Chinese Journal of Animal Nutrition >

2023 , Vol. 35 >Issue 12: 7748 - 7758

DOI: https://doi.org/10.12418/CJAN2023.704

RESEARCH PAPER

Effects of Combination of Glucose Oxidase and Catalase on Growth Performance, Nutrient Digestibility, Serum Indices and Intestinal Morphology of Broilers

  • CHEN Dandie , 1 ,
  • FENG Dingyuan 2 ,
  • WANG Min 1 ,
  • CHEN Shuqin 1 ,
  • LU Jingyi 1 ,
  • LIU Ge 1 ,
  • LI Yangyuan 1 ,
  • HUANG Zhiyi 1 ,
  • WANG Yonghua 3 ,
  • GUO Yuguang , 1, *
Expand
  • 1 Guangdong VTR Biotechnology Co., Ltd., Zhuhai 510000, China
  • 2 College of Animal Science and Technology, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China
  • 3 College of Food Science and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China
* E-mail:

Received date: 2023-06-15

  Online published: 2023-12-11

Fold

Abstract

This experiment was conducted to investigate the effects of combination of glucose oxidase (GOD) and catalase (CAT) on growth performance, nutrient digestibility, serum indices and intestinal morphology of broilers. A total of 600 one-day-old healthy Ross 308 white feather broilers were randomly assigned to 6 groups with 10 replicates in each group and 10 broilers in each replicate (half male and half female). Broilers in the control group were fed a basal diet, and others in experimental groups were fed basal diets supplemented with 250 g/t GOD, 250 g/t CAT, 250 g/t GOD+125 g/t CAT, 250 g/t GOD+250 g/t CAT and 250 g/t GOD+500 g/t CAT, respectively. The experiment was divided into two stages: 1 to 21 days of age and 22 to 42 days of age, and the experiment lasted for 42 days. The results showed as follows: 1) during 1 to 21 days of age, compared with the control group, the body weight at 21 days of age and average daily gain of 250 g/t GOD+250 g/t CAT group were significantly increased (P<0.05), and the feed to gain was significantly decreased (P<0.05). 2) Compared with the control group, the ether extract digestibility during 1 to 21 days of age of 250 g/t GOD+250 g/t CAT group was significantly increased (P<0.05), and the digestibility of dry matter, crude protein and gross energy was increased by 1.94%, 1.47% and 2.37%, respectively (P>0.05). 3) Compared with the control group, the serum albumin content at 21 days of age of 250 g/t GOD group was significantly increased (P<0.05), the serum immunoglobulin G content of 250 g/t CAT group was significantly increased (P<0.05), and the serum immunoglobulin A content of 250 g/t GOD+125 g/t CAT group was significantly increased (P<0.05). 4) Compared with the control group, the serum superoxide dismutase activity at 21 days of age of 250 g/t CAT group was significantly decreased (P<0.05), and the serum malondialdehyde content of 250 g/t GOD+125 g/t CAT group was significantly increased (P<0.05). 5) Compared with the control group, the ileal crypt depth at 21 days of age of 250 g/t GOD+125 g/t CAT group and 250 g/t GOD+250 g/t CAT group was significantly decreased (P<0.05). In conclusion, dietary addition of 250 g/t GOD+250 g/t CAT can improve growth performance and nutrient digestibility of broilers during 1 to 21 days of age, and addition of 250 g/t GOD+125 g/t CAT and 250 g/t GOD+250 g/t CAT can promote the intestinal development of broilers.

Key words： glucose oxidase; catalase; growth performance; nutrient digestibility; serum indices; intestinal morphology

Cite this article

CHEN Dandie , FENG Dingyuan , WANG Min , CHEN Shuqin , LU Jingyi , LIU Ge , LI Yangyuan , HUANG Zhiyi , WANG Yonghua , GUO Yuguang . Effects of Combination of Glucose Oxidase and Catalase on Growth Performance, Nutrient Digestibility, Serum Indices and Intestinal Morphology of Broilers[J]. Chinese Journal of Animal Nutrition, 2023 , 35(12) : 7748 -7758 . DOI: 10.12418/CJAN2023.704

商品料中除中草药之外的促动物生长类药物添加剂,从2020年7月1日开始禁止生产销售。因此,开发能够代替抗生素作用的、绿色安全的产品是当今主要任务之一。葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,GOD)常常被作为功能性添加剂添加到动物饲粮中,在动物肠道中消耗氧气并产生氢[1-2],在我国畜牧生产中作为抗生素替代品得到广泛应用[3]。GOD能够在动物肠道内为有益菌创造赖以生存的厌氧环境,维持相对健康的肠道环境,有助于提高机体对饲料养分的消化与利用,促进动物生长。另外有研究表明,禽饲粮中添加GOD可消灭有害菌,改善肠道健康,提高机体对饲料的转化效率,提升生长性能的同时降低了饲养成本[4-5]。饲粮中添加GOD能够提高肉鸡的生长性能和免疫机能[6]。机体内的自由基能够被过氧化氢酶(catalase,CAT)清除,并将GOD氧化过程产生的过氧化氢分解成水和氧气[7]。研究发现,断奶仔猪饲粮中添加CAT可通过改善抗氧化能力促进仔猪生长[8]。根据预试验确定,在肉鸡饲粮中添加GOD(250 g/t,活性3 000 IU/g)作用效果明显且稳定。因此,本试验旨在研究不同剂量的CAT(125、250和500 g/t,活性3 000 IU/g)与固定剂量的GOD(250 g/t)复合对肉鸡生长性能、养分消化率、血清指标及肠道形态的影响,以结合二者的作用机理进一步探究二者相互协同作用,为复合GOD和CAT在畜禽养殖业中的应用提供数据支持。

1 材料与方法

1.1 试验设计与饲养管理

试验挑选600只1日龄罗斯308白羽肉鸡,随机分成6个组,每组10个重复,每个重复10只鸡(公母各占1/2)。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中分别添加250 g/t GOD、250 g/t CAT、250 g/t GOD+125 g/t CAT、250 g/t GOD+250 g/t CAT和250 g/t GOD+500 g/t CAT。试验分为1~21日龄和22~42日龄2个阶段,试验期42 d。
试验于广东溢多利生物科技股份有限公司乾务动物试验基地进行,试验期间严格按管理手册与免疫程序进行管理和接种。肉鸡进行笼养,采取粉料饲喂,自由采食和饮水。

1.2 试验饲粮

基础饲粮为玉米-豆粕型,参考NRC(1994)标准进行配制,其组成及营养水平见表1。
表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)

Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets (air-dry basis) %

项目
Items		 1~21日龄
1 to 21
days of age		 22~42日龄
22 to 42
days of age
原料Ingredients
玉米Corn 49.75 51.8
豆粕Soybean meal (43%) 34.4 29.2
米糠Rich bran 5 5
玉米蛋白粉 3 4
Corn gluten meal (60%)
石粉Limestone 1.15 1.05
磷酸氢钙CaHPO4 2 1.85
豆油Soybean oil 3.5 6
食盐NaCl 0.25 0.25
赖氨酸Lys (98.5%) 0.3 0.24
蛋氨酸Met (99%) 0.25 0.21
预混料Premix1) 0.4 0.4
合计Total 100 100
营养水平Nutrient levels2)
代谢能ME/(MJ/kg) 16.73 17.37
粗蛋白质CP 22.16 20.45
粗脂肪EE 6.64 9.12
钙Ca 1.01 0.96
总磷TP 0.76 0.73
赖氨酸Lys 1.3 1.13
蛋氨酸Met 0.59 0.53
蛋氨酸+半胱氨酸Met+Cys 0.94 0.87
色氨酸Trp 0.27 0.24
苏氨酸Thr 0.77 0.71

1)预混料为每千克饲粮提供 The premix provided the following per kg of diets: VA 6 000 IU,VB1 3 mg,VB2 4 mg,VB6 5 mg,VB12 0.2 mg,VD3 2 000 IU,VE 25 IU,VK3 2 mg,生物素 biotin 0.15 mg,D-泛酸 D-pantothenic acid 12 mg,烟酸 niacin 10 mg,抗氧化剂(乙氧基喹啉、二丁基羟基甲苯) antioxidant (ethoxyquinoline, dibutyl hydroxytoluene) 200 mg,Cu 10 mg,Fe 90 mg,Mn 80 mg,Zn 70 mg,I 0.45 mg,Se 0.40 mg。

2)粗蛋白质、粗脂肪、钙和总磷为实测值,其他营养水平为计算值。CP, EE, Ca and TP were measured values, while the other nutrient levels were calculated values.

1.3 指标测定与方法

1.3.1 生长性能测定

分别于21和42日龄,空腹12 h后以重复为单位进行称重,并对余料进行统计,计算1~21日龄、22~42日龄和1~42日龄的平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。

1.3.2 养分消化率测定

代谢试验采用外源指示剂法进行,提前2 d预饲含有指示剂二氧化钛(TiO2)的饲粮,15日龄09:00清粪,间隔24 h后于16~18日龄09:00各收粪1次,一共3次。将每天收集好的粪样以重复为单位混合均匀,剔除其中的皮屑、羽毛等,65 ℃烘干后回潮24 h,制作成风干样品,粉碎过40目,保存待测。
饲粮与粪样中TiO2含量与养分含量的测定方法分别为:TiO2含量按照邓雪娟等[9]的方法测定,干物质(DM)含量按照GB/T 6435—2014的方法测定,粗脂肪(EE)含量按照GB/T 6433—2006的方法测定,粗蛋白质(CP)含量按照GB/T 6432—2018的方法测定,总能(GE)使用Parr(6400)氧弹仪测定,钙(Ca)含量按照NY/T 1944—2010的方法测定,总磷(TP)按照GB/T 6437—2002的方法测定。养分消化率计算公式为:
某养分消化率(%)=100-[(粪样中该养分含量×饲粮中指示剂含量)/(饲粮中该养分含量×粪样中指示剂含量)×100]。

1.3.3 血清生化、免疫和抗氧化指标测定

试验第21天,在每个重复中挑取2只体重相近的鸡进行采血(10 mL),静置约30 min后用离心机离心(9 065×g,15 min),随即将上清液分离出来装入样品管中,于-20 ℃冰箱保存待测。
血清总蛋白(TP)含量采用双缩脲法测定,白蛋白(ALB)含量采用溴甲酚绿法测定,尿素氮(UN)含量采用速率法测定,并计算球蛋白(GLB)含量和白蛋白/球蛋白(A/G),试剂盒均购自科方生物技术有限公司。
血清免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)和免疫球蛋白M(IgM)含量均采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定,试剂盒均购自武汉优尔生科技股份有限公司。
血清超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量均采用比色法测定,总抗氧化能力(T-AOC)采用ABTS法测定,以上指标测定所用试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。

1.3.4 肠道形态测定

试验第21天,每个重复取2只体重相近的鸡,采用二氧化碳处死后进行解剖取样,十二指肠、空肠和回肠分别于中部位置取2 cm肠段,用生理盐水清理内容物后置于装有10%甲醛溶液(V/V)的采集管内固定,肠段经脱水、二甲苯透明、石蜡包埋后制成切片,并染色封片进行显微镜观察、拍照,绒毛高度(VH)和隐窝深度(CD)的测量利用Image Pro Plus 6.0软件进行,并计算绒毛高度/隐窝深度(V/C)。

1.4 数据分析

试验数据经过Excel 2010整理后,采用SPSS 19.0软件中的单因素方差分析(one-way ANOVA)对试验数据进行统计与分析,Duncan氏法对组间差异显著性进行多重比较,结果用“平均值±标准差”表示,P<0.05表示差异显著。

2 结果

2.1 复合GOD与CAT对肉鸡生长性能的影响

由表2可知,1~21日龄,与对照组相比,250 g/t GOD+250 g/t CAT组的21日龄体重和ADG显著升高(P<0.05),F/G显著降低(P<0.05);各试验组的ADFI无显著差异(P>0.05)。22~42日龄和1~42日龄,各组之间生长性能无显著差异(P>0.05)。
表2 复合GOD与CAT对肉鸡生长性能的影响

Table 2 Effects of combination of GOD and CAT on growth performance of broilers

项目
Items		 对照组
Control
group		 250 g/t葡萄
糖氧化酶组
250 g/t
GOD group		 250 g/t过氧化
氢酶组
250 g/t
CAT group		 250 g/t葡萄糖
氧化酶+125 g/t
过氧化氢酶组
250 g/t GOD+
125 g/t CAT group		 250 g/t葡萄糖
氧化酶+250 g/t
过氧化氢酶组
250 g/t GOD+
250 g/t CAT
group		 250 g/t葡萄糖
氧化酶+500 g/t
过氧化氢酶组
250 g/t GOD+
500 g/t CAT
group		 P值
P-value
1~21日龄1 to 21 days of age
1日龄体重BW at 1 day of age/g 42.00±0.15 42.03±0.18 41.93±0.17 42.16±0.16 41.86±0.15 42.14±0.16 0.992
21日龄体重BW at 21 days of age/g 872.14±7.43c 899.26±7.43b 901.03±7.83ab 900.75±7.43ab 923.94±8.30a 906.08±7.83ab 0.008
平均日增重ADG/(g/d) 39.53±0.35c 40.83±0.35b 40.91±0.37b 40.89±0.35b 42.14±0.37a 41.15±0.37ab 0.008
平均日采食量ADFI/(g/d) 49.64±0.09 49.83±0.09 49.80±0.09 49.78±0.09 49.77±0.09 49.59±0.09 0.315
料重比F/G 1.26±0.01a 1.22±0.01b 1.21±0.01b 1.22±0.01b 1.18±0.01c 1.20±0.01bc 0.007
22~42日龄22 to 42 days of age
42日龄体重BW at 42 days of age/g 2 797.89±25.59 2 784.93±25.59 2 811.50±25.59 2 834.09±24.13 2 811.13±22.89 2 773.15±25.59 0.332
平均日增重ADG/(g/d) 90.62±1.27 88.98±1.12 91.02±1.18 91.80±1.12 88.86±1.12 88.74±1.18 0.367
平均日采食量ADFI/(g/d) 142.19±2.01 144.41±2.01 145.60±2.14 144.20±2.14 144.12±1.91 146.04±2.14 0.995
料重比F/G 1.56±0.03 1.60±0.03 1.59±0.03 1.56±0.03 1.60±0.03 1.59±0.03 0.580
1~42日龄1 to 42 days of age
平均日增重ADG/(g/d) 65.62±0.61 65.31±0.61 65.94±0.61 66.48±0.57 65.94±0.55 65.03±0.61 0.333
平均日采食量ADFI/(g/d) 96.40±1.00 97.72±1.00 97.72±1.00 97.86±1.07 96.94±0.90 97.83±1.00 0.993
料重比F/G 1.46±0.02 1.50±0.02 1.50±0.02 1.45±0.02 1.47±0.02 1.46±0.02 0.798

同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05),相同或无字母表示差异不显著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

2.2 复合GOD与CAT对肉鸡1~21日龄养分消化率的影响

由表3可知,与对照组相比,250 g/t GOD+250 g/t CAT组肉鸡1~21日龄EE消化率显著升高(P<0.05);DM、CP和GE消化率分别提高了1.94%、1.47%和2.37%,但差异不显著(P>0.05)。
表3 复合GOD与CAT对肉鸡1~21日龄养分消化率的影响

Table 3 Effects of combination of GOD and CAT on nutrient digestibility of broilers during 1 to 21 days of age %

项目
Items		 对照组
Control
group		 250 g/t葡萄糖
氧化酶组
250 g/t
GOD group		 250 g/t过氧化
氢酶组
250 g/t CAT group		 250 g/t葡萄糖
氧化酶+125 g/t
过氧化氢酶组
250 g/t GOD+
125 g/t CAT group		 250 g/t葡萄糖
氧化酶+250 g/t
过氧化氢酶组
250 g/t GOD+
250 g/t CAT
group		 250 g/t葡萄糖
氧化酶+500 g/t
过氧化氢酶组
250 g/t GOD+
500 g/t CAT
group		 P值
P-value
干物质DM 68.49±1.92ab 67.36±2.31ab 66.61±1.50bc 64.23±1.48c 69.82±1.57a 66.15±1.48bc 0.035
粗蛋白质CP 61.70±2.82a 59.23±3.76a 60.29±1.05a 54.76±2.50b 62.61±2.41a 59.10±3.15a 0.013
总能GE 73.72±1.74ab 72.82±1.98bc 73.00±1.46bc 70.73±1.44c 75.47±1.38a 72.69±1.29bc 0.015
粗脂肪EE 74.94±3.31b 77.71±1.40ab 78.32±3.39ab 78.44±3.13ab 80.12±0.76a 77.32±2.70ab 0.048

2.3 复合GOD与CAT对肉鸡21日龄血清生化与免疫指标的影响

由表4可知,各组之间肉鸡21日龄血清GLB、IgM含量和A/G均无显著差异(P>0.05)。与对照组对比,各试验组肉鸡21日龄血清TP、UN含量均无显著差异(P>0.05);250 g/t GOD组血清ALB含量显著升高(P<0.05),250 g/t CAT组血清IgG含量显著升高(P<0.05),250 g/t GOD+125 g/t CAT组血清IgA含量显著升高(P<0.05)。
表4 复合GOD与CAT对肉鸡21日龄血清生化与免疫指标的影响

Table 4 Effects of combination of GOD and CAT on serum biochemical and immune indices of broilers at 21 days of age

项目
Items		 对照组
Control
group		 250 g/t葡萄糖
氧化酶组
250 g/t GOD
group		 250 g/t过氧化
氢酶组
250 g/t CAT
group		 250 g/t葡萄糖
氧化酶+125 g/t
过氧化氢酶组
250 g/t GOD+
125 g/t CAT
group		 250 g/t葡萄糖
氧化酶+250 g/t
过氧化氢酶组
250 g/t GOD+
250 g/t CAT
group		 250 g/t葡萄糖
氧化酶+500 g/t
过氧化氢酶组
250 g/t GOD+
500 g/t CAT
group		 P值
P-value
总蛋白TP/(g/L) 28.83±1.40ab 32.03±1.66a 32.10±2.26a 30.08±3.40ab 28.78±2.79ab 27.88±0.92b 0.045
白蛋白ALB/(g/L) 13.58±0.83bc 14.75±0.42a 14.15±0.55ab 14.15±0.54ab 13.05±0.65c 12.95±0.81c 0.036
球蛋白GLB/(g/L) 15.25±0.66 17.28±1.37 17.95±2.09 15.93±3.39 15.73±2.49 14.93±0.91 0.291
白蛋白/球蛋白A/G 0.89±0.03 0.86±0.06 0.80±0.10 0.92±0.17 0.84±0.12 0.87±0.09 0.689
尿素氮UN/(mmol/L) 2.58±0.10ab 2.70±0.08a 2.55±0.10ab 2.58±0.05ab 2.58±0.15ab 2.45±0.06b 0.048
免疫球蛋白A IgA/(ng/mL) 62.06±18.72b 94.11±22.83ab 83.50±31.03ab 102.79±19.51a 81.93±8.16ab 60.96±21.55b 0.012
免疫球蛋白G IgG/(ng/mL) 1.23±0.60b 2.44±1.64ab 5.33±1.61a 2.59±2.26ab 4.12±3.01ab 1.71±0.23b 0.048
免疫球蛋白M IgM/(pg/mL) 53.84±3.31 59.95±3.78 60.22±4.82 57.12±3.20 61.35±4.56 48.96±3.67 0.033

2.4 复合GOD与CAT对肉鸡21日龄血清抗氧化指标的影响

由表5可知,各组之间肉鸡21日龄血清GSH-Px、CAT活性和T-AOC均无显著差异(P>0.05)。与对照组对比,250 g/t CAT组肉鸡21日龄血清SOD活性显著降低(P<0.05),250 g/t GOD+125 g/t CAT组血清MDA含量显著升高(P<0.05)。
表5 复合GOD与CAT对肉鸡21日龄血清抗氧化指标的影响

Table 5 Effects of combination of GOD and CAT on serum antioxidant indices of broilers at 21 days of age

项目
Items		 对照组
Control
group		 250 g/t葡萄糖
氧化酶组
250 g/t GOD
group		 250 g/t过氧
化氢酶组
250 g/t CAT
group		 250 g/t葡萄糖
氧化酶+125 g/t
过氧化氢酶组
250 g/t GOD+
125 g/t CAT
group		 250 g/t葡萄糖
氧化酶+250 g/t
过氧化氢酶组
250 g/t GOD+
250 g/t CAT
group		 250 g/t葡萄糖
氧化酶+500 g/t
过氧化氢酶组
250 g/t GOD+
500 g/t CAT
group		 P值
P-value
谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px/(U/mL) 2 984.48±79.76 3 225.87±72.47 2 865.52±76.07 3 112.07±71.16 2 741.38±76.55 2 782.76±69.48 0.231
过氧化氢酶CAT/(U/mL) 2.23±0.48 2.19±0.73 2.35±1.21 1.51±1.15 2.36±2.04 2.74±1.27 0.842
超氧化物歧化酶SOD/(U/mL) 295.69±64.66a 269.66±45.58ab 193.75±76.86b 309.82±43.63a 258.51±27.20ab 281.57±35.93ab 0.042
总抗氧化能力T-AOC/(U/mL) 0.79±0.02 0.87±0.06 0.83±0.06 0.84±0.10 0.76±0.04 0.77±0.07 0.217
丙二醛MDA/(nmol/mL) 24.05±5.02b 21.62±2.41b 20.22±6.31b 39.12±5.58a 20.96±6.80b 23.38±4.50b 0.039

2.5 复合GOD与CAT对肉鸡21日龄肠道形态的影响

由表6可知,各组之间肉鸡21日龄十二指肠、空肠、回肠的绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度均无显著差异(P>0.05),十二指肠、空肠的隐窝深度无显著差异(P>0.05)。与对照组相比,250 g/t GOD+125 g/t CAT组和250 g/t GOD+250 g/t CAT组肉鸡21日龄回肠隐窝深度显著降低(P<0.05)。
表6 复合GOD与CAT对肉鸡21日龄肠道形态的影响

Table 6 Effects of combination of GOD and CAT on intestinal morphology of broilers at 21 days of age

项目
Items		 对照组
Control
group		 250 g/t葡萄糖
氧化酶组
250 g/t GOD
group		 250 g/t过氧化
氢酶组
250 g/t CAT
group		 250 g/t葡萄糖
氧化酶+125 g/t
过氧化氢酶组
250 g/t GOD+
125 g/t CAT
group		 250 g/t葡萄糖
氧化酶+250 g/t
过氧化氢酶组
250 g/t GOD+
250 g/t CAT
group		 250 g/t葡萄糖
氧化酶+500 g/t
过氧化氢酶组
250 g/t GOD+
500 g/t CAT
group		 P值
P-value
绒毛高度VH/μm
十二指肠Duodenum 1 613.65±57.13 1 645.38±53.74 1 673.50±56.20 1 576.50±66.87 1 551.50±69.11 1 512.83±64.69 0.917
空肠Jejunum 1 249.88±39.01 1 204.88±37.21 1 080.00±53.60 1 130.75±44.15 1 260.50±31.25 1 108.50±42.55 0.293
回肠Ileum 970.50±44.02 1035.13±74.79 944.75±100.95 852.75±72.37 922.63±162.64 847.13±173.48 0.223
隐窝深度CD/μm
十二指肠Duodenum 161.00±38.97 145.38±13.76 183.50±36.20 137.17±17.82 136.88±15.88 147.00±77.16 0.362
空肠Jejunum 133.75±23.39 126.38±21.26 119.88±28.77 115.38±13.03 105.00±21.86 127.75±18.84 0.510
回肠Ileum 174.63±30.51a 181.00±16.27a 142.25±29.20ab 134.13±29.43b 125.63±18.94b 147.38±31.14ab 0.047
绒毛高度/隐窝深度V/C
十二指肠Duodenum 11.13±2.85 11.95±0.97 8.90±1.00 11.75±0.93 11.93±1.27 8.82±3.04 0.091
空肠Jejunum 9.92±1.78 10.30±2.05 9.55±1.57 10.57±1.92 11.34±0.22 9.24±0.39 0.449
回肠Ileum 5.66±1.71 6.19±0.35 7.01±1.00 6.97±1.61 7.69±1.48 6.02±1.01 0.269

3 讨论

3.1 复合GOD与CAT对肉鸡生长性能的影响

在动物生产中,对动物生长性能相关指标进行统计与分析,可更加直观地体现出饲养效果,其中生长性能相关指标包括ADFI、ADG和F/G等。侯海锋等[10]研究表明,蛋鸡饲粮中添加1 kg/t的GOD显著提高了产蛋量,降低了料蛋比。庞家满等[11]与郭玉光等[12]研究表明,肉鸡饲粮中添加GOD提高了肉鸡对饲料的利用率和ADG。本试验研究中,与对照组相比,肉鸡饲粮中添加250 g/t GOD+250 g/t CAT显著降低了1~21日龄的F/G;单独添加250 g/t GOD使F/G降低了3.17%,250 g/t GOD与250 g/t CAT复合添加使F/G降低了6.35%,但250 g/t GOD与500 g/t CAT复合添加使F/G有所上升。戴晋军等[13]研究表明,肉鸡饲粮中添加200 g/t的GOD后,其生长全期的F/G比对照组降低了11.31%,与本试验结果存在差异的因素可能是肉鸡品种的不同所致。唐明红[14]研究表明,在黄羽肉鸡饲粮中添加100、150和200 U/kg CAT(20、30和40 g/t)可提高肉鸡末重、ADG、ADFI,降低F/G。郑伟萍等[15]研究发现,在肉鸡饲粮中添加CAT可降低肉鸡生长前期F/G,添加750 U/kg CAT可提高肉鸡生长后期与全期ADG,并降低F/G。本试验研究表明,肉鸡饲粮中无论是GOD、CAT单独添加还是GOD+CAT复合添加,均可提高1~21日龄生长性能,而在22~42日龄则无显著的应用效果,原因可能是热应激影响导致机体免疫与抗氧化水平下降,进而影响机体养分的消化吸收与利用。CAT与GOD复合添加后,生长性能随着CAT添加量提高而提高,但当CAT添加量达到500 g/t时生长性能降低;1~21日龄肉鸡饲粮中添加250 g/t GOD+250 g/t CAT的生长性能最佳。提高生长性能的原因可能是GOD进入肠道后,消耗氧气产生的葡萄糖酸降低肠道pH,为有益菌的生存提供有利条件,维持了肠道健康,促进了肠道消化吸收;加入CAT后可将GOD产生的能够抑制GOD活性的过氧化氢分解成水和氧气,清除自由基,提高内源消化酶活性,而氧气再次被GOD利用产生更多的葡萄糖酸,使营养物质在肠道中发酵产生利于消化吸收的游离的挥发性脂肪酸,进而改善生长性能。

3.2 复合GOD与CAT对肉鸡1~21日龄养分消化率的影响

饲粮中的营养成分不能被动物充分的吸收利用[16]。在研究中通常通过对饲料和动物代谢物中养分进行测定,并计算养分消化率来评估动物对饲料养分的消化与吸收性能[17]。吴昊等[18]和崔细鹏等[19]研究表明,不同剂量的GOD添加到肉鸡饲粮中,可不同程度地提高CP消化率有。陈嘉铭等[20]研究表明,在母猪饲粮中添加CAT对可显著提高CP和EE消化率,且随CAT添加量的提高而升高。刘欣等[21]研究表明,在饲粮中添加0.1%的CAT可极显著提高乌苏里貂的CP和EE消化率。以上结果与本试验研究结果不一致,其原因可能是酶制剂来源、试验动物与饲养环境不同所致。本试验研究结果表明,与对照组相比,250 g/t GOD+250 g/t CAT组肉鸡1~21日龄DM、CP、GE和EE消化率分别提高了1.94%、1.47%、2.37%和6.91%,其中仅有EE消化率呈现出显著差异,这与尹胜杰[7]研究结果一致。本试验研究中,除了EE消化率在添加250 g/t GOD+250 g/t CAT后显著提高外,其他养分消化率在添加酶制剂后未呈现出较好的添加效果和互作效应,可能是热应激引起的。而当复合酶中的CAT添加量达500 g/t后出现抑制效果,养分消化率下降。其原因可能与二者的添加比例有关,如一定量的CAT将GOD产生的过氧化氢完全清除后,剩余的CAT在机体内存留并与多余的氧气作用,导致肠道内的营养物质发生质变,从而降低养分消化率及其他功能。

3.3 复合GOD与CAT对肉鸡21日龄血清生化与免疫指标的影响

血清TP、ALB、GLB含量及A/G是衡量肝脏合成和储备功能的指标,ALB是由肝脏合成的,当血清中ALB含量减少时肝脏损伤程度加大,而若肝脏发生炎症则会引起血清GLB含量的升高。动物机体对蛋白质的分解代谢水平通过蛋白质的代谢产物UN来反映,一般而言,蛋白质沉积率开始出现下降则血清中UN含量升高。动物体液免疫的主要免疫分子是由免疫球蛋白来介导的,因此免疫球蛋白是衡量机体免疫功能的重要指标,当机体免疫功能增强时,血清IgA、IgG、IgM含量升高。赵国先等[22]研究发现,在蛋鸡饲粮中添加GOD可显著提高血清ALB含量,这与本试验肉鸡饲粮中添加250 g/t GOD显著提高血清ALB含量的结果一致。刘娇[23]研究表明,将GOD添加到攻毒肉鸭饲粮中,提高了血清IgG和IgM含量,增强了机体的免疫功能,并降低了血清TP和GLB含量,进而大大减少了炎症的发生。穆淑琴等[24]研究表明,将GOD添加到仔猪饲粮中,促进了仔猪免疫性能的提升。Wu等[25]研究表明,在肉仔鸡饲粮中添加GOD可提高血清IgA含量,促进肠道屏障功能提升。刘欣等[21]研究表明,在饲粮中添加CAT可显著提高貂血清IgA含量,添加0.1%和0.2%的CAT可显著提高血清IgG含量,提高免疫能力。本试验研究结果表明,饲粮中添加250 g/t GOD+125 g/t CAT可显著提高血清IgA含量,但其随着CAT添加量由250 g/t提高到500 g/t,血清IgA含量下降,其原因可能是由于CAT添加量太多占据了大部分空间而将酶活性位点隐蔽,从而降低了GOD活性[26],进而降低免疫能力;此外,饲粮中添加250 g/t CAT可显著提高血清IgG含量。

3.4 复合GOD与CAT对肉鸡21日龄血清抗氧化指标的影响

不同的抗氧化酶在整个抗氧化过程中具有不同的抗氧化作用。通常测定血清中的CAT、SOD和GSH-Px等抗氧化酶来反映机体的抗氧化能力,如协助清除体内过氧化物、超氧化物、自由基等。机体的综合性抗氧化能力通过T-AOC来反映。机体脂质的氧化程度通过MDA含量体现,MDA含量增加则破坏细胞的完整性,MDA含量下降则与脂质氧化程度减缓。Wang等[27]研究表明,肉鸡饲粮中添加GOD到能够增强机体的抗氧化能力,降低肝脏MDA含量,并提高肝脏GSH-Px活性和T-AOC。赵晓芳等[28]与杨久仙等[29]研究结果表明,GOD可缓解动物体霉菌毒素中毒,其主要原因是毒素在GOD进入肝脏后被迅速氧化代谢。陈嘉铭等[20]研究表明,饲粮中添加CAT可提高母猪血清和初乳的抗氧化能力,初乳间接为仔猪提供抗氧化物质。本试验研究结果表明,各组之间肉鸡21日龄血清GSH-Px、CAT活性和T-AOC均无显著差异,而单独添加250 g/t CAT显著降低了血清SOD活性,复合添加250 g/t GOD+125 g/t CAT显著提高了血清MDA含量,可能是由于高温雷雨天气引起的应激,使过氧化氢和自由基等过度累积,导致体内的氧化-还原失去平衡状态。

3.5 复合GOD与CAT对肉鸡21日龄肠道形态的影响

动物机体对养分的消化吸收能力可通过肠道形态情况反映,随着小肠绒毛高度的增加和隐窝深度变浅,养分的吸收面积增大的同时还提高了上皮细胞的成熟度及完整性,促进养分的消化与吸收[30]。同时,肠道形态结构还受肠道微生物区系的影响,特别是在发生应激时[31]。黄婧溪[32]和尹胜杰[7]研究结果表明,饲粮中添加GOD可提高小肠的绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度。本试验研究结果表明,各组之间肉鸡21日龄十二指肠、空肠的隐窝深度及十二指肠、空肠、回肠的绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度均无显著差异;单独添加250 g/t CAT时隐窝深度有所降低,但差异不显著,与方锐等[8]和战晓燕等[33]研究结果一致;而复合添加250 g/t GOD+125 g/t CAT和250 g/t GOD+250 g/t CAT后,显著降低了回肠隐窝深度,这说明二者复合添加后呈现出协同作用,但当CAT添加量提高到500 g/t后,对肠道形态的互作效应出现抑制效应,这可能是多余的CAT与氧气反应后营养物质发生变质,改变肠道内环境,进而破坏肠壁完整性并抑制肠道发育,此猜测有待进一步研究确认。

4 结论

在本试验条件下,饲粮中添加250 g/t GOD+250 g/t CAT可提高肉鸡1~21日龄的生长性能和养分消化率;添加250 g/t GOD+125 g/t CAT和250 g/t GOD+250 g/t可促进肉鸡肠道发育。

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