研究论文

苦参提取物对育肥羊生长性能、免疫功能及抗氧化能力的影响

  • 梁一飞 , 1 ,
  • 靳科 1 ,
  • 郭丽华 2 ,
  • 张淼 1 ,
  • 王楚凡 1 ,
  • 张铁 1, 3 ,
  • 王春光 , 1, 3, *
展开
  • 1 河北农业大学动物医学院, 保定 071000
  • 2 山东德州神牛药业有限公司, 德州 253002
  • 3 保定市肉羊养殖减抗替抗技术研究重点实验室, 保定 071000
* 王春光,教授,硕士生导师,E-mail:

梁一飞(2000—),男,河北张家口人,硕士研究生,从事中药替抗促生长增强免疫力研究。E-mail:

Office editor: 靳爽

收稿日期: 2025-12-03

  网络出版日期: 2026-07-13

基金资助

河北省现代农业产业技术体系建设专项(HBCT2024240207)

河北省现代农业产业技术体系建设专项(HBCT2024250206)

Effects of Sophora flavescens Extract on Growth Performance, Immune Function and Antioxidant Capacity of Fattening Sheep

  • LIANG Yifei , 1 ,
  • JIN Ke 1 ,
  • GUO Lihua 2 ,
  • ZHANG Miao 1 ,
  • WANG Chufan 1 ,
  • ZHANG Tie 1, 3 ,
  • WANG Chunguang , 1, 3, *
Expand
  • 1 College of Veterinary Medicine, Hebei Agricultural University, Baoding 071000, China
  • 2 Shandong Dezhou Shenniu Pharmaceutical Co., Ltd., Dezhou 253002, China
  • 3 Baoding Key Laboratory of Research on Antimicrobial Reduction and Substitution Technology in Mutton Sheep Breeding, Baoding 071000, China
* professor, E-mail:

Received date: 2025-12-03

  Online published: 2026-07-13

摘要

本试验旨在探究苦参提取物对育肥羊生长性能、免疫功能及抗氧化能力的影响。选取75只3月龄、体重为(28.25±2.17) kg的健康湖羊公羔,随机分为5组,每组3个重复,每个重复5只。A组饲喂基础饲粮,B组在饲喂基础饲粮的基础上补饲2 g/(只·d)金霉素,C、D、E组在饲喂基础饲粮的基础上分别补饲0.25、0.50、0.75 g/(只·d)苦参提取物。试验期72 d。结果表明:1)试验第1~72天,与A组相比,B、C、D组平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)极显著升高(P<0.01),C、D、E组料重比(F/G)显著降低(P<0.05);C、D组各养分表观消化率极显著升高(P<0.01)。2)试验第36天,与A组相比,B、C、D组血清免疫球蛋白A(IgA)含量极显著升高(P<0.01),D组血清免疫球蛋白G(IgG)和血清免疫球蛋白M(IgM)含量显著升高(P<0.05);C、D、E组血清白细胞介素-2(IL-2)含量极显著升高(P<0.01),C组血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量显著降低(P<0.05)。试验第72天,与A组相比,B、C、D、E组血清IgA含量极显著升高(P<0.01),C组血清IgM含量显著升高(P<0.05);E组血清TNF-α含量极显著低于A、B组(P<0.01)。3)试验第36和72天,与A、B组相比,D组血清总抗氧化能力(T-AOC)极显著升高(P<0.01);与A组相比,C、D组血清超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性极显著升高(P<0.01)。4)试验第36天,与A组相比,C、D、E组血清白蛋白(ALB)含量显著升高(P<0.05);D、E组血清总蛋白(TP)含量极显著升高(P<0.01),血清尿素氮(UN)含量极显著降低(P<0.01)。试验第72天,与A组相比,B、D组血清ALB含量显著升高(P<0.05),C组血清UN含量极显著降低(P<0.01)。综上所述,补饲适量苦参提取物能够促进育肥羊的生长发育,提升机体免疫功能与抗氧化能力,调节蛋白质及脂肪代谢。本试验条件下,育肥羊苦参提取物的适宜补饲剂量为0.50 g/(只·d)。

本文引用格式

梁一飞 , 靳科 , 郭丽华 , 张淼 , 王楚凡 , 张铁 , 王春光 . 苦参提取物对育肥羊生长性能、免疫功能及抗氧化能力的影响[J]. 动物营养学报, 2026 , 38(7) : 5226 -5238 . DOI: 10.12418/CJAN2026.419

Abstract

This experiment was conducted to investigate the effects of Sophora flavescens extract on growth performance, immune function and antioxidant capacity of fattening sheep. A total of 75 healthy 3-month-old Hu male lambs with an average body weight of (28.25±2.17) kg were randomly divided into 5 groups, with 3 replicates per group and 5 lambs per replicate. Lambs in group A were fed a basal diet, those in group B were fed the basal diet supplemented with 2 g/(head·d) chlortetracycline, and those in groups C, D and E were fed the basal diets supplemented with 0.25, 0.50 and 0.75 g/(head·d) Sophora flavescens extract, respectively. The experimental period lasted 72 days. The results showed as follows: 1) during days 1 to 72 of the experiment, compared with group A, the average daily gain (ADG) and average daily feed intake (ADFI) in groups B, C and D were extremely significantly increased (P<0.01), and the feed/gain ratio (F/G) in groups C, D and E was significantly decreased (P<0.05); the apparent digestibility of various nutrients in groups C and D was extremely significantly increased (P<0.01). 2) On day 36 of the experiment, compared with group A, the serum immunoglobulin A (IgA) content in groups B, C and D was extremely significantly increased (P<0.01), and the serum immunoglobulin G (IgG) and immunoglobulin M (IgM) contents in group D were significantly increased (P<0.05); the serum interleukin-2 (IL-2) content in groups C, D and E was extremely significantly increased (P<0.01), and the serum tumor necrosis factor-α (TNF-α) content in group C was significantly decreased (P<0.05). On day 72 of the experiment, compared with group A, the serum IgA content in groups B, C, D and E was extremely significantly increased (P<0.01), and the serum IgM content in group C was significantly increased (P<0.05); the serum TNF-α content in group E was extremely significantly lower than that in groups A and B (P<0.01). 3) On days 36 and 72 of the experiment, compared with groups A and B, the serum total antioxidant capacity (T-AOC) in group D was extremely significantly increased (P<0.01); compared with group A, the activities of serum superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GSH-Px) in groups C and D were extremely significantly increased (P<0.01). 4) On day 36 of the experiment, compared with group A, the serum albumin (ALB) content in groups C, D and E was significantly increased (P<0.05); the serum total protein (TP) content in groups D and E was extremely significantly increased (P<0.01), and the serum urea nitrogen (UN) content was extremely significantly decreased (P<0.01). On day 72 of the experiment, compared with group A, the serum ALB content in groups B and D was significantly increased (P<0.05), and the serum UN content in group C was extremely significantly decreased (P<0.01). In conclusion, dietary supplementation with an appropriate dose of Sophora flavescens extract can promote the growth and development, improve immune function and antioxidant capacity, and regulate protein and lipid metabolism of fattening sheep. Under the conditions of this experiment, the optimal supplemental dose of Sophora flavescens extract for fattening sheep is 0.50 g/(head·d).

我国是畜禽养殖大国,也是兽用抗生素生产和使用大国。兽用抗生素在防治动物疾病、提高养殖效益、保障畜禽产品有效供给等方面发挥着重要作用。当前规模化养殖过程中,抗生素不规范使用问题仍较为突出,易引发畜禽产品抗生素残留、病原菌耐药性上升及生态环境污染等一系列问题,与国家倡导的遏制细菌耐药、推进抗生素减量化行动的要求背道而驰。目前,市场上的替抗产品种类繁多、功能多样,常用的饲用抗生素替代品主要包括酸化剂、酶制剂、微生态制剂、抗菌肽、中草药和植物提取物等[1]。其中,中草药苦参(Sophora flavescens)在我国已有2 000多年的药用历史。研究表明,苦参具有促生长、抑菌杀虫、抗肿瘤、抗炎、抗氧化及调节糖代谢等作用[2-4]。苦参提取物是以苦参为原料,采用物理或化学方法提取分离所得,主要含有苦参碱、氧化苦参碱等生物活性成分[5]。本试验通过探究苦参提取物对育肥羊生长性能、免疫功能、抗氧化能力及蛋白质和脂肪代谢相关指标的影响,为苦参提取物在家畜养殖中的应用以及减抗、替抗策略的实施提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验所用苦参提取物中苦参碱和氧化苦参碱含量≥0.80%,芦丁含量≥8 mg/g;金霉素购自驻马店华中正大有限公司,有效成分含量20%。

1.2 试验设计与饲养管理

动物试验于河北省承德市某羊场开展,试验方案经河北农业大学实验动物伦理委员会批准(No.2025165)。选取75只3月龄、体重为(28.25±2.17) kg的健康湖羊公羔,随机分为5组,分别为A组(空白对照组)、B组(金霉素对照组)、C组(低剂量苦参提取物组)、D组(中剂量苦参提取物组)、E组(高剂量苦参提取物组),每组3个重复,每个重复5只。A组饲喂基础饲粮,B组在饲喂基础饲粮的基础上补饲2 g/(只·d)金霉素,C、D、E组在饲喂基础饲粮的基础上分别补饲0.25、0.50、0.75 g/(只·d)苦参提取物。试验期72 d。基础饲粮参照《肉羊营养需要量》(NY/T 816—2021)进行配制,其组成及营养水平见表1。试验期间,每天08:00定时饲喂,羊只自由采食和饮水。
表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)

Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) %

项目Items 含量Content
原料Ingredients
玉米Corn 47.00
花生秧Peanut vine 12.00
苜蓿干草Alfalfa hay 6.00
豆粕Soybean meal 9.00
麸皮Bran 7.00
酵母Yeast 3.00
酒糟Distiller’s grains 4.00
预混料Premix1) 8.00
碳酸氢钠NaHCO3 1.00
石粉Limestone 2.00
食盐NaCl 1.00
合计Total 100.00
营养水平Nutrient levels2)
代谢能ME/(MJ/kg) 12.47
粗蛋白质CP 16.72
中性洗涤纤维NDF 23.69
酸性洗涤纤维ADF 13.12
钙Ca 0.51
磷P 0.32

1)每千克预混料含有 One kilogram of premix contained the following:Zn 2 700 mg,Cu 350 mg,I 90 mg,Mn 1 750 mg,VA 180 000 IU,VD3 88 000 IU,VE 5 000 IU。

2)代谢能为根据《肉羊营养需要量》(NY/T 816—2021)所得计算值,其余为实测值。ME was a calculated value according to Nutrient Requirements of Meat-Type Sheep and Goat (NY/T 816—2021), while the others were measured values.

1.3 样品采集与指标测定

1.3.1 苦参提取物有效成分

采用高效液相色谱-质谱联用(LC-MS)技术测定苦参提取物中的主要活性成分。称取10 mg苦参提取物粉末,加入500 μL甲醇溶液,超声提取30 min,随后在21 900×g下离心10 min,吸取上清液上机检测。
色谱条件:选用Thermo Hypersil gold C18色谱柱(粒径1.9 μm,规格2.1 mm×100 mm);流动相A为0.1%甲酸-水溶液,流动相B为0.1%甲酸-乙腈溶液,流动相梯度洗脱程序见表2;流速0.3 mL/min,进样量10 μL。
表2 流动相梯度洗脱程序

Table 2 Gradient elution procedure of mobile phase %

时间
Time/min
流动相A
Mobile phase A
流动相B
Mobile phase B
0 90 10
10.0 0 100
15.0 0 100
17.1 90 10
20.0 90 10
质谱条件:离子源温度310 ℃,毛细管温度320 ℃;鞘气流速30 Arb,辅助气流速10 Arb;正离子模式喷雾电压3 kV,负离子模式喷雾电压2.8 kV。采用数据依赖扫描(DDA)分析,循环次数(loop count)设为10;高能碰撞解离(HCD)采用step-wise归一化碰撞能,能量设为10、28、35 eV。一级质谱扫描范围100~1 500 m/z,分辨率设为70 000,自动增益控制目标(AGC target)设为3E6,注入时间200 ms;二级质谱分辨率设为17 500,AGC target设为1E5,注入时间50 ms。

1.3.2 生长性能

于试验第1、24、48和72天晨饲前对所有试验羊进行空腹称重,计算平均日增重(ADG);试验期内每天记录喂料量与剩料量,计算平均日采食量(ADFI);利用ADG和ADFI计算料重比(F/G)。计算公式如下:
ADFI=总耗料量/(试验天数×试验羊数量);
ADG=(末重-初重)/试验天数;
F/G=ADFI/ADG。

1.3.3 养分表观消化率

于试验第70~72天,每天收集饲粮样品和粪样。饲粮样品采用四分法取样,缩分至500 g后粉碎过40目筛,于-20 ℃冷冻保存。粪样采用点收粪法,每组随机选取5只健康育肥羊,每天固定时间采集每只羊新鲜粪样300 g,连续采样3 d;将同只羊3 d粪样充分混匀后取300 g,分装为2份,其中一份按每100 g粪样添加10 mL 10%盐酸的比例混匀,用于测定粗蛋白质(CP)含量;另一份不添加盐酸,用于测定总能(GE)及干物质(DM)、粗脂肪(EE)、粗灰分(Ash)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)、钙(Ca)、磷(P)、盐酸不溶灰分(AIA)含量。所有粪样于-20 ℃冷冻保存。饲粮和粪便中GE及DM、CP、EE、Ash、NDF、ADF、Ca、P、AIA含量分别参照GB/T 45104—2024及GB/T 6435—2014、GB/T 6432—2018、GB/T 6433—2025、GB/T 6438—2007、GB/T 20806—2022、NY/T 1459—2022、GB/T 6436—2018、GB/T 6437—2018、GB/T 23742—2009的方法进行测定,有机物(OM)含量根据DM与Ash含量差值计算得出。采用内源指示剂(AIA)法[6]计算养分表观消化率,计算公式如下:
某养分表观消化率(%)=100-(饲粮中AIA含量/粪便中AIA含量)×(粪便中该养分含量/饲粮中该养分含量)×100。

1.3.4 血清指标

于试验第36、72天晨饲前,对试验羊颈静脉采血5 mL,静置后以1 200×g离心15 min,分离血清并分装于1.5 mL离心管中,于-20 ℃冷冻保存待测。
血清免疫球蛋白指标包括免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)含量,血清炎性因子与肝功能指标包括白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量及天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,均采用上海源桔生物科技中心提供的酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒测定;血清抗氧化指标包括总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性,血清生化指标包括总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(UN)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量及碱性磷酸酶(ALP)活性,均采用南京建成生物工程研究所提供的试剂盒进行测定。

1.3.5 腹泻率

试验期间每天观察并记录每只试验羊粪便状态,参照Lee等[7]的方法进行粪便评分并计算腹泻率。粪便评分标准设定为:1分,粪便形态正常、质地偏硬;2分,粪便成形、质地偏软;3分,粪便不成形、呈水样;4分,粪便不成形、呈水样、黏液含少量血丝;5分,粪便不成形、呈水样、黏液中伴有大量血丝。粪便评分≥3分即判定为腹泻。腹泻率计算公式:
腹泻率(%)=100×(腹泻只数×腹泻天数)/(总只数×试验天数)。

1.4 数据统计与分析

试验数据采用SPSS 26.0软件进行单因素方差分析,并利用Duncan氏法进行多重比较。结果以“平均值±标准差”表示,P<0.05表示差异显著,P<0.01表示差异极显著。

2 结果与分析

2.1 苦参提取物有效成分分析

采用LC-MS技术对苦参提取物进行成分分析,经数据库检索匹配,筛选出匹配度较高的成分共185种。苦参提取物在正、负离子模式下的基峰色谱图如图1图2所示。按各成分所占百分比排序,其主要有效成分如表3所示,包括氧化苦参碱(50.22%)、氧化槐果碱(12.54%)、苦参碱(5.95%)、毛蕊异黄酮(3.04%)等。
图1 苦参提取物正离子模式下基峰色谱图

Fig.1 Base peak chromatogram of Sophora flavescens extract in positive ion mode

图2 苦参提取物负离子模式下基峰色谱图

Fig.2 Base peak chromatogram of Sophora flavescens extract in negative ion mode

表3 苦参提取物主要有效成分

Table 3 Main active ingredients of Sophora flavescens extract

项目Items 保留时间Retention time/min 百分比Percentage/%
氧化苦参碱Oxymatrine 1.59 50.22
氧化槐果碱Oxysophocarpine 1.31 12.54
丙酸Propionic acid 1.58 7.22
苦参碱Matrine 1.09 5.95
毛蕊异黄酮Calycosin 7.32 3.04
油酸酰胺Oleamide 16.60 1.84
9-羟基-10,12-十八碳二烯酸9-hydroxy-10,12-decadienoic acid 13.01 1.46
金雀花碱Cytisine 1.02 1.43
木犀草素4'-O-葡萄糖苷Luteolin 4'-O-glucoside 6.12 1.35
染料木黄酮Genistein 6.21 1.22

2.2 苦参提取物对育肥羊生长性能的影响

表4可知,试验第1~24天,与A组相比,B、C、D组ADG显著升高(P<0.05);B组ADFI极显著升高(P<0.01),C组ADFI显著升高(P<0.05);C、D组F/G显著降低(P<0.05)。试验第25~48天,与A组相比,B、C、D组ADFI极显著升高(P<0.01)。试验第49~72天,与A组相比,B、C、D组ADFI极显著升高(P<0.01),E组ADFI极显著降低(P<0.01)。试验第1~72天,与A组相比,B、C、D组ADG和ADFI极显著升高(P<0.01),C、D、E组F/G显著降低(P<0.05)。
表4 苦参提取物对育肥羊生长性能的影响

Table 4 Effects of Sophora flavescens extract on growth performance of fattening sheep

项目
Items
A组
Group A
B组
Group B
C组
Group C
D组
Group D
E组
Group E
P
P-value
第1~24天Days 1 to 24
平均日增重ADG/g 286.50±21.04c 359.50±27.81ab 372.00±39.62a 372.50±42.06a 320.50±41.77bc 0.030
平均日采食量ADFI/kg 1.45±0.14BCbc 1.60±0.19Aa 1.56±0.15ABa 1.52±0.14ABCab 1.41±0.10Cc <0.001
料重比F/G 5.08±0.40a 4.47±0.34ab 4.23±0.45b 4.12±0.46b 4.46±0.59ab 0.029
第25~48天Days 25 to 48
平均日增重ADG/g 338.75±37.98bc 404.58±43.69a 373.75±62.23ab 374.17±7.88ab 311.67±29.89c 0.016
平均日采食量ADFI/kg 1.75±0.06Cc 2.01±0.08Aa 1.83±0.09Bb 1.86±0.08Bb 1.72±0.11Cc <0.001
料重比F/G 5.21±0.51 5.02±0.61 5.02±0.90 4.97±0.11 5.56±0.54 0.509
第49~72天Days 49 to 72
平均日增重ADG/g 278.21±23.60 317.14±33.16 304.29±35.55 319.64±30.98 333.21±15.60 0.066
平均日采食量ADFI/kg 1.89±0.13Cd 2.15±0.07Aa 2.04±0.06Bb 1.99±0.06Bc 1.79±0.08De <0.001
料重比F/G 6.83±0.53Aa 6.84±0.70Aa 6.77±0.72Aa 6.27±0.59ABa 5.38±0.25Bb 0.003
第1~72天Days 1 to 72
平均日增重ADG/g 301.15±22.35Bb 360.41±11.19Aa 350.01±29.03Aa 355.44±19.07Aa 321.79±14.54ABb <0.001
平均日采食量ADFI/kg 1.72±0.21Cc 1.95±0.26Aa 1.83±0.22Bb 1.82±0.21Bb 1.65±0.19Cc <0.001
料重比F/G 5.71±0.40a 5.41±0.17ab 5.23±0.45b 5.12±0.28b 5.13±0.23b 0.043

同行数据肩标无字母或相同小写字母表示差异不显著(P>0.05),不同小写字母表示差异显著(P<0.05),不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)。下表同(表10除外)。

In the same row, values with no letter or the same lowercase letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different lowercase letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean extremely significant difference (P<0.01). The same as below (except for Table 10).

2.3 苦参提取物对育肥羊养分表观消化率的影响

表5可知,B、C、D、E组各养分表观消化率均高于A组。其中,C、D组GE、DM、EE、OM、CP、NDF、ADF、Ash、Ca和P表观消化率极显著高于A组(P<0.01),B、E组GE和EE表观消化率极显著高于A组(P<0.01)。
表5 苦参提取物对育肥羊养分表观消化率的影响

Table 5 Effects of Sophora flavescens extract on nutrient apparent digestibility of fattening sheep %

项目
Items
A组
Group A
B组
Group B
C组
Group C
D组
Group D
E组
Group E
P
P-value
总能GE 74.12±0.89Bc 77.56±0.73Ab 79.89±0.65Aa 80.34±0.58Aa 77.21±0.78Ab <0.001
干物质DM 80.85±0.56Bc 82.94±0.49ABb 84.76±0.41Aa 85.12±0.38Aa 82.67±0.52ABb <0.001
粗脂肪EE 79.32±0.94Bc 83.15±0.82Ab 85.47±0.71Aa 85.93±0.65Aa 82.86±0.87Ab <0.001
有机物OM 82.03±0.62Bc 84.36±0.55ABb 86.18±0.48Aa 86.54±0.43Aa 84.09±0.60ABb <0.001
粗蛋白质CP 46.85±0.78Bc 49.73±0.69ABb 52.64±0.61Aa 53.17±0.55Aa 49.26±0.75ABb <0.001
中性洗涤纤维NDF 42.56±0.87Bc 44.89±0.79ABb 46.93±0.71Aa 47.35±0.66Aa 44.52±0.83ABb 0.002
酸性洗涤纤维ADF 38.24±0.75Bc 40.57±0.68ABb 42.71±0.60Aa 43.16±0.54Aa 40.23±0.72ABb 0.003
粗灰分Ash 47.42±0.81Bc 49.65±0.74ABb 51.83±0.66Aa 52.27±0.61Aa 49.31±0.78ABb <0.001
钙Ca 56.83±1.02Bc 59.47±0.93ABb 61.75±0.85Aa 62.24±0.79Aa 59.12±1.00ABb 0.001
磷P 58.76±1.13Bc 61.32±1.04ABb 63.68±0.95Aa 64.15±0.89Aa 60.97±1.10ABb 0.001

2.4 苦参提取物对育肥羊血清免疫球蛋白含量的影响

表6可知,试验第36天,与A组相比,B、C、D组血清IgA含量极显著升高(P<0.01),D组血清IgG含量显著升高(P<0.05),C、D组血清IgM含量显著升高(P<0.05)。试验第72天,与A组相比,B、C、D、E组血清IgA含量极显著升高(P<0.01),C组血清IgM含量显著升高(P<0.05)。
表6 苦参提取物对育肥羊血清免疫球蛋白含量的影响

Table 6 Effects of Sophora flavescens extract on serum immunoglobulin contents of fattening sheep g/L

项目
Items
A组
Group A
B组
Group B
C组
Group C
D组
Group D
E组
Group E
P
P-value
第36天Day 36
免疫球蛋白A IgA 7.56±0.11Cc 8.89±0.30Aa 8.30±0.22Bb 9.20±0.58Aa 7.62±0.18Cc <0.001
免疫球蛋白G IgG 17.25±1.20Bc 20.89±1.50Aa 18.07±1.80Bbc 19.43±0.85ABb 17.83±1.23Bbc 0.003
免疫球蛋白M IgM 14.49±1.00b 15.79±1.28ab 16.97±0.69a 16.40±1.58a 14.58±1.16b 0.011
第72天Day 72
免疫球蛋白A IgA 6.19±0.09Bc 7.99±0.35Aa 7.52±0.19Aab 7.74±0.46Aab 7.42±0.49Ab <0.001
免疫球蛋白G IgG 17.81±1.31 20.00±2.25 18.99±2.15 18.92±1.24 17.84±2.30 0.362
免疫球蛋白M IgM 12.20±1.02b 12.46±0.57b 14.62±2.14a 13.11±1.14ab 12.61±0.78b 0.045

2.5 苦参提取物对育肥羊血清炎性因子含量与肝功能指标的影响

表7可知,试验第36天,与A组相比,C、D、E组血清IL-2含量极显著升高(P<0.01),E组血清IL-4含量极显著降低(P<0.01),C组血清TNF-α含量显著降低(P<0.05)。试验第72天,E组血清TNF-α含量极显著低于A、B组(P<0.01)。
表7 苦参提取物对育肥羊血清炎性因子含量与肝功能指标的影响

Table 7 Effects of Sophora flavescens extract on serum inflammatory factor contents and liver function indices of fattening sheep

项目
Items
A组
Group A
B组
Group B
C组
Group C
D组
Group D
E组
Group E
P
P-value
第36天Day 36
白细胞介素-2 IL-2/(pg/mL) 679.01±61.55Cc 794.13±80.75BCb 961.64±41.50Aa 972.59±77.11Aa 834.97±51.02Bb <0.001
白细胞介素-4 IL-4/(pg/mL) 81.13±8.73 87.78±12.40 80.11±5.85 83.37±8.61 73.86±6.89 0.150
白细胞介素-6 IL-6/(pg/mL) 161.87±3.55Aa 155.44±6.54Aa 154.14±7.07Aa 153.64±7.01Aa 123.65±7.83Bb <0.001
肿瘤坏死因子-α
TNF-α/(ng/L)
135.05±3.12a 128.71±5.23ab 116.88±15.49b 124.97±8.00ab 124.13±6.15ab 0.047
天门冬氨酸氨基转移酶
AST/(U/L)
126.04±6.63 130.06±8.49 127.83±6.72 130.67±6.85 133.77±11.13 0.634
丙氨酸氨基转移酶
ALT/(U/L)
15.28±0.36 15.36±0.94 15.12±0.86 15.63±1.06 15.56±0.83 0.872
第72天Day 72
白细胞介素-2 IL-2/(pg/mL) 721.92±63.79 734.94±132.94 769.57±96.25 790.29±83.00 645.27±24.56 0.130
白细胞介素-4 IL-4/(pg/mL) 63.67±12.08 85.26±11.97 79.35±14.96 82.51±10.81 69.65±18.33 0.113
白细胞介素-6 IL-6/(pg/mL) 150.51±11.97 141.80±26.56 149.69±2.42 149.51±5.40 145.23±8.34 0.833
肿瘤坏死因子-α
TNF-α/(ng/L)
142.75±10.69Aa 132.10±14.16Aa 127.11±6.61ABa 126.54±5.43ABa 106.77±18.13Bb 0.003
天门冬氨酸氨基转移酶
AST/(U/L)
128.31±5.09 131.34±5.94 130.27±4.76 129.43±6.37 129.16±5.09 0.924
丙氨酸氨基转移酶
ALT/(U/L)
15.75±1.14 15.26±0.55 15.57±0.83 15.60±0.34 15.59±1.12 0.884

2.6 苦参提取物对育肥羊血清抗氧化指标的影响

表8可知,试验第36天,与A、B组相比,C组血清T-AOC显著升高(P<0.05),D组血清T-AOC极显著升高(P<0.01)。与A组相比,B、C、D、E组血清MDA含量显著降低(P<0.05),血清GSH-Px活性极显著升高(P<0.01);B、C、D组血清SOD活性极显著升高(P<0.01)。试验第72天,与A、B组相比,D组血清T-AOC极显著升高(P<0.01),C、D组血清SOD活性极显著升高(P<0.01);B、C、D、E组血清GSH-Px活性极显著高于A组(P<0.01),且D组血清GSH-Px活性显著高于B、C、E组(P<0.05)。
表8 苦参提取物对育肥羊血清抗氧化指标的影响

Table 8 Effects of Sophora flavescens extract on serum antioxidant indices of fattening sheep

项目
Items
A组
Group A
B组
Group B
C组
Group C
D组
Group D
E组
Group E
P
P-value
第36天Day 36
总抗氧化能力T-AOC/(mmol/L) 0.17±0.03Bb 0.17±0.05Bb 0.26±0.02ABa 0.27±0.07Aa 0.17±0.06Bb 0.003
丙二醛MDA/(mmol/mL) 8.65±0.79a 6.20±1.09b 6.65±0.97b 6.23±0.39b 6.94±1.89b 0.016
超氧化物歧化酶SOD/(U/mL) 39.96±2.34Bc 43.97±2.14Aab 44.92±2.21Aab 45.12±2.24Aa 42.16±0.84ABbc 0.003
谷胱甘肽过氧化物酶
GSH-Px/(U/mL)
190.43±19.89Bc 265.82±22.66Aab 265.01±30.79Aab 281.42±15.04Aa 240.25±23.74Ab <0.001
过氧化氢酶CAT/(U/mL) 2.15±0.11 2.19±0.12 2.29±0.08 2.32±0.16 2.28±0.12 0.198
第72天Day 72
总抗氧化能力T-AOC/(mmol/L) 0.16±0.02Bc 0.18±0.04Bbc 0.23±0.04ABab 0.27±0.04Aa 0.17±0.20Bc <0.001
丙二醛MDA/(mmol/mL) 9.57±2.24 7.23±1.26 9.29±1.72 8.09±0.55 7.69±1.29 0.101
超氧化物歧化酶SOD/(U/mL) 41.06±1.52Bc 42.71±0.91Bbc 46.31±0.76Aa 46.61±0.76Aa 43.98±2.59Bb <0.001
谷胱甘肽过氧化物酶
GSH-Px/(U/mL)
200.23±18.52Bc 267.53±13.13Ab 269.22±28.32Ab 295.56±12.89Aa 262.51±12.80Ab <0.001
过氧化氢酶CAT/(U/mL) 2.18±0.07 2.20±0.16 2.26±0.15 2.36±0.21 2.34±0.20 0.340

2.7 苦参提取物对育肥羊血清生化指标的影响

表9可知,试验第36天,与A组相比,C、D、E组血清ALB含量显著升高(P<0.05);D、E组血清TP含量极显著升高(P<0.01),血清UN含量极显著降低(P<0.01)。与A、B组相比,C组血清ALP活性极显著升高(P<0.01),D组血清ALP活性显著升高(P<0.05)。试验第72天,与A组相比,B、D组血清ALB含量显著升高(P<0.05),C组血清UN含量极显著降低(P<0.01)。
表9 苦参提取物对育肥羊血清生化指标的影响

Table 9 Effects of Sophora flavescens extract on serum biochemical indices of fattening sheep

项目
Items
A组
Group A
B组
Group B
C组
Group C
D组
Group D
E组
Group E
P
P-value
第36天Day 36
白蛋白ALB/(g/L) 34.21±3.76b 39.22±4.99ab 42.79±3.37a 43.82±6.03a 42.46±6.56a 0.045
总蛋白TP/(g/L) 37.24±5.27Bc 43.45±8.80ABbc 45.91±8.92ABbc 47.41±2.95Ab 61.04±7.55Aa <0.001
尿素氮UN/(mmol/L) 8.25±0.46Aa 5.81±0.74BCb 7.82±1.49ABa 4.88±1.35Cb 6.10±0.88BCb <0.001
碱性磷酸酶ALP/(U/mL) 61.66±25.21Bc 63.54±3.38Bc 112.81±16.13Aa 99.07±15.73ABab 77.83±27.28ABbc 0.001
甘油三酯TG/(mmol/L) 2.72±0.13 2.40±0.33 2.55±0.38 2.39±0.22 2.51±0.22 0.331
总胆固醇TC/(mmol/L) 0.89±0.09 1.28±0.30 1.00±0.39 1.19±0.14 0.93±0.31 0.212
第72天Day 72
白蛋白ALB/(g/L) 38.79±3.58b 52.12±8.66a 42.07±4.23b 53.09±7.75a 46.42±8.01ab 0.013
总蛋白TP/(g/L) 42.58±6.58 51.15±13.36 50.67±15.60 49.00±11.74 61.63±12.28 0.224
尿素氮UN/(mmol/L) 8.78±1.02Aa 7.04±0.93ABb 5.23±1.41Bc 7.39±1.12Aab 7.27±1.01ABab 0.002
碱性磷酸酶ALP/(U/L) 61.39±14.96 67.33±27.16 89.39±15.51 70.11±23.97 89.62±12.95 0.105
甘油三酯TG/(mmol/L) 2.43±0.14 2.33±0.18 2.34±0.15 2.18±0.08 2.31±0.21 0.232
总胆固醇TC/(mmol/L) 1.31±0.27 1.71±0.44 1.48±0.40 1.37±0.25 1.80±0.29 0.137

2.8 苦参提取物对育肥羊腹泻率的影响

表10可知,C、D、E组腹泻率较A、B组降低,但差异不显著(P>0.05)。
表10 苦参提取物对育肥羊腹泻率的影响

Table 10 Effects of Sophora flavescens extract on diarrhea rate of fattening sheep %

项目
Items
腹泻率
Diarrhea rate
A组Group A 8.33±2.41
B组Group B 7.25±3.77
C组Group C 6.79±2.13
D组Group D 6.39±0.73
E组Group E 7.22±0.56
PP-value 0.768

同列数据肩标无字母表示差异不显著(P>0.05)。

In the same column, values with no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05).

3 讨论

3.1 苦参提取物有效成分的LC-MS分析

研究表明,苦参中含有苦参生物碱类、苦参黄酮类、二苯甲酰及其衍生物、三萜类化合物、脂肪酸类,以及挥发油类、香豆素、醌类、甾醇类等成分[8]。本研究采用LC-MS技术对苦参提取物进行成分分析,结果表明,其主要活性成分为氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱及丙酸等,其中氧化苦参碱占比超过50%,为提取物中的优势组分。

3.2 苦参提取物对育肥羊生长性能的影响

研究表明,发酵中草药可改善草食动物饲粮适口性,提升采食量[9]。本研究所用的苦参提取物兼具杀菌、抗炎、抗病毒、保肝降酶等功效,其含有的生物碱、黄酮类化合物具有抗炎、抗氧化及增强机体免疫力等作用[10-11],有利于育肥羊的生长发育。国梦阳[12]研究表明,饲粮添加蒙药苦参七汤及其提取物可显著提升热应激母牛的ADG,改善其生长性能。本研究结果表明,补饲0.25、0.50 g/(只·d)苦参提取物均可提高育肥羊的ADG和ADFI,降低F/G,提高生长性能。其中,补饲0.50 g/(只·d)苦参提取物组在第1~72天的ADG与补饲2 g/(只·d)金霉素组接近,且显著高于补饲0.75 g/(只·d)苦参提取物组。究其原因,可能是苦参提取物中的生物碱能够增强育肥羊肠道的营养吸收能力,从而促进生长;但过量的生物碱会刺激肠道黏膜,反而抑制消化功能,导致生长性能下降。

3.3 苦参提取物对育肥羊养分表观消化率的影响

养分表观消化率是评价饲料营养价值的核心指标,可直接反映动物对饲粮养分的吸收利用效率。研究表明,饲粮添加富含黄酮类的中草药复合物,可显著提高蒙古羔羊的CP表观消化率[13];饲粮添加槐角与槐花粗提物,能够显著提升肉兔的CP和GE表观消化率[14]。本研究结果表明,补饲苦参提取物可显著提高育肥羊对GE、DM、CP、NDF等养分的表观消化率;其中补饲0.50 g/(只·d)苦参提取物(D组)时效果最优,各养分表观消化率均极显著高于A组,显著高于B组。这可能是由于苦参提取物中的黄酮类活性物质可提升育肥羊瘤胃消化酶活性,进而提高养分表观消化率。该养分表观消化率变化规律与生长性能结果高度一致,补饲0.50 g/(只·d)苦参提取物后ADG和ADFI升高,F/G降低,正是养分消化利用率改善的直接体现。

3.4 苦参提取物对育肥羊免疫功能的影响

免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)含量是评价机体免疫功能的关键指标[15]。其中,IgG主要参与机体血液抗感染过程,IgM介导免疫应答早期防御反应,IgA则为机体外分泌液中的主要免疫屏障[16-17]。研究证实,植物活性成分可有效调控动物免疫球蛋白分泌,如芦丁可显著提升湖羊血清IgA、IgG、IgM含量[18],槲皮素能够促进奶牛IgA与可溶性CD8分子(sCD8)的分泌[19]。娜日苏等[17]研究发现,饲粮添加2%苦参提取液与金霉素均可显著提高肉羊血清IgM、IgG含量,且苦参提取液的调控效果优于金霉素。本试验第72天检测结果显示,补饲金霉素及苦参提取物均极显著提高了血清IgA含量,血清IgM含量亦有所提升;其中补饲0.25 g/(只·d)苦参提取物(C组)时血清IgM含量显著高于A、B组。综上可知,补饲苦参提取物与金霉素均可促进育肥羊血清IgA、IgM生成,提升机体免疫水平,且0.25 g/(只·d)苦参提取物对血清IgM含量的提升效果优于2 g/(只·d)金霉素。推测这是由于苦参提取物中的生物碱、多糖类组分可促进免疫器官发育,增强免疫细胞分泌功能,进而提升机体免疫应答能力。
白细胞介素在免疫信息传递、免疫细胞活化调控及T/B淋巴细胞增殖分化过程中发挥重要作用。机体的快速生长会加快细胞分裂与衰老进程,过量脂肪沉积也会诱导促炎因子大量分泌[20-21]。本试验第72天检测结果显示,补饲金霉素及苦参提取物可在一定程度上提高血清IL-4含量,降低血清IL-6及TNF-α含量,且补饲0.75 g/(只·d)苦参提取物(E组)时血清TNF-α含量极显著低于A组。已有研究利用脂多糖(LPS)构建奶牛子宫内膜上皮细胞炎症损伤模型,发现苦参碱干预可显著下调TNF-α的mRNA相对表达量[22]。综上可知,补饲苦参提取物可降低育肥羊血清TNF-α含量,同时可调节血清炎性因子含量。推测苦参提取物中的苦参碱等活性成分可通过减轻炎性细胞高表达引发的组织损伤与细胞凋亡,促进抗炎因子释放,从而增强机体免疫功能。

3.5 苦参提取物对育肥羊抗氧化能力的影响

氧化应激是诱发动物机体代谢紊乱与疾病的重要诱因[23]。T-AOC及SOD、GSH-Px、CAT是机体核心抗氧化指标,可通过清除氧自由基、减少过氧化物蓄积,保护细胞膜结构;MDA积累则会加重氧化应激的病理发展[24-25]。本试验第72天检测结果表明,与A组相比,补饲金霉素及苦参提取物组血清T-AOC及SOD、GSH-Px、CAT活性均呈升高趋势;其中补饲0.25、0.50 g/(只·d)苦参提取物可极显著提升育肥羊血清SOD和GSH-Px活性。已有研究证实,苦参碱可上调细胞SODT-AOCGSH-Px表达水平,促进细胞损伤修复[26];氧化苦参碱与黄芪多糖复配制剂,能显著提高雏鸡血清SOD和GSH-Px活性[27]。综上可知,补饲苦参提取物可增强育肥羊机体抗氧化能力,这可能与其含有的苦参碱、氧化苦参碱等活性组分密切相关。

3.6 苦参提取物对育肥羊蛋白质和脂肪代谢相关指标的影响

血清ALB、TP、UN含量与机体蛋白质代谢密切相关,ALP活性及TC、TG含量主要与脂肪代谢相关。其中,ALB与TP参与机体免疫调节及渗透压维持;血清UN为蛋白质代谢终产物,其含量与饲粮含氮量、能量水平及机体蛋白质利用率相关[28-30];ALP可参与小肠营养吸收,促进Ca、P沉积与骨骼发育[31-32];TC主要在肝脏合成,TG由肝脏、小肠黏膜及脂肪细胞共同合成[33]。研究表明,饲粮添加复方中草药可提高陇东黑山羊血清TP含量、降低血清UN含量[34];饲粮添加沙棘黄酮可提高荷斯坦奶牛血清TC含量,促进脂肪吸收[35]。陈颜旭[36]研究发现,饲粮添加万寿菊粕可降低绵羊血清TG含量、提高血清TC含量,原因可能与血清高密度脂蛋白含量增加、胆固醇转运能力提升,从而减少组织细胞对胆固醇的摄取有关。本研究结果表明,补饲0.25 g/(只·d)苦参提取物可极显著降低试验第72天血清UN含量,极显著提升试验第36天血清ALP活性;补饲0.50 g/(只·d)苦参提取物可显著提高血清ALB含量;补饲苦参提取物还可降低血清TG含量,提示苦参提取物可提升育肥羊蛋白质利用效率,调节机体脂肪代谢。推测苦参提取物中的黄酮、氧化苦参碱等成分可参与脂肪代谢信号调控,同时提升机体氨基酸与蛋白质利用率,增加体内氮沉积。

3.7 苦参提取物对育肥羊腹泻率的影响

腹泻是畜禽养殖中的常见消化道疾病,不仅会造成动物生长迟缓、饲料转化率下降,严重时还会引发畜禽死亡,给养殖业造成重大经济损失[37]。苦参具有清热解毒、利尿和驱虫的功效,对湿热型腹泻具有良好的调理与治疗作用[38]。邢玉娟等[39]研究发现,苦参止痢颗粒可显著减少蓖麻油诱导的小鼠腹泻次数,同时抑制正常小鼠胃排空速率,具有止泻及调控胃肠蠕动的作用。本研究结果显示,补饲苦参提取物对育肥羊腹泻率无显著影响,但补饲0.50 g/(只·d)苦参提取物时育肥羊腹泻率降幅最为明显,可在一定程度上印证苦参调控肠道健康、缓解腹泻的功能。

4 结论

补饲适量苦参提取物能够促进育肥羊的生长发育,提升机体免疫功能与抗氧化能力,调节蛋白质及脂肪代谢,其综合应用效果优于金霉素。本试验条件下,育肥羊苦参提取物的适宜补饲剂量为0.50 g/(只·d)。
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