研究论文

蛋氨酸构型和添加水平对黄羽肉鸡生长性能、胴体品质、肉品质和血浆蛋氨酸代谢相关酶活性的影响

  • 林厦菁 , 1 ,
  • 林泽玲 1 ,
  • 苟钟勇 1 ,
  • 范秋丽 1 ,
  • 董晓丽 2 ,
  • 邓远帆 2 ,
  • 叶金玲 1 ,
  • 王一冰 1 ,
  • 张赛 1 ,
  • 阮栋 1 ,
  • 蒋守群 , 1, *
展开
  • 1 广东省农业科学院动物科学研究所,猪禽种业全国重点实验室,农业农村部华南动物营养与饲料重点实验室,广东省畜禽育种与营养研究重点实验室,广州 510640
  • 2 希杰(上海)商贸有限公司,上海 200336
*蒋守群,研究员,硕士生导师,E-mail:

林厦菁(1988—),女,福建尤溪人,副研究员,硕士,主要从事黄羽肉鸡营养与饲料科学研究。E-mail:

Copy editor: 田艳明

收稿日期: 2024-06-05

  网络出版日期: 2024-12-12

基金资助

国家重点研发专项(2021YFD300404)

国家现代农业产业技术体系(CARS-41-G10)

广东省自然科学基金项目(2022A1515012069)

广州市科技计划项目(202206010168)

广州市科技计划项目(2024E04J0562)

广东省农业科学院科技计划项目(202106TD)

Effects of Methionine Configuration and Supplemental Level on Growth Performance, Carcass Quality, Meat Quality and Plasma Methionine Metabolism Related Enzyme Activity of Yellow-Feathered Broilers

  • LIN Xiajing , 1 ,
  • LIN Zeling 1 ,
  • GOU Zhongyong 1 ,
  • FAN Qiuli 1 ,
  • DONG Xiaoli 2 ,
  • DENG Yuanfan 2 ,
  • YE Jinling 1 ,
  • WANG Yibing 1 ,
  • ZHANG Sai 1 ,
  • RUAN Dong 1 ,
  • JIANG Shouqun , 1, *
Expand
  • 1 Guangdong Key Laboratory of Animal Breeding and Nutrition, Key Laboratory of Animal Nutrition and Feed Science in South China, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, State Key Laboratory of Swine and Poultry Breeding Industry, Institute of Animal Science, Guangdong Academy of Agricultural Sciences, Guangzhou 510640, China
  • 2 CJ (Shanghai) International Trading Co., Ltd., Shanghai 200336, China
*professor, E-mail:

Received date: 2024-06-05

  Online published: 2024-12-12

摘要

本试验旨在研究饲粮添加不同构型和不同水平蛋氨酸对中速型黄羽肉鸡生长性能、胴体品质、肉品质和血浆蛋氨酸代谢相关酶活性的影响,以确定中速型黄羽肉鸡蛋氨酸需要量以及L-蛋氨酸相对于DL-蛋氨酸的相对生物学效价。试验分为2个独立的饲养试验,分别选用31和61日龄健康且发育良好的科朗麻黄母鸡各1 584只,随机分为11个组,每组6个重复,每个重复24只鸡。各组分别饲喂在基础饲粮中添加0(对照组,2种构型共用)、0.04%、0.08%、0.12%、0.16%和0.20% L-蛋氨酸或DL-蛋氨酸的饲粮。试验期共计50 d。结果表明:1)与对照组相比,饲粮添加蛋氨酸显著提高黄羽肉鸡31~60日龄平均日增重和平均日采食量(P<0.05),并显著降低料重比(P<0.05),且L-蛋氨酸的效果优于DL-蛋氨酸(P<0.05);饲粮添加蛋氨酸对61~80日龄生长性能无显著影响(P>0.05)。2)与对照组相比,饲粮添加L-蛋氨酸显著提高60日龄黄羽肉鸡胸肌率(P<0.05),饲粮添加DL-蛋氨酸有提高60日龄胸肌率的趋势(P=0.06);饲粮添加蛋氨酸对80日龄胴体品质无显著影响(P>0.05)。3)与对照组相比,饲粮添加DL-蛋氨酸和L-蛋氨酸均显著降低80日龄黄羽肉鸡胸肌剪切力(P≤0.05)。4)与对照组相比,饲粮添加DL-蛋氨酸和L-蛋氨酸均显著降低80日龄黄羽肉鸡血浆甜菜碱-同型半胱氨酸甲基转移酶(BHMT)活性(P<0.05)。与DL-蛋氨酸相比,饲粮添加L-蛋氨酸显著提高60日龄黄羽肉鸡血浆BHMT活性(P<0.05),显著降低血浆甲硫氨酸腺苷转移酶活性(P<0.05);饲粮添加L-蛋氨酸显著提高80日龄血浆胱硫醚-β-合成酶活性(P<0.05)。综上所述,在本试验条件下,以平均日增重为评价指标,根据二次曲线回归分析得出,中速型黄羽肉鸡31~60日龄饲粮DL-蛋氨酸和L-蛋氨酸最适添加水平分别为0.16%和0.20%,相应饲粮蛋氨酸需要量分别为0.42%和0.46%;61~80日龄饲粮蛋氨酸需要量不高于0.23%。以平均日增重为评价指标,根据非线性曲线拟合得出,中速型黄羽肉鸡31~60日龄阶段L-蛋氨酸相对于DL-蛋氨酸的相对生物学效价为154.1%。

本文引用格式

林厦菁 , 林泽玲 , 苟钟勇 , 范秋丽 , 董晓丽 , 邓远帆 , 叶金玲 , 王一冰 , 张赛 , 阮栋 , 蒋守群 . 蛋氨酸构型和添加水平对黄羽肉鸡生长性能、胴体品质、肉品质和血浆蛋氨酸代谢相关酶活性的影响[J]. 动物营养学报, 2024 , 36(12) : 7710 -7724 . DOI: 10.12418/CJAN2024.658

Abstract

This experiment was conducted to investigate the effects of dietary methionine (Met) supplementation with different configurations and levels on growth performance, carcass quality, meat quality and plasma Met metabolism related enzyme activity of medium-speed yellow-feathered broilers, in order to determine the Met requirement and the relative biological titer of L-Met to DL-Met in medium-speed yellow-feathered broilers. The experiment was divided into 2 independent feeding experiments with each 1 584 healthy and well-developed female Kelang spotted-brown chickens at 31 and 61 days of age were selected and randomly divided into 11 groups with 6 replicates per group and 24 chickens per replicate, respectively. The chickens in each group were fed a basal diet supplemented with 0 (control group, shared by two configurations), 0.04%, 0.08%, 0.12%, 0.16% and 0.20% L-Met or DL-Met, respectively. The experiment lasted for 50 days. The results showed as follows: 1) compared with the control group, dietary Met supplementation significantly increased the average daily gain and average daily feed intake of yellow-feathered broilers from 31 to 60 days of age (P<0.05), significantly decreased the ratio of feed to gain (P<0.05), and the effects of L-Met was better than that of DL-Met (P<0.05); dietary Met supplementation had no significant effect on growth performance from 61 to 80 days of age (P>0.05). 2) Compared with the control group, dietary L-Met supplementation significantly increased the breast muscle rate of yellow-feathered broilers at 60 days of age (P<0.05), and dietary DL-Met supplementation had a trend of increasing the breast muscle rate at 60 days of age (P=0.06); dietary Met supplementation had no significant effect on carcass quality at 80 days of age (P>0.05). 3) Compared with the control group, dietary DL-Met and L-Met supplementation significantly decreased the breast muscle shear force of yellow-feathered broilers at 80 days of age (P≤0.05). 4) Compared with the control group, dietary DL-Met and L-Met supplementation significantly decreased the betaine-homocysteine methyltransferase (BHMT) activity in plasma of yellow-feathered broilers at 80 days of age (P<0.05). Compared with DL-Met, dietary L-Met supplementation significantly increased the BHMT activity in plasma of yellow-feathered broilers at 60 days of age (P<0.05), and significantly decreased the methionine adenosyltransferase activity in plasma (P<0.05); dietary L-Met supplementation significantly increased the cystathionine-β-synthase activity in plasma at 80 days of age (P<0.05). In conclusion, under the conditions of this experiment, using average daily gain as the evaluation index and according to quadratic regression analysis, the optimal dietary DL-Met and L-Met supplemental levels for medium-speed yellow-feathered broilers from 31 to 60 days of age are 0.16% and 0.20%, and the corresponding dietary Met requirements are 0.42% and 0.46%, respectively; the dietary Met requirement is not higher than 0.23% from 61 to 80 days of age. Using average daily gain as the evaluation index, the relative biological titer of L-Met to DL-Met in medium-speed yellow-feathered broilers from 31 to 60 days of age is 154.1% according to nonlinear curve fitting.

蛋氨酸是家禽的第一限制氨基酸,不仅参与蛋白质的合成,还参与多种代谢反应[1]。在实际生产中,蛋氨酸的缺乏或过量会影响到家禽生长[2]、抗氧化[3]以及脂质代谢[4]等,因此,蛋氨酸精准需要量尤为重要。蛋氨酸无法通过自身合成,畜禽常用的玉米-豆粕型饲粮需要额外添加蛋氨酸。在畜禽体内,L-蛋氨酸能被直接代谢利用,而D-蛋氨酸需在肝脏和肾脏中被D-氨基酸氧化酶氧化成酮式蛋氨酸,再经转氨酶作用生成L-蛋氨酸而被机体利用[5]。在肉仔鸡、北京鸭和樱桃谷鸭上的研究表明,L-蛋氨酸相对于DL-蛋氨酸的相对生物学效价在120%~140%,说明L-蛋氨酸的添加效果一般优于DL-蛋氨酸[6-8]
黄羽肉鸡是我国的特色肉鸡品种,具有皮薄肉厚、滋味鲜美以及风味独特的特点,深受广大消费者所喜爱。但目前关于L-蛋氨酸和DL-蛋氨酸在黄羽肉鸡上效价的比较研究尚未见报道,因此,本试验通过研究不同添加水平和化学构型的蛋氨酸对中速型黄羽肉鸡不同生长阶段生长性能、胴体品质以及蛋氨酸代谢相关酶活性的影响,探讨中速型黄羽肉鸡蛋氨酸需要量,并比较DL-蛋氨酸与L-蛋氨酸的相对生物学效价,以期为L-蛋氨酸和DL-蛋氨酸在黄羽肉鸡生产中的合理应用提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

本试验用L-蛋氨酸和DL-蛋氨酸为市售产品,纯度均为99%。中速型黄羽肉鸡购自中山某农业科技股份有限公司。

1.2 试验动物与分组设计

本试验为2个独立阶段的饲养试验,分别选用31和61日龄健康且发育良好的科朗麻黄母鸡各1 584只(共计3 168只),各阶段肉鸡均根据体重一致原则随机分为11个组,每组6个重复,每个重复24只鸡。按照表1设计的不同蛋氨酸添加水平,各组分别饲喂在基础饲粮中添加0(对照组,2种构型共用)、0.04%、0.08%、0.12%、0.16%和0.20% L-蛋氨酸或DL-蛋氨酸的饲粮。试验期共计50 d。本动物试验由广东省农业科学院动物科学研究所实验动物伦理委员会审批,伦理批准编号为2024008。
表1 试验分组与设计

Table 1 Experimental grouping and design %

项目
Items
饲粮蛋氨酸添加水平
Dietary Met supplemental level
饲粮总蛋氨酸水平
Dietary total Met level
饲粮蛋氨酸+半胱氨酸水平
Dietary Met+Cys level
31~60日龄
31 to 60
days of age
61~80日龄
61 to 80
days of age
31~60日龄
31 to 60
days of age
61~80日龄
61 to 80
days of age
31~60日龄
31 to 60
days of age
61~80日龄
61 to 80
days of age
基础饲粮Basal diet 0.00 0.00 0.26 0.23 0.54 0.51
DL-蛋氨酸饲粮
DL-Met diet
0.04 0.04 0.30 0.27 0.58 0.55
0.08 0.08 0.34 0.31 0.62 0.59
0.12 0.12 0.38 0.35 0.66 0.63
0.16 0.16 0.42 0.39 0.70 0.67
0.20 0.20 0.46 0.43 0.74 0.71
L-蛋氨酸饲粮
L-Met diet
0.04 0.04 0.30 0.27 0.58 0.55
0.08 0.08 0.34 0.31 0.62 0.59
0.12 0.12 0.38 0.35 0.66 0.63
0.16 0.16 0.42 0.39 0.70 0.67
0.20 0.20 0.46 0.43 0.74 0.71

1.3 试验饲粮

参考《黄羽肉鸡营养需要量》(NY/T 3645—2020)[9]中速型黄羽肉鸡营养需要量配制玉米-豆粕-豌豆蛋白粉型基础饲粮,其组成及营养水平见表2。各组饲粮除蛋氨酸外,其他营养水平均保持一致。试验鸡在进入正式试验前,均饲喂参照黄羽肉鸡营养标准配制的相同饲粮。
表2 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)

Table 2 Composition and nutrient levels of basal diets (air-dry basis) %

原料
Ingredients
31~60日龄
31 to 60
days of age
61~80日龄
61 to 80
days of age
营养水平
Nutrient levels2)
31~60日龄
31 to 60
days of age
61~80日龄
61 to 80
days of age
玉米Corn (7.83% CP) 55.23 33.65 氮校正代谢能MEn/(MJ/kg) 11.92 11.32
豆粕Soybean meal (46.22% CP) 5.20 3.78 粗蛋白质CP 17.26 16.02
花生仁粕
Peanut kernel meal (47.01% CP)
3.96 3.35 钙Ca 0.83 0.62
豌豆蛋白粉
Pea protein powder (77.78% CP)
7.80 3.00 总磷TP 0.62 0.52
小麦Wheat 19.50 40.74 非植酸磷NPP 0.41 0.36
苜蓿草粉Alfalfa meal 3.69 11.43 赖氨酸Lys 0.97 0.81
磷酸氢钙CaHPO4 1.41 1.18 蛋氨酸Met 0.26 0.23
氯化钠NaCl 0.30 0.80 蛋氨酸+半胱氨酸Met+Cys 0.54 0.51
石粉Limestone 1.08 0.30 苏氨酸Thr 0.68 0.58
L-赖氨酸盐酸盐
L-Lys·HCl (78%)
0.32 0.26 色氨酸Try 0.18 0.17
L-苏氨酸L-Thr 0.14 0.09 精氨酸Arg 1.21 0.92
统糠Chaff mixing 0.37 0.42 异亮氨酸Ile 0.65 0.58
预混料Premix1) 1.00 1.00 缬氨酸Val 0.82 0.73
合计Total 100.00 100.00

1)预混料为31~60日龄每千克饲粮提供 The premix provided the following per kg of the diet for 31 to 60 days of age:VA 9 000 IU,VD3 500 IU,VE 35 IU,VK 2.2 mg,VB12 15 μg,吡哆醇 pyridoxine 2.4 mg,烟酸 niacin 35 mg,泛酸 pantothenic acid 10 mg,叶酸 folic acid 0.7 mg,生物素 biotin 0.10 mg,50%氯化胆碱 50% choline chloride 2 000 mg,小苏打 sodium bicarbonate 1 500 mg,防霉剂 mold inhibitor 1 400 mg,Fe 80 mg,Cu 18.8 mg,Mn 60 mg,Zn 60 mg,I 0.6 mg,Se 0.15 mg。

预混料为61~80日龄每千克饲粮提供 The premix provided the following per kg of the diet for 61 to 80 days of age:VA 6 000 IU,VD3 500 IU,VE 35 IU,VK 1.7 mg,VB12 8 μg,吡哆醇 pyridoxine 0.6 mg,烟酸 niacin 20 mg,泛酸 pantothenic acid 8 mg,叶酸 folic acid 0.3 mg,生物素 biotin 0.02 mg,50%氯化胆碱 50% choline chloride 1 500 mg,小苏打 sodium bicarbonate 1 500 mg,防霉剂 mold inhibitor 1 400 mg,Fe 80 mg,Cu 18.8 mg,Mn 60 mg,Zn 55 mg,I 0.5 mg,Se 0.15 mg。

2)氮校正代谢能和非植酸磷为计算值,依据《中国饲料成分及营养价值表(2021年第32版)》中各原料对应数值计算,其他均为实测值。MEn and NPP were calculated according to corresponding values of each raw material in Tables of Feed Composition and Nutritive Values in China (32nd edition, 2021), while the others were measured values.

1.4 饲养管理

饲养试验在广东省农业科学院动物科学研究所试验鸡场进行,采用地面平养,地面铺放谷壳作为垫料。各组饲养管理和环境条件一致,试验鸡自由采食颗粒料、自由饮水,每天记录温度和相对湿度,按照《黄羽肉鸡饲养管理技术规程》(NY/T 1871—2010)进行饲养和免疫。

1.5 测定指标及方法

1.5.1 饲粮常规营养成分含量

饲粮干物质、粗蛋白质、氨基酸、钙和总磷含量的测定分别依照GB/T 6435—2014、GB/T 6432—2018、GB/T 18246—2019、GB/T 6436—2018和GB/T 6437—2018执行。

1.5.2 生长性能

分别于肉鸡31、60和80日龄前一晚20:00断料供水,并于次日08:00以重复为单位称鸡空腹重及结料,准确记录给料量和剩料量,统计试验鸡平均日采食量、平均日增重和料重比。试验期间每日观察鸡只健康状况、精神状态及粪便颜色等情况,记录死亡数。试验结束后,计算各组的平均日增重、平均日采食量、料重比及死亡率。

1.5.3 胴体品质和肉品质

分别于肉鸡60和80日龄,各组每个重复选取2只接近平均体重的健康试验鸡,颈部放血致死,完整剥离两侧无骨无皮的胸肌、腿肌以及腹腔的全部腹脂,称量屠体重、胸肌重、腿肌重和腹脂重,并计算屠体率、全净膛率、半净膛率、胸肌率、腿肌率和腹脂率。计算公式如下:
屠体率(%)=100×屠体重/宰前体重;
全净膛率(%)=100×全净膛重/宰前体重;
半净膛率(%)=100×半净膛重/宰前体重;
胸肌率(%)=100×两侧胸净肌肉重/全净膛重;
腿肌率(%)=100×两侧腿净肌肉重/全净膛重;
腹脂率(%)=100×腹脂重/(全净膛重+腹脂重)。
取左侧胸肌用便携式pH计(Testo-205,深圳市吉格机电设备有限公司)测定45 min、24 h pH和24 h滴水损失;取右侧胸肌用色差仪(CR-410型,美能达公司,日本)测定45 min和24 h肉色,并用质构仪(Instron 4411型,英斯特朗公司,美国)测定剪切力。各项肉品质指标测定方法参照文献[10]。

1.5.4 血浆蛋氨酸代谢相关酶活性

分别于肉鸡60和80日龄,各组每个重复选取2只接近平均体重的健康试验鸡,翅静脉采血5 mL,2 500×g离心15 min,制备血浆并分装至500 μL离心管中,于-80 ℃保存,用于测定蛋氨酸代谢相关酶活性。
蛋氨酸代谢相关酶包括:甜菜碱-同型半胱氨酸甲基转移酶(betaine-homocysteine methyltransferase,BHMT)、甘氨酸-N-甲基转移酶(glycine-N-methyltransferase,GNMT)、胱硫醚-β-合成酶(cystathionine-β-synthase,CBS)、甲硫氨酸腺苷转移酶(methionine adenosyltransferase,MAT)、D-氨基酸氧化酶(D-amino acid oxidase,D-AAO)、磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine,PC)。测定所用的酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒购于北京方程生物科技有限公司,测定方法严格按照试剂盒说明书步骤进行。

1.6 数据处理与统计分析

采用SAS 8.0软件的Mixed Model对数据进行分析,采用Preplanned Contrasts对蛋氨酸来源进行多重比较分析。结果数据采用平均值和均值标准误(SEM)表示,P≤0.05为差异显著水平,0.05<P<0.10为差异有显著趋势。
采用SAS 8.0软件的二次多项式和单斜率折线模型拟合估算黄羽肉鸡饲粮蛋氨酸需要量,二次多项式模型为Y=aX2+bX+c,饲粮蛋氨酸最适需要量定义为95%的Xmax=-b/2a。单斜率折线模型为Y=aX+b, X<X0; Y=aX0+b, XX0。式中:X为饲粮蛋氨酸水平;X0为拐点所对应的饲粮蛋氨酸水平,即饲粮蛋氨酸需要量。
根据Littell等[11]提出的数学模型:计算L-蛋氨酸的相对生物学效价。计算公式为:
Y=a+c[1-Exp-(b1X1+b2X2)]。
式中:Y表示生长性能等指标;a表示Y的截距;c表示公共渐进响应;X1X2分别表示饲粮中DL-蛋氨酸和L-蛋氨酸的添加水平,b1和b2分别表示DL-蛋氨酸和L-蛋氨酸2种曲线的增长系数。
根据平均日增重数据,模拟出平均日增重随饲粮蛋氨酸添加水平变化的曲线,以b2与b1的比值为L-蛋氨酸相对于DL-蛋氨酸的相对生物学效价。

2 结果与分析

2.1 蛋氨酸构型和添加水平对黄羽肉鸡生长性能的影响

表3可知,与对照组相比,饲粮添加不同构型和不同水平蛋氨酸均显著提高黄羽肉鸡60日龄体重以及31~60日龄平均日采食量、平均日增重(P<0.05),并显著降低料重比(P<0.05)。其中,各DL-蛋氨酸添加组和各L-蛋氨酸组均以0.20%添加水平组平均日增重最高。与饲粮添加DL-蛋氨酸相比,饲粮添加L-蛋氨酸显著提高黄羽肉鸡60日龄体重及31~60日龄平均日增重和平均日采食量(P<0.05)。由表4可知,饲粮添加不同构型和不同水平蛋氨酸对黄羽肉鸡80日龄体重以及61~80日龄平均日采食量、平均日增重和料重比均无显著影响(P>0.05)。
表3 蛋氨酸构型和添加水平对黄羽肉鸡31~60日龄生长性能的影响

Table 3 Effects of Met configuration and supplemental level on growth performance of yellow-feathered broilers from 31 to 60 days of age

项目
Items
添加水平
Supplemental
levels/%
60日龄体重
BW at 60
days of age/g
平均日采食量
ADFI/
(g/d)
平均日增重
ADG/
(g/d)
料重比
F/G
死亡率
Mortality/%
基础饲粮Basal diet 0.00 1 262 74.85 26.60 2.81 0.76
DL-蛋氨酸饲粮
DL-Met diet
0.04 1 330 78.37 28.98 2.71 1.52
0.08 1 322 76.27 28.69 2.66 0.00
0.12 1 344 77.13 29.44 2.62 0.00
0.16 1 343 78.02 29.41 2.66 0.76
0.20 1 353 77.70 29.76 2.61 0.76
L-蛋氨酸饲粮
L-Met diet
0.04 1 322 77.67 28.70 2.71 0.00
0.08 1 331 77.28 28.99 2.67 0.76
0.12 1 360 79.32 30.00 2.65 0.00
0.16 1 378 80.29 30.61 2.62 0.00
0.20 1 398 80.16 31.31 2.56 0.00
均值标准误SEM 11.07 0.79 0.38 0.03 0.65

构型Configuration
DL-蛋氨酸DL-Met 1 338 77.50 29.25 2.65 0.61
L-蛋氨酸L-Met 1 358 78.94 29.92 2.64 0.15
PP-value
对照vs DL-蛋氨酸CON vs DL-Met <0.01 <0.01 <0.01 <0.01 0.83
对照vs L-蛋氨酸CON vs L-Met <0.01 <0.01 <0.01 <0.01 0.40
DL-蛋氨酸vs L-蛋氨酸DL-Met vs L-Met <0.01 0.01 0.01 0.55 0.27
表4 蛋氨酸构型和添加水平对黄羽肉鸡61~80日龄生长性能的影响

Table 4 Effects of Met configuration and supplemental level on growth performance of yellow-feathered broilers from 61 to 80 days of age

项目
Items
添加水平
Supplemental
levels/%
80日龄体重
BW at 80
days of age/g
平均日采食量
ADFI/
(g/d)
平均日增重
ADG/
(g/d)
料重比
F/G
死亡率
Mortality/%
基础饲粮Basal diet 0.00 1 769 93.66 22.98 4.08 0.00
DL-蛋氨酸饲粮
DL-Met diet
0.04 1 783 96.09 23.71 4.06 0.83
0.08 1 776 95.59 23.21 4.12 0.83
0.12 1 762 94.27 22.56 4.18 0.00
0.16 1 758 93.12 22.78 4.09 0.00
0.20 1 785 95.79 23.65 4.06 0.00
L-蛋氨酸饲粮
L-Met diet
0.04 1 771 95.33 23.11 4.14 0.00
0.08 1 774 94.97 23.25 4.09 0.00
0.12 1 785 95.71 23.77 4.03 0.83
0.16 1 776 96.12 23.36 4.12 0.00
0.20 1 772 95.19 23.12 4.12 0.83
均值标准误SEM 8.20 1.11 0.43 0.05 0.50

构型Configuration
DL-蛋氨酸DL-Met 1 773 95.10 23.21 4.10 0.33
L-蛋氨酸L-Met 1 776 95.46 23.32 4.10 0.33
PP-value
对照vs DL-蛋氨酸CON vs DL-Met 0.65 0.27 0.66 0.70 0.55
对照vs L-蛋氨酸CON vs L-Met 0.45 0.13 0.46 0.75 0.55
DL-蛋氨酸vs L-蛋氨酸DL-Met vs L-Met 0.60 0.47 0.60 0.91 1.00

2.2 L-蛋氨酸相对于DL-蛋氨酸的相对生物学效价

表5图1可知,以黄羽肉鸡31~60日龄阶段的平均日增重为评价指标进行回归分析得出,L-蛋氨酸相对于DL-蛋氨酸的相对生物学效价为154.1%(R2=0.94)。由于饲粮添加蛋氨酸对黄羽肉鸡61~80日龄生长性能无显著影响,因此无法对该阶段进行生物学效价对比。
表5 L-蛋氨酸相对于DL-蛋氨酸的相对生物学效价

Table 5 Relative biological titer of L-Met to DL-Met

项目
Item
非线性回归方程
Nonlinear regression equation
决定系数
R2
相对生物学效价
Relative biological titer/%
31~60日龄平均日增重
ADG from 31 to 60 days of age
Y=26.85+4.59×[1-Exp-(6.73X1+10.37X2)] 0.94 154.1

Y为评定指标,X1DL-蛋氨酸水平,X2L-蛋氨酸水平。

Y was evaluation index, X1 was DL-Met level, and X2 was L-Met level.

图1 L-蛋氨酸相对于DL-蛋氨酸的相对生物学效价

Fig.1 Relative biological titer of L-Met versus DL-Met

2.3 黄羽肉鸡饲粮DL-蛋氨酸和L-蛋氨酸需要量

表6可知,以平均日增重为评价指标,由二次曲线回归分析得出,黄羽肉鸡31~60日龄阶段饲粮DL-蛋氨酸和L-蛋氨酸最适添加水平分别为0.16%和0.20%,相应饲粮蛋氨酸需要量分别为0.42%和0.46%,每日需要量分别为0.330和0.340 g/d;由单斜率折线回归分析得出,31~60日龄阶段饲粮DL-蛋氨酸和L-蛋氨酸最适添加水平分别为0.10%和0.15%,相应饲粮蛋氨酸需要量分别为0.36%和0.41%,每日需要量分别为0.276和0.324 g/d。
表6 31~60日龄黄羽肉鸡饲粮蛋氨酸添加水平与平均日增重和料重比的回归方程

Table 6 Regression equations of dietary Met supplemental level with average daily gain and feed to gain ratio of yellow-feathered broilers from 31 to 60 days of age

项目
Items
构型
Configuration
回归方程
Regression
equations
决定系数
R2
P
P-value
最适添加水平
Optimal
supplemental
level/%
推荐添加水平
Recommended
supplemental
level/%1)
每日需要量
Daily
requirement/
(g/d)2)
平均日增重
ADG
DL-蛋氨酸
DL-Met
Y=-112.69X2+36.84X+26.81 0.67 <0.01 0.16 0.42 0.330
Y=26.12X+27.05,X<0.10;
Y=29.53,X≥0.10
0.48 <0.01 0.10 0.36 0.276
L-蛋氨酸
L-Met
Y=-63.71X2+34.40X+26.86 0.73 <0.01 0.20 0.46 0.340
Y=26.19X+27.00,X<0.15;
Y=30.96,X≥0.15
0.70 <0.01 0.15 0.41 0.324
料重比F/G DL-蛋氨酸
DL-Met
Y=7.08X2-2.44X+2.82 0.72 <0.01 0.16 0.42 0.324
Y=-1.96X+2.82,X<0.10;
Y=2.62,X≥0.10
0.73 <0.01 0.10 0.36 0.277
L-蛋氨酸
L-Met
Y=6.39X2-2.31X+2.81 0.84 <0.01 0.17 0.43 0.340
Y=-1.83X+2.80,X<0.11
Y=2.61,X≥0.11
0.83 <0.01 0.11 0.37 0.292

1)推荐添加水平=最适添加水平+基础饲粮中蛋氨酸水平(0.26%)。Recommended supplemental level=optimal supplemental level+Met level in basal diet (0.26%).

2)每日需要量=推荐添加水平×每日采食量,每日采食量为各组的平均日采食量。Daily requirement=recommended supplemental level×daily feed intake, where daily feed intake was the average daily feed intake in each group.

以料重比为评价指标,由二次曲线回归分析得出,黄羽肉鸡31~60日龄阶段饲粮DL-蛋氨酸和L-蛋氨酸最适添加水平分别为0.16%和0.17%,相应饲粮蛋氨酸需要量分别为0.42%和0.43%,每日需要量分别为0.324和0.340 g/d;由单斜率折线回归分析得出,31~60日龄阶段饲粮DL-蛋氨酸和L-蛋氨酸最适添加水平分别0.10%和0.11%,相应饲粮蛋氨酸需要量分别为0.36%和0.37%,每日需要量分别为0.277和0.292 g/d。

2.4 蛋氨酸构型和添加水平对黄羽肉鸡胴体品质的影响

表7可知,与对照组相比,饲粮添加L-蛋氨酸显著提高60日龄黄羽肉鸡胸肌率(P<0.05),饲粮添加DL-蛋氨酸有提高60日龄黄羽肉鸡胸肌率的趋势(P=0.06)。由表8可知,与对照组相比,饲粮添加不同构型和不同水平蛋氨酸对80日龄胴体品质均无显著影响(P>0.05)。
表7 蛋氨酸构型和添加水平对60日龄黄羽肉鸡胴体品质的影响

Table 7 Effects of Met configuration and supplemental level on carcass quality of yellow-feathered broilers at 60 days of age %

项目
Items
添加水平
Supplemental
levels/%
屠体率
Carcass
rate
半净膛率
Semi-
evisceration
rate
全净膛率
Evisceration
rate
胸肌率
Breast
muscle
rate
腿肌率
Leg muscle
rate
腹脂率
Abdominal
fat rate
基础饲粮Basal diet 0.00 87.98 80.01 65.67 14.65 18.92 3.56
DL-蛋氨酸饲粮
DL-Met diet
0.04 88.42 80.14 65.46 15.18 17.96 4.11
0.08 87.80 79.29 65.50 16.38 20.06 3.69
0.12 88.02 80.78 66.93 16.05 18.96 3.61
0.16 88.69 81.12 67.51 16.10 20.03 3.77
0.20 88.34 80.84 66.80 16.19 18.68 4.06
L-蛋氨酸饲粮
L-Met diet
0.04 88.31 80.49 64.60 16.56 20.28 4.17
0.08 87.90 80.12 66.49 15.83 19.71 3.89
0.12 88.37 80.54 66.73 15.71 18.91 3.89
0.16 88.27 81.33 67.40 17.33 17.68 4.14
0.20 87.98 80.38 66.24 16.86 19.75 4.19
均值标准误SEM 0.42 0.67 0.88 0.64 0.71 0.29

构型Configuration
DL-蛋氨酸DL-Met 88.25 80.43 66.44 15.98 19.14 3.85
L-蛋氨酸L-Met 88.17 80.57 66.29 16.46 19.27 4.06
PP-value
对照vs DL-蛋氨酸CON vs DL-Met 0.55 0.57 0.43 0.06 0.78 0.36
对照vs L-蛋氨酸CON vs L-Met 0.69 0.45 0.52 0.01 0.66 0.12
DL-蛋氨酸vs L-蛋氨酸
DL-Met vs L-Met
0.74 0.75 0.79 0.24 0.77 0.25
表8 蛋氨酸构型和添加水平对80日龄黄羽肉鸡胴体品质的影响

Table 8 Effects of Met configuration and supplemental level on carcass quality of yellow-feathered broilers at 80 days of age %

项目
Items
添加水平
Supplemental
levels/%
屠体率
Carcass
rate
半净膛率
Semi-
evisceration
rate
全净膛率
Evisceration
rate
胸肌率
Breast
muscle rate
腿肌率
Leg muscle
rate
腹脂率
Abdominal
fat rate
基础饲粮Basal diet 0.00 90.74 83.57 69.99 17.69 20.32 4.51
DL-蛋氨酸饲粮
DL-Met diet
0.04 91.12 85.30 71.91 17.67 18.73 4.04
0.08 90.99 83.52 70.31 18.06 19.80 4.19
0.12 91.15 83.90 70.68 18.10 20.07 3.76
0.16 89.77 82.64 69.21 18.04 19.60 4.20
0.20 91.25 85.31 71.84 17.80 19.28 4.69
L-蛋氨酸饲粮
L-Met diet
0.04 90.34 82.69 69.41 17.75 20.50 3.90
0.08 91.37 85.63 72.02 16.82 19.06 4.23
0.12 91.17 83.23 70.83 18.48 20.00 3.92
0.16 90.41 83.11 69.96 17.54 20.44 3.71
0.20 90.39 83.63 69.77 17.48 20.38 4.80
均值标准误SEM 0.35 1.03 1.04 0.53 0.45 0.31

构型Configuration
DL-蛋氨酸DL-Met 90.86 84.14 70.79 17.93 19.49 4.18
L-蛋氨酸L-Met 90.74 83.66 70.40 17.61 20.08 4.11
PP-value
对照vs DL-蛋氨酸CON vs DL-Met 0.75 0.61 0.48 0.68 0.13 0.32
对照vs L-蛋氨酸CON vs L-Met 1.00 0.93 0.72 0.89 0.62 0.23
DL-蛋氨酸vs L-蛋氨酸
DL-Met vs L-Met
0.58 0.47 0.55 0.34 0.11 0.74

2.5 蛋氨酸构型和添加水平对80日龄黄羽肉鸡肉品质的影响

表9可知,与对照组相比,饲粮添加DL-蛋氨酸和L-蛋氨酸均显著降低80日龄黄羽肉鸡胸肌剪切力(P≤0.05),对其他肉品质指标无显著影响(P>0.05)。2种构型蛋氨酸添加组之间胸肌肉品质也无显著差异(P>0.05)。
表9 蛋氨酸构型和添加水平对80日龄黄羽肉鸡肉品质的影响

Table 9 Effects of Met configuration and supplemental level on meat quality of yellow-feathered broilers at 80 days of age

项目
Items
添加水平
Supplemental
levels/%
剪切力
Shear
force/N
24 h滴
水损失
Drip loss
at 24 h/%
pH 45 min肉色
Meat color at 45 min
24 h肉色
Meat color at 24 h
45 min 24 h 亮度L* 红度a* 黄度b* 亮度L* 红度a* 黄度b*
基础饲粮
Basal diet
0.00 32.10 2.08 5.57 5.64 60.08 10.97 13.67 67.14 26.54 65.70
DL-蛋氨
酸饲粮
DL-
Met diet
0.04 29.33 1.98 5.69 5.61 59.98 11.61 12.68 67.29 25.60 63.66
0.08 23.36 1.96 5.65 5.62 62.16 10.94 13.99 69.21 26.47 64.93
0.12 20.24 2.34 5.78 5.61 60.55 10.89 16.19 69.01 28.15 67.78
0.16 28.31 2.20 5.52 5.65 62.28 9.73 13.55 69.22 26.68 67.68
0.20 22.60 2.07 5.80 5.59 59.58 11.22 17.00 68.78 28.88 68.57
L-蛋氨
酸饲粮
L-Met diet
0.04 26.66 2.26 5.73 5.65 60.52 10.81 15.14 67.26 27.80 64.30
0.08 20.45 2.20 5.57 5.62 61.81 10.34 14.40 68.62 26.47 65.60
0.12 24.85 2.12 5.69 5.67 59.46 11.17 17.97 68.91 28.48 69.06
0.16 23.23 2.04 5.52 5.65 60.71 11.78 14.36 67.71 27.16 64.53
0.20 19.23 2.36 5.80 5.62 60.47 11.34 15.97 68.04 27.97 67.98
均值标准误
SEM
3.30 0.26 0.10 0.03 0.88 0.40 1.32 0.70 1.09 1.68


构型
Configuration
DL-蛋氨酸
DL-Met
24.77 2.11 5.69 5.61 60.91 10.88 14.68 68.70 27.16 66.52
L-蛋氨酸
L-Met
22.88 2.20 5.66 5.64 59.99 11.09 15.57 68.11 27.58 66.29
PP-value
对照vs DL-蛋氨酸
CON vs DL-Met
0.05 0.91 0.27 0.30 0.40 0.83 0.49 0.07 0.61 0.66
对照vs L-蛋氨酸
CON vs L-Met
0.01 0.69 0.39 0.90 0.92 0.79 0.20 0.21 0.39 0.75
DL-蛋氨酸vs
L-蛋氨酸
DL-Met vs L-Met
0.37 0.61 0.67 0.12 0.11 0.40 0.29 0.19 0.55 0.83

2.6 蛋氨酸构型和添加水平对黄羽肉鸡血浆蛋氨酸代谢相关酶活性的影响

表10可知,与对照组相比,饲粮添加DL-蛋氨酸和L-蛋氨酸均显著降低60日龄黄羽肉鸡血浆PC活性(P<0.05);饲粮添加DL-蛋氨酸显著降低血浆BHMT活性(P<0.05);饲粮添加L-蛋氨酸显著降低血浆MAT活性(P<0.05),显著提高血浆D-AAO活性(P<0.05)。与饲粮添加DL-蛋氨酸相比,饲粮添加L-蛋氨酸显著提高60日龄黄羽肉鸡血浆D-AAO、BHMT和GNMT活性(P<0.05),显著降低血浆MAT和PC活性(P<0.05)。
表10 蛋氨酸构型和添加水平对60日龄黄羽肉鸡血浆蛋氨酸代谢相关酶活性的影响

Table 10 Effects of Met configuration and supplemental level on plasma Met metabolism related enzyme activity of yellow-feathered broilers at 60 days of age

项目
Items
添加水平
Supplemental
levels/%
D-氨基
酸氧化酶
D-AAO/
(pg/mL)
甲硫氨酸
腺苷转移酶
MAT/
(pg/mL)
甘氨酸-N-
甲基转移酶
GNMT/
(ng/L)
甜菜碱-同
型半胱氨酸
甲基转移酶
BHMT/
(ng/L)
胱硫醚-
β-合成酶
CBS/
(pg/mL)
磷脂
酰胆碱
PC/
(ng/L)
基础饲粮Basal diet 0.00 12.96 12.83 14.05 24.11 227.26 39.40
DL-蛋氨酸饲粮
DL-Met diet
0.04 13.21 12.52 13.61 22.29 220.96 38.61
0.08 14.18 12.92 13.69 21.65 222.62 38.18
0.12 13.27 11.97 12.50 21.41 221.56 37.79
0.16 12.88 11.35 13.22 20.96 222.60 36.88
0.20 14.15 12.39 12.49 21.57 231.80 36.90
L-蛋氨酸饲粮
L-Met diet
0.04 14.11 11.83 13.63 22.28 220.44 33.87
0.08 15.44 12.18 13.49 23.45 226.66 29.93
0.12 14.45 11.60 13.87 25.02 241.32 34.74
0.16 14.75 11.50 13.57 24.31 229.53 35.09
0.20 13.96 11.61 14.53 23.70 218.91 30.55
均值标准误SEM 0.40 0.36 0.48 0.89 4.40 0.77

构型Configuration
DL-蛋氨酸DL-Met 13.55 12.27 13.11 21.58 223.99 37.68
L-蛋氨酸L-Met 14.54 11.76 13.82 23.73 228.06 32.80
PP-value
对照vs DL-蛋氨酸CON vs DL-Met 0.18 0.11 0.07 <0.01 0.46 0.04
对照vs L-蛋氨酸CON vs L-Met <0.01 <0.01 0.65 0.70 0.98 <0.01
DL-蛋氨酸vs L-蛋氨酸DL-Met vs L-Met <0.01 0.02 0.02 <0.01 0.18 <0.01
表11可知,与对照组相比,饲粮添加DL-蛋氨酸和L-蛋氨酸均显著降低80日龄黄羽肉鸡血浆BHMT活性(P<0.05),饲粮添加DL-蛋氨酸显著降低血浆GNMT活性(P<0.05)。与饲粮添加DL-蛋氨酸相比,饲粮添加L-蛋氨酸显著提高80日龄黄羽肉鸡血浆GNMT和CBS活性(P<0.05)。
表11 蛋氨酸构型和添加水平对80日龄黄羽肉鸡血浆蛋氨酸代谢相关酶活性的影响

Table 11 Effects of Met configuration and supplemental level on plasma Met metabolism related enzyme activity of yellow-feathered broilers at 80 days of age

项目
Items
添加水平
Supplemental
levels/%
D-氨基
酸氧化酶
D-AAO/
(pg/mL)
甲硫氨酸
腺苷转移酶
MAT/
(pg/mL)
甘氨酸-N-
甲基转移酶
GNMT/
(ng/L)
甜菜碱-同型
半胱氨酸
甲基转移酶
BHMT/
(ng/L)
胱硫醚-
β-合成酶
CBS/
(pg/mL)
磷脂
酰胆碱
PC/
(ng/L)
基础饲粮Basal diet 0.00 18.85 19.33 14.35 23.94 218.64 38.27
DL-蛋氨酸饲粮
DL-Met diet
0.04 18.19 20.92 13.10 19.67 209.07 38.57
0.08 19.86 19.85 11.50 22.15 214.37 37.78
0.12 18.81 18.14 8.97 21.24 217.28 35.91
0.16 19.96 18.28 9.30 21.12 224.41 36.23
0.20 20.45 17.00 10.89 22.50 225.09 34.07
L-蛋氨酸饲粮
L-Met diet
0.04 18.35 14.30 10.59 18.06 219.93 33.37
0.08 20.25 23.05 16.74 26.28 230.22 34.84
0.12 20.48 19.98 19.31 23.55 245.37 36.39
0.16 20.23 19.57 16.06 22.38 226.18 38.92
0.20 20.74 17.92 18.25 19.21 222.70 38.76
均值标准误SEM 0.76 0.93 1.18 0.73 7.82 1.00

构型Configuration
DL-蛋氨酸DL-Met 19.45 18.84 10.87 21.34 218.04 36.51
L-蛋氨酸L-Met 20.00 19.04 16.00 22.18 228.88 36.45
PP-value
对照vs DL-蛋氨酸CON vs DL-Met 0.47 0.63 <0.01 <0.01 0.94 0.10
对照vs L-蛋氨酸CON vs L-Met 0.17 0.72 0.12 <0.01 0.21 0.09
DL-蛋氨酸vs L-蛋氨酸DL-Met vs L-Met 0.26 0.83 <0.01 0.16 0.02 0.93

3 讨论

3.1 蛋氨酸构型和添加水平对黄羽肉鸡生长性能的影响

目前,关于饲粮蛋氨酸水平对鸡生长性能影响的结果并不一致。杨秀娟等[12]研究发现,7~12周龄武定鸡饲粮添加0.25%~0.65%蛋氨酸对其平均日增重和平均日采食量均无显著影响。李亮[13]研究发现,饲粮添加高水平(0.2%~0.3%)DL-蛋氨酸可以显著提高稚鸡42~49日龄平均日采食量。有研究报道,在低蛋白质饲粮中添加DL-蛋氨酸可以改善肉仔鸡(11~24日龄)饲粮氨基酸平衡,提高肉鸡生长性能,从而降低生产成本[14]。根据以上研究结果表明,在饲养前期和中期,饲粮蛋氨酸水平对肉鸡生长性能有显著影响,但对于饲养后期的作用不显著。本试验结果表明,饲粮添加不同水平蛋氨酸均显著提高黄羽肉鸡60日龄体重以及31~60日龄平均日采食量、平均日增重,并显著降低料重比;但对61~80日龄生长性能无显著影响,这与前人研究结果一致,分析原因可能是因为肉鸡生长后期需要的蛋氨酸减少[9,15],基础饲粮中的蛋氨酸已经能够满足肉鸡的生长需要。

3.2 L-蛋氨酸相对于DL-蛋氨酸的相对生物学效价

DL-蛋氨酸与L-蛋氨酸的利用效率存在差异,在D-蛋氨酸氧化的过程中,有少量酮酸会自发脱羧形成β-甲基硫-丙酸,且该过程不可逆,这表明D-蛋氨酸无法完全转化为L-蛋氨酸[16]。目前,对于DL-蛋氨酸与L-蛋氨酸的相对生物学效价的差异还存在争议。Htoo等[17]研究表明,饲粮添加等量DL-蛋氨酸和L-蛋氨酸,以平均日增重为评价指标,通过斜率比法回归分析得出,L-蛋氨酸相对于DL-蛋氨酸的相对生物学效价为99.6%。Espinosa等[18]研究发现,断奶仔猪以氮沉积为评价指标,D-蛋氨酸相对于L-蛋氨酸的相对生物学效价为101%。Kong等[19]在肥育猪饲粮中分别添加DL-蛋氨酸和L-蛋氨酸,以氮平衡为评价指标发现,DL-蛋氨酸与L-蛋氨酸在生物功效上没有差异。Asasi等[20]研究报道,分别以平均日增重和料重比为评价指标,通过线性回归分析得出,DL-蛋氨酸相对于L-蛋氨酸的相对生物学效价分别为94.97%和95.63%。与此相反,Wang等[21]研究表明,饲粮添加L-蛋氨酸比添加DL-蛋氨酸在肉仔鸡中具有更高的饲料转化效率。Zhang等[7]以平均日增重和料重比为评价指标,在樱桃谷鸭中L-蛋氨酸相对于DL-蛋氨酸的相对生物学效价为120%~140%。Park等[22]以体增重为评价指标,在火鸡中L-蛋氨酸相对于DL-蛋氨酸的相对生物学效价为160%。本试验中,以黄羽肉鸡31~60日龄平均日增重为评价指标,L-蛋氨酸相对于DL-蛋氨酸的相对生物学效价约为150%。假定化学合成的DL-蛋氨酸中的L-蛋氨酸效价与发酵得到的L-蛋氨酸效价一样,则D-蛋氨酸的效价相当于L-蛋氨酸效价的1/3。

3.3 蛋氨酸构型和添加水平对黄羽肉鸡胴体品质和肉品质的影响

胸肌是肉鸡身上可食用部分最多的组织,提高鸡胸肉产量,可以提高肉鸡养殖的经济效益。Akter等[23]在饲粮中添加适量的L-蛋氨酸提高了肉仔鸡屠宰率和经济效益,降低了生产成本。Zhan等[24]研究表明,饲粮添加DL-蛋氨酸能显著提高肉鸡胸肌产量,降低腹脂含量。本试验也得到了相似的结果,即饲粮添加蛋氨酸可提高60日龄黄羽肉鸡胸肌率,且L-蛋氨酸提高胸肌率的效果要好于DL-蛋氨酸。席鹏彬等[25]研究发现,在岭南黄鸡饲粮中添加适宜水平蛋氨酸可以改善胴体品质,促进母鸡羽毛蛋白质沉积,但添加水平过高会对胴体品质产生不利影响。研究表明,蛋氨酸不足会导致宰后肉鸡胸肌pH下降,更容易导致PSE肉的产生[3]。蒋雪樱[26]在青脚麻鸡上的试验也得到相同结果,并推测是由于添加蛋氨酸降低了丙酮酸激酶活性,从而抑制了糖酵解反应和机体乳酸堆积。嫩度是评价肉质物理特性的重要指标,反映肉中各种蛋白质的结果特性和脂肪分布状态等。剪切力的大小与嫩度呈负相关,有研究发现蛋氨酸能够降低肌肉剪切力,提高肌肉嫩度[27-28]。本试验发现,饲粮添加蛋氨酸可以降低黄羽肉鸡胸肌剪切力,提高肌肉嫩度,这与上述结果一致,说明充足蛋氨酸对黄羽肉鸡胴体品质和肉品质具有改善作用,同时L-蛋氨酸的效果要优于DL-蛋氨酸。

3.4 蛋氨酸构型和添加水平对黄羽肉鸡血浆蛋氨酸代谢相关酶活性的影响

D-AAO是一种含有黄素腺嘌呤二核苷酸(flavin adenine dinucleotide,FAD)的类黄素蛋白酶,依赖FAD催化D-蛋氨酸氧化脱氨生成α-酮-蛋氨酸,是D-蛋氨酸转化为L-蛋氨酸的限速酶[29]。Zhang等[30]研究发现,DL-蛋氨酸添加组肉鸡十二指肠和空肠D-AAO活性要高于L-蛋氨酸添加组,在肝脏中则相反。本试验中,L-蛋氨酸添加组黄羽肉鸡60日龄血浆D-AAO活性显著高于DL-蛋氨酸添加组,这与Zhang等[30]在肝脏上的研究结果一致;而2组之间黄羽肉鸡80日龄血浆D-AAO活性则无显著差异,这可能与肉鸡生长后期对蛋氨酸的需要量降低有关。
MAT耗能催化L-蛋氨酸向S-腺苷-L-蛋氨酸(S-adenosyl-L-methionine,SAM)的转化,SAM被GNMT催化反应转化为S-腺苷-L-同型半胱氨酸(S-adenosyl-L-homocysteine,SAH),SAH随后被腺苷同型半胱氨酸酶(adenosylhomocysteinase,AHCY)水解为同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)。Hcy通过BHMT催化,以组织特异性维生素B12作为辅因子,利用甜菜碱作为活性甲基供体完成再甲基化[31];或是通过甲硫氨酸合成酶(methionine synthetase,MS)催化,以5-甲基四氢叶酸的甲基和维生素B12作为辅因子,利用叶酸作为活性甲基供体完成再甲基化;再或是通过CBS催化进入转硫途径,不可逆地转化为半胱氨酸,形成牛磺酸等其他硫醇产物[32]。本试验中,在生长全期,饲粮添加DL-蛋氨酸和L-蛋氨酸显著降低了黄羽肉鸡血浆BHMT活性,对血浆MAT活性无显著影响,这与刘怡琳[33]的研究结果相似,蛋氨酸缺乏影响了蛋氨酸的甲基化、再甲基化和转硫途径。本试验中,随着饲粮蛋氨酸添加水平的提高,黄羽肉鸡血浆MAT活性下降。当体内蛋氨酸含量不足时,会诱导蛋氨酸甲基化和再甲基化循环的机制,抑制Hcy转硫,以确保活性甲基的正常供给,并提高对蛋氨酸的利用率,以弥补蛋氨酸缺乏导致的影响。随着饲粮蛋氨酸水平提高,体内蛋氨酸不再缺乏,此时则促进Hcy进入转硫途径生成半胱氨酸,激活CBS,降低再甲基化组作用。在生长中后期,随着肉鸡蛋氨酸需要量减少,蛋氨酸分解代谢趋于平衡状态。SAM可以为PC的合成提供甲基基团,研究表明甲基供体对于蛋氨酸转甲基化的有效性至关重要,饲粮添加蛋氨酸可以促进蛋白质合成[34]

3.5 中速型黄羽肉鸡蛋氨酸需要量

在黄羽肉鸡营养标准(NY/T 3645—2020)[9]中,中速型黄羽肉鸡的蛋氨酸需要量为31~60日龄为0.41%,61~80日龄为0.35%。NRC(1994)[15]提出,肉仔鸡4~6周龄和7周龄至出栏的蛋氨酸需要量分别为0.38%和0.32%。本研究根据二次曲线回归模型估测,以平均日增重为评价指标,中速型黄羽肉鸡31~60日龄饲粮DL-蛋氨酸和L-蛋氨酸需要量分别为0.42%和0.46%;以料重比为评价指标,饲粮DL-蛋氨酸和L-蛋氨酸需要量分别为0.42%和0.43%。考虑到氨基酸需要量的评价指标通常以平均日增重为主,故本研究推荐中速型黄羽肉鸡中速型黄羽肉鸡31~60日龄饲粮DL-蛋氨酸和L-蛋氨酸需要量分别为0.42%和0.46%,61~80日龄饲粮蛋氨酸需要量不高于0.23%。中速型黄羽肉鸡61~80日龄饲粮蛋氨酸需要量研究结果低于黄羽肉鸡营养标准(NY/T 3645—2020)[9]和NRC(1994)[15],而31~60日龄饲粮以2种构型蛋氨酸计的蛋氨酸需要量均略高于上述2个标准。本试验结果说明,与白羽肉鸡相比,黄羽肉鸡中鸡阶段对蛋氨酸的需要量更高,而大鸡阶段对蛋氨酸需要量则更低;此外,相较于DL-蛋氨酸,中速型黄羽肉鸡中鸡阶段使用L-蛋氨酸可以降低蛋氨酸的使用量,大鸡阶段则可以不用额外添加。

4 结论

在本试验条件下:
① 以平均日增重为评价指标,根据二次曲线回归分析得出,中速型黄羽肉鸡31~60日龄饲粮DL-蛋氨酸和L-蛋氨酸最适添加水平分别为0.16%和0.20%,相应饲粮蛋氨酸需要量分别为0.42%和0.46%;61~80日龄饲粮蛋氨酸需要量不高于0.23%。
② 以平均日增重为评价指标,根据非线性曲线拟合得出,中速型黄羽肉鸡31~60日龄阶段L-蛋氨酸相对于DL-蛋氨酸的相对生物学效价为154.1%。
③ 饲粮添加蛋氨酸可以提高中速型黄羽肉鸡31~60日龄生长性能;饲粮添加L-蛋氨酸可以显著提高60日龄黄羽肉鸡胸肌率,降低80日龄胸肌剪切力。
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