动物营养学报 >

2024 , Vol. 36 >Issue 11: 6977 - 6988

DOI: https://doi.org/10.12418/CJAN2024.595

研究论文

饲粮添加栀子对黄羽肉鸡生长性能、血浆生化指标、免疫功能和抗氧化能力的影响

  • 范秋丽 , 1 ,
  • 张典铨 2 ,
  • 潘晨璐 3 ,
  • 林厦菁 1 ,
  • 苟钟勇 1 ,
  • 林志恒 2 ,
  • 叶金玲 1 ,
  • 丁发源 1 ,
  • 程忠刚 1 ,
  • 蒋守群 , 1, *
展开
  • 1 广东省农业科学院动物科学研究所,猪禽种业全国重点实验室,农业农村部华南动物营养与饲料重点实验室,广东省畜禽育种与营养研究重点实验室,广州 510640
  • 2 福鼎市林业局,福鼎 355200
  • 3 福鼎市农业农村局,福鼎 355200
* 蒋守群,研究员,硕士生导师,E-mail:

范秋丽(1987—),女,陕西渭南人,副研究员,硕士,从事黄鸡营养与饲料研究。E-mail:

Copy editor: 田艳明

收稿日期: 2024-05-15

  网络出版日期: 2024-11-09

基金资助

现代农业产业技术体系国家肉鸡产业技术体系项目(CARS-41-06)

国家重点研发计划项目(2021YFD1300404)

国家重点研发计划项目(2022YFD1300502)

广东省自然科学基金项目(2022A1515012069)

广东省基础与应用基础研究基金项目(2024A1515012121)

广州市科技计划项目(202206010168)

广东省农业科学院科技计划项目(202106TD)

收起

Effects of Dietary Gardeniae Fructus on Growth Performance, Plasma Biochemical Indices, Immune Function and Antioxidant Capacity of Yellow-Feathered Broilers

  • FAN Qiuli , 1 ,
  • ZHANG Dianquan 2 ,
  • PAN Chenlu 3 ,
  • LIN Xiajing 1 ,
  • GOU Zhongyong 1 ,
  • LIN Zhiheng 2 ,
  • YE Jinling 1 ,
  • DING Fayuan 1 ,
  • CHENG Zhonggang 1 ,
  • JIANG Shouqun , 1, *
Expand
  • 1 Guangdong Provincial Key Laboratory of Animal Breeding and Nutrition, Key Laboratory of Animal Nutrition and Feed Science in South China, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, State Key Laboratory of Livestock and Poultry Breeding, Institute of Animal Science, Guangdong Academy of Agricultural Sciences, Guangzhou 510640, China
  • 2 Forestry Bureau of Fuding City, Fuding 355200, China
  • 3 Fuding Agriculture and Rural Affairs Bureau, Fuding 355200, China
* professor, E-mail:

Received date: 2024-05-15

  Online published: 2024-11-09

Fold

摘要

本试验旨在研究饲粮添加不同水平栀子对1~51日龄黄羽肉鸡生长性能、器官指数、血浆生化指标、空肠黏膜细胞因子含量以及肝脏和肾脏抗氧化指标的影响,并确定栀子在黄羽肉鸡饲粮中的适宜添加水平。选取720只初始体重为(38.44±0.06) g且健康状况良好的1日龄麻黄肉鸡,根据体重一致原则随机分为5组,分别在基础饲粮中添加0(对照组)、0.4%、0.8%、1.2%和1.6%栀子,每组6个重复,每个重复24只鸡(公母各占1/2)。试验期51 d。结果表明: 1)黄羽肉鸡平均日采食量随饲粮栀子添加水平的提高呈线性和二次变化(P<0.05)。与对照组相比,0.4%和0.8%栀子组末重和平均日增重有所提高(P>0.05),0.4%、0.8%和1.6%栀子组料重比显著降低(P<0.05)。2)黄羽肉鸡肺脏指数随饲粮栀子添加水平的提高呈二次变化(P<0.05)。与对照组相比,各栀子组肺脏指数均显著提高(P<0.05)。3)随着饲粮栀子添加水平的提高,黄羽肉鸡血浆总蛋白含量呈线性和二次变化(P<0.05),血浆总胆红素和肌酐含量呈线性提高(P<0.05),血浆肌酸激酶活性呈线性和二次变化(P<0.05)。与对照组相比,0.4%栀子组血浆谷草转氨酶活性显著提高(P<0.05),0.4%、0.8%和1.6%栀子组血浆乳酸脱氢酶活性显著提高(P<0.05)。4)与对照组相比,1.6%栀子组黄羽肉鸡空肠黏膜分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量显著提高(P<0.05)。5)随着饲粮栀子添加水平的提高,黄羽肉鸡肝脏总抗氧化能力和肾脏总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性均呈线性和二次变化(P<0.05),肝脏T-SOD活性呈二次变化(P<0.05),肾脏丙二醛含量和谷胱甘肽过氧化物酶活性呈线性提高(P<0.05)。综上所述,饲粮添加栀子可提高黄羽肉鸡生长性能、空肠黏膜sIgA含量以及肝脏和肾脏抗氧化酶活性;以生长性能指标为主要评价指标,依据二次曲线回归模型估测,黄羽肉鸡饲粮中栀子适宜添加水平为0.66%~0.95%。

关键词： 栀子; 黄羽肉鸡; 生长性能; 血浆生化指标; 免疫功能; 抗氧化能力

本文引用格式

范秋丽 , 张典铨 , 潘晨璐 , 林厦菁 , 苟钟勇 , 林志恒 , 叶金玲 , 丁发源 , 程忠刚 , 蒋守群 . 饲粮添加栀子对黄羽肉鸡生长性能、血浆生化指标、免疫功能和抗氧化能力的影响[J]. 动物营养学报, 2024 , 36(11) : 6977 -6988 . DOI: 10.12418/CJAN2024.595

Abstract

This experiment was conducted to investigate the effects of different dietary levels of gardeniae fructus on growth performance, organ indices, plasma biochemical indices, jejunal mucosal cytokine contents and liver and kidney antioxidant indices of yellow-feathered broilers aged from 1 to 51 days, and to determine the optimal supplemental level of gardeniae fructus in diets for yellow-feathered broilers. A total of 720 one-day-old Mahuang broiler chickens with initial body weight of (38.44±0.06) g and good health were randomly divided into 5 groups according to the principle of body weight uniformity, and fed the basal diets supplemented with 0 (control group), 0.4%, 0.8%, 1.2% and 1.6% gardeniae fructus, respectively, with 6 replicates in each group and 24 chickens (half male and half female) in each replicate. The experiment lasted for 51 days. The results showed as follows: 1) the average daily feed intake of yellow-feathered broilers had linear and quadratic changes with the increase of dietary gardeniae fructus level (P<0.05). Compared with the control group, the final body weight and average daily gain in 0.4% and 0.8% gardeniae fructus groups were increased (P>0.05), and the ratio of feed to gain in 0.4%, 0.8% and 1.6% gardeniae fructus groups was significantly decreased (P<0.05). 2) The lung index of yellow-feathered broilers had a quadratic change with the increase of dietary gardeniae fructus level (P<0.05). Compared with the control group, the lung index in gardeniae fructus groups was significantly increased (P<0.05). 3) With the increase of dietary gardeniae fructus level, the plasma total protein content of yellow feather broilers had linear and quadratic changes (P<0.05), the plasma contents of total bilirubin and creatinine were linearly increased (P<0.05), and the plasma creatine kinase activity had linear and quadratic changes (P<0.05). Compared with the control group, the plasma glutamic oxalacetic transaminase activity in 0.4% gardeniae fructus group was significantly increased (P<0.05), and the plasma lactate dehydrogenase activity in 0.4%, 0.8% and 1.6% gardeniae fructus groups was significantly increased (P<0.05). 4) Compared with the control group, the secreted immunoglobulin A (sIgA) content in jejunal mucosa of yellow-feathered broilers in 1.6% gardeniae fructus group was significantly increased (P<0.05). 5) With the increase of dietary gardeniae fructus level, the total antioxidant capacity in liver and the total superoxide dismutase (T-SOD) activity in kidney of yellow-feathered broilers had linear and quadratic changes (P<0.05), the T-SOD activity in liver had a quadratic change (P<0.05), and the malondialdehyde content and the glutathione peroxidase activity in kidney were increased linearly (P<0.05). In conclusion, dietary gardeniae fructus can increase the growth performance, sIgA content in jejunal mucosa and antioxidant enzyme activity in liver and kidney of yellow-feathered broilers; based on the growth performance indices as the main evaluation indices, the optimal supplemental level of gardeniae fructus in diets for yellow-feathered broilers is 0.66% to 0.95% according to the quadratic regression model.

Key words： gardeniae fructus; yellow-feather broilers; growth performance; plasma biochemical indices; immune function; antioxidant capacity

栀子又名栀子黄、山栀子等,是茜草科栀子属植物的果实,先后于2002年和2020年被列入国家卫生健康委员会公告的《既是食品又是药品的物品名单》和《中华人民共和国药典》中的药食同源物质,具有保肝护胆和防治糖尿病等药理作用[1-2],主产地为福建、湖南、江西和河南等地,其中福建省福鼎市现有栀子种植面积6万多亩(1亩≈666.7 m2),年产栀子干果1.6万多t。栀子主要活性成分包括环烯醚萜类、黄酮、酚酸类和二萜化合物[3],其中栀子苷为环烯醚萜糖苷,又称京尼平苷,属于环烯醚类,具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤和降脂等功能。前人研究发现,腹腔注射栀子苷可治疗卵清蛋白引起的小鼠气道炎症反应[4];50 μmol/L栀子苷可通过调节磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)信号通路降低过氧化氢诱导的PC12细胞氧化损伤[5];栀子苷不仅能诱导肿瘤细胞凋亡,还可抑制肿瘤细胞侵袭[6];400 mg/kg栀子苷可降低高脂饮食条件下小鼠血清甘油三酯和总胆固醇含量[7]。虽然栀子已于2023年12月29日作为饲料原料被农业农村部第744号公告列入《饲料原料目录》,但目前栀子作为饲料原料在畜牧和水产上的应用研究报道很少,且主要体现在改善蛋鸡蛋黄颜色[8-9]和鱼类体色方面[10],在肉鸡上的研究报道尚属空白。因此,本研究以黄羽肉鸡为对象,通过研究饲粮添加不同水平栀子对其生长性能、器官指数、血浆生化指标、空肠黏膜细胞因子含量以及肝脏和肾脏抗氧化指标的影响,旨在为栀子作为饲料原料在肉鸡上的应用提供理论依据,同时为栀子在畜牧生产上的广泛应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料和试验设计

栀子干果由福鼎市福鼎黄栀子协会提供,外观为橙红色长圆形,在饲粮配制过程中将栀子干果粉碎制成栀子粉后添加,栀子粉主要有效成分为栀子苷,通过高效液相色谱法检测其含量为5.5%,且符合2020版《中华人民共和国药典》规定(栀子苷含量≥1.8%)。栀子营养成分见表1。
表1 栀子营养成分(干物质基础)

Table 1 Nutrient composition of gardeniae fructus (DM basis) %

项目Items 含量Content 项目Items 含量Content
表观代谢能AME/(MJ/kg) 7.00 精氨酸Arg 0.71
干物质(风干基础) DM (air-dry basis) 91.74 天冬氨酸Asp 0.88
粗蛋白质CP 10.21 丝氨酸Ser 0.40
粗脂肪EE 16.60 谷氨酸Glu 1.57
粗纤维CF 23.30 甘氨酸Gly 0.48
粗灰分Ash 3.70 丙氨酸Ala 0.42
钙Ca 0.24 胱氨酸Cys 0.08
总磷TP 0.17 缬氨酸Val 0.42
赖氨酸Lys 0.32 亮氨酸Leu 0.69
蛋氨酸Met 0.08 酪氨酸Tyr 0.18
苏氨酸Thr 0.33 苯丙氨酸Phe 0.45
色氨酸Trp 0.38 组氨酸His 0.21
异亮氨酸Ile 0.35 脯氨酸Pro 0.45
采用单因素随机分组设计,选取720只初始体重为(38.44±0.06) g且健康状况良好的1日龄麻黄肉鸡,根据体重一致原则随机分为5组,分别在基础饲粮中添加0(对照组)、0.4%、0.8%、1.2%和1.6%栀子,每组6个重复,每个重复24只鸡(公母各占1/2)。试验期51 d,分为1~21日龄、22~42日龄和43~51日龄3个阶段。本试验由广东省农业科学院动物科学研究所实验动物伦理委员会批准,试验伦理批准编号为2024005。

1.2 试验饲粮

试验采用玉米-小麦-杂粕型基础饲粮,参考《中国饲料成分及营养价值表(2021年第32版)》和《黄羽肉鸡营养需要量》(NY/T 3645—2020)中快速型商品鸡饲粮营养需要科学配制,各组相同饲养阶段饲粮营养水平保持一致。饲粮组成及营养水平见表2。
表2 饲粮组成及营养水平(干物质基础)

Table 2 Composition and nutrient levels of diets (DM basis) %

项目
Items		 1~21日龄栀子添加水平
Gardeniae fructus supplemental
levels from 1 to 21 days/%		 22~42日龄栀子添加水平
Gardeniae fructus supplemental
levels from 22 to 42 days/%		 43~51日龄栀子添加水平
Gardeniae fructus supplemental
levels from 43 to 51 days/%
0(对照
Control)		 0.4 0.8 1.2 1.6 0(对照
Control)		 0.4 0.8 1.2 1.6 0(对照
Control)		 0.4 0.8 1.2 1.6
原料Ingredients
玉米Corn 36.95 36.75 36.43 36.13 35.90 29.10 28.85 28.55 28.25 28.05 20.90 20.65 20.35 20.15 19.80
小麦Wheat 20.00 20.00 20.00 20.00 20.00 30.00 30.00 30.00 30.00 30.00 40.00 40.00 40.00 40.00 40.00
豆粕Soybean meal 11.60 11.50 11.50 11.50 11.40 7.90 7.80 7.80 7.80 7.70 6.00 5.90 5.90 5.80 5.80
花生粕Peanut meal 10.50 10.50 10.50 10.50 10.50 7.00 7.00 7.00 7.00 7.00 4.10 4.10 4.10 4.10 4.10
菜籽粕Rapeseed meal 6.00 6.00 6.00 6.00 6.00 8.20 8.20 8.20 8.20 8.20 11.20 11.20 11.20 11.20 11.20
栀子Gardeniae fructus 0.40 0.80 1.20 1.60 0.40 0.80 1.20 1.60 0.40 0.80 1.20 1.60
麸皮Wheat bran 3.20 3.20 3.20 3.20 3.20 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00
次粉Wheat middling 2.20 2.20 2.20 2.20 2.20 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00
大豆油Soybean oil 3.00 3.00 3.00 3.00 3.00 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00 5.00 5.00 5.00 5.00 5.00
石粉Limestone 1.20 1.19 1.19 1.19 1.19 1.26 1.26 1.26 1.26 1.25 1.24 1.24 1.24 1.23 1.23
磷酸氢钙CaHPO4 1.83 1.83 1.83 1.83 1.83 1.36 1.36 1.36 1.36 1.36 0.98 0.98 0.98 0.98 0.98
L-赖氨酸盐酸盐
L-lysine·HCl		 0.53 0.53 0.53 0.53 0.53 0.46 0.47 0.47 0.47 0.47 0.29 0.30 0.30 0.30 0.30
DL-蛋氨酸DL-methionine 0.35 0.35 0.35 0.35 0.35 0.28 0.28 0.28 0.28 0.28 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10
异亮氨酸Isoleucine 0.18 0.18 0.18 0.18 0.19 0.16 0.16 0.16 0.16 0.16 0.04 0.04 0.04 0.04 0.04
L-苏氨酸L-threonine 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.24 0.24 0.24 0.24 0.24 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10
氯化钠NaCl 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30
统糠Rice mill byproduct 0.91 0.82 0.74 0.64 0.56 0.74 0.68 0.58 0.48 0.39 0.75 0.69 0.59 0.50 0.45
预混料Premix1) 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00
合计Total 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00
营养水平Nutrient levels2)
表观代谢能AME/(MJ/kg) 12.13 12.13 12.13 12.13 12.13 12.38 12.38 12.38 12.38 12.38 12.59 12.59 12.59 12.59 12.59
粗蛋白质CP 19.61 19.89 19.83 19.76 19.55 17.54 17.81 17.56 17.74 17.88 16.63 16.42 16.38 16.61 16.45
赖氨酸Lys 1.29 1.29 1.29 1.29 1.29 1.15 1.15 1.15 1.15 1.15 0.96 0.96 0.96 0.96 0.96
蛋氨酸+半胱氨酸Met+Cys 0.93 0.93 0.93 0.93 0.93 0.86 0.86 0.86 0.86 0.86 0.71 0.71 0.71 0.71 0.71
异亮氨酸Ile 0.86 0.86 0.86 0.86 0.86 0.79 0.79 0.79 0.79 0.79 0.66 0.66 0.66 0.66 0.66
苏氨酸Thr 0.86 0.86 0.86 0.86 0.86 0.81 0.81 0.81 0.81 0.81 0.67 0.67 0.67 0.67 0.67
色氨酸Trp 0.21 0.21 0.21 0.21 0.21 0.20 0.20 0.20 0.20 0.20 0.16 0.16 0.16 0.16 0.16
钙Ca 1.02 0.98 0.99 1.00 1.00 0.89 0.90 0.89 0.87 0.89 0.80 0.81 0.77 0.79 0.79
总磷TP 0.64 0.61 0.63 0.63 0.62 0.54 0.55 0.54 0.54 0.53 0.51 0.51 0.51 0.52 0.50
非植酸磷NPP 0.47 0.47 0.47 0.47 0.47 0.41 0.41 0.41 0.41 0.41 0.36 0.36 0.36 0.36 0.36

1)预混料为1~21日龄每千克饲粮提供 The premix provided the following per kg of diets from 1 to 21 days of age:VA 8 000 IU,VB1 2 mg,VB2 8 mg,烟酸 nicotinic acid 35 mg,VB6 3.5 mg,VB12 0.01 mg,VD3 1 000 IU,VE 20 IU,VK 0.5 mg,生物素 biotin 0.18 mg,泛酸 pantothenic acid 10 mg,叶酸 folic acid 0.55 mg,氯化胆碱 choline chloride 1 300 mg,Fe 100 mg,Cu 8 mg,Mn 120 mg,Zn 100 mg,I 0.7 mg,Se 0.3 mg。预混料为22~42日龄每千克饲粮提供 The premix provided the following per kg of diets from 22 to 42 days of age:VA 6 000 IU,VB1 2 mg,VB2 5 mg,烟酸 nicotinic acid 30 mg,VB6 3 mg,VB12 0.01 mg,VD3 750 IU,VE 10 IU,VK 0.5 mg,生物素 biotin 0.15 mg,泛酸 pantothenic acid 10 mg,叶酸 folic acid 0.55 mg,氯化胆碱 choline chloride 1 000 mg,Fe 80 mg,Cu 8 mg,Mn 100 mg,Zn 80 mg,I 0.7 mg,Se 0.3 mg。预混料为43~51日龄每千克饲粮提供 The premix provided the following per kg of diets from 43 to 51 days of age:VA 6 000 IU,VB1 1 mg,VB2 4 mg,烟酸 nicotinic acid 20 mg,VB6 0.6 mg,VB12 0.008 mg,VD3 500 IU,VE 25 IU,VK 1.7 mg,生物素 biotin 0.02 mg,泛酸 pantothenic acid 8 mg,叶酸 folic acid 0.3 mg,氯化胆碱 choline chloride 750 mg,Fe 80 mg,Cu 7 mg,Mn 55 mg,Zn 75 mg,I 0.5 mg,Se 0.15 mg。

2)粗蛋白质、钙和总磷为实测值,表观代谢能和氨基酸依据《中国饲料成分及营养价值表(2021年第32版)》中各原料对应数值进行计算。CP, Ca and TP were measured values, while AME and amino acids were calculated according to the corresponding values of each raw material in Tables of Feed Composition and Nutritive Values in China (thirty-second edition, 2021).

1.3 饲养管理

试验鸡平养于封闭式鸡舍内,地面铺放谷壳,自由采食颗粒料和饮水,各组饲养管理和环境条件保持一致。试验期每天白天自然光照,晚上人工补光,每天记录鸡舍温度和相对湿度情况,保持鸡舍卫生清洁,每天观察鸡只健康状况和死亡情况并记录,按照常规操作程序和免疫流程进行饲养和免疫。

1.4 样品采集与制备

51日龄试验结束当天20:00断料供水,次日08:00以栏为重复单位进行空腹称重。每重复随机选取接近平均体重的2只鸡(公母各1只),翅静脉采集全血5 mL于抗凝管中,3 000×g离心10 min分离血浆,备测血浆生化指标。采血后的鸡颈部放血致死,剖取心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏称重,测定器官指数。称重后的肝脏和肾脏在固定位置剪取适量组织分装于1.5 mL离心管中于-80 ℃保存,备测肝脏和肾脏抗氧化指标。剖取空肠,在中间部位取10 cm肠段剪开,用生理盐水将内容物冲洗干净,并用滤纸吸干表面水分,采用载玻片刮取黏膜组织于1.5 mL离心管中于-80 ℃保存,备测空肠黏膜细胞因子含量。

1.5 测定指标及方法

1.5.1 栀子和饲粮常规营养成分含量

栀子表观代谢能以及干物质、粗脂肪、粗纤维、粗灰分和氨基酸含量测定方法分别依照全收粪法[11]、GB/T 6435—2014、GB/T 6433—2006、GB/T 6434—2006、GB/T 6438—2007和GB/T 18246—2019等执行。栀子和饲粮粗蛋白质、钙和总磷含量测定方法分别依照GB/T 6432—2018、GB/T 6436—2018和GB/T 6437—2018执行。

1.5.2 生长性能

51日龄试验结束当晚20:00断料供水,次日08:00以栏为重复单位称重,统计耗料量,计算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、料重比(F/G)和死亡率。

1.5.3 器官指数

各器官称重后计算以活体重为基础的器官指数。
器官指数(%)=(器官重量/活体重)×100。

1.5.4 血浆生化指标

血浆总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿酸(UA)、葡萄糖(GLU)、总胆红素(TBILI)、肌酐(CRE)含量以及谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、碱性磷酸酶(ALP)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性等血浆生化指标测定按照南京建成生物工程研究所相关试剂盒说明书进行,各试剂盒型号依次为:A045-2-2、A028-1-1、C012-1-1、A154-1-1、C019-1-1、C011-2-1、C009-1-1、C010-1-1、A059-1-1、A032-1-1和A020-1-2,以上所有指标读数均在多功能酶标仪(SYNERGY H1,BioTek,美国)上操作。

1.5.5 空肠黏膜细胞因子含量

按照空肠黏膜组织样品重量(mg)∶生理盐水(μL)=1∶9的比例在组织研磨仪(JXFSTPRP-CL,上海净信实业发展有限公司)上40 Hz/s匀浆样品120 s,匀浆后3 500×g离心10 min后取上清即为10%空肠黏膜匀浆液,直接用于测定分泌型免疫球蛋白A(sIgA)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-8(IL-8)和白细胞介素-10(IL-10)等空肠黏膜细胞因子含量。以上指标均采用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测,试剂盒购买于江苏酶免实业有限公司。采用二喹啉甲酸(bicinchoninic acid,BCA)蛋白定量试剂盒测定空肠黏膜总蛋白质含量,试剂盒购买于赛默飞世尔科技(上海)有限公司。

1.5.6 肝脏和肾脏抗氧化指标

肝脏和肾脏10%组织匀浆液的制备和总蛋白质含量测定方法参考空肠黏膜组织,10%组织匀浆液直接用于测定丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)以及总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。各指标测定按照南京建成生物工程研究所相关试剂盒说明书进行,试剂盒型号依次为:A003-1-2、A015-1-2、A001-1-2和A005-1-2。

1.6 数据统计分析

试验数据采用SPSS 19.0软件中的one-way ANOVA过程进行单因素方差分析,当处理效应差异显著时进行Duncan氏法多重比较以及线性(linear)和二次(quadratic)趋势分析,P<0.05为差异显著,各组试验数据均用平均值和均值标准误(SEM)表示。
对差异显著的生长性能指标:末重、平均日增重、平均日采食量和料重比应用REG程序进行二次曲线(Y=A×X2+B×X+C)拟合,其中Y代表对应指标测定值,X代表饲粮栀子水平,A和B分别为回归方程二次项和一次项的系数,C为方程的常数项,X0=-B/(2×A)为饲粮栀子适宜添加水平。

2 结果与分析

2.1 饲粮添加栀子对黄羽肉鸡生长性能的影响

由表3可知,饲粮添加栀子显著影响黄羽肉鸡末重、平均日增重、平均日采食量和料重比(P<0.05),其中平均日采食量随饲粮栀子添加水平的提高呈线性和二次变化(P<0.05)。与对照组相比,0.4%和0.8%栀子组末重和平均日增重有所提高(P>0.05),0.4%、0.8%和1.6%栀子组料重比显著降低(P<0.05)。各组间黄羽肉鸡死亡率无显著差异(P>0.05)。
表3 饲粮添加栀子对黄羽肉鸡生长性能的影响

Table 3 Effects of dietary gardeniae fructus on growth performance of yellow-feathered broilers

项目
Items		 栀子添加水平Gardeniae fructus supplemental levels/% 均值
标准误
SEM		 P值P-value
0(对照
Control)		 0.4 0.8 1.2 1.6 处理
Treatment		 线性
Linear		 二次
Quadratic
初重IBW/g 38.47 38.39 38.44 38.50 38.44 0.02 0.873
末重FBW/g 1 688.90ab 1 741.08a 1 755.39a 1 587.39b 1 670.42ab 19.78 0.037 0.169 0.316
平均日增重ADG/g 32.36ab 33.39a 33.67a 30.37b 32.00ab 0.43 0.032 0.062 0.097
平均日采食量ADFI/g 72.68ab 72.54ab 73.62a 69.63b 69.84b 0.54 0.046 0.021 0.045
料重比F/G 2.25a 2.17b 2.19b 2.29a 2.18b 0.02 0.049 0.508 0.417
死亡率Mortality/% 2.90 2.25 3.70 6.06 1.45 0.61 0.142

同行数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著(P>0.05),不同字母表示差异显著(P<0.05)。表4至表7同。

In the same row, values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as Table 4 to Table 7.

2.2 饲粮添加栀子对黄羽肉鸡器官指数的影响

由表4可知,随着饲粮栀子添加水平的提高,黄羽肉鸡肺脏指数呈二次变化(P<0.05)。与对照组相比,各栀子组肺脏指数均显著提高(P<0.05),且各栀子组间肺脏指数无显著差异(P>0.05)。饲粮添加栀子对黄羽肉鸡心脏指数、肝脏指数、脾脏指数和肾脏指数均无显著影响(P>0.05)。
表4 饲粮添加栀子对黄羽肉鸡器官指数的影响

Table 4 Effects of dietary gardeniae fructus on organ indices of yellow-feathered broilers %

项目
Items		 栀子添加水平Gardeniae fructus supplemental levels/% 均值
标准误
SEM		 P值P-value
0(对照
Control)		 0.4 0.8 1.2 1.6 处理
Treatment		 线性
Linear		 二次
Quadratic
心脏指数Heart index 0.42 0.53 0.46 0.52 0.54 0.02 0.283
肝脏指数Liver index 1.71 2.27 1.80 2.25 1.88 0.08 0.073
脾脏指数Spleen index 0.16 0.17 0.20 0.18 0.17 0.01 0.716
肺脏指数Lung index 0.46b 0.78a 0.68a 0.69a 0.68a 0.03 0.031 0.138 0.046
肾脏指数Kidney index 0.77 0.98 0.80 0.93 0.97 0.04 0.189

2.3 饲粮添加栀子对黄羽肉鸡血浆生化指标的影响

由表5可知,饲粮添加栀子显著影响黄羽肉鸡血浆TP、TBILI和CRE含量以及GOT、CK和LDH活性(P<0.05),其中,随着饲粮栀子添加水平的提高,血浆TP含量呈线性和二次变化(P<0.05),血浆TBILI和CRE含量呈线性提高(P<0.05),血浆CK活性呈线性和二次变化(P<0.05)。与对照组相比,0.8%栀子组血浆TP含量显著提高(P<0.05),0.4%栀子组血浆GOT活性显著提高(P<0.05),0.4%、0.8%和1.6%栀子组血浆LDH活性显著提高(P<0.05)。饲粮添加栀子对黄羽肉鸡血浆ALB、UA和GLU含量以及GPT和ALP活性均无显著影响(P>0.05)。
表5 饲粮添加栀子对黄羽肉鸡血浆生化指标的影响

Table 5 Effects of dietary gardeniae fructus on plasma biochemical indices of yellow-feathered broilers

项目
Items		 栀子添加水平Gardeniae fructus supplemental levels/% 均值
标准误
SEM		 P值P-value
0(对照
Control)		 0.4 0.8 1.2 1.6 处理
Treatment		 线性
Linear		 二次
Quadratic
总蛋白TP/(g/L) 18.84b 19.84b 27.31a 22.39ab 23.81ab 0.87 0.008 0.040 0.030
白蛋白ALB/(g/L) 12.12 11.38 11.91 10.61 11.70 0.23 0.271
尿酸UA/(mg/L) 156.29 198.07 193.23 176.52 155.85 9.02 0.444
葡萄糖GLU/(mmol/L) 12.41 12.16 12.18 12.73 12.18 0.09 0.150
总胆红素
TBILI/(μmol/L)		 4.47b 5.28b 9.15ab 10.73ab 14.27a 0.96 0.001 <0.001 0.341
肌酐CRE/(μmol/L) 37.24b 37.51b 37.27b 39.94a 40.97a 0.44 0.006 0.001 0.568
谷丙转氨酶GPT/(U/L) 4.02 5.93 5.95 6.33 4.98 0.43 0.549
谷草转氨酶GOT/(U/L) 17.26b 24.56a 14.67b 15.80b 14.53b 1.18 0.023 0.072 0.177
碱性磷酸酶ALP/(U/L) 11.19 13.51 21.78 23.06 10.99 1.98 0.135
肌酸激酶CK/(U/mL) 1.10ab 1.13a 0.87b 0.87b 0.91ab 0.04 0.040 0.011 0.031
乳酸脱氢酶LDH/(U/L) 4 001.29b 5 032.22a 4 764.82a 4 525.77ab 4 793.81a 111.04 0.014 0.142 0.069

2.4 饲粮添加栀子对黄羽肉鸡空肠黏膜细胞因子含量的影响

由表6可知,与对照组相比,1.6%栀子组黄羽肉鸡空肠黏膜sIgA含量显著提高(P<0.05)。饲粮添加栀子对空肠黏膜IL-1β、IL-8和IL-10含量均无显著影响(P>0.05)。
表6 饲粮添加栀子对黄羽肉鸡空肠黏膜细胞因子含量的影响

Table 6 Effects of dietary gardeniae fructus on cytokine contents in jejunal mucosa of yellow-feathered broilers

项目
Items		 栀子添加水平Gardeniae fructus supplemental levels/% 均值
标准误
SEM		 P值P-value
0(对照
Control)		 0.4 0.8 1.2 1.6 处理
Treatment		 线性
Linear		 二次
Quadratic
分泌型免疫球蛋白A
sIgA/(mg/g)		 1.53b 1.62b 1.64b 1.20b 2.48a 0.12 0.019 0.110 0.058
白细胞介素-1β
IL-1β/(ng/g)		 2.21 2.49 1.77 2.28 2.64 0.13 0.254
白细胞介素-8
IL-8/(ng/g)		 3.87 5.39 3.62 3.74 4.52 0.26 0.154
白细胞介素-10
IL-10/(ng/g)		 5.85 7.75 5.70 6.47 6.55 0.41 0.548

2.5 饲粮添加栀子对黄羽肉鸡空肠肝脏和肾脏抗氧化指标的影响

由表7可知,饲粮添加栀子显著影响黄羽肉鸡肝脏T-AOC和T-SOD活性以及肾脏MDA含量、T-SOD和GSH-Px活性(P<0.05),其中,随着饲粮栀子添加水平的提高,肝脏T-AOC和肾脏T-SOD活性均呈线性和二次变化(P<0.05),肝脏T-SOD活性呈二次变化(P<0.05),肾脏MDA含量和GSH-Px活性呈线性提高(P<0.05)。与对照组相比,0.8%、1.2%和1.6%栀子组肝脏T-AOC显著提高(P<0.05),0.4%、0.8%和1.2%栀子组肝脏T-SOD活性显著提高(P<0.05),各栀子组肾脏T-SOD活性显著提高(P<0.05),0.4%、1.2%和1.6%栀子组肾脏GSH-Px活性显著提高(P<0.05)。饲粮添加栀子对黄羽肉鸡肝脏MDA含量和GSH-Px活性以及肾脏T-AOC均无显著影响(P>0.05)。
表7 饲粮添加栀子对黄羽肉鸡空肠肝脏和肾脏抗氧化指标的影响

Table 7 Effects of dietary gardeniae fructus on antioxidant indices in liver and kidney of yellow-feathered broilers

项目
Items		 栀子添加水平Gardeniae fructus supplemental levels/% 均值
标准误
SEM		 P值P-value
0(对照
Control)		 0.4 0.8 1.2 1.6 处理
Treatment		 线性
Linear		 二次
Quadratic
肝脏Liver
丙二醛
MDA/(nmol/mg prot)		 0.28 0.35 0.27 0.33 0.22 0.02 0.347
总抗氧化能力
T-AOC/(U/mg prot)		 0.59c 0.80bc 1.15a 0.86b 0.99ab 0.05 0.002 0.010 0.003
总超氧化物歧化酶
T-SOD/(U/mg prot)		 27.79b 33.44a 33.15a 33.69a 28.12b 0.86 0.030 0.883 0.006
谷胱甘肽过氧化物酶
GSH-Px/(U/mg prot)		 14.64 19.05 18.09 18.06 18.05 0.70 0.334
肾脏Kidney
丙二醛
MDA/(nmol/mg prot)		 0.39b 0.61b 0.59b 0.68ab 0.90a 0.05 0.015 0.003 0.512
总抗氧化能力
T-AOC/(U/mg prot)		 1.02 1.32 1.26 1.19 1.21 0.04 0.111
总超氧化物歧化酶
T-SOD/(U/mg prot)		 42.05c 52.29ab 47.11b 49.08ab 53.48a 1.06 0.001 0.005 0.017
谷胱甘肽过氧化物酶
GSH-Px/(U/mg prot)		 14.41c 29.20a 18.44bc 22.92ab 29.65a 1.59 0.001 0.020 0.070

2.6 黄羽肉鸡饲粮栀子适宜添加水平

由表8可知,以黄羽肉鸡末重、平均日增重、平均日采食量和料重比为主要评价指标,通过二次曲线回归方程估测,饲粮栀子适宜添加水平分别为0.87%、0.86%、0.95%和0.66%。
表8 二次曲线回归模型估测黄羽肉鸡饲粮栀子适宜添加水平

Table 8 Estimation of dietary optimal supplemental level of gardeniae fructus for yellow-feathered broilers based on quadratic regression model

项目
Items		 回归方程
Regression equations		 P值
P-value		 决定系数
R2		 饲粮栀子适宜添加水平
Dietary optimal supplemental
level of gardeniae fructus/%
末重FBW/g Y=-17.032X2+29.636X+1 708.496 0.316 0.745 0.87
平均日增重ADG/g Y=-0.794X2+1.366X+32.681 0.095 0.879 0.86
平均日采食量ADFI/g Y=-0.469X2+0.892X+72.743 0.043 0.924 0.95
料重比F/G Y=0.082X2-0.109X+2.240 0.117 0.715 0.66

3 讨论

3.1 饲粮添加栀子对黄羽肉鸡生长性能和器官指数的影响

栀子中的活性成分环烯醚萜、藏红花素、黄酮和酚类的应用研究报道多见于医学方面,关于栀子作为饲料原料在畜禽应用研究方面的报道甚少。姜建平等[9]研究发现,玉米-豆粕型基础饲粮中添加0.1%和0.5%栀子对57~63周龄海兰褐蛋鸡平均日采食量、平均蛋重、产蛋率和料蛋比等生产性能均无显著影响。王衡等[12]研究表明,玉米-豆粕型基础饲粮中分别添加1.0%、1.5%和2.0%栀子可提高51~59周龄海兰褐蛋鸡产蛋率和平均蛋重,但对平均日采食量无显著影响。本研究结果表明,玉米-小麦-杂粕型基础饲粮中添加0.4%和0.8%栀子可提高1~51日龄黄羽肉鸡末重和平均日增重,添加0.8%栀子可提高平均日采食量,同时添加0.4%、0.8%和1.6%栀子可显著降低料重比,且二次曲线回归模型估测肉鸡获得最佳末重、平均日增重、平均日采食量和料重比的饲粮栀子适宜添加水平分别为0.87%、0.86%、0.95%和0.66%。由此说明,适量栀子作为饲料原料添加于肉鸡饲粮中对其生长性能的改善有促进作用,关于栀子对肉鸡和蛋鸡生产性能不同的研究结果可能与鸡种和日龄不同有关。
器官指数可作为评价机体健康状况的常用指标,其中肺脏指数又是病理毒理试验的重要考察指标之一[13]。王永锋等[14]和Yang等[15]分别应用栀子提取物栀子苷研究发现,10和20 mg/kg栀子苷可降低利巴韦林诱导的小鼠肺脏指数;80 mg/kg栀子苷可降低脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠的肺脏指数。本研究结果表明,饲粮添加0.4%~1.6%栀子(栀子苷对应含量计算值为220~880 mg/kg)显著提高了黄羽肉鸡肺脏指数,此结果与前人研究结果不一致,可能与栀子苷剂量和物种体型不同有关,同时这也说明此添加水平的栀子可能引起肉鸡肺脏充血或者肺泡肿大,从而导致肺脏指数升高,具体原因有待后续进行病理切片分析。

3.2 饲粮添加栀子对黄羽肉鸡血浆生化指标的影响

血浆生化指标可在一定程度上反映机体内环境和代谢情况。血浆TP含量升高,表明机体蛋白质的合成和运输提高[16]。TBILI是血红蛋白分解和代谢的内源性产物,可抑制可溶性血管细胞黏附分子1依赖性白细胞向内皮细胞迁移,血浆TBILI含量的升高可能与肝胆疾病有关[17]。CRE是肌肉在代谢偏磷酸产生能量过程中生成的化合物,经肾小球过滤排泄,肾功能障碍、高蛋白饮食和高强度运动等均可引起血浆CRE含量升高[18]。GOT分布在心肌、肝脏、肾脏和骨骼肌等器官组织中,当相应组织细胞受损、细胞通透性增加,其在血液中的活性即会升高[19]。同时,CK和LDH也可作为评价肝脏损伤的辅助指标,当机体处于热应激状态时糖酵解增加,血浆CK和LDH活性均升高[20]。本研究结果表明,饲粮添加0.8%栀子显著提高黄羽肉鸡血浆TP含量,添加1.6%栀子显著提高血浆TBILI含量,添加1.2%和1.6%栀子显著提高血浆CRE含量,添加0.4%栀子提高血浆GOT和CK活性,添加0.4%、0.8%和1.6%栀子显著提高血浆LDH活性,此结果与袁士雅等[21]应用不同炮制程度栀子水提物提高斑马鱼肝脏和肾脏中CRE含量和GOT活性的结果相似,说明饲粮添加不同水平的栀子虽然可以提高肉鸡体内蛋白质的合成和运输,但同时对肝脏和肾脏可能造成损伤。

3.3 饲粮添加栀子对黄羽肉鸡免疫功能的影响

肠道黏膜免疫是机体免疫功能的重要组成部分,其在对抗病原体感染的同时可调节环境和饮食中无害抗原以及共生微生物间的平衡[22],其中sIgA不仅可在肠道黏膜表面对抗微生物,还可在肠道派亚氏集合淋巴结中选择性黏附M细胞,参与上皮屏障的免疫平衡[23]。本研究结果表明,饲粮添加1.6%栀子显著提高黄羽肉鸡空肠黏膜sIgA含量,这与姜建平等[9]应用5%栀子提高蛋鸡血清IgA含量的结果相似,说明此添加水平的栀子可通过提高肠道黏膜免疫能力而提高肉鸡免疫功能。

3.4 饲粮添加栀子对黄羽肉鸡抗氧化能力的影响

病原体入侵或者环境应激会导致机体氧化稳态失衡,出现自由基升高、活性氧释放以及MDA和髓过氧化物酶(MPO)等过氧化物含量或活性升高,机体为平衡氧化稳态,会激活酶促和非酶促抗氧化系统,如T-AOC及T-SOD和GSH-Px等酶活性升高,以达到清除自由基和过氧化物的目的[24]。张小龙等[25]研究发现,栀子中的环烯醚萜类化合物和酚类化合物含量越高,对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和2,2’-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS+)自由基的清除能力越强,抗氧化能力也越强。本研究结果表明,饲粮添加0.8%、1.2%和1.6%栀子显著提高黄羽肉鸡肝脏T-AOC,添加0.4%、0.8%和1.2%栀子显著提高肝脏T-SOD活性,添加1.6%栀子显著提高肾脏MDA含量,添加0.4%~1.6%栀子显著提高肾脏T-SOD活性,同时添加0.4%、1.2%和1.6%栀子显著提高肾脏GSH-Px活性,这与徐敏等[26]使用栀子苷提高氧化应激大鼠胎盘组织中T-SOD活性的结果相似,但与降低胎盘组织MDA含量的结果相反,不同研究结果可能与T-SOD和GSH-Px是作用于过氧化氢和羟基自由基等有关[27]。结果表明,饲粮添加不同水平栀子可通过提高抗氧化酶活性而提高黄羽肉鸡抗氧化能力。

4 结论

饲粮添加栀子可通过提高黄羽肉鸡空肠黏膜sIgA含量以及肝脏和肾脏抗氧化酶活性提高其生长性能;以生长性能指标为主要评价指标,依据二次曲线回归模型估测,黄羽肉鸡饲粮中栀子适宜添加水平为0.66%~0.95%。

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