研究论文

补喂β-羟基-β-甲基丁酸钙对伊犁马母马泌乳性能和血清指标的影响

  • 李永刚 , 1 ,
  • 谢欣杰 1 ,
  • 李凤鸣 , 1, * ,
  • 李明乾 1 ,
  • 张健 1 ,
  • 杨振 2 ,
  • 臧长江 1 ,
  • 杨开伦 1
展开
  • 1 新疆农业大学动物科学学院, 新疆肉乳用草食动物营养实验室, 乌鲁木齐 830052
  • 2 伊犁州昭苏县畜牧兽医发展中心, 昭苏 835600
* 李凤鸣,副教授,博士生导师,E-mail:

李永刚(2000—),男,河南新乡人,硕士研究生,动物营养与饲料科学专业。E-mail:

Office editor: 菅景颖

收稿日期: 2025-12-08

  网络出版日期: 2026-07-13

基金资助

自治区重大科技专项(2022A02013-2)

第三次新疆综合科学考察项目(2022xjkk0404)

Effects of β-Hydroxy-β-Methylbutyrate Calcium Supplementation on Lactation Performance and Serum Indexes of Yili Mares

  • LI Yonggang , 1 ,
  • XIE Xinjie 1 ,
  • LI Fengming , 1, * ,
  • LI Mingqian 1 ,
  • ZHANG Jian 1 ,
  • YANG Zhen 2 ,
  • ZANG Changjiang 1 ,
  • YANG Kailun 1
Expand
  • 1 Laboratory of Nutrition for Meat and Milk Producing Herbivores in Xinjiang, College of Animal Science, Xinjiang Agricultural University, Urumqi 830052, China
  • 2 Animal Husbandry and Veterinary Development Center of Zhaosu County, Ili Prefecture, Zhaosu 835600, China
* associate professor, E-mail:

Received date: 2025-12-08

  Online published: 2026-07-13

摘要

本试验旨在研究补喂不同水平β-羟基-β-甲基丁酸钙(HMB-Ca)对泌乳母马泌乳性能和血清指标的影响。选取18匹健康的泌乳伊犁马(产后30 d,胎次、体重相近),随机分为3组(每组6匹,n=6):在放牧的基础上,对照组每匹马每日补喂500 g精料补充料,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组每匹马每日在补喂500 g精料补充料的基础上再分别补喂10和20 g HMB-Ca。预试期7 d,正试期60 d。结果表明:1)与对照组相比,第30天时,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组产奶量均极显著提高(P<0.01);并且,补喂HMB-Ca能够缓解随泌乳期推进产奶量下降的趋势。2)第60天时,试验Ⅰ组马乳中酪蛋白含量显著高于对照组(P<0.05);并且,补喂HMB-Ca能够延缓随泌乳期推进马乳中乳蛋白率、总固形物及酪蛋白含量的持续下降。3)第60天时,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组血清葡萄糖、甘油三酯和总胆红素含量显著低于对照组(P<0.05),血清尿素氮含量显著高于对照组(P<0.05);试验Ⅰ组血清总蛋白含量显著高于对照组(P<0.05)。4)第60天时,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组血清超氧化物歧化酶活性及总抗氧化能力均显著高于对照组(P<0.05)。5)第30天时,试验Ⅱ组血清免疫球蛋白A、免疫球蛋白G和免疫球蛋白M含量均显著高于对照组(P<0.05)。6)第60天时,试验Ⅰ组血清雌二醇含量显著高于对照组及试验Ⅱ组(P<0.05)。综上所述,在本试验条件下,补喂HMB-Ca可有效提高泌乳母马的产奶量,增强机体抗氧化能力和免疫功能,并调节激素分泌;综合各项指标,泌乳母马的HMB-Ca适宜补喂剂量为10 g/(匹·d)。

本文引用格式

李永刚 , 谢欣杰 , 李凤鸣 , 李明乾 , 张健 , 杨振 , 臧长江 , 杨开伦 . 补喂β-羟基-β-甲基丁酸钙对伊犁马母马泌乳性能和血清指标的影响[J]. 动物营养学报, 2026 , 38(7) : 5268 -5279 . DOI: 10.12418/CJAN2026.422

Abstract

This experiment was conducted to investigate the effects of supplemental β-hydroxy-β-methylbutyrate calcium (HMB-Ca) at different levels on lactation performance and serum indexes of lactating mares. Eighteen healthy lactating Yili mares (30 days postpartum, with similar parity and body weight) were selected and randomly divided into three groups (six mares per group, n=6). Based on grazing, mares in the control group were supplemented with 500 g of concentrated supplement per head per day. Mares in the test groups Ⅰ and Ⅱ were supplemented with 10 and 20 g of HMB-Ca per head per day, respectively, in addition to 500 g of concentrated supplement. The preliminary feeding period lasted for 7 days, and the formal experimental period lasted for 60 days. The results showed as follows: 1) compared with the control group, on day 30, the milk yield of both test groups Ⅰ and Ⅱ was extremely significantly increased (P<0.01); moreover, HMB-Ca supplementation alleviated the declining trend of milk yield as lactation progressed. 2) On day 60, the casein content in the milk of experimental group Ⅰ was significantly higher than that of the control group (P<0.05); moreover, HMB-Ca supplementation delayed the continuous decline in milk protein percentage, total solids and casein contents in mare milk as lactation progressed. 3) On day 60, the serum contents of glucose, triglyceride and total bilirubin in test groups Ⅰ and Ⅱ were significantly lower than those in the control group (P<0.05), while the serum urea nitrogen content was significantly higher than that in the control group (P<0.05); the serum total protein content in test group Ⅰ was significantly higher than that in the control group (P<0.05). 4) On day 60, the serum superoxide dismutase activity and total antioxidant capacity in test groups Ⅰ and Ⅱ were significantly higher than those in the control group (P<0.05). 5) On day 30, the serum contents of immunoglobulin A, immunoglobulin G and immunoglobulin M in test group Ⅱ were significantly higher than those in the control group (P<0.05). 6) On day 60, the serum estradiol content in test group Ⅰ was significantly higher than that in the control group and test group Ⅱ (P<0.05). In conclusion, under the conditions of this experiment, HMB-Ca supplementation can effectively increase the milk yield of lactating mares, enhance the body’s antioxidant capacity and immune function, and regulate hormone secretion. Based on comprehensive evaluation of various indicators, the appropriate supplemental dose of HMB-Ca for lactating mares is 10 g/(head·d).

泌乳动物需要充足的能量和蛋白质等营养素,以支持高效的乳汁合成和生殖组织修复,从而保障其顺利完成后续繁殖周期[1]。伊犁马的泌乳期(4~10月份)与当地放牧季节重叠,泌乳高峰期正值饲草营养季节性波动的时期,放牧母马常因饲草供给不足而出现营养摄入不足的问题,进而表现为体况评分下降和泌乳性能减退[2]。生产中通常采用补喂精料来弥补放牧导致的营养亏缺,但单纯补充常规营养素难以彻底缓解泌乳期母马因高代谢负荷诱导的氧化应激及体蛋白质过度动员。因此,在科学补喂的基础上,探索能够通过调节机体代谢、改善抗氧化功能以进一步挖掘泌乳潜力的功能性饲料添加剂,已成为马匹精细化饲养管理的重要研究方向。
β-羟基-β-甲基丁酸(HMB)是亮氨酸在动物体内代谢过程中产生的一种中间代谢物,已被证实具有抑制肌肉蛋白质降解、促进蛋白质合成[3]、改善机体能量利用效率[4]、提高抗氧化能力[5]、促进脂肪酸氧化[6]等多种生物学功能。在实际动物生产中,常采用其钙盐形式,即β-羟基-β-甲基丁酸钙(HMB-Ca)。研究表明,补喂15.0 g/d HMB-Ca可显著缩短伊犁马2 000 m赛跑时间,并降低运动后血浆肌酸激酶和乳酸脱氢酶活性,表明其对马匹肌肉代谢具有积极调节作用[7]。此外,HMB在哺乳动物泌乳期也展现出提高产奶量、改善乳成分的潜力。Nissen等[8]研究发现,在母猪妊娠期补喂2.0 g/d HMB-Ca,可显著提高初乳中脂肪含量及21日龄仔猪断奶体重。Krakowski等[9]在泌乳母猪上的研究同样发现,补喂HMB-Ca可有效改善仔猪生长性能。郑昌炳[6]的研究也表明,饲喂含0.13% HMB-Ca的饲粮可明显改善猪的生长性能。综上可知,HMB可能通过调节氨基酸代谢、提高能量利用效率以及改善机体抗氧化状态,对泌乳动物的乳汁合成及母体健康产生综合益处。
然而,马匹在乳腺结构[10]、泌乳激素调控[11]及代谢需求[12]等方面与奶牛、猪等传统家畜存在差异,因此HMB-Ca在泌乳母马上的应用效果尚不明确,亟待系统研究。基于此,本研究拟通过给泌乳母马补喂HMB-Ca,全面评估其对母马泌乳性能和健康状况的影响,以期为泌乳期马匹的精细化管理提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 伦理声明

本试验已获得新疆农业大学实验动物福利伦理委员会的审查和批准,批准号:2023059。

1.2 试验材料

本试验所用HMB-Ca为白色粉末,纯度≥99%,分子式为C10H18CaO6,相对分子质量为274.32。

1.3 试验设计

动物试验于2024年7月至2024年9月进行。选取18匹5~7岁、2~4胎次、产后30 d的健康泌乳期伊犁马母马,随机分为3组(每组6匹,n=6),分别为对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组。对照组马匹每日补喂500 g精料补充料;试验Ⅰ组和试验Ⅱ组每日在补喂500 g精料补充料的基础上,分别额外补喂10和20 g的HMB-Ca。HMB-Ca的补喂剂量参考韩明[7]及Krakowski等[9]的研究确定。预试期为7 d,正试期为60 d。精料补充料的组成及营养水平见表1。其中,粗蛋白质、粗脂肪、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、钙、磷含量分别参照GB/T 6432—2018、GB/T 6433—2006、GB/T 20806—2022、NY/T 1459—2022、GB/T 6436—2018、GB/T 6437—2018进行测定,消化能依据《马营养与饲养》[13]中各饲料原料的消化能及其在配方中的占比加权计算得出。
表1 精料补充料组成及营养水平(干物质基础)

Table 1 Composition and nutrient levels of concentrate supplement (DM basis) %

原料Ingredients 含量Content 营养水平Nutrient levels2) 含量Content
玉米Corn 54.50 粗蛋白质CP 17.50
麸皮Wheat bran 9.75 粗脂肪EE 3.35
次粉Wheat middling 10.00 中性洗涤纤维NDF 14.70
豆粕Soybean meal 22.00 酸性洗涤纤维ADF 4.70
磷酸氢钙CaHPO4 0.75 钙Ca 0.89
食盐NaCl 0.50 磷P 0.63
石粉Limestone 1.50 消化能DE/(MJ/kg) 12.97
预混料Premix1) 1.00
合计Total 100.00

1)预混料为每千克精料补充料提供 The premix provided the following per kg of concentrate supplement:FeSO4·7H2O 135.0 mg,KI 1.5 mg,MnSO4 60.0 mg,ZnSO4 60.0 mg,CuSO4 15.0 mg,VA 3 600 IU,VD 396 IU,VE 1 200 IU,VB1 4.5 mg,VB2 3.0 mg。

2)消化能为计算值,其余营养水平为实测值。DE was a calculated value, while the others were measured values.

1.4 饲养管理

试验马匹每日10:00—20:00接受10 h的固定位挤奶管理,在此期间母马与马驹分离,马驹不吮吸母乳;其余14 h母马与马驹共同在放牧区自由活动。每日10:00,将母马及马驹自放牧草场转入圈舍进行栓系饲养。挤奶时间分别为每日12:00、14:00、16:00、18:00和20:00。20:00最后1次挤奶结束后,母马与马驹重新合群,并一同返回放牧区域。对照组和试验组母马均采用专用料兜饲喂精料补充料,其中试验Ⅰ组和试验Ⅱ组的HMB-Ca与精料补充料混匀后一并补喂。挤奶期间,母马可自由采食青干草并足量饮水。

1.5 样品采集

分别于正试期第1、30和60天,在母马晨饲前使用一次性普通采血管,通过颈静脉采集血液,静置30 min后1 350×g离心15 min后分离血清,分装至3个冻存管内,置于-20 ℃冰箱中保存待测。
分别于正试期第1、30和60天,在母马于12:00、14:00、16:00、18:00、20:00进行泌乳时,使用50 mL无菌管采集乳样,振荡混匀,用于乳成分测定。

1.6 测定指标及方法

1.6.1 产奶量测定

分别在正试期的第1、15、30、45、60天统计产奶量。各测定日,在每次挤奶时(12:00、14:00、16:00、18:00、20:00)使用电子秤称量每匹马的挤奶量,并累加计算每匹马的单日产奶量。

1.6.2 乳成分测定

采用MilkoScanTM FT3乳成分分析仪(FOSS,丹麦),基于傅里叶变换红外光谱(FTIR)法测定乳成分。

1.6.3 血清指标测定

采用全自动生化分析仪(BS-240VET,深圳迈瑞生物医疗有限公司)测定血清生化指标,所测指标包括:葡萄糖(GLU)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(T-CHO)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、尿素(UN)、尿酸(UA)、总胆红素(TBIL)含量。
采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒测定血清抗氧化、免疫和激素指标。抗氧化指标包括丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性和总抗氧化能力(T-AOC),分别采用硫代巴比妥酸(TBA)法、羟胺法、比色法、钼酸铵法、2,2'-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)法测定;免疫指标包括免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)含量,均采用免疫比浊法测定;激素指标包括孕酮(PROG)、雌二醇(E2)、催乳素(PRL)含量,均采用酶联免疫吸附检测(ELISA)法测定。

1.7 数据统计与分析

试验数据使用Excel 2010进行初步整理。首先采用Shapiro-Wilk法对数据进行正态性检验,并使用Levene法进行方差齐性检验。符合正态分布且方差齐性的数据,采用SPSS 26.0进行单因素方差分析,并采用Duncan氏法进行多重比较。结果数据均以“平均值±标准差”的形式表示,P<0.05表示差异显著,P<0.01表示差异极显著,P>0.05表示差异不显著。

2 结果与分析

2.1 补喂HMB-Ca对母马产奶量的影响

图1可知,随着泌乳期的推进,对照组的产奶量呈逐渐下降趋势,而补喂HMB-Ca能够提高母马的产奶量,且补喂HMB-Ca的2个试验组产奶量呈现先升高后降低的波动性变化。在第30天时,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组的产奶量均极显著高于对照组(P<0.01);在其余各测定时间点(第1、15、45、60天),各组间产奶量无显著差异(P>0.05)。
图1 补喂HMB-Ca对母马产奶量的影响

数据柱形标注相同小写字母或无字母表示差异不显著(P>0.05),不同小写字母表示差异显著(P<0.05),不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)。

Fig.1 Effects of HMB-Ca supplementation on milk yield of mares

Value columns with the same small letter or no letter mean no significant difference (P>0.05), while with different small letters mean significant difference (P<0.05), and with different capital letters mean extremely significant difference (P<0.01).

2.2 补喂HMB-Ca对母马乳成分的影响

表2可知,随着泌乳期的推进,对照组乳脂率呈先降低后升高的趋势,乳糖率呈持续降低趋势,而试验组则呈先升高后降低的趋势;各组的乳蛋白率、总固形物及酪蛋白含量均持续下降,但试验组的下降幅度较对照组平缓。在第1天时,对照组乳糖率极显著高于试验Ⅰ组和试验Ⅱ组(P<0.01);在第60天时,试验Ⅰ组酪蛋白含量显著高于对照组(P<0.05);在各测定时间点,各组间乳脂率、乳蛋白率、总固形物及非脂固形物含量均无显著差异(P>0.05)。
表2 补喂HMB-Ca对母马乳成分的影响

Table 2 Effects of HMB-Ca supplementation on milk composition of mares %

项目
Items
试验天数
Experimental days/d
对照组
CON group
试验Ⅰ组
Test group Ⅰ
试验Ⅱ组
Test group Ⅱ


乳脂率
Milk fat percentage
1 1.63±0.14 1.49±0.39 1.21±0.42
30 1.35±0.34 1.69±0.47 1.50±0.19
60 1.84±1.08 1.43±0.30 1.47±0.19


乳蛋白率
Milk protein percentage
1 2.12±0.24 2.32±0.18 2.29±0.12
30 1.84±0.11 2.05±0.13 2.05±0.26
60 1.56±0.16 1.79±0.16 1.75±0.25


乳糖率
Lactose percentage
1 7.06±0.35Aa 6.30±0.22Bb 6.42±0.24Bb
30 6.70±0.39 6.69±0.33 6.53±0.34
60 6.27±0.79 6.46±0.59 6.42±0.65


总固形物含量
Total solids content
1 11.19±0.55 10.97±0.61 10.65±0.29
30 10.25±0.82 10.86±0.76 10.15±0.93
60 9.80±1.14 10.01±1.14 9.58±1.26


非脂固形物含量
Non-fat milk solids content
1 9.42±0.61 9.54±0.52 9.67±0.31
30 8.70±0.52 9.19±0.31 8.98±0.69
60 7.83±0.84 8.45±0.70 8.30±0.93


酪蛋白含量
Casein content
1 1.39±0.19 1.58±0.15 1.56±0.13
30 1.19±0.09 1.35±0.10 1.34±0.19
60 0.97±0.11b 1.17±0.12a 1.13±0.18ab

同行数据肩标无字母或相同小写字母表示差异不显著(P>0.05),不同小写字母表示差异显著(P<0.05),不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)。下表同。

In the same row, values with no letter or the same small letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean extremely significant difference (P<0.01). The same as below.

2.3 补喂HMB-Ca对母马血清生化指标的影响

表3可知,在第30天时,对照组血清TP含量显著高于试验Ⅱ组(P<0.05);在第60天时,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组血清GLU、TG及TBIL含量均显著低于对照组(P<0.05),血清UN含量显著高于对照组(P<0.05),此外,试验Ⅰ组血清TP含量显著高于对照组(P<0.05);在各测定时间点,血清其他生化指标各组间均无显著差异(P>0.05)。
表3 补喂HMB-Ca对母马血清生化指标的影响

Table 3 Effects of HMB-Ca supplementation on serum biochemical indexes of mares

项目
Items
试验天数
Experimental days/d
对照组
CON group
试验Ⅰ组
Test group Ⅰ
试验Ⅱ组
Test group Ⅱ


葡萄糖
GLU/(mmol/L)
1 1.80±1.63 1.12±1.56 1.26±1.62
30 2.54±0.83 2.43±0.89 2.30±0.56
60 3.69±0.33a 1.85±0.36c 2.67±1.01b


甘油三酯
TG/(mmol/L)
1 0.15±0.05 0.15±0.06 0.14±0.04
30 0.15±0.06 0.10±0.05 0.12±0.06
60 0.25±0.12a 0.11±0.04b 0.15±0.04b


总胆固醇
T-CHO/(mmol/L)
1 1.98±0.39 1.79±0.12 2.01±0.12
30 1.95±0.26 1.86±0.15 1.92±0.08
60 1.72±0.19 1.86±0.15 1.86±0.16


高密度脂蛋白胆固醇
HDL-C/(mmol/L)
1 1.67±0.31 1.58±0.11 1.75±0.13
30 1.62±0.11 1.69±0.18 1.70±0.12
60 1.52±0.25 1.55±0.30 1.67±0.21


低密度脂蛋白胆固醇
LDL-C/(mmol/L)
1 0.21±0.10 0.11±0.05 0.13±0.04
30 0.15±0.06 0.15±0.06 0.15±0.03
60 0.15±0.03 0.12±0.04 0.14±0.02


总蛋白
TP/(g/L)
1 82.55±5.38 83.73±8.21 78.63±4.37
30 81.15±1.24a 76.95±6.60ab 75.08±4.30b
60 75.30±2.38b 86.30±12.42a 77.00±3.56ab


白蛋白
ALB/(g/L)
1 29.50±3.47 29.38±2.72 30.98±1.12
30 29.78±2.04 27.47±2.20 29.42±1.60
60 29.60±2.22 31.45±2.38 30.18±2.13


球蛋白
GLB/(g/L)
1 53.05±6.83 54.35±9.09 47.65±3.31
30 51.37±2.88 49.48±8.15 45.67±3.29
60 45.70±2.26 54.85±11.73 46.81±2.36


尿素
UN/(mmol/L)
1 7.77±0.89 8.09±1.03 7.95±0.85
30 7.25±0.95 7.38±0.75 7.01±1.48
60 8.42±0.83b 10.87±0.83a 10.25±0.93a


尿酸
UA/(μmol/L)
1 17.33±4.41 32.83±13.85 35.17±16.02
30 23.33±6.94 20.50±7.94 14.23±4.23
60 17.50±8.04 26.00±11.11 23.17±8.89


总胆红素
TBIL/(μmol/L)
1 5.60±1.46 3.73±1.68 4.75±1.41
30 7.87±2.04 7.58±2.97 7.77±1.53
60 16.88±10.49a 8.55±2.43b 8.65±1.93b

2.4 补喂HMB-Ca对母马血清抗氧化指标的影响

表4可知,在第1天时,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组血清MDA含量均显著低于对照组(P<0.05);在第30天时,试验Ⅰ组血清T-AOC显著高于对照组(P<0.05);在第60天时,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组血清SOD活性及T-AOC均显著高于对照组(P<0.05);在各测定时间点,血清其他抗氧化指标各组间均无显著差异(P>0.05)。
表4 补喂HMB-Ca对母马血清抗氧化指标的影响

Table 4 Effects of HMB-Ca supplementation on serum antioxidant indexes of mares

项目
Items
试验天数
Experimental days/d
对照组
CON group
试验Ⅰ组
Test group Ⅰ
试验Ⅱ组
Test group Ⅱ


丙二醛
MDA/(nmol/mL)
1 2.72±0.47a 1.91±0.25b 1.77±0.22b
30 2.74±0.52 2.97±0.79 2.48±0.67
60 3.04±0.90 2.82±1.03 2.92±0.89


超氧化物歧化酶
SOD/(U/mL)
1 122.77±0.62 123.26±10.07 126.36±7.02
30 127.51±6.41 125.99±6.74 119.43±7.19
60 120.59±5.95b 131.94±3.10a 126.83±5.41a


谷胱甘肽过氧化物酶
GSH-Px/(U/mL)
1 175.63±30.69 196.09±25.58 172.64±16.81
30 163.22±34.02 126.21±42.76 138.62±30.64
60 204.14±32.62 233.56±45.95 207.59±14.19


过氧化氢酶
CAT/(U/mL)
1 0.38±0.08 0.33±0.15 0.42±0.14
30 0.20±0.06 0.28±0.10 0.29±0.09
60 0.36±0.09 0.33±0.15 0.19±0.05


总抗氧化能力
T-AOC/(mmol/mL)
1 0.63±0.05 0.60±0.03 0.61±0.05
30 0.64±0.04b 0.68±0.05a 0.60±0.05ab
60 0.60±0.05b 0.68±0.05a 0.68±0.04a

2.5 补喂HMB-Ca对母马血清免疫指标的影响

表5可知,在第1天时,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组血清IgA、IgG、IgM含量均低于对照组,具体表现为2个试验组IgA含量均极显著低于对照组(P<0.01),试验Ⅱ组IgG含量显著低于对照组(P<0.05);在第30天时,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组血清IgA、IgG、IgM含量均高于对照组,其中试验Ⅱ组这3种免疫球蛋白含量均显著高于对照组(P<0.05);在第60天时,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组血清IgA、IgM含量极显著低于对照组(P<0.01),试验Ⅰ组血清IgG含量极显著低于对照组和试验Ⅱ组(P<0.01)。
表5 补喂HMB-Ca对母马血清免疫指标的影响

Table 5 Effects of HMB-Ca supplementation on serum immune indexes of mares mg/mL

项目
Items
试验天数
Experimental days/d
对照组
CON group
试验Ⅰ组
Test group Ⅰ
试验Ⅱ组
Test group Ⅱ


免疫球蛋白A
IgA
1 1.82±0.21Aa 1.44±0.23Bb 1.41±0.23Bb
30 1.31±0.34b 1.41±0.33ab 1.77±0.24a
60 1.57±0.17Aa 1.06±0.27Bb 1.12±0.22Bb


免疫球蛋白G
IgG
1 10.64±1.32a 9.26±0.79ab 8.75±1.21b
30 9.84±1.68b 10.14±1.39ab 11.99±1.66a
60 9.56±1.13Aa 7.03±1.56Bb 9.22±1.09Aa


免疫球蛋白M
IgM
1 1.33±0.11 1.25±0.17 1.17±0.16
30 1.15±0.19b 1.21±0.17ab 1.40±0.18a
60 1.18±0.11Aa 0.84±0.17Bb 0.92±0.12Bb

2.6 补喂HMB-Ca对母马血清激素指标的影响

表6可知,血清PROG、E2和PRL含量基本随泌乳期的推进呈现规律性波动:第1天时处于较高水平,第30天时有所下降,第60天时再次回升。组间比较显示,在第1天时,试验Ⅱ组血清PRL含量显著高于对照组(P<0.05);在第30天时,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组血清PROG含量均显著低于对照组(P<0.05);在第60天时,试验Ⅰ组血清E2含量显著高于对照组及试验Ⅱ组(P<0.05)。
表6 补喂HMB-Ca对母马血清激素指标的影响

Table 6 Effects of HMB-Ca supplementation on serum hormone indexes of mares

项目
Items
试验天数
Experimental days/d
对照组
CON group
试验Ⅰ组
Test group Ⅰ
试验Ⅱ组
Test group Ⅱ


孕酮
PROG/(ng/mL)
1 5.22±0.87 4.99±0.53 4.88±0.68
30 5.23±0.94a 4.13±0.73b 3.80±0.77b
60 4.71±0.45 5.11±0.44 4.28±0.59


雌二醇
E2/(ng/L)
1 62.80±8.03 66.70±6.04 71.80±8.53
30 56.94±10.60 49.95±7.59 55.52±8.48
60 62.46±7.87b 72.88±6.90a 60.06±7.44b


催乳素
PRL/(ng/mL)
1 23.17±2.47b 25.19±1.84ab 26.70±2.54a
30 18.70±2.80 18.04±1.98 17.99±2.22
60 23.11±2.55 25.77±3.51 22.39±3.52

3 讨论

3.1 补喂HMB-Ca对母马泌乳性能和乳成分的影响

产奶量与乳成分是评估伊犁马泌乳性能及经济价值的重要指标[14]。本研究结果表明,补喂HMB-Ca对母马泌乳性能具有影响。在正试期第1天,试验组马乳中乳糖率均低于对照组,这可能与HMB-Ca吸收后在代谢过程中对葡萄糖代谢产生短期竞争有关。乳糖对泌乳性能具有重要调控作用,乳糖率的升高会增加乳汁渗透压,促进水分由血液经乳腺细胞进入乳汁,因此乳糖率通常与产奶量呈正相关[15]。本试验结果符合上述生理规律,乳糖率较高的对照组在补喂初期产奶量也相对较高,说明乳糖在调节伊犁马泌乳性能中发挥关键作用。HMB调控乳糖合成的机制可能涉及激活哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)信号通路、上调线粒体生成相关基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)表达,进而改善线粒体功能[16],恢复乳腺对葡萄糖的摄取平衡。补喂至第60天,试验Ⅰ组马乳中酪蛋白含量较对照组提升20.6%,表明HMB可能通过提供代谢底物并调控相关信号通路,优化乳腺内源性蛋白质合成环境[17],且该调控效应呈现累积性特征[18]。龚睿[19]研究表明,HMB可能经由Rag三磷酸鸟苷酶(Rag GTPase)激活mTORC1-核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)信号通路,促进乳腺上皮细胞增殖与乳蛋白合成。Flummer等[20]报道,在母猪妊娠后期及哺乳期补充5 g/d HMB-Ca可显著提高乳脂率与乳中干物质含量;朱加桃[18]在围产期母猪中添加0.20% HMB-Ca可提高泌乳量与乳脂率;上述研究结论与本研究结果基本一致。然而,在本试验条件下,补喂HMB-Ca组马乳中乳脂率、乳糖率随泌乳期的推进呈现先升高后降低的趋势,而对照组则呈现先降低后升高的趋势,二者变化规律有所不同。这表明补喂HMB-Ca对泌乳母马乳成分的影响可能受到泌乳阶段和补喂时长的综合调控,其具体代谢机制因缺乏相关研究,仍需后续试验进一步探讨。与对照组相比,试验组马乳中乳蛋白率、总固形物及酪蛋白含量的下降幅度更为平缓,这进一步支持了HMB在促进乳腺发育与提升泌乳性能方面的潜在作用[21]

3.2 补喂HMB-Ca对母马血清生化指标的影响

血清生化指标是评估动物营养物质代谢、内环境稳态及整体健康状态的重要依据[22]。本试验中,补喂HMB-Ca对母马血清生化指标产生了影响,主要体现在蛋白质、葡萄糖和脂质代谢3个方面。在蛋白质代谢方面,补喂至第30天时,对照组母马血清TP含量显著高于试验Ⅱ组;补喂至第60天时,试验Ⅰ组血清TP、UN含量均显著高于对照组。UN作为蛋白质代谢的主要终产物,其在血清中的含量升高通常反映体内蛋白质分解代谢增强或氨基酸脱氨基作用加强[23]。试验Ⅰ组血清TP含量显著升高,可能与补喂HMB-Ca促进了机体蛋白质周转代谢、增强了蛋白质合成有关。万海峰等[16]报道,HMB作为亮氨酸代谢产物,可通过激活哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路调节蛋白质合成,这支持了本试验结果。
在葡萄糖与脂质代谢方面,补喂至第60天时,试验组血清GLU、TG及TBIL含量均显著低于对照组。俞俊等[24]研究同样表明HMB具有降低血糖的作用。血糖下降提示HMB-Ca可能改善了细胞对葡萄糖的利用效率。试验组血清TG含量显著低于对照组,表明HMB-Ca在调节脂代谢方面具有积极作用。Nissen等[25]研究表明,HMB作为亮氨酸代谢产物,可经β-羟基-β-甲基丁酰辅酶A(HMB-CoA)进一步代谢为3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA),参与胆固醇从头合成,并可显著降低血清TG和LDL-C含量。Duan等[26]对生长猪的研究也证实,HMB可通过调节脂肪组织中脂质代谢相关基因的表达改善脂质代谢,这与本试验结果一致。血清TBIL含量下降则提示肝脏处理血红素衍生物的负担减轻,可能反映了肝脏功能状态的改善[27]。综上所述,在本试验条件下,补喂HMB-Ca对泌乳母马的蛋白质、葡萄糖及脂质代谢均具有调节作用。

3.3 补喂HMB-Ca对母马抗氧化能力的影响

GSH-Px、CAT活性和MDA含量是反映机体氧化水平和抗氧化能力的重要指标。GSH-Px和CAT可通过分解过氧化氢,减少其在体内的积累[28]。MDA作为脂质过氧化程度的标志物,在死亡细胞表面及动脉粥样硬化等炎症病理过程中可形成氧化特异性表位[29]。本研究结果表明,补喂HMB-Ca可显著改善泌乳母马的抗氧化能力:第30天时,试验Ⅰ组血清T-AOC显著高于对照组;至第60天时,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组血清SOD活性及T-AOC均显著高于对照组。这一结果可能与HMB代谢产物β-羟基异戊酸调控氧化还原稳态有关——其可通过激活Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)-核因子红细胞2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号轴,促进SOD等Ⅱ相解毒酶的转录表达[30]。Tebay等[31]的研究显示,HMB代谢产物β-羟基异戊酸可能通过增强Nrf2核转位,诱导SODCAT等抗氧化酶基因的转录,从而缓解乳腺细胞的氧化损伤。Ji等[32]研究表明,补喂1.25 g/d HMB-Ca可显著提高藏羊空肠中CAT、GSH-Px、SOD活性及T-AOC,进而提升抗氧化能力,这与本研究结果一致。值得注意的是,试验Ⅰ组血清SOD活性的增幅优于试验Ⅱ组,提示较低的补饲剂量[10 g/(匹·d)]已足以充分激活抗氧化通路。尽管GSH-Px活性在各组间未表现出显著差异,但试验组血清MDA含量在补喂第60天时呈下降趋势,表明脂质过氧化损伤可能得到间接缓解。综上所述,补喂HMB-Ca可通过增强机体抗氧化防御功能,有效提升泌乳母马应对代谢应激的能力。

3.4 补喂HMB-Ca对母马免疫功能的影响

免疫球蛋白在机体病原防御中发挥关键作用[33]。本研究结果表明,补喂HMB-Ca对泌乳母马的免疫机能具有改善效果。补喂至第30天时,HMB-Ca有效提升了母马血清免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)含量。这一效应可能与HMB作为亮氨酸代谢物,通过改善机体蛋白质代谢状况,为免疫球蛋白的大量合成提供充足底物与能量有关[34]。此外,HMB及其代谢产物可能通过调控免疫细胞的代谢通路,促进浆细胞分化与抗体生成[35]。然而,至试验后期(第60天),高剂量HMB-Ca[试验Ⅱ组,20 g/(匹·d)]的免疫促进效应出现减弱。此现象可能与长期干预下机体的适应性调节有关:持续的营养物质流入可能通过负反馈机制调节相关信号通路的活性,或引起肠道菌群结构及其代谢产物的变化,从而间接影响宿主的免疫应答状态[36-37]。相关研究也支持HMB对免疫功能的积极作用。例如,耿文静等[38]在哺乳母猪饲粮中添加0.2% HMB-Ca,发现母猪血清中IgG含量极显著提高,且初乳中IgG含量有提高的趋势;Krakowski等[9]按母猪体重添加15 mg/kg HMB-Ca,同样发现母猪血清和初乳中IgG含量显著增加。此外,已有研究表明,饲粮中添加HMB可提高鱼类[39]、肉鸡[40]、犊牛[41]及山羊[42]等动物的免疫功能。此外,本研究结果表明,补喂适宜剂量[试验Ⅰ组,10 g/(匹·d)]的HMB-Ca在试验末期部分指标上优于补饲高剂量[试验Ⅱ组,20 g/(匹·d)],提示HMB-Ca对母马免疫功能的调控存在明确的剂量效应,适宜的剂量有助于实现更持久的免疫稳态。综上可知,补喂HMB-Ca可作为一种有效的营养干预策略,通过时序性调节泌乳母马的免疫功能。

3.5 补喂HMB-Ca对母马血清激素分泌的影响

研究表明,PROG含量增加会抑制泌乳[43]。在奶牛妊娠末期、泌乳即将启动时,血清PROG含量显著下降,而PRL含量则维持在较高水平[44]。E2作为一种类固醇激素,具有促进乳腺管道系统发育的功能。陈静等[45]研究发现,E2对奶牛乳腺上皮细胞具有双向调节作用:低水平时促进乳腺细胞增殖,诱导热休克蛋白70(HSP70)-SOD抗氧化通路,减少脂质过氧化;高水平时则抑制增殖并损伤细胞。PRL不仅是动物乳腺发育和分化的重要调节因子,更是泌乳启动和维持所必需的激素,在调节乳腺生长、乳汁生成与分泌及乳成分合成方面发挥关键作用[46]。本试验结果表明,补喂至第30天时,试验Ⅰ组与试验Ⅱ组血清PROG含量呈下降趋势,且显著低于对照组,同时各组血清E2含量均有所下降,但试验组的下降幅度大于对照组;补喂至第60天时,试验Ⅰ组血清E2含量高于对照组及试验Ⅱ组。然而,补喂HMB-Ca对相关激素分泌的影响机制,以及其最适补喂剂量对激素调控的具体效应,仍需进一步研究。

4 结论

在本试验条件下,补喂HMB-Ca可有效提高泌乳母马的产奶量,增强机体抗氧化能力和免疫功能,并调节激素分泌;综合各项指标,泌乳母马的HMB-Ca适宜补喂剂量为10 g/(匹·d)。
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