b 77.25±5.51a 76.13±3.30ab
粗蛋白质 CP 62.43±4.96a 57.40±7.67b 59.42±2.71ab 60.54±4.05ab 61.17±1.90ab
粗脂肪 EE 93.29±2.13 90.03±1.96 90.93±5.40 91.09±4.07 91.49±3.33
钙 Ca 53.24±5.89 55.50±5.96 49.90±4.90 50.07±7.11 53.04±3.77
磷 P 53.97±5.31 55.31±4.40 56.96±2.75 55.56±4.46 54.93±3.02
37~42日龄 37 to 42 days of age
干物质 DM 71.51±2.52 70.61±1.83 71.45±2.32 71.34±5.16 71.38±1.08
有机物 OM 74.79±2.22 75.16±3.62 74.61±2.13 74.31±4.66 74.38±1.00
粗蛋白质 CP 54.39±4.25 53.39±2.94 54.67±8.30 53.16±4.12 57.82±2.95
粗脂肪 EE 89.72±3.39 90.02±3.43 89.38±1.94 90.30±3.53 89.65±2.99
钙 Ca 59.27±5.37 52.73±6.66 52.84±9.90 51.26±5.07 53.95±5.33
磷 P 55.57±4.01 53.66±3.82 52.82±8.26 52.22±3.12 56.07±4.27
58~63日龄 58 to 63 days of age
干物质 DM 71.77±3.21 72.50±2.42 72.39±1.89 72.37±1.68 71.72±4.15
有机物 OM 74.97±2.93 75.51±2.07 75.42±1.72 75.81±1.50 74.75±3.79
粗蛋白质 CP 56.66±5.86 53.58±1.91 54.55±4.48 54.38±4.22 56.93±4.28
粗脂肪 EE 89.05±2.74 89.81±3.58 90.24±2.64 91.66±2.62 90.83±3.08
钙 Ca 47.79±6.52 46.05±8.62 51.38±5.19 47.34±4.86 50.06±6.68
磷 P 50.78±4.06 53.04±5.81 51.85±3.17 50.92±3.63 54.35±4.34

2.3 SBPE对氧化应激黄羽肉鸡免疫器官指数的影响

由表4可知,BC组和OX组在3个日龄的器官指数均无显著差异(P>0.05)。相较于OX组,添加0.4%的SBPE可降低21日龄肉鸡脾脏指数(P<0.05),其他指标无显著差异(P>0.05)。此外,0.2% SBPE组63日龄脾脏指数以及0.4% SBPE组21日龄脾脏指数显著低于BC组(P<0.05)。
表4 SBPE对氧化应激黄羽肉鸡免疫器官指数的影响

Table 4 Effects of SBPE on immune organ indices of yellow-feathered broilers under oxidative stress%

项目
Items		 BC组
BC group		 OX组
OX group		 SBPE添加量 SBPE addition level/%
0.1 0.2 0.4
21日龄 21 days of age
脾脏指数 Spleen index 0.18±0.07a 0.19±0.06a 0.15±0.05ab 0.15±0.04ab 0.14±0.04b
法氏囊指数 Bursa of Fabricius index 0.16±0.06 0.14±0.05 0.15±0.03 0.16±0.08 0.14±0.03
胸腺指数 Pancreatic index 0.48±0.15 0.39±0.12 0.46±0.06 0.46±0.11 0.46±0.16
42日龄 42 days of age
脾脏指数 Spleen index 0.15±0.04 0.14±0.06 0.14±0.04 0.14±0.06 0.13±0.03
法氏囊指数 Bursa of Fabricius index 0.11±0.03 0.10±0.03 0.10±0.04 0.10±0.04 0.10±0.06
胸腺指数 Pancreatic index 0.36±0.09 0.34±0.12 0.36±0.15 0.32±0.14 0.40±0.11
63日龄 63 days of age
脾脏指数 Spleen index 0.13±0.02b 0.16±0.06ab 0.15±0.05ab 0.17±0.06a 0.16±0.07ab
法氏囊指数 Bursa of Fabricius index 0.08±0.04 0.06±0.03 0.07±0.04 0.08±0.04 0.07±0.03
胸腺指数 Pancreatic index 0.26±0.14 0.25±0.17 0.28±0.14 0.33±0.15 0.28±0.12

2.4 SBPE对氧化应激黄羽肉鸡血浆免疫指标的影响

由表5可知,与BC组相比,OX组3个日龄血浆中IgG、IgA和IgM及IFN-γ、IL-2含量均极显著升高(P<0.01)。与OX组相比,添加0.1%的SBPE后,对21和42日龄血浆IFN-γ和IL-2含量无显著影响(P>0.05),63日龄血浆IgA含量极显著降低(P<0.01),其他免疫指标均极显著降低(P<0.01);添加0.2%的SBPE后,对21日龄血浆IgG、IgM含量以及63日龄血浆IgA、IgG含量均无显著影响(P>0.05),21日龄血浆IgA和IFN-γ含量显著降低(P<0.05),其他免疫指标均极显著降低(P<0.01);添加0.4%的SBPE后,21和63日龄血浆IgA、IgG、IgM含量无显著变化(P>0.05),其他免疫指标均极显著降低(P<0.01)。
表5 SBPE对氧化应激黄羽肉鸡血浆免疫指标的影响

Table 5 Effects of SBPE on plasma immune indexes of yellow-feathered broilers under oxidative stress

项目
Items		 BC组
BC group		 OX组
OX group		 SBPE添加量 SBPE addition level/%
0.1 0.2 0.4
21日龄 21 days of age
免疫球蛋白A IgA/(mg/mL) 1.37±0.44Cc 2.22±0.44Aa 1.73±0.42BCbc 1.80±0.48ABCbc 2.03±0.50ABab
免疫球蛋白G IgG/(mg/mL) 3.42±0.64Cc 4.68±0.52Aa 4.03±0.52Bb 3.88±1.07ABab 4.50±0.58ABab
免疫球蛋白M IgM/(mg/mL) 1.24±0.37Bc 1.87±0.54Aa 1.37±0.50Bbc 1.66±0.57ABab 1.72±0.33ABab
干扰素-γ IFN-γ/(pg/mL) 20.61±2.71Cd 37.73±2.73Aa 36.12±6.97Aab 33.07±4.92ABbc 30.58±2.20Bc
白细胞介素-2 IL-2/(pg/mL) 158.40±26.69Dd 260.13±20.56Aa 243.65±22.51ABab 232.32±25.15BCbc 214.33±21.28Cc
42日龄 42 days of age
免疫球蛋白A IgA/(mg/mL) 1.40±0.44Bb 2.15±0.35Aa 1.50±0.17Bb 1.55±0.38Bb 1.64±0.52Bb
免疫球蛋白G IgG/(mg/mL) 3.53±0.28Cc 4.78±0.49Aa 3.68±0.35BCbc 3.51±0.88BCbc 3.97±0.31Bb
免疫球蛋白M IgM/(mg/mL) 0.95±0.32Cc 1.58±0.32Aa 0.98±0.32BCbc 1.17±0.38BCbc 1.29±0.22Bb
干扰素-γ IFN-γ/(pg/mL) 27.84±2.43Dd 53.88±1.65Aa 49.74±3.35ABab 47.85±2.56BCbc 44.96±3.94Cc
白细胞介素-2 IL-2/(pg/mL) 132.60±18.01Cc 317.86±21.27Aa 299.27±12.30Aa 274.35±13.61Bb 260.35±23.24Bb
63日龄 63 days of age
免疫球蛋白A IgA/(mg/mL) 0.86±0.30Bc 1.40±0.21Aa 1.18±0.24Ab 1.26±0.17Aab 1.32±0.20Aab
免疫球蛋白G IgG/(mg/mL) 3.08±0.36Bb 3.60±0.39Aa 3.16±0.44Bb 3.35±0.30ABab 3.52±0.28Aa
免疫球蛋白M IgM/(mg/mL) 0.81±0.13Bc 1.07±0.20Aa 0.84±0.13Bbc 0.83±0.22Bbc 0.89±0.25ABab
干扰素-γ IFN-γ/(pg/mL) 55.15±3.10Ee 73.29±3.82Aa 68.78±3.13Bb 62.56±2.94Cc 59.25±2.28Dd
与BC组相比,添加0.1%的SBPE可极显著升高3个日龄血浆中IFN-γ和IL-2含量、21日龄血浆IgG含量以及63日龄血浆IgA含量(P<0.01),对其他指标无显著影响(P>0.05);添加0.2%的SBPE可极显著提高3个日龄血浆中IFN-γ和IL-2含量(P<0.01),极显著升高21日龄血浆IgG含量和63日龄血浆IgA含量(P<0.01),显著提高21日龄血浆IgM含量(P<0.05),对其他指标无显著影响(P>0.05);添加0.4%的SBPE对42日龄血浆IgA含量和63日龄血浆IL-2含量无显著影响(P>0.05),显著提高21日龄血浆IgM含量和63日龄血浆IgM、IL-2含量(P<0.05),其他指标均极显著提高(P<0.01)。由此可见,添加SBPE可有效缓解氧化大豆油引起的抗体水平和炎症因子的波动,但与正常大豆油相比仍有明显差异。

2.5 SBPE对氧化应激黄羽肉鸡血浆抗氧化指标的影响

由表6可知,与BC组相比,OX组3个日龄血浆的SOD、GSH-Px、CAT活性及T-AOC、MDA含量极显著升高(P<0.01)。与OX组相比,添加0.1%的SBPE可极显著降低3个日龄血浆SOD、GSH-Px、CAT活性、T-AOC(P<0.01),对MDA含量无显著影响(P>0.05);添加0.2%的SBPE可极显著降低3个日龄的血浆SOD、GSH-Px、CAT活性、T-AOC及MDA含量(P<0.01);添加0.4%的SBPE可极显著降低21和42日龄血浆中SOD、GSH-Px、CAT活性、T-AOC和MDA含量(P<0.01),极显著降低63日龄血浆中SOD活性、T-AOC及MDA含量(P<0.01),对GSH-Px和CAT活性无显著影响(P>0.05)。
表6 SBPE对氧化应激黄羽肉鸡血浆抗氧化指标的影响

Table 6 Effects of SBPE on plasma antioxidant indexes of yellow-feathered broilers under oxidative stress

项目
Items		 BC组
BC group		 OX组
OX group		 SBPE添加量 SBPE addition level/%
0.1 0.2 0.4
21日龄 21 days of age
超氧化物歧化酶 SOD/(U/mL) 67.83±3.72De 95.67±7.75Aa 73.72±8.00CDd 80.50±8.36BCc 86.81±7.84Bb
谷胱甘肽过氧化物酶
GSH-Px/(U/mL)		 367.34±51.42Cc 636.03±71.28Aa 383.11±38.45Cc 440.61±44.24Bb 475.36±53.93Bb
总抗氧化能力 T-AOC/(U/mL) 8.50±0.84Dd 12.39±0.93Aa 9.14±1.06CDcd 9.86±0.66BCbc 10.38±0.93Bb
过氧化氢酶 CAT/(U/mL) 38.10±5.70Dd 62.89±7.73Aa 41.99±3.83CDc 48.23±4.52BCb 51.88±7.18Bb
丙二醛 MDA/(nmol/mL) 2.73±0.74Dd 5.53±0.49Aa 4.97±0.51ABab 4.65±0.31Bb 3.91±0.37Cc
42日龄 42 days of age
超氧化物歧化酶 SOD/(U/mL) 58.26±3.18Dc 85.26±6.14Aa 61.39±5.12CDc 64.77±6.75BCb 69.34±3.48Bb
谷胱甘肽过氧化物酶
GSH-Px/(U/mL)		 313.41±52.39Cc 437.96±31.50Aa 334.69±40.89BCbc 346.23±28.79BCbc 358.12±49.49Bb
总抗氧化能力 T-AOC/(U/mL) 6.81±1.02Cc 10.25±1.03Aa 8.09±0.78Bb 8.88±1.20Bb 9.05±0.85Bb
过氧化氢酶 CAT/(U/mL) 29.70±3.14Dd 45.14±7.78Aa 32.86±4.12CDcd 35.52±5.13BCc 39.94±5.64Bb
丙二醛 MDA/(nmol/mL) 4.16±0.12Cc 6.04±0.41Aa 5.74±0.56Aa 5.30±0.16Bb 5.14±0.19Bb
63日龄 63 days of age
超氧化物歧化酶 SOD/(U/mL) 40.31±2.15Ee 58.93±3.68Aa 45.71±2.99Dd 51.96±3.20Cc 54.65±2.49Bb
谷胱甘肽过氧化物酶
GSH-Px/(U/mL)		 248.88±30.23Ce 325.80±38.58Aa 256.02±33.02Ccd 281.02±28.96BCbc 302.11±40.30ABab
总抗氧化能力 T-AOC/(U/mL) 4.97±0.77Dd 7.35±0.64Aa 5.22±0.24CDcd 5.69±0.39BCc 6.21±0.51Bb
过氧化氢酶 CAT/(U/mL) 19.12±4.22Dd 33.48±2.82Aa 21.48±5.62CDc 26.42±2.90BCb 31.25±3.23ABab
丙二醛 MDA/(nmol/mL) 5.75±0.42Cd 7.01±0.44Aa 6.65±0.19ABb 6.17±0.51BCc 6.00±0.13Cc
与BC组相比,添加0.1%的SBPE对21日龄血浆GSH-Px活性、T-AOC,42日龄血浆SOD、GSH-Px、CAT活性,63日龄血浆T-AOC均无显著影响(P>0.05),显著提高21日龄血浆SOD、CAT活性,63日龄血浆GSH-Px、CAT活性(P<0.05),极显著提高21日龄血浆MDA含量、42日龄血浆T-AOC及MDA含量、63日龄血浆SOD活性和MDA含量(P<0.01);添加0.2%的SBPE后21日龄血浆抗氧化指标均极显著提高(P<0.01),42日龄血浆GSH-Px活性无显著变化(P>0.05),其他抗氧化指标均极显著提高(P<0.01),63日龄血浆GSH-Px活性和MDA含量显著提高(P<0.05),其他抗氧化指标均极显著提高(P<0.01);添加0.4%的SBPE后,63日龄血浆MDA含量显著提高(P<0.05),其他抗氧化指标均极显著提高(P<0.01)。

3 讨论

3.1 SBPE对氧化应激黄羽肉鸡生长性能的影响

研究表明,当黄羽肉鸡饲喂POV>120 meq/kg的氧化大豆油后可造成氧化应激[12]。本试验的研究结果表明,饲粮中添加氧化大豆油显著降低了1~21日龄和22~42日龄肉鸡的采食量,与Anjum等[13]的研究结果一致。沙棘果渣中含有较多的有机酸[14],有机酸对肉鸡的采食具有促进作用[15]。研究表明,饲粮中添加沙棘果渣能够提高肉鸡的日增重[16],与本试验的结果相似。然而姚炳浓等[17]的研究发现,饲粮中添加0.05%~0.15%的沙棘黄酮对广西小麻鸭的生长性能无显著影响。这说明沙棘黄酮在促进动物生长上的作用有限。另外,本试验结果还表明,饲粮中添加SBPE和氧化大豆油均对42~63日龄肉鸡生长性能无显著影响。其原因可能是在肉鸡快速的生长过程中,其消化和免疫功能逐渐发育成熟,能够有效应对油脂酸败后的负面作用,并且提取物的积极作用也逐步稳定。因此,在生长性能上表现出较小的差异性。

3.2 SBPE对氧化应激黄羽肉鸡营养物质表观代谢率的影响

本研究结果显示,添加氧化大豆油会显著降低肉鸡的CP表观代谢率。这可能是因为氧化大豆油影响了肠道绒毛的发育,导致营养物质的可吸收面积减少,影响消化酶的降解作用,从而降低了CP等有机物的代谢率[18]。同时,含有大量自由基的氧化油脂还会引起肠道绒毛细胞的损伤,引起细胞炎症反应,诱发肠道细胞膜通透性增加[19],导致肉鸡腹泻、呕吐,降低DM表观代谢率,从而降低营养物质利用率。因此,添加氧化大豆油会对肉鸡的生产性能产生负面影响。
本研究结果显示,随着SBPE添加量的增加,肉鸡的OM表观代谢率逐渐上升,呈正相关关系。这表明SBPE能够缓解氧化大豆油对肉鸡营养物质表观代谢率的负面影响。与此前的研究结果[20]相似;添加沙棘果渣可以促进肉鸡的消化功能,提高营养物质的利用率。
需要注意的是,SBPE虽然能促进肉鸡的消化功能,但对Ca、P的吸收却没有影响。这可能是因为饲料中Ca、P主要以无机化合物的形式添加,而小肠细胞对Ca的吸收大多为顺浓度梯度,仅依靠载体进行跨膜运输,不需要ATP的直接参与。因此,Ca的转运并不受细胞状态的直接影响。另外,无机磷在肠道中的吸收率较高[21],高达70%。因此,Ca、P在小肠中的吸收率受肠道环境的影响较小。这表明SBPE对营养物质消化和吸收的影响有一定选择性。

3.3 SBPE对氧化应激黄羽肉鸡免疫器官指数的影响

在家禽生产中,肉鸡免疫器官的发育是衡量其健康状态的重要指标。评估肉鸡免疫功能通常采用免疫器官形态和大小的变化,例如胸腺、法氏囊、脾脏指数。脾脏作为家禽的外周免疫器官,在肉鸡对逆境环境的抵抗中起着重要作用[22]。研究表明,肠道炎症反应会引起小鼠脾脏指数的增加[23]。本试验的结果显示,SBPE的添加对不同年龄的黄羽肉鸡脾脏指数影响不同,在21日龄时,SBPE能够降低肉鸡脾脏指数,然而,随着日龄的增长,SBPE的摄入量逐渐增加,在63日龄时SBPE则能够刺激脾脏的发育,这一结果表明,SBPE对缓解肉鸡脾脏细胞的增殖作用,存在一定的既定范围,过量的摄入SBPE可能刺激脾脏细胞的增殖,因此表现为脾脏指数增加的现象。另一研究表明,通过注射氧化诱导剂可降低小鼠脾脏指数[24],与本试验结果有不同之处,原因可能是,本试验中的试验动物处于正常生长状态,诱导剂的摄入是通过消化道的吸收作用逐渐进入血液刺激脾脏细胞增殖产生应答,导致脾脏指数升高,属于慢性应激,与Sun等[25]研究结果相似。
本试验结果显示,法氏囊和胸腺指数各组之间无显著差异,这表明氧化大豆油并未影响中枢免疫器官的发育。综上所述,SBPE可以改善氧化大豆油对外周免疫器官的负面作用,提高外周循环系统的免疫功能,而氧化大豆油对中枢免疫系统无显著影响,与熊兆龙[26]的研究结果一致。

3.4 SBPE对氧化应激黄羽肉鸡免疫功能的影响

在免疫系统受抗原攻击时,外周循环系统中主要的抗体蛋白IgA、IgG和IgM最先分泌,它们能够结合抗原,形成一道屏障,减少细胞的损伤。免疫应答的最初阶段,血浆中IgA、IgG和IgM含量受循环系统中抗原浓度的影响,随着抗原浓度的增加而降低。当循环系统中抗体蛋白下降时,代表屏障功能减弱,导致细胞受抗原感染,进而引起自然杀伤细胞(NK)、巨噬细胞免疫功能增强,分泌大量的促炎因子。此时,血液中IFN-γ、IL-2含量增加,激活核因子-κB(NF-κB)基因结合通路,细胞产生炎症和应激反应。研究表明,口服适宜浓度的抗原可以诱导小鼠炎症反应,从而引起血浆中抗体水平的增加[27]。此外,Bai等[28]研究表明,通过肠道外源感染抗原,可以显著增加血浆中白细胞介素及促炎因子的含量。另外,Wang等[29]研究表明,在氧化应激状态下,血液中IgM含量有上升的趋势。
本试验的结果显示,使用氧化大豆油可以诱导肉鸡的免疫应激反应,其血浆中的IgA、IgG、IgM、IFN-γ和IL-2含量均极显著高于BC组。并且,随着SBPE添加量的增加,肉鸡血浆中的IgA、IgG、IgM含量逐渐上升,而IFN-γ和IL-2的含量则显著下降,这一结果表明,SBPE可以提高肉鸡的免疫功能,并缓解炎症反应。
然而,另一报道中提到,家畜在饲喂氧化油脂状态下,氧化对照组血清的IgM和IgG含量显著低于空白对照组和试验组[30],这与本试验的结果不一致。我们认为其原因可能是这篇报道中所使用的氧化油脂的氧化程度与本试验有所差异,该氧化油脂可能破坏了免疫系统的正常生理功能,进而引起免疫应激,免疫系统短时间内难以恢复正常水平。而在本试验中,OX组中抗体的水平极显著高于BC组,表明氧化诱导剂并未对免疫系统造成破坏性损伤,仅引起了肉鸡的炎症反应,属于慢性免疫应激。综上所述,本试验的结果表明,氧化大豆油能够诱导肉鸡的炎症反应,并提高血浆中抗体水平,而SBPE则能够缓解氧化大豆油引起的细胞炎症,降低血浆中促炎症因子的含量。

3.5 SBPE对氧化应激黄羽肉鸡抗氧化能力的影响

动物拥有完整的抗氧化体系,其中包括SOD、GSH-Px、CAT、T-AOC。这些抗氧化物质受自由基的影响[31],无论是急性还是慢性氧化应激,都会导致抗氧化酶活性和MDA含量显著增加。急性氧化应激引起的抗氧化酶活性上升速度和活性比慢性诱导条件下更快,最终维持在比空白对照低的水平。慢性诱导指的是一种持续的刺激反应,抗氧化系统会出现缓慢上升、缓慢下降、再上升的现象,并最终维持在比空白对照水平更高的范围内[32]。然而,无论是急性还是慢性诱导都会导致抗氧化系统的不同程度损伤。高浓度诱导剂会降低血液中抗氧化酶的活性,并且随着时间的推移会降至低于正常水平[33]。本试验结果表明,添加SBPE后,血浆SOD、GSH-Px、CAT活性及T-AOC先降低后升高,而MDA含量则显著下降。此外,OX组血浆抗氧化酶活性及MDA含量均极显著高于BC组,这表明氧化大豆油可以作为低浓度诱导剂诱导慢性氧化应激,而SBPE的添加能够缓解氧化大豆油引起的抗氧化酶活性升高,并且可以提高黄羽肉鸡的抗氧化能力,这一结果与以往的研究结果[34⇓⇓-37]有相似之处。因此,在本试验条件下,饲喂POV为125.78 meq/kg的氧化大豆油能够诱导黄羽肉鸡慢性氧化应激,且不造成免疫器官损伤;添加SBPE则能够缓解氧化大豆油引起的抗氧化酶活性升高,并且可以提高黄羽肉鸡的抗氧化能力。综上所述,我们认为动物抗氧化体系在应对氧化应激时具有一定的修复能力,而SBPE则可以作为一种潜在的氧化应激缓解剂应用于动物生产中。

4 结论

氧化大豆油可以降低黄羽肉鸡的生长性能和饲粮营养物质表观代谢率,并诱导抗体和抗氧化水平升高;添加0.1%的SBPE可有效缓解肉鸡因氧化大豆油诱发的抗体水平和抗氧化酶活性的升高;添加0.2%和0.4%的SBPE则可以提高肉鸡的生长性能、免疫功能和抗氧化能力。

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