研究论文

1~21日龄肉仔鸡对高温烧结法磷酸三钙的相对生物学利用率研究

  • 曹素梅 , 1 ,
  • 罗状状 1, 2 ,
  • AYALEW Habtamu 1 ,
  • 徐长春 1 ,
  • 刘英丽 2 ,
  • 张永松 3 ,
  • 杨宏 3 ,
  • 吴长江 3 ,
  • 刘成 3 ,
  • 张海军 , 1, * ,
  • 武书庚 1
展开
  • 1 中国农业科学院饲料研究所,农业农村部饲料生物技术重点实验室,生物饲料开发国家工程研究中心,北京 100081
  • 2 信阳农林学院,动物科技学院,信阳 464000
  • 3 瓮福(集团)有限责任公司,贵阳 550002
* 张海军,研究员,博士生导师,E-mail:

曹素梅(1990—),女,河南上蔡人,博士,研究方向为动物营养与饲料科学。E-mail:

Copy editor: 田艳明

收稿日期: 2023-12-05

  网络出版日期: 2024-11-09

基金资助

国家自然科学基金(32302771)

瓮福(集团)研发基金(WF-001-2022-QT-00236)

Relative Bioavailability of Tricalcium Phosphate by High Temperature Sintering in Broilers from 1 to 21 Days of Age

  • CAO Sumei , 1 ,
  • LUO Zhuangzhuang 1, 2 ,
  • AYALEW Habtamu 1 ,
  • XU Changchun 1 ,
  • LIU Yingli 2 ,
  • ZHANG Yongsong 3 ,
  • YANG Hong 3 ,
  • WU Changjiang 3 ,
  • LIU Cheng 3 ,
  • ZHANG Haijun , 1, * ,
  • WU Shugeng 1
Expand
  • 1 National Engineering Research Center for Biological Feed, Key Laboratory of Feed Biotechnology, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Institute of Feed Research, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China
  • 2 College of Animal Science and Technology, Xinyang Agriculture and Forestry University, Xinyang 464000, China
  • 3 Wengfu Group Co., Ltd., Guiyang 550002, China
* professor, E-mail:

Received date: 2023-12-05

  Online published: 2024-11-09

摘要

本研究以磷酸一二钙(MDCP)为参照物,以1~21日龄肉仔鸡生长性能、血清磷代谢以及胫骨发育和磷代谢相关指标为评价指标,评价高温烧结法磷酸三钙(TCP)的相对生物学利用率,为TCP在肉鸡上的高效利用提供参考。试验采用“2×4+1”两因素完全随机试验设计,选择1 080只1日龄爱拔益加(AA)肉仔鸡公雏,随机分为9个组,每组6个重复,每个重复20只鸡。2种磷源各设定5个无机磷添加水平,分别为0(对照组,基础饲粮)、0.07%、0.14%、0.21%和0.28%,对应9个组(对照组共用);基础饲粮非植酸磷含量为0.16%。试验期21 d。结果表明: 1)与对照组相比,磷添加组1~21日龄肉仔鸡终末体重和平均日增重(ADG)显著提高(P<0.05),死淘率显著降低(P<0.05)。随着饲粮磷添加水平的提高,1~21日龄肉仔鸡终末体重、ADG和平均日采食量(ADFI)均呈线性提高(P<0.05),死淘率呈线性降低(P<0.05)。2)与添加MDCP相比,添加TCP显著提高了21日龄肉仔鸡血清钙和磷含量(P<0.05)。随着饲粮磷添加水平的提高,21日龄肉仔鸡血清钙和磷含量均呈线性降低(P<0.05)。3)与对照组相比,磷添加组21日龄肉仔鸡胫骨密度和胫骨强度显著提高(P<0.05)。随着饲粮磷添加水平的提高,21日龄肉仔鸡胫骨长度、胫骨密度、胫骨矿物质含量和胫骨强度均呈线性提高(P<0.05)。当饲粮磷添加水平为0.28%时,21日龄肉仔鸡胫骨发育各项指标均显著高于饲粮磷添加水平为0.07%和0.14%时(P<0.05)。4)与对照组相比,磷添加组21日龄肉仔鸡胫骨钙和磷含量显著提高(P<0.05)。随着饲粮磷添加水平的提高,21日龄肉仔鸡胫骨灰分、钙和磷含量以及灰分总磷沉积量均呈线性提高(P<0.05)。5)以MDCP(100.0%)为参照物,以1~21日龄肉仔鸡生长性能以及胫骨发育和磷代谢相关指标作为评价指标,高温烧结法TCP的相对生物学利用率为63.6%~117.8%。综上可知,相对于MDCP(100.0%),1~21日龄肉仔鸡对高温烧结法TCP的相对生物学利用率为96.4%;当磷源为高温烧结法TCP时,饲粮无机磷的适宜添加水平为0.28%。

本文引用格式

曹素梅 , 罗状状 , AYALEW Habtamu , 徐长春 , 刘英丽 , 张永松 , 杨宏 , 吴长江 , 刘成 , 张海军 , 武书庚 . 1~21日龄肉仔鸡对高温烧结法磷酸三钙的相对生物学利用率研究[J]. 动物营养学报, 2024 , 36(11) : 6989 -7002 . DOI: 10.12418/CJAN2024.596

Abstract

In this study, the relative bioavailability of tricalcium phosphate (TCP) by high temperature sintering to mono-calcium and di-calcium phosphate (MDCP) was evaluated by using the growth performance, serum phosphorus metabolism, tibial development and phosphorus metabolism related indices of broilers from 1 to 21 days of age, aiming to provide a reference for the efficient utilization of TCP in broilers. A total of 1 080 Arbor Acres (AA) broilers of 1-day-old were randomly divided into 9 groups with 6 replicates per group and 20 broilers per replicate using a “2×4+1” two-factor completely randomized design. Five inorganic phosphorus supplemental levels were set for each of the two phosphorus sources, which were 0 (control group, basal diet), 0.07%, 0.14%, 0.21% and 0.28%, respectively, corresponding to 9 groups (control group shared). The content of non-phytic acid phosphorus in the basal diet was 0.16%. The experiment lasted for 21 days. The results showed as follows: 1) compared with the control group, the final body weight and average daily gain (ADG) of broilers from 1 to 21 days of age in phosphate supplemental groups were significantly increased (P<0.05), and the mortality was significantly decreased (P<0.05). With the increase of dietary phosphate supplemental level, the final body weight, ADG and average daily feed intake (ADFI) of broilers from 1 to 21 days of age were linearly increased (P<0.05), and the mortality was linearly decreased (P<0.05). 2) Compared with MDCP, TCP supplementation significantly increased the serum calcium and phosphorus contents of broilers at 21 days of age (P<0.05). With the increase of dietary phosphorus supplemental level, the serum calcium and phosphorus contents of broilers at 21 days of age were linearly decreased (P<0.05). 3) Compared with the control group, the tibia density and tibia strength of broilers at 21 days of age in phosphorus supplemental group were significantly increased (P<0.05). With the increase of dietary phosphorus supplemental level, the tibial length, tibial density, tibial mineral content and tibial strength of broilers at 21 days of age were linearly increased (P<0.05). When the dietary phosphorus supplemental level was 0.28%, the tibia development indices of broilers at 21 days of age were significantly higher than those when the dietary phosphorus supplemental levels were 0.07% and 0.14% (P<0.05). 4) Compared with the control group, the tibia calcium and phosphorus contents of broilers at 21 days of age in phosphorus supplemental group were significantly increased (P<0.05). With the increase of dietary phosphorus supplemental level, the tibia ash, calcium and phosphorus contents and the total phosphorus deposition in ash of broilers at 21 days of age were linearly increased (P<0.05). 5) Using MDCP (100.0%) as reference and the growth performance, tibia development and phosphorus metabolism related indices of broilers from 1 to 21 days of age as evaluation indices, the relative bioavailability of TCP by high temperature sintering ranged from 63.6% to 117.8%. In conclusion, compared with MDCP (100.0%), the relative bioavailability of TCP by high temperature sintering in broilers from 1 to 21 days of age is 96.4%; when the phosphorus source is TCP by high temperature sintering, the optimal supplemental level of inorganic phosphorus is 0.28%.

Key words: broilers; TCP; MDCP; bioavailability

磷是家禽必需的矿物质元素,具有重要而广泛的生物学功能,如参与骨骼发育、能量代谢和细胞信号传导等,特别对快速生长肉鸡的骨骼发育尤为重要[1-3]。磷是不可再生资源,肉鸡对饲粮磷的生物学利用率低,一般在40%~60%,因此磷是仅次于能量、蛋白质之后的第三大饲料成本源,而且磷的低利用率也会导致环境磷污染日益严峻[4-6]。在饲粮中添加植酸酶或使用转植酸酶基因玉米作为饲料原料虽可提高饲粮中植酸磷的消化率,但却不能有效改善磷的吸收和代谢利用。因此,选择肉鸡更易吸收和利用的磷源,对节约磷源和降低环境污染具有重要意义。
目前,家禽饲粮中添加的磷酸盐主要包括磷酸氢钙(dibasic calcium phosphate,DCP)、磷酸二氢钙(mono-calcium phosphate,MCP)和磷酸一二钙(mono-calcium and di-calcium phosphate,MDCP),其中DCP产量占80%。最近在家禽上的研究发现,相比于DCP,MDCP的生物学利用率和利用效果更好,更利于家禽的生产。何万领等[7]和任跃昌等[8]均证实,在蛋鸡生产性能和骨骼代谢等方面,MDCP优于DCP。万敏艳等报道,以1~21日龄肉仔鸡体增重、胫骨指标和血清生化指标作为效应指标,发现相对于DCP(100.0%),肉仔鸡对MDCP的生物学利用率是112.5%[9]。由此可知,MDCP是肉鸡生产中常用的一种磷源,在动物体内的消化吸收优于无机磷源DCP。
磷酸三钙(tricalcium phosphate,TCP)作为一种新型磷源,含有与动物骨骼中钙磷比相当的磷源,却较少用于家禽饲粮中,其主要原因是生产工艺受限。当前,随着科技的发展,采用高温烧结法生产的TCP生产工艺逐渐成熟,生产成本降低,生产过程中无三废成本;同时,生产的TCP化学性质稳定、物理性能良好,国内饲料及化工行业对饲料级TCP认识不断加深。较多的研究表明,钙磷比严重影响肉鸡的生长性能和骨骼发育[2,10]。因此,基于TCP的优势以及目前肉鸡对磷源的需求,TCP有望成为家禽饲粮中的重要磷源。我国学者先前研究曾将TCP应用于家禽,发现其对校正龙骨弯曲变形的效果极为显著。刘岩等[11]研究发现,TCP作为饲料磷源对肉鸡生长和成骨的作用与DCP相似,相对生物学利用率在88%~95%。何姝颖等[12]研究指出,以体增重为指标,以MDCP为100%参照时,TCP的生物学利用率为85%。
近些年来,随着生产工艺的完善,TCP逐渐引起饲料行业的关注。但是,关于系统评价高温烧结法TCP相对于MDCP在肉鸡上的相对生物学利用率的研究尚未见报道。因此,本试验通过研究高温烧结法TCP相对饲料级MDCP的生物学利用率,探究其在肉鸡生产中的适宜用量,旨在指导高温烧结法TCP在肉鸡饲粮中的科学应用,并引导广大养殖者合理选择磷酸盐的种类与利用率,以降低饲料成本,提高磷的利用效率,减少磷的排泄,降低磷对环境的污染。

1 材料与方法

1.1 试验材料

本试验所用TCP中钙和无机磷含量分别为32.04%和18.22%;MDCP中钙和无机磷含量分别为21.88%和21.90%。

1.2 试验设计

试验采用“2×4+1”两因素(2种磷源、5个添加水平)完全随机试验设计,以MDCP作为参照物通过测定相对生物学利用率,考察肉仔鸡对TCP生物学利用率的差异。其中,每种磷源各设定5个无机磷添加水平,分别为0(对照组,基础饲粮)、0.07%、0.14%、0.21%和0.28%,共9个组(对照组共用);基础饲粮非植酸磷含量为0.16%。选择1 080只1日龄爱拔益加(AA)肉仔鸡公雏,随机分配到上述9个组,每组6个重复,每个重复20只鸡。试验期21 d。

1.3 试验饲粮

试验饲粮为玉米-豆粕-杂粕型,参考《鸡饲养标准》(NY/T 33—2004)[13]营养推荐量(有效磷除外)配制,为颗粒料,其组成及营养水平见表1
表1 饲粮组成及营养水平(饲喂基础)

Table 1 Composition and nutrient levels of diets (as fed basis) %

项目
Items
基础饲粮
Basal diet
MDCP添加水平
MDCP supplemental levels/%
TCP添加水平
TCP supplemental levels/%
0.07 0.14 0.21 0.28 0.07 0.14 0.21 0.28
原料Ingredients
玉米Corn 51.60 51.60 51.60 51.60 51.60 51.60 51.60 51.60 51.60
豆粕Soybean meal 32.50 32.50 32.50 32.50 32.50 32.50 32.50 32.50 32.50
大豆油Soybean oil 3.65 3.65 3.65 3.65 3.65 3.65 3.65 3.65 3.65
棉籽粕Cottonseed meal 2.50 2.50 2.50 2.50 2.50 2.50 2.50 2.50 2.50
菜籽粕Rapeseed meal 2.00 2.00 2.00 2.00 2.00 2.00 2.00 2.00 2.00
次粉Wheat middlings 2.50 2.50 2.50 2.50 2.50 2.50 2.50 2.50 2.50
L-赖氨酸L-Lys 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40
DL-蛋氨酸DL-Met 0.35 0.35 0.35 0.35 0.35 0.35 0.35 0.35 0.35
苏氨酸Thr 0.18 0.18 0.18 0.18 0.18 0.18 0.18 0.18 0.18
缬氨酸Val 0.16 0.16 0.16 0.16 0.16 0.16 0.16 0.16 0.16
石粉Limestone 0.45 2.05 1.98 1.83 1.70 1.88 1.54 1.19 0.85
氯化钠NaCl 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10
氯化胆碱Choline chloride 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10
磷酸一二钙MDCP 0.32 0.64 0.96 1.28
磷酸三钙TCP 0.38 0.76 1.14 1.52
硫酸钠Na2SO4 0.43 0.43 0.43 0.43 0.43 0.43 0.43 0.43 0.43
矿物质预混料Mineral premix1) 0.20 0.20 0.20 0.20 0.20 0.20 0.20 0.20 0.20
维生素预混料Vitamin premix2) 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02
稻壳粉Rice husk powder 1.07 0.46 0.23 0.16 0.38 0.34 0.31 0.27
沸石粉Zeolite powder 1.79 0.48 0.46 0.36 0.33 0.67 0.67 0.67 0.67
合计Total 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00
营养水平Nutrient levels3)
代谢能ME/(MJ/kg) 12.55 12.55 12.55 12.55 12.55 12.55 12.55 12.55 12.55
粗蛋白质CP 19.55 19.50 19.49 19.55 19.54 19.50 19.52 19.48 19.54
钙Ca 0.89 0.89 0.88 0.86 0.89 0.86 0.88 0.89 0.88
非植酸磷NPP 0.16 0.21 0.30 0.37 0.44 0.22 0.29 0.37 0.42
总磷TP 0.43 0.52 0.58 0.64 0.71 0.51 0.59 0.65 0.72
蛋氨酸Met 0.67 0.67 0.67 0.67 0.67 0.67 0.67 0.67 0.67
赖氨酸Lys 1.24 1.24 1.24 1.24 1.24 1.24 1.24 1.24 1.24
蛋氨酸+胱氨酸Met+Cys 0.92 0.92 0.92 0.92 0.92 0.92 0.92 0.92 0.92

1) 矿物质预混料为每千克饲粮提供 Mineral premix provided the following per kg of diets:Cu 8 mg,Zn 7 mg,Fe 80 mg,Mn 100 mg,Se 0.15 mg,I 10.35 mg。

2)维生素预混料为每千克饲粮提供 Vitamin premix provided the following per kg of diets:VA 12 500 IU,VD3 2 500 IU,VK3 2.65 mg,VB1 2.0 mg,VB2 6.0 mg,VB12 0.025 mg,VB6 3.0 mg,VE 50 mg,泛酸 pantothenic acid 12 mg,烟酸 niacin 50 mg,生物素 biotin 0.032 5 mg,叶酸 folic acid 1.25 mg。

3) 粗蛋白质、钙、总磷和非植酸磷为实测值,其他为计算值[参照《鸡饲养标准》(NY/T 33—2004)]。CP, Ca, TP and NPP were measured values, while the others were calculated values [referred to Feeding Standard of Chicken (NY/T 33—2004)].

1.4 饲养管理

试验鸡舍为全封闭式,采用3层重叠式笼养,单笼面积为0.93 m2;各组间重复的排列考虑位置效应。试验期间,1~3日龄保持舍内温度33~35 ℃,然后每日降低1 ℃,直至14日龄末降至24 ℃,并保持到试验结束;1~3日龄鸡舍相对湿度为70%~75%,之后保持在50%~65%;机械通风结合人工光照,23 h连续光照后黑暗1 h;鸡只自由采食和饮水;鸡舍及时清粪与清扫、消毒,每周带鸡消毒2次;免疫程序及方法参考商业公司推荐的方案执行。

1.5 样品采集与制备

试验开始前,首先采集饲料原料和各个组的饲粮进行营养成分分析。试验结束时,从每组每个重复中取2只鸡,翅静脉采集5 mL全血于非抗凝管中,1 006.2×g离心10 min,取上清液于-20 ℃保存,以备测血清钙、磷含量和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性。将抽血鸡只宰杀,取左腿胫骨,去除肌肉和结缔组织,以备测定胫骨长度、密度、强度和矿物质含量以及灰分、磷、钙含量和灰分总磷沉积量。

1.6 测定指标及方法

1.6.1 饲料原料及各组饲粮营养成分测定

饲料原料和各组饲粮中粗蛋白质、钙和总磷含量分别参考GB/T 6432—2018、GB/T 6436—2018和GB/T 6437—2018方法进行测定,非植酸磷含量参照Cao等[3]报道的方法测定。

1.6.2 生长性能

试验结束时,以重复为单位对试验鸡进行称重,试验期间记录耗料量及死淘情况,计算平均日采食量(average daily feed intake,ADFI)、平均日增重(average daily gain,ADG)、死淘率及料重比(feed/gain,F/G)。

1.6.3 血清磷代谢相关指标

将血清样本解冻后,使用钙检测试剂盒(C004-1-1,南京建成生物工程研究所)测定血清钙含量;采用钼蓝显色法[14]测定血清无机磷含量;采用碱性磷酸酶检测试剂盒(A059-1,南京建成生物工程研究所)测定血清ALP活性。

1.6.4 胫骨发育和磷代谢相关指标

采用数显游标卡尺测定胫骨长度;采用双能X射线骨密度仪(Dual-Energy X-Ray Absorptiometry,DEXA,DMS,法国)测定胫骨密度和胫骨矿物质含量[15];随后,采用物理测试仪(三点弯曲探头HDP/3PB,Stable Micro Systems,英国)测定胫骨强度[16];然后脱脂24 h,于马弗炉中550 ℃煅烧16 h,用于分析胫骨中灰分、钙和磷含量[17];根据Shao等[1]报道的方法,计算胫骨灰分总磷沉积量。

1.7 数据统计分析

采用SAS 9.4软件中的单一自由度比较检验磷添加组与对照组之间的差异显著性;除去对照组数据以外的所有数据均用一般线性模型(GLM)进行2×2两因素方差分析,统计模式包括磷源、磷添加水平及二者的互作;对于死淘率的数据,先进行反正弦转换后再进行统计分析。
方差分析差异显著(P<0.05)者,采用最小显著差异(LSD)法比较各组间平均值的差异显著性;采用不相关比较法分析所测指标与磷添加水平之间的线性或二次变化趋势;以MDCP的生物学利用率为100%,TCP相对于MDCP的生物学利用率采用多元线性回归斜率比法进行计算[9]。为了消除肉鸡因采食量的微小变化可能对多元线性回归方程的斜率计算结果的影响,TCP的相对生物学利用率根据所测指标与试验肉鸡每日磷实际进食量的回归方程计算[18]。采用误差计算方法估计斜率比及标准误[19]。以每个重复作为1个试验单元,试验结果采用平均值和集合标准误(pooled SE)表示,以P<0.05作为差异显著性检验水平。

2 结果

2.1 饲粮磷源和磷添加水平对1~21日龄肉仔鸡生长性能和死淘率的影响

表2可知,与对照组相比,磷添加组1~21日龄肉仔鸡终末体重和ADG显著提高(P<0.05),死淘率显著降低(P<0.05),但ADFI和F/G均无显著差异(P>0.05)。饲粮磷源对1~21日龄肉仔鸡终末体重、ADG、ADFI、F/G和死淘率均无显著影响(P>0.05);饲粮磷添加水平对1~21日龄肉仔鸡终末体重、ADG、ADFI和死淘率有显著影响(P<0.05),但对F/G无显著影响(P>0.05)(P>0.05);饲粮磷源与磷添加水平对1~21日龄肉仔鸡生长性能各指标均无显著交互作用(P>0.05)。随着饲粮磷添加水平的提高,1~21日龄肉仔鸡终末体重、ADG和ADFI均呈线性提高(P<0.05),死淘率呈线性降低(P<0.05);在饲粮磷添加水平为0.21%~0.28%时,1~21日龄肉仔鸡终末体重和ADG达到平台期。
表2 饲粮磷源和磷添加水平对1~21日龄肉仔鸡生长性能和死淘率的影响

Table 2 Effects of dietary phosphorus source and phosphorus supplemental level on growth performance and mortality of broilers from 1 to 21 days of age

项目
Items
磷添加水平
Phosphorus
supplemental levels/%
终末体重
Final
BW/g
平均日增重
ADG/(g/d)
平均日采食量
ADFI/(g/d)
料重比
F/G
死淘率
Mortality/%
对照组Control group 0.00 509 36.67 46.46 1.27 23.10
MDCP组
MDCP group
0.07 587 35.98 44.87 1.25 16.67
0.14 730 45.85 56.94 1.24 1.52
0.21 927 58.77 70.83 1.20 3.03
0.28 965 61.84 74.96 1.21 0.00
TCP组
TCP group
0.07 675 40.40 43.48 1.17 18.18
0.14 695 43.81 55.62 1.27 3.03
0.21 863 54.56 67.91 1.25 1.52
0.28 927 58.90 72.96 1.24 1.52
集合标准误Pooled SE 49 2.65 1.67 0.05 0.06
磷源Phosphorus sources 磷酸一二钙MDCP 802 50.61 61.90 1.23 5.30
磷酸三钙TCP 789 49.42 59.99 1.23 6.06
集合标准误Pooled SE 24 1.33 0.84 0.02 0.03
磷添加水平
Phosphorus supplemental
levels/%
0.07 631b 38.19c 44.17d 1.21 17.42a
0.14 712b 44.83b 56.28c 1.26 2.72b
0.21 895a 56.66a 69.37b 1.23 2.72b
0.28 947a 60.37a 73.96a 1.23 0.76b
集合标准误Pooled SE 34 1.87 1.18 0.03 0.89
PP-value
对照组vs.磷添加组
Control group vs. phosphorus supplemental group
0.028 0.037 0.560 0.211 0.047
磷源Phosphorus source 0.717 0.528 0.115 0.878 0.955
磷添加水平
Phosphorus supplemental level
<0.001 <0.001 <0.001 0.767 <0.001
磷源×磷添加水平
Phosphorus source×phosphorus supplemental level
0.412 0.380 0.961 0.570 0.704
线性Linear <0.001 <0.001 <0.001 <0.001
二次Quadratic 0.677 0.436 0.007 0.436

同列数据肩标不同字母表示差异显著(P<0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P>0.05)。下表同。

In the same column, values with different letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same letter or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

2.2 饲粮磷源和磷添加水平对21日龄肉仔鸡血清磷代谢相关指标的影响

表3可知,与对照组相比,磷添加组21日龄肉仔鸡血清钙和磷含量以及ALP活性均无显著差异(P>0.05)。饲粮磷源和磷添加水平对21日龄肉仔鸡血清钙和磷含量均有显著影响(P<0.05),但对血清ALP活性无显著影响(P>0.05);饲粮磷源与磷添加水平对血清钙和磷含量以及ALP活性均无显著交互作用(P>0.05)。与添加MDCP相比,添加TCP显著提高了21日龄肉仔鸡血清钙和磷含量(P<0.05)。随着饲粮磷添加水平的提高,21日龄肉仔鸡血清钙和磷含量均呈线性降低(P<0.05)。
表3 饲粮磷源和磷添加水平对21日龄肉仔鸡血清磷代谢相关指标的影响

Table 3 Effects of dietary phosphorus source and phosphorus supplemental level on phosphorus metabolism related indices in serum of broilers at 21 days of age

项目
Items
磷添加水平
Phosphorus supplemental
levels/%

Ca/(mmol/L)

P/(mmol/L)
碱性磷酸酶
ALP/(U/L)
对照组Control group 0.00 1.790 1.610 147
MDCP组
MDCP group
0.07 1.743 1.578 145
0.14 1.502 1.267 150
0.21 1.517 1.320 147
0.28 1.563 1.395 144
TCP组
TCP group
0.07 2.540 2.170 171
0.14 1.920 1.758 146
0.21 1.563 1.515 132
0.28 1.655 1.370 157
集合标准误Pooled SE 0.159 0.034 15
磷源Phosphorus sources 磷酸一二钙MDCP 1.581b 1.390b 146
磷酸三钙TCP 1.920a 1.703a 152
集合标准误Pooled SE 0.105 0.096 7
磷添加水平
Phosphorus supplemental levels/%
0.07 2.142a 1.874a 158
0.14 1.711b 1.513ab 148
0.21 1.609b 1.418b 139
0.28 1.540b 1.383b 150
集合标准误Pooled SE 0.149 0.136 10
PP-value
对照组vs.磷添加组
Control group vs. phosphorus supplemental group
0.883 0.797 0.904
磷源Phosphorus source 0.029 0.027 0.598
磷添加水平Phosphorus supplemental level 0.031 0.049 0.591
磷源×磷添加水平
Phosphorus source×phosphorus supplemental level
0.269 0.377 0.443
线性Linear 0.020 0.017
二次Quadratic 0.133 0.238

2.3 饲粮磷源和磷添加水平对21日龄肉仔鸡胫骨发育的影响

表4可知,与对照组相比,磷添加组21日龄肉仔鸡胫骨密度和胫骨强度显著提高(P<0.05),但胫骨长度和胫骨矿物质含量无显著差异(P>0.05)。饲粮磷源对21日龄肉仔鸡胫骨发育各项指标均无显著影响(P>0.05);饲粮磷添加水平对胫骨长度、胫骨密度、胫骨矿物质含量和胫骨强度均有显著影响(P<0.05);饲粮磷源与磷添加水平对胫骨发育各项指标均无显著交互作用(P>0.05)。随着饲粮磷添加水平的提高,21日龄肉仔鸡胫骨长度、胫骨矿物质含量和胫骨强度均呈线性提高(P<0.05),胫骨密度呈线性和二次变化(P<0.05)。当饲粮磷添加水平为0.28%时,21日龄肉仔鸡胫骨发育各项指标均显著高于饲粮磷添加水平为0.07%和0.14%时(P<0.05)。
表4 饲粮磷源和磷添加水平对21日龄肉仔鸡胫骨发育的影响

Table 4 Effects of dietary phosphorus source and phosphorus supplemental level on tibia development of broilers at 21 days of age

项目
Items
磷添加水平
Phosphorus supplemental
levels/%
胫骨长度
Tibia length/
mm
胫骨密度
Tibia density/
(g/cm2)
胫骨矿物质含量
Tibia mineral
content/g
胫骨强度
Tibia strength/
N
对照组Control group 0.00 47.368 0.072 0.090 44.38
MDCP组
MDCP group
0.07 55.605 0.078 0.183 45.58
0.14 62.576 0.108 0.350 82.68
0.21 66.033 0.124 0.617 101.60
0.28 67.937 0.124 0.683 169.60
TCP组
TCP group
0.07 58.590 0.083 0.225 73.30
0.14 64.300 0.097 0.350 74.80
0.21 64.330 0.112 0.500 113.20
0.28 70.782 0.120 0.733 148.80
集合标准误Pooled SE 2.210 0.004 0.005 14.48
磷源Phosphorus sources 磷酸一二钙MDCP 63.768 0.109 0.458 103.19
磷酸三钙TCP 65.345 0.105 0.473 106.63
集合标准误Pooled SE 1.230 0.002 0.024 7.77
磷添加水平
Phosphorus supplemental
levels/%
0.07 57.098c 0.080c 0.200d 57.90c
0.14 63.516b 0.103b 0.350c 78.74bc
0.21 65.182ab 0.118a 0.558b 107.93b
0.28 69.359a 0.122a 0.708a 159.20a
集合标准误Pooled SE 1.610 0.003 0.040 10.24
PP-value
对照组vs.磷添加组
Control group vs. phosphorus supplemental group
0.504 <0.001 0.066 0.013
磷源Phosphorus source 0.414 0.099 0.858 0.811
磷添加水平Phosphorus supplemental level <0.001 <0.001 <0.001 <0.001
磷源×磷添加水平
Phosphorus source×phosphorus supplemental level
0.735 0.320 0.299 0.436
线性Linear <0.001 <0.001 <0.001 <0.001
二次Quadratic 0.106 0.046 0.893 0.469

2.4 饲粮磷源和磷添加水平对21日龄肉仔鸡胫骨磷代谢相关指标的影响

表5可知,与对照组相比,磷添加组21日龄肉仔鸡胫骨钙和磷含量显著提高(P<0.05),但胫骨灰分含量和灰分总磷沉积量无显著差异(P>0.05)。饲粮磷源对21日龄肉仔鸡胫骨磷代谢相关指标均无显著影响(P>0.05);饲粮磷添加水平对胫骨磷代谢相关指标均有显著影响(P<0.05);饲粮磷源与磷添加水平对胫骨磷代谢相关指标均无显著交互作用(P>0.05)。随着饲粮磷添加水平的提高,21日龄肉仔鸡胫骨灰分、钙和磷含量以及灰分总磷沉积量均呈线性提高(P<0.05)。
表5 饲粮磷源和磷添加水平对21日龄肉仔鸡胫骨磷代谢相关指标的影响

Table 5 Effects of dietary phosphorus source and phosphorus supplemental level on phosphorus metabolism related indices in tibia of broilers at 21 days of age

项目
Items
磷添加水平
Phosphorus supplemental
levels/%
灰分
Ash/%

Ca/%

P/%
灰分总磷沉积量
Total phosphorus
deposition in
ash/(g/只)
对照组Control group 0.00 34.07 37.77 20.06 0.14
MDCP组
MDCP group
0.07 34.27 39.67 17.28 0.12
0.14 38.04 40.73 17.92 0.23
0.21 46.90 41.11 18.24 0.27
0.28 48.43 41.31 18.26 0.34
TCP组
TCP group
0.07 35.76 38.97 17.51 0.18
0.14 37.20 39.45 17.22 0.19
0.21 44.91 40.45 18.26 0.24
0.28 44.27 40.65 18.59 0.33
集合标准误Pooled SE 2.24 0.54 0.36 0.03
磷源Phosphorus sources 磷酸一二钙MDCP
磷酸三钙TCP 41.91 40.70 17.97 0.24
集合标准误Pooled SE 40.54 39.88 17.91 0.24
磷添加水平
Phosphorus supplemental
levels/%
0.07 1.15 0.29 0.20 0.01
0.14 35.01b 39.32b 17.41b 0.15c
0.21 37.54b 40.15ab 17.57b 0.21b
0.28 45.82a 40.81a 18.25ab 0.26b
集合标准误Pooled SE 46.16a 40.94a 18.44a 0.33a
PP-value 1.66 0.40 0.27 0.02
对照组vs.磷添加组
Control group vs. phosphorus supplemental group
0.088 0.004 <0.001 0.069
磷源Phosphorus source 0.430 0.060 0.910 0.620
磷添加水平Phosphorus supplemental level <0.001 0.040 0.040 <0.001
磷源×磷添加水平
Phosphorus source×phosphorus supplemental level
0.700 0.930 0.570 0.350
线性Linear <0.001 0.015 0.022 <0.001
二次Quadratic 0.821 0.890 0.997 0.934

2.5 1~21日龄肉仔鸡对TCP的相对生物学利用率评价

以上结果表明,由于1~21日龄肉仔鸡生长性能相关指标(终末体重和ADG)、血清磷代谢相关指标(血清钙和磷含量)、胫骨发育相关指标(胫骨长度、胫骨密度、胫骨矿物质含量和胫骨强度)以及胫骨磷代谢相关指标(胫骨灰分、钙和磷含量以及灰分总磷沉积量)随着饲粮磷添加水平的升高呈线性升高或降低,所以将以上指标分别进行多元线性回归分析。结果表明,除血清钙、磷含量与肉仔鸡每日磷进食量之间不存在显著的多元线性回归关系(P>0.05)外,其他上述指标均存在显著的多元线性回归关系(P<0.05)。因此,采用除血清钙、磷含量以外相关指标的多元线性回归斜率比法来评价TCP相对于MDCP的生物学利用率,结果见表6
表6 TCP相对于MDCP的生物学利用率

Table 6 Relative bioavailability of TCP to MDCP1)

项目
Items
多元线性回归方程
Multiple linear regression
equations2)
TCP相对于MDCP的
生物学利用率
Relative bioavailability
of TCP to MDCP/
%3)
决定系数
R2
P
P-value
血清钙含量Serum calcium content y=2.225 4-0.026 6x1-0.018 7x2 0.13 0.069
血清磷含量Serum phosphorus content y=1.898 0-0.021 3x1-0.012 6x2 0.12 0.082
终末体重Final BW y=476.809 9+15.507 9x1+15.038 8x2 97.0 0.59 <0.001
平均日增重ADG y=27.889 0+1.077 1x1+1.039 8x2 95.5 0.71 <0.001
胫骨长度Tibia length y=57.455 2+0.325 4x1+0.364 7x2 117.8 0.35 <0.001
胫骨密度Tibia density y=0.062 3+0.002 1x1+0.001 9x2 90.1 0.65 <0.001
胫骨矿物质含量Tibia mineral content y=-0.1+0.022 16x1+0.022 13x2 103.5 0.71 <0.001
胫骨强度Tibia strength y=5.440 9+4.460 3x1+4.464 2x2 102.3 0.60 <0.001
胫骨灰分含量Tibia ash content y=29.825+0.569x1+0.500x2 89.1 0.47 <0.001
胫骨钙含量Tibia calcium content y=38.351+0.101x1+0.073x2 63.6 0.37 <0.001
胫骨磷含量Tibia phosphorus content y=17.657+0.022x1+0.019x2 107.8 0.42 <0.001
胫骨灰分总磷沉积量
Tibia total phosphorus deposition in ash
y=0.072+0.008x1+0.0076x2 97.7 0.58 <0.001
平均值Mean 96.4

1) 以重复为单元进行线性回归分析。Multiple linear regression analysis was performed with replicate as a unit.

2) y为效应指标,x1x2分别为TCP和MDCP平均每日磷进食量[%/(d·只)]。y was the evaluation index, and x1 and x2 were average daily phosphorus intake of TCP and MDCP [%/(d·bird)], respectively.

3) TCP的相对生物学利用率是以MDCP为标准(100.0%)计算得到。Relative bioavailability of TCP was calculated using MDCP as standard (100.0%).

由表可知,以21日龄肉仔鸡终末体重和1~21日龄ADG作为效应指标,TCP相对于MDCP的生物学利用率分别为97.0%和95.5%;以胫骨长度、胫骨密度、胫骨矿物质含量含量以及胫骨强度作为效应指标,TCP相对于MDCP的生物学利用率分别为117.8%、90.1%、103.5%和102.3%;以胫骨灰分、钙和磷含量以及灰分总磷沉积量作为效应指标,TCP相对于MDCP的生物学利用率分别为89.1%、63.6%、107.8%和97.7%。综合上述指标,相对于MDCP,1~21日龄肉仔鸡对TCP的相对生物学利用率平均值为96.4%。

3 讨论

3.1 饲粮磷源和磷添加水平对1~21日龄肉仔鸡生长性能和死淘率的影响

磷作为肉鸡的必需矿物质元素,先前一系列的研究已经证实饲粮磷源和磷水平均会显著影响肉鸡的生长性能[3,20-21]。夏良宙等[20]和万荣等[21]均研究发现,在满足肉鸡磷需要量的情况下,相对于DCP,MDCP能显著提高肉仔鸡的ADFI和ADG,降低F/G。Cao等[3]报道,饲粮磷水平影响肉鸡整个生长期的生长性能,肉鸡饲喂低磷饲粮会降低ADG和ADFI,提高F/G,并提高死淘率。由此可见,饲粮磷源和磷水平在肉仔鸡生长发育方面发挥着至关重要的作用。TCP作为一种新型磷源,因其合适钙磷比和较好经济效益,在日本、俄罗斯和美国应用广泛,且多用于家禽饲料中,占磷酸盐消费量90%以上。而在我国,目前饲料级磷酸盐品种单一,绝大部分为DCP,还有少量的MDCP,而TCP使用量较低,主要原因是原料欠缺、生产工艺不高。随着我国科技的发展,饲料级TCP的加工工艺逐渐完善,生产成本降低,TCP逐渐引起了饲料行业的注意。虽然关于TCP相对生物学利用率的研究早前已有报道,但大多集中于单一添加量的研究,且在当时饲料级TCP生产工艺相对落后,熔融法生产能耗高,产品质量差,现已逐步被淘汰。因此,本试验采用MDCP作为参照,研究不同添加水平的TCP对1~21日龄肉仔鸡生长性能的影响,结果发现分别饲喂MDCP和TCP这2种磷源对肉仔鸡生长性能的影响无显著差异,这表明对于生长性能而言,TCP与MDCP具有相同的效果,这与何姝颖等[12]报道的结果一致,这可能因TCP其较合理的钙磷比以及日渐成熟的加工工艺,能够维持机体磷稳态,使其易被机体消化吸收和利用[22],进而达到与MDCP极近相同的效果。磷缺乏或不足,会导致肉鸡生长发育缓慢,死淘率增高[23-24]。本研究发现,饲粮磷添加水平显著影响1~21日龄肉仔鸡终末体重、ADG、ADFI和死淘率,且呈线性提高或降低;在饲粮无机磷添加水平为0.21~0.28%时,终末体重和ADG达到平台期,这与先前的研究结果[3,25]相一致,再次表明磷对肉鸡生长发育至关重要,饲粮额外添加磷水平0.21%~0.28%可以满足1~21日龄肉仔鸡基本生长需求。同时,以终末体重和ADG为效应指标,评价TCP相对于MDCP的生物学利用率,结果发现终末体重、ADG与肉仔鸡每日磷进食量之间存在显著的多元线性回归关系,表明终末体重和ADG可以用来评价不同磷源的生物利用率,可以作为敏感指标。就生长性能而言,TCP相对于MDCP(100.0%)的生物学利用率平均值为96.3%,这与屠焰等[26]报道的结果相近。综上可知,就1~21日龄肉仔鸡的生长性能而言,TCP有相当于MDCP的应用价值。

3.2 饲粮磷源和磷添加水平对21日龄肉仔鸡血清磷代谢相关指标的影响

血清钙、磷含量及ALP活性是已被广泛用于研究家禽等动物磷代谢利用的评价指标。万敏艳等[9]报道,饲粮磷源显著影响肉仔鸡血清钙磷代谢,可能原因是在正常情况下,血清钙和磷含量被维持在相对狭窄的生理范围内,这是由于甲状旁腺激素(PTH)、维生素D3的激素形式以及降钙素(CT)它们各自的受体在小肠、骨骼和肾脏的周转可通过精巧的反馈机制维持相对平衡[27-28]。当饲喂肉仔鸡不同磷源时,因其不同的钙和磷含量,导致钙磷周身代谢周转不同,进而引起血清钙和磷含量不同。本试验发现,TCP组肉仔鸡血清钙和磷含量显著高于MDCP组,这与Hemme等[29]报道的结果一致,可能原因是TCP含有较高的钙和磷含量。血清钙和磷对饲粮磷水平非常敏感已被证实[3,25]。本试验中,饲粮磷添加水平显著影响肉仔鸡血清钙和磷含量,且随着饲粮无机磷添加水平的提高,上述指标呈线性降低,当饲粮无机磷添加水平为0.21%~0.28%时达到平台期,这与先前的研究结果[3]基本一致,这是由于当机体磷缺乏时,成纤维生长因子23(FGF23)作为重要的调磷因子,能够调控骨骼释放钙和磷进入血液,进而维持机体磷稳态。此外,ALP是成骨能力的标志物,ALP活性的增强表明骨组织发生了更强烈的成骨作用[30]。本研究发现,MDCP组和TCP组之间肉仔鸡血清ALP活性无显著差异,说明TCP和MDCP具有相当的成骨作用。以血清钙和磷含量为效应指标,评价TCP相对于MDCP的生物学利用率,发现血清钙和磷含量与肉仔鸡每日磷进食量之间不存在显著的多元线性回归关系,表明血清钙和磷含量不是评价TCP生物学利用率差异的敏感指标,这可能与血清钙和磷含量受多种因素的调控有关,如磷稳态和相关的调节激素等[28]

3.3 饲粮磷源和磷添加水平对21日龄肉仔鸡胫骨发育的影响

骨的长度、密度、矿物质含量及强度经常用于反映骨骼发育和矿化情况[30]。有研究指出,肉仔鸡胫骨密度与胫骨矿物质含量高度相关,二者与典型的骨生物力学性能如骨强度、骨长度等能反映饲粮磷水平[15,31-32]。吕小康等[33]指出,饲粮磷源不影响断奶仔猪骨强度。李文静等[34]指出,饲粮磷源不影响42日龄肉鸭胫骨长度和胫骨强度。同时,在肉鸡上的研究发现,饲粮磷源不影响胫骨强度[9]。本试验研究结果与上述研究结果相似,即分别饲喂添加MDCP和TCP这2种磷源饲粮的1~21日龄肉仔鸡胫骨发育相关指标均无显著差异,这说明就胫骨发育而言,TCP可以达到与MDCP相同的效果。而就饲粮磷添加水平而言,本研究发现,随着饲粮无机磷添加水平的提高,肉仔鸡胫骨发育相关指标呈线性提高,且在磷添加水平为0.21%~0.28%时达到平台期,这与先前的研究结果[3,21]相吻合,表明无论何种磷源在添加水平为0.21%~0.28%时均可以维持正常的骨骼质量。同时,以上述指标作为效应指标,评价TCP相对于MDCP的生物学利用率,发现上述效应指标均与肉仔鸡每日磷进食量之间存在显著的多元线性回归关系,表明胫骨发育相关指标可以用来评价不同磷源的生物学利用率,这与万敏艳等[9]报道的一致。就胫骨发育情况,TCP相对于MDCP(100.0%)的生物学利用率为103.4%,证明磷源TCP优于MDCP,这可能与TCP本身特性有关,因为其含有更合理的钙磷比,易被小肠吸收利用,钙磷沉积于骨骼促进骨骼矿化,进而提高骨骼的质量[35]

3.4 饲粮磷源和磷添加水平对21日龄肉仔鸡胫骨磷代谢相关指标的影响

家禽等动物骨骼质量与骨灰分及钙磷沉积密切相关。肉鸡小肠吸收的磷约80%沉积于骨骼,与钙一起以羟基磷灰石的形式沉积于骨基质形成骨组织[3]。骨骼是一个动态的器官,不断进行着新陈代谢,骨骼中钙和磷的沉积情况以及灰分含量在一定程度上反映了机体钙磷代谢情况和骨骼质量[1]。万艳敏等[9]指出,饲粮磷源对肉仔鸡胫骨灰分、钙和磷含量无显著影响,这与本试验结果类似。胫骨灰分总磷沉积量作为能直接反映骨骼中磷的沉积情况指标,可明确磷的沉积情况[3]。本研究发现,饲粮磷源对肉仔鸡胫骨灰分总磷沉积量无显著影响,表明TCP就骨磷沉积与MDCP具有相当的效果。但Hemme等[29]指出,饲粮磷源显著影响肉仔鸡胫骨灰分、钙和磷含量,这可能与磷源和添加水平不同以及先前的加工工艺不成熟有关。Cardoso等[36]报道,当肉鸡饲喂低磷水平饲粮时,胫骨钙和磷含量降低,进而导致骨矿化程度较低。本研究发现,随着饲粮磷添加水平的提高,上述所有胫骨磷代谢指标均呈线性提高,且添加水平为0.21%~0.28%达到平台期,这与先前的研究结果[3,25]相似,表明无论何种磷源,不同磷水平均会显著影响骨骼的钙磷代谢。以上述胫骨磷代谢相关指标作为效应指标,评价TCP相对于MDCP的生物学利用率,发现上述指标均与肉仔鸡每日磷进食量之间存在显著的多元线性回归关系,表明其可以作为评价磷源的敏感指标。刘岩等[11]比较DCP和TCP,发现以胫骨灰分、钙和磷含量等作为评价指标,TCP相对于DCP(100.0%)的生物学利用率为98.1%,而本研究发现TCP相对于MDCP(100.0%)的生物学利用率为89.6%,造成上述评价结果不同可能是不同试验所选用的参照物以及评价肉鸡的日龄不同等。

3.5 1~21日龄肉仔鸡对TCP的相对生物学利用率评价

关于TCP在家禽中生物学利用率的研究多集中于20世纪八九十年代。屠焰等[26]指出,以DCP作为参照物,以胫骨灰分含量作为评价指标,TCP的相对生物学利用率为89.1%。刘岩等[11]研究发现,以DCP作为参照物,以肉鸡生长性能和成骨作用作为评价指标,TCP的相对生物学利用率为88%~95%。Bikker等[37]研究发现,以粪磷排泄量为评价指标,MDCP的利用率为70.7%,而TCP的利用率为31.5%。近年来,何姝颖等[12]研究指出,以MDCP为参照物,以体增重为评价指标,TCP的相对生物学利用率为85%。上述研究结果与本研究存在一定的差异,本研究基于多元线性回归斜率比,综合考虑了1~21日龄肉仔鸡生长性能以及胫骨发育和磷代谢相关指标,相对于MDCP(100.0%),TCP的相对生物学利用率是96.4%。不同研究结果差异主要原因可能是不同试验的试验设计不同、所选的参照物不同、以及不同时间和国家其TCP的质量不同等[38],而本研究设置多个磷添加水平、多个敏感评价指标以及选择了基于加工工艺日趋完善且质量相对稳定的高温烧结法TCP。因此,从本试验研究结果可以看出,高温烧结法TCP具有相当MDCP的效果。而基于TCP加工工艺完善、生产成本低等优点,面对目前家禽养殖业对磷源的大量需求,高温烧结法TCP有望成为肉鸡的有效替代磷源。

4 结论

① 相对于MDCP(100.0%),以1~21日龄肉仔鸡生长性能以及胫骨发育和磷代谢相关指标作为评价指标,高温烧结法TCP的相对生物学利用率为96.4%。
② 对于1~21日龄肉仔鸡,当磷源为高温烧结法TCP时,饲粮无机磷的适宜添加水平为0.28%。
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