动物营养学报 >

2025 , Vol. 37 >Issue 2: 1011 - 1021

DOI: https://doi.org/10.12418/CJAN2025.088

研究论文

迷迭香提取物对蛋鸡产蛋性能、血清指标和肝脏脂质代谢的影响

  • 王萱 , 1 ,
  • 陈泽豪 2 ,
  • 石玉祥 1 ,
  • 刘华 3, 4 ,
  • 刘秀斌 3, 4 ,
  • 宋伟光 , 2, 5, * ,
  • 曾建国 , 1, 4, *
展开
  • 1 河北工程大学生命科学与食品工程学院,邯郸 056038
  • 2 晨光生物科技集团股份有限公司,邯郸 057250
  • 3 中兽药湖南省重点实验室,长沙 410128
  • 4 湖南农业大学动物医学院,长沙 410128
  • 5 河北省植物源动物保健品技术创新中心,邯郸 057250
*宋伟光,高级工程师,E-mail: ;
曾建国,教授,硕士生导师,E-mail:

王 萱(2000—),女,河北唐山人,硕士研究生,从事天然提取物的应用研究。E-mail:

Copy editor: 菅景颖

收稿日期: 2024-08-26

  网络出版日期: 2025-02-16

基金资助

国家重点研发计划(2023YFD13012)

河北省三期现代农业产业技术体系蛋禽创新团队资助项目(HBCT2024260205)

收起

Effects of Rosemary Extract on Laying Performance, Serum Indicators and Liver Lipid Metabolism of Laying Hens

  • WANG Xuan , 1 ,
  • CHEN Zehao 2 ,
  • SHI Yuxiang 1 ,
  • LIU Hua 3, 4 ,
  • LIU Xiubin 3, 4 ,
  • SONG Weiguang , 2, 5, * ,
  • ZENG Jianguo , 1, 4, *
Expand
  • 1 School of Life Sciences and Food Engineering, Hebei University of Engineering, Handan 056038, China
  • 2 Chenguang Biotechnology Group Co., Ltd., Handan 057250, China
  • 3 Hunan Provincial Key Laboratory of Traditional Chinese Veterinary Medicine, Changsha 410128, China
  • 4 College of Veterinary Medicine, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China
  • 5 Hebei Province Plant Source Animal Health Products Technology Innovation Center, Handan 057250, China
*SONG Weiguang, senior engineer, E-mail: ;
ZENG Jianguo, professor, E-mail:

Received date: 2024-08-26

  Online published: 2025-02-16

Fold

摘要

本试验旨在研究饲粮中添加不同水平的迷迭香提取物对蛋鸡产蛋性能、血清指标及肝脏脂质代谢的影响。选取体重相近、17周龄的海兰灰蛋鸡504只,随机分为4个组,每组6个重复,每个重复21只。对照组(CON组)饲喂基础饲粮,试验组分别饲喂在基础饲粮中添加250(RE250组)、500(RE500组)和750 mg/kg(RE750组)迷迭香提取物的试验饲粮。预试期1周,正试期10周。结果显示:1)饲粮中添加不同水平的迷迭香提取物对蛋鸡的产蛋率无显著影响(P>0.05)。180日龄时RE250组蛋黄颜色较CON组显著升高(P<0.05)。2)与CON组相比,RE250和RE750组血清高密度脂蛋白(HDL)含量显著增高(P<0.05)。3)与CON组相比,RE250和RE500组血清总抗氧化能力(T-AOC)显著升高(P<0.05),RE250和RE750组血清超氧化物歧化酶(SOD)活性显著升高(P<0.05)。4)与CON组相比,饲粮中添加250、500和750 mg/kg的迷迭香提取物均显著降低了血清白细胞介素-6(IL-6)含量(P<0.05)。5)与CON组相比,添加迷迭香提取物各试验组的肝脏中脂滴占比降低;同时,RE250、RE500组肝脏脂蛋白脂肪酶(LPL)mRNA相对表达量显著升高(P<0.05),RE250、RE750组肝脏脂肪酸合成酶(FAS)mRNA相对表达量显著降低(P<0.05)。综上可知,饲粮中添加迷迭香提取物对蛋鸡的产蛋率无显著影响,但可改善蛋黄颜色,提高机体抗氧化能力和免疫力,调节肝脏脂质代谢。

关键词： 迷迭香提取物; 蛋鸡; 产蛋性能; 抗氧化; 免疫; 脂质代谢

本文引用格式

王萱 , 陈泽豪 , 石玉祥 , 刘华 , 刘秀斌 , 宋伟光 , 曾建国 . 迷迭香提取物对蛋鸡产蛋性能、血清指标和肝脏脂质代谢的影响[J]. 动物营养学报, 2025 , 37(2) : 1011 -1021 . DOI: 10.12418/CJAN2025.088

Abstract

This study aimed to investigate the effects of adding different levels of rosemary extract (RE) into diets on the laying performance, serum indicators and liver lipid metabolism of laying hens. A total of 504 seventeen-week-old Hy-Line grey laying hens with comparable body weight were selected and randomly assigned to four groups, each consisting of 6 replicates with 21 hens per replicate. Hens in control group (CON group) fed a basal diet, while those in experimental groups fed experimental diets which supplemented with RE at levels of 250 (RE250 group), 500 (RE500 group) and 750 mg/kg (RE750 group) on the basis of the basal diet. The pretrial period lasted for one week, followed by a formal trial period of ten weeks.The results showed as follows: 1) adding different levels of RE into diets had no significant effect on laying rate (P>0.05). At 180 days of age, the yolk color of the RE250 group was significantly higher than that of the CON group (P<0.05). 2) Compared with the CON group, serum high-density lipoprotein (HDL) content in RE250 and RE750 groups were significantly increased (P<0.05). 3) Compared with the CON group, the serum total antioxidant capacity (T-AOC) of the RE250 and RE500 groups was significantly increased (P<0.05), and the serum superoxide dismutase (SOD) activity of the RE250 and RE750 groups was significantly increased (P<0.05). 4) Compared with the CON group, adding 250, 500 and 750 mg/kg RE in diets significantly reduced serum interleukin-6 (IL-6) content (P<0.05). 5) Compared with the CON group, the ratio of lipid droplets in liver of experimental groups decreased, and the mRNA relative expression level of liver lipoprotein lipase (LPL) of the RE250 and RE500 groups was significantly increased (P<0.05), while the mRNA relative expression level of liver fatty acid synthesis enzyme (FAS) of the RE250 and RE750 groups were significantly decreased (P<0.05). In conclusion, adding RE into the diets has no significant effect on laying rate, but it can improve yolk color, anti-oxidative ability and immunity, and regulate liver lipid metabolism of laying hens.[Chinese Journal of Animal Nutrition, 2025, 37(2):1011-1021]

Key words： rosemary extract; laying hens; laying performance; anti-oxidation; immune; lipid metabolism

迷迭香(Rosmarinus officinalis)是一种唇形科迷迭香属的多年生草本植物[1],它富含迷迭香酸、鼠尾草酸、萜类与精油类、熊果酸和黄酮类成分[2],这些成分可以抵御自由基的侵害,并且还可以抵御衰老、抑制细菌的繁殖和癌症的发展,被广泛应用于动物生产中[3]。迷迭香酸、鼠尾草酸、迷迭香精油在动物生产中表现出了较好的应用效果。台瑞青[4]研究发现,在育肥猪饲粮中添加200 mg/kg的迷迭香酸可以提高血清免疫球蛋白含量,增强机体免疫和抗氧化能力,并通过上调肝脏组织中的脂肪分解基因表达、下调脂肪合成基因的表达来改善脂肪代谢,缓解脂肪沉积。Rostami等[5]研究表明,在肉鸡饲粮中添加0.5%、1.0%的迷迭香粉(主要成分为鼠尾草酸)可以显著提高血浆球蛋白含量,增强机体免疫功能。马红等[6]研究发现,在断乳仔猪饲粮中添加300 mg/kg包被迷迭香精油具有改善饲料转化效率的作用。然而,关于迷迭香中的熊果酸在畜牧生产上的研究鲜见报道,熊果酸存在于迷迭香、百里香、苹果、橄榄等多种中草药和香料中,是一种含有30个碳原子、5个类异戊二烯环的五环三萜类化合物,其在水中溶解度低,在乙醇、氢氧化钠溶液、冰醋酸中溶解度较高[7],具有抗炎、抗癌症、抗糖尿病、抗氧化以及抑菌等多种生物学功能。熊果酸可介导抗炎、抗氧化信号通路,对肝脏再生、逆转肝脏纤维化以及治疗或预防脂肪肝、肝癌具有一定的功效。在应用方面,熊果酸可作为饲用抗生素的替代品应用于畜禽健康养殖中,也可作为潜在的保健产品,用于预防肝癌的发生[8]。随着人们对鸡蛋品质要求的日益提升,天然来源的迷迭香提取物作为一种多功效的饲料添加剂,越来越受到研究者的关注。然而,目前的研究主要集中在肉鸡、水产动物方面,在蛋鸡产蛋前期的应用研究关注度较少。因此,本试验探讨饲粮中添加迷迭香提取物对蛋鸡产蛋性能、血清生化指标及肝脏脂质代谢的影响,旨在为蛋鸡行业的无抗发展提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物和试验材料

试验动物为由河北华帅禽业育种有限公司提供的17周龄海兰灰蛋鸡,试验所用迷迭香提取物的主要成分为熊果酸,含量为50%,以粉剂形式混合添加到饲粮中。

1.2 试验设计

动物试验伦理批准编号:SYXK(冀)2022-006,审批机构:河北省科学技术厅。
将504只机体状态健康的蛋鸡随机分为4个组,每组6个重复,每个重复21只。对照组(CON组)饲喂基础饲粮,3个试验组在基础饲粮中分别添加250(RE250组)、500(RE500组)、750 mg/kg(RE750组)的迷迭香提取物,开展为期1周的预试验、为期10周的正式试验。基础饲粮为玉米-豆粕型粉状饲粮,参照《鸡饲养标准》(NY/T 33—2004)[9]营养需要标准配制,其组成及营养水平见表1。饲粮的粗蛋白质含量根据GB/T 6432—2018[10]采用凯氏定氮法进行测定,钙含量根据GB/T 6436—2018[11]采用乙二胺四乙酸(EDTA)络合滴定法进行测定,总磷含量根据GB/T 6437—2018[12]采用分光光度法进行测定,赖氨酸、蛋氨酸含量根据GB/T 18868—2002[13]采用近红外光谱法进行测定,代谢能和有效磷含量参考《中国饲料成分及营养价值表(2019年第30版)》[14]进行计算。
表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)

Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) %

原料Ingredients 含量Content 营养水平Nutrient levels2) 含量Content
玉米Com 62.5 代谢能ME/(MJ/kg) 11.24
豆粕Soybean meal 24.0 粗蛋白质CP 15.90
大豆油Soybean oil 0.5 钙Ca 3.95
石粉Lime stone 8.0 总磷TP 0.62
预混料Premix1) 5.0 有效磷AP 0.42
合计Total 100.0 赖氨酸Lys 0.75
蛋氨酸Met 0.59

1)预混料为每千克饲粮提供The premix provided the following per kg of the basal diet:VA 5 375 IU,VD3 1 800 IU,VE 30.00 mg,VK3 2.50 mg,VB1 1.10 mg,VB2 2.40 mg,烟酰胺 nicotinamide 35.00 mg,泛酸 pantothenic acid 8 mg,Cu 10 mg,Fe 250 mg,Mn 50 mg,Zn 50 mg。

2)代谢能和有效磷为计算值,其余为实测值。ME and AP were calculated values, while the others were measured values.

1.3 饲养管理

试验鸡饲养在3层全阶梯式鸡笼内,每个重复上中下各设有1笼,鸡只可以自由采食(不限量),饮水采用全天供应的模式。每天在08:00和16:00各饲喂1次,每天14:00定时收集当日鸡蛋。鸡舍采用自然通风和机械通风相结合的通风模式,保证16 h光照时间,每天记录鸡舍的温湿度,打扫舍内卫生并清理鸡粪,严格按照免疫程序进行免疫。

1.4 样品采集

在蛋鸡150和180日龄时分别选取96枚鸡蛋(每个重复4枚)用于检测蛋品质。试验结束后,以每个重复随机抓取1只鸡,翅下静脉采血10 mL于真空采血管中静置30 min,然后在1 776×g离心力下离心10 min,收集血清放置于-20 ℃冰箱中保存,待测血清生化、抗氧化及免疫指标。采血后的蛋鸡颈动脉放血致死,取肝脏右叶(1 cm×1 cm×1 cm)放于4%多聚甲醛固定液中固定,其上半部分用于制作苏木精-伊红(HE)染色切片,下半部分用于制作油红O染色切片,取肝脏左叶经液氮速冻后放置于-80 ℃冰箱保存,用于肝脏脂质代谢相关基因表达的检测。

1.5 检测指标及方法

1.5.1 产蛋性能

每天以重复为单位记录蛋鸡的产蛋数,计算产蛋率[产蛋率(%)=(总产蛋数/鸡只数)×100]。
使用蛋品质分析仪对每个鸡蛋样本的蛋白高度、哈氏单位、蛋重、蛋黄颜色等指标进行精确的检测。蛋壳强度是将完整的鸡蛋钝端向上、尖端向下垂直放置于蛋壳强度测定仪进行测定。蛋壳厚度是用镊子剥出蛋壳内壳膜后,使用蛋壳厚度测定仪分别测量蛋壳锐端、钝端及中间部分的厚度,取三者平均值。

1.5.2 血清生化指标

血清解冻后,使用上海酶联生物科技有限公司提供的试剂盒检测白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)含量,测定方法严格按照说明书进行以确保检测结果的准确性。

1.5.3 血清抗氧化指标

血清解冻后,使用上海酶联生物科技有限公司提供的试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及总抗氧化能力(T-AOC)与丙二醛(MDA)含量,测定方法严格按照说明书进行以确保检测结果的准确性。

1.5.4 血清免疫指标

血清解冻后,使用上海酶联生物科技有限公司提供的试剂盒检测免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)及白细胞介素-6(IL-6)含量,测定方法严格按照说明书进行以确保检测结果的准确性。

1.5.5 肝脏组织切片

HE染色切片:肝脏组织在4%多聚甲醛固定液中固定24 h后取出制成切片,将切片依次浸入二甲苯Ⅰ 20 min、二甲苯Ⅱ 20 min、无水乙醇Ⅰ 5 min、无水乙醇Ⅱ 5 min,然后放入75%酒精中浸泡5 min,最后用清水冲刷后进行染色:苏木素染液洗涤3~5 min,自来水洗后使用分化液进行分化,然后自来水洗、使用返蓝液进行返蓝处理后,用流水冲洗;在伊红染液中染色5 min;最后用不同梯度的酒精脱水、二甲苯透明后,进行中性树胶封片,使用Case Viewer软件观察切片。
油红O染色切片:肝脏组织在4%多聚甲醛固定液中固定24 h后取出制成切片,然后将切片进行冰冻,冰冻切片复温干燥,自来水洗,晾干;切片入油红染液浸染8~10 min(加盖避光),蒸馏水洗;75%酒精稍分化,蒸馏水洗;入苏木素染液染3~5 min,自来水洗,分化液分化,自来水洗,使用返蓝液进行返蓝处理后,流水冲洗,甘油明胶封片剂封片,使用Case Viewer软件观察切片。

1.5.6 肝脏脂质代谢相关基因表达

将冻存的肝脏组织取出,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法对肝脏脂质代谢相关基因脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂蛋白脂肪酶(LPL)、载脂蛋白极低密度脂蛋白(APO-VLDL)的表达情况进行检测。采用2-ΔΔCt法计算目的基因mRNA的相对表达量。RT-qPCR所需引物序列见表2。
表2 RT-qPCR所需引物序列

Table 2 Primer sequences for RT-qPCR

基因名称
Gene names		 引物序列
Primer sequences (5'—3')		 登录号
Accession number		 产物大小
Product size/bp
乙酰辅酶A羧化酶
ACC		 F:AACTACCGGAACTTCTCCACAAA
R:CGAAGACCACTGCCACTCCA		 NM_205505.2 148
脂肪酸合成酶
FAS		 F:TATAGATGTTGACCTGACCCACCA
R:TAGGTTCCGATAGACGGTGATG		 NM_001199487.2 101
脂蛋白脂肪酶
LPL		 F:GACGGTGACAGGAATGTATGAAA
R:CCAATCAATGAACATGGCAACA		 NM_205282.2 178
载脂蛋白极低密度脂蛋白
APO-VLDL		 F:CTGGTCAGTTCTTGCTGGATGTT
R:TGTTCCGCCAGTTTAGTGAGTCT		 NM_205483.3 100
甘油醛-3-磷酸脱氢酶
GAPDH		 F:ACTTTGGCATTGTGGAGGGT
R:GGACGCTGGGATGATGTTCT		 NM_204305.1 131

1.6 数据分析

试验数据使用Excel 2016软件进行初步整理后,利用SPSS 27.0软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA),并采用Duncan氏法进行多重比较,P<0.05表示差异显著,P<0.01表示差异极显著,0.05<P<0.10表示差异有显著趋势,结果以“平均值(mean)±标准差(SD)”表示。

2 结果与分析

2.1 迷迭香提取物对蛋鸡产蛋性能的影响

2.1.1 迷迭香提取物对蛋鸡产蛋率的影响

由表3可知,整个试验期内,各组之间产蛋率并无显著差异(P>0.05)。饲粮添加500和750 mg/kg迷迭香提取物时蛋鸡的17~20周龄产蛋率有提高趋势(P=0.092),比CON组分别提高了11.98%和15.59%;饲粮添加250 mg/kg迷迭香提取物时蛋鸡的25~28周龄产蛋率有提高趋势(P=0.097),与CON组相比提高了1.45%;在试验全期(17~28周龄),RE250、RE500和RE750组的产蛋率较CON组分别提高了0.78%、0.58%和0.54%。
表3 迷迭香提取物对蛋鸡产蛋率的影响

Table 3 Effects of rosemary extract on laying rate of laying hens

项目
Items		 组别Groups P值
P-value
CON RE250 RE500 RE750
17~20周龄17 to 20 weeks of age 18.95±2.01 18.12±2.23 21.53±1.74 22.45±3.41 0.092
21~24周龄21 to 24 weeks of age 93.13±3.25 90.89±5.23 90.67±3.33 90.93±2.78 0.357
25~28周龄25 to 28 weeks of age 96.62±2.47 98.05±1.92 96.76±1.28 95.72±1.95 0.097
17~28周龄17 to 28 weeks of age 67.94±1.42 68.48±1.11 68.34±2.17 68.31±2.55 0.724

同行数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著(P>0.05),不同小写字母表示差异显著(P<0.05),不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)。下表同。

In the same row, values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01). The same as below.

2.1.2 迷迭香提取物对蛋鸡蛋品质的影响

由表4可知,150日龄时,各组间蛋重、蛋黄颜色、蛋白高度、哈氏单位、蛋壳强度和蛋壳厚度均无显著差异(P>0.05);与CON组相比,RE750组的蛋重出现了增高的趋势(P=0.058),RE250、RE500和RE750组的蛋白高度出现了增高的趋势(P=0.053),哈氏单位也出现了增高的趋势(P=0.095),且均以RE750组表现最为突出。在180日龄时,RE250组的蛋黄颜色较CON组显著提高(P<0.05),其余蛋品质指标各组间无显著差异(P>0.05);与CON相比,饲粮中添加迷迭香提取物的3个试验组的蛋白高度有增高的趋势(P=0.067)。
表4 迷迭香提取物对蛋鸡蛋品质的影响

Table 4 Effects of rosemary extract on egg quality of laying hens

项目
Items		 组别Groups P值
P-value
CON RE250 RE500 RE750
150日龄150 days of age
蛋重Egg height/g 48.65±3.67 48.52±2.21 49.78±3.32 50.61±3.72 0.058
蛋黄颜色Egg yolk color 6.25±1.90 6.38±1.75 6.96±1.93 6.96±1.62 0.231
蛋白高度Albumen height/mm 5.31±2.65 6.75±2.42 6.23±2.63 6.89±2.37 0.053
哈氏单位Haugh unit 70.97±21.44 81.95±20.54 77.33±21.26 82.33±20.23 0.095
蛋壳强度Shell strength/N 45.53±5.00 42.68±2.92 44.88±4.24 43.16±6.89 0.230
蛋壳厚度Shell thickness/mm 0.36±0.02 0.36±0.01 0.36±0.02 0.35±0.02 0.070
180日龄180 days of age
蛋重Egg height/g 58.65±4.19 58.09±2.07 59.11±2.84 59.99±3.72 0.233
蛋黄颜色Egg yolk color 6.58±0.45b 7.67±0.42a 6.96±0.76ab 6.67±0.46b 0.015
蛋白高度Albumen height/mm 5.59±2.61 7.00±2.21 6.34±2.27 6.50±2.33 0.067
哈氏单位Haugh unit 70.96±22.38 81.33±20.81 75.88±18.89 75.47±23.83 0.146
蛋壳强度Shell strength/N 47.91±6.69 48.38±8.11 45.32±7.90 44.50±5.96 0.259
蛋壳厚度Shell thickness/mm 0.37±0.02 0.37±0.02 0.36±0.03 0.36±0.02 0.298

2.2 迷迭香提取物对蛋鸡血清生化指标的影响

由表5可知,与CON组相比,RE250和RE750组的血清HDL含量显著增高(P<0.05);血清ALB、TG、TC和LDL含量各组之间均无显著差异(P>0.05)。
表5 迷迭香提取物对蛋鸡血清生化指标的影响

Table 5 Effects of rosemary extract on serum biochemical indicators of laying hens

项目
Items		 组别Groups P值
P-value
CON RE250 RE500 RE750
白蛋白ALB/(mg/mL) 2.72±0.13 2.91±0.21 2.91±0.25 2.94±0.17 0.115
甘油三酯TG/(mg/mL) 0.29±0.03 0.29±0.02 0.28±0.04 0.30±0.03 0.680
总胆固醇TC/(μmol/dL) 203.56±35.37 147.95±54.59 132.01±43.47 148.85±53.43 0.102
高密度脂蛋白HDL/(mmol/L) 2.18±0.03b 2.34±0.07a 2.29±0.07ab 2.32±0.13a 0.040
低密度脂蛋白LDL/(mmol/L) 3.25±0.64 2.95±0.40 3.24±0.60 3.24±0.63 0.470

2.3 迷迭香提取物对蛋鸡血清抗氧化指标的影响

由表6可知,与CON组相比,RE250和RE500组的血清T-AOC显著升高(P<0.05),RE250和RE750组的血清SOD活性显著升高(P<0.05);血清CAT活性以RE250组最高,且显著高于RE750组(P<0.05);血清GSH-Px活性和MDA含量各组之间无显著差异(P>0.05)。
表6 迷迭香提取物对蛋鸡血清抗氧化指标的影响

Table 6 Effects of rosemary extract on serum antioxidant indicators of laying hens

项目
Items		 组别Groups P值
P-value
CON RE250 RE500 RE750
总抗氧化能力T-AOC/(U/mL) 0.36±0.21b 0.72±0.17a 0.72±0.19a 0.64±0.21ab 0.049
超氧化物歧化酶SOD/(U/mL) 26.23±3.01b 32.15±1.97a 28.76±3.04ab 33.76±5.28a 0.040
谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px/(U/mL) 289.44±86.89 325.17±81.33 329.64±42.22 349.47±59.72 0.227
过氧化氢酶CAT/(U/mL) 33.97±3.31ab 39.29±8.53a 30.29±7.95ab 24.33±9.33b 0.049
丙二醛MDA/(nmol/mL) 0.73±0.13 0.65±0.24 0.83±0.35 0.86±0.53 0.462

2.4 迷迭香提取物对蛋鸡血清免疫指标的影响

由表7可知,与CON组相比,饲粮中添加250、500和750 mg/kg的迷迭香提取物均显著降低了血清IL-6含量(P<0.05),并有提高血清IgA含量的趋势(P=0.057);血清IgG、IgM、TNF-α、IL-2含量各组之间无显著影响(P>0.05)。
表7 迷迭香提取物对蛋鸡血清免疫指标的影响

Table 7 Effects of rosemary extract on serum immune indicators of laying hens

项目
Items		 组别Groups P值
P-value
CON RE250 RE500 RE750
免疫球蛋白A IgA/(g/L) 7.54±0.28 8.51±0.72 8.36±0.51 8.11±0.86 0.057
免疫球蛋白G IgG/(g/L) 2.01±0.10 2.08±0.39 1.89±0.59 2.18±0.13 0.270
免疫球蛋白M IgM/(g/L) 10.79±1.17 11.34±2.55 11.05±1.18 11.14±0.99 0.624
肿瘤坏死因子-α TNF-α/(pg/mL) 56.09±4.18 55.09±3.30 54.97±3.94 55.19±3.02 0.570
白细胞介素-2 IL-2/(pg/mL) 4.32±1.22 4.19±1.75 3.38±0.21 3.32±0.25 0.193
白细胞介素-6 IL-6/(pg/mL) 20.00±2.62a 16.94±1.80b 16.30±0.57b 16.49±1.20b 0.018

2.5 迷迭香提取物对蛋鸡肝脏脂质代谢的影响

2.5.1 HE染色切片观察

由图1可以看出,CON组的切片中存在较多的脂滴空泡,而饲粮中添加迷迭香提取物的试验组的切片中只存在少量的脂肪空泡,细胞排列整齐,细胞核位于细胞中央。
图1 肝脏HE染色切片

蓝色箭头指向的是脂滴空泡,黄色箭头指向的是正常细胞。

Fig.1 Liver HE staining sections (40×)

Blue arrow pointed to lipid droplet bubbles, and yellow arrow pointed to normal cells

2.5.2 油红O染色切片观察

图2为肝脏切片油红O染色结果,图中红色的均为脂滴,从图中可以看出,饲粮中添加迷迭香提取物的试验组肝脏中脂滴占比明显低于CON组。
图2 肝脏油红O染色切片

Fig.2 Liver oil red O staining sections (20×)

2.5.3 脂质代谢相关基因表达情况

由图3可知,与CON组相比,RE250、RE500组的肝脏LPL mRNA相对表达量显著升高(P<0.05),RE250、RE750组的肝脏FAS mRNA相对表达量显著降低(P<0.05);饲粮添加不同水平的迷迭香提取物对肝脏APO-VLDL、ACC mRNA相对表达量无显著影响(P>0.05)。
图3 迷迭香提取物对蛋鸡肝脏脂质代谢相关基因表达的影响

数据柱标注不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。

Fig.3 Effects of rosemary extract on expression of genes related to lipid metabolism in liver of laying hens

Data columns with different letters mean significant difference (P<0.05).

3 讨论

3.1 迷迭香提取物对蛋鸡产蛋率的影响

迷迭香是一种具有独特芳香气味的植物,它的提取物中富含多种有益成分,包括黄酮、萜、酚酸和脂肪。这些成分能够帮助机体抵抗自由基的侵害,促进免疫系统的健康,并且可以抑制肿瘤的生长,预防细胞损伤[15]。本试验结果表明,饲粮中添加不同水平迷迭香提取物的试验组蛋鸡的产蛋率与CON组相比并无显著差异,但RE500和RE750组的产蛋率在17~20周龄时较CON组分别提高了11.98%、15.59%,RE250、RE500和RE750组的产蛋率在试验全期较CON组分别提高了0.78%、0.58%和0.54%。葛俊伟[16]研究发现,蛋鸡饲粮中添加迷迭香提取物后其产蛋率没有明显变化,然而,在试验全期RE100和RE200组蛋鸡产蛋率分别较CON组提高了7.44%和5.10%;符小琴等[17]研究显示,饲粮中添加不同水平的迷迭香提取物对黑羽绿壳蛋鸡产蛋率没有显著影响,本试验研究结果与葛俊伟[16]、符小琴等[17]的研究结果一致,即饲粮中添加迷迭香提取物对蛋鸡产蛋率并未产生显著影响。

3.2 迷迭香提取物对蛋鸡蛋品质的影响

目前,越来越多的消费者在购买鸡蛋时更加关注蛋品质,较深的蛋黄颜色逐渐受到消费者的青睐。蛋黄中的色素家禽自身不能合成,其主要是饲料中的亲脂性含氧类胡萝卜素、天然叶黄素在蛋黄中沉积所致[18]。符小琴等[17]的研究发现,黑羽绿壳蛋鸡饲粮中添加100、200和400 mg/kg的迷迭香提取物可极显著提高蛋黄颜色;安婷婷等[19]研究发现,饲粮中添加迷迭香草粉可以大大提高存放1和15 d鸡蛋的哈氏单位,明显改善蛋黄颜色。本研究发现,RE250组的蛋黄颜色较CON组显著提高,这与前人研究结果一致,但其作用机制值得深入探索。

3.3 迷迭香提取物对蛋鸡血清生化指标的影响

ALB具有结合游离脂肪酸的能力,脂肪酸不溶于水,与ALB结合后形成脂蛋白由血流运送至全身各组织,主要由心脏、肝脏、骨骼肌等摄取利用[20]。血清中的TC、TG、HDL、LDL等指标均与机体脂代谢有关,LDL和HDL是2种运载胆固醇的脂蛋白,LDL主要由极低密度脂蛋白(VLDL)转化而来,为胆固醇的主要携带者,可进入肝外细胞进行降解,而HDL可将肝外组织及血浆中的胆固醇运回肝脏代谢,LDL和HDL可维持动物体内脂类代谢的稳定,是反映机体脂质代谢情况的指标[21]。本试验结果显示,与CON组相比,RE250组和RE750组的血清HDL含量显著增高,表明迷迭香提取物具有调控机体脂质代谢的作用。孙大淇等[22]在吉富罗非鱼上的试验结果表明,在饲粮中加入迷迭香提取物可以减少吉富罗非鱼血清TG、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和TC的含量,添加迷迭香提取物有助于提高动物脂肪在吉富罗非鱼体内的分解与代谢能力。本研究结果与之存在着相似性。

3.4 迷迭香提取物对蛋鸡血清抗氧化指标的影响

机体在新陈代谢过程中可以产生活性氧自由基(ROS),当ROS过度攻击细胞膜不饱和脂肪酸时,则会导致机体产生脂质过氧化反应。机体可依靠自体细胞分泌的各种抗氧化酶清除体内自由基,当机体内ROS产生与清除调节失衡时,机体容易发生氧化损伤[23]。目前为止,T-AOC、SOD、GSH-Px、CAT和MDA等被认为是评价机体抗氧化能力的主要指标。陈翔等[24]研究表明,熊果酸能够有效降低肉鸡血清MDA含量,提高SOD活性。刘亚楠等[25]研究发现,饲粮添加200 mg/kg的迷迭香提取物可以显著提高京海黄鸡血清T-AOC,降低血清MDA含量。沈根明等[26]研究发现,饲粮添加0.3%迷迭香可显著提高高温蛋鸡血清抗氧化能力。本试验结果表明,与CON组相比,RE250和RE500组的血清T-AOC显著升高,RE250组的血清CAT活性显著高于RE750组,与上述研究结果一致,这说明饲粮中添加迷迭香提取物具有提高蛋鸡抗氧化水平的能力,这可能与迷迭香提取物中含有的熊果酸、黄酮类物质等成分具有直接清除自由基、抑制酪氨酸酶活性、减轻脂质过氧化、减少氧化应激有关[27]。

3.5 迷迭香提取物对蛋鸡血清免疫指标的影响

炎性细胞因子可以影响动物机体免疫,在造血、肝脏和神经元再生、胚胎发育和生育能力方面也起着至关重要的作用,还可以介导炎症和免疫反应的产生和发展[28],但是它们持续释放会产生很多健康问题,如IL-3和IL-6的过量产生会导致器官损伤和剧痛[29]。迷迭香提取物对动物免疫力改善的作用机制可能与其抑制核因子-κB(NF-κB)信号通路有关。NF-κB是调控细胞因子和其他炎症反应相关因子基因表达的重要转录因子[30]。葛俊伟[16]的试验证明了迷迭香提取物可以有效降低蛋鸡炎性因子IL-6的分泌,200 mg/kg的迷迭香提取物可能具有增强鸡体免疫力和潜在的预防治疗肠道炎症的作用。本试验结果显示,饲粮中添加迷迭香提取物可以显著降低血清IL-6含量。

3.6 迷迭香提取物对蛋鸡肝脏脂质代谢的影响

肝脏是动物体内脂质代谢的主要器官,脂质代谢是否平衡一定程度上反映了机体的健康水平[31]。有研究表明,迷迭香提取物可以通过激活磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)和过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)途径,诱导脂肪酸氧化分解,从而调控脂质代谢[32]。FAS和ACC在脂肪合成过程中起关键作用[33];LPL主要在脂肪分解过程中起主要作用,其活性与甘油水解的速度呈正相关;APO-VLDL主要在脂肪转运过程中发挥作用,可以将营养物质输送到卵巢,供给其营养需要[34]。张志毕等[35]研究发现,饲粮中添加迷迭香提取物能下调FAS的表达,降低肝脏中的脂肪合成。本研究结果也表明了饲粮中添加迷迭香提取物可以显著下调肝脏中FAS的表达,同时还能显著上调LPL的表达,进而通过调控脂质代谢发挥保护肝脏的作用。

4 结论

饲粮中添加迷迭香提取物对蛋鸡的产蛋率无显著影响,但可改善蛋黄颜色,提高机体抗氧化能力和免疫力,调节肝脏脂肪代谢。

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