1 材料与方法
1.1 试验设计
1.2 试验饲粮
表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis)% |
| 项目 Items | 含量 Content |
|---|---|
| 原料 Ingredients | |
| 玉米 Corn | 55.00 |
| 豆粕 Soybean meal | 23.00 |
| 麸皮 Bran | 4.50 |
| 菊花梗粉 Chrysanthemum stem powder | 5.90 |
| 豆油 Soybean oil | 3.00 |
| 石粉 Limestone | 6.00 |
| 磷酸氢钙 CaHPO4 | 1.50 |
| 食盐 NaCl | 0.40 |
| 微量元素预混料 Trace element premix1) | 0.50 |
| 维生素预混料 Vitamin premix1) | 0.10 |
| 蛋氨酸 Methionine | 0.10 |
| 合计 Total | 100.00 |
| 营养水平 Nutrient levels2) | |
| 代谢能 ME/(MJ/kg) | 11.29 |
| 粗蛋白质 CP | 15.97 |
| 粗纤维 CF | 4.76 |
| 钙 Ca | 2.66 |
| 非植酸磷 NPP | 0.36 |
| 赖氨酸 Lys | 0.86 |
| 蛋氨酸+胱氨酸 Met+Cys | 0.72 |
| 色氨酸 Trp | 0.19 |
| 苏氨酸 Thr | 0.61 |
| 生物素 Biotin/(mg/kg) | 0.16 |
1)微量元素预混料和维生素预混料为每千克饲粮提供 The trace elements premix and vitamin premix provided the following per kg of the diet: VA 9 000 IU,VD3 2 000 IU,VE 40 mg,VK3 0.8 mg,VB2 4.0 mg,VB6 4.0 mg,VB1 2.0 mg,VB12 12 μg,烟酰胺 nicotinic acid 30 mg,泛酸钙 calcium pantothenate 11 mg,叶酸 folic acid 0.5 mg,Se 0.5 mg,Fe 80 mg,Mn 30 mg,Cu 4 mg,I 0.3 mg,Zn 0.3 mg。 2)粗蛋白质、粗纤维、钙和非植酸磷为实测值,其余营养水平为计算值。CP, CF, Ca and NPP were measured values, while the other nutrient levels were calculated values. |
1.3 饲养管理
1.4 测定指标与方法
1.4.1 血清生化指标
1.4.2 肠道黏膜上皮形态
1.4.3 16S rDNA高变区/内源转录间隔区(ITS)PCR扩增产物的高通量测序
1.5 数据处理与分析
2 结果
2.1 生物素对产蛋期种鹅血清生化指标的影响
表2 生物素对产蛋期种鹅血清生化指标的影响Table 2 Effects of biotin on serum biochemical indices of breeding geese during laying period |
| 项目 Items | 生物素添加水平 Biotin supplemental level/(mg/kg) | 均值 标准误 SEM | P值 P-value | |||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 0(对照 Control) | 0.1 | 0.2 | 0.3 | 0.4 | 0.5 | 生物素 Biotin | 线性 Linear | 二次 Quadratic | ||
| 总蛋白 TP/(g/L) | 58.7b | 63.8ab | 67.3a | 65.5a | 65.2a | 64.1ab | 2.759 | 0.015 | 0.032 | 0.003 |
| 白蛋白 ALB/(g/L) | 24.9b | 27.0a | 27.1a | 27.4a | 26.2ab | 27.4a | 0.279 | 0.047 | 0.051 | 0.081 |
| 甘油三酯 TG/(mmol/L) | 2.54 | 2.89 | 2.90 | 2.91 | 2.89 | 2.84 | 0.092 | 0.872 | 0.463 | 0.340 |
| 总胆固醇 TC/(mmol/L) | 2.61 | 2.38 | 3.79 | 3.41 | 4.01 | 3.21 | 0.306 | 0.631 | 0.253 | 0.396 |
| 高密度脂蛋白胆固醇 HDL-C/(mmol/L) | 1.96b | 3.05ab | 3.52a | 3.35a | 3.55a | 3.38a | 0.170 | 0.042 | 0.011 | 0.036 |
| 低密度脂蛋白胆固醇 LDL-C/(mmol/L) | 2.22 | 2.12 | 2.10 | 2.02 | 1.97 | 2.01 | 0.063 | 0.897 | 0.262 | 0.673 |
同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05),相同或无字母表示差异不显著(P>0.05)。下表同。 | |
In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below. |
2.2 生物素对产蛋期种鹅十二指肠组织结构的影响
表3 生物素对产蛋期种鹅十二指肠组织结构的影响Table 3 Effects of biotin on duodenal histological structure of breeding geese during laying period |
| 项目 Items | 生物素添加水平 Biotin supplemental level/(mg/kg) | 均值 标准误 SEM | P值 P-value | |||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 0(对照 Control) | 0.1 | 0.2 | 0.3 | 0.4 | 0.5 | 生物素 Biotin | 线性 Linear | 二次 Quadratic | ||
| 绒毛高度 Villus height/μm | 658.14c | 635.61c | 853.96a | 775.57b | 653.94c | 732.72b | 19.479 | <0.001 | 0.014 | 0.002 |
| 隐窝深度 Crypt depth/μm | 220.05 | 244.62 | 241.30 | 173.59 | 257.65 | 244.94 | 9.577 | 0.107 | 0.575 | 0.388 |
| 绒毛高度/隐窝深度 Villus height/crypt depth | 3.00b | 2.63b | 3.59ab | 4.65a | 2.59b | 3.05b | 0.211 | 0.011 | 0.698 | 0.030 |
2.3 生物素对产蛋期种鹅盲肠菌群结构的影响
2.3.1 产蛋期种鹅盲肠微生物Alpha多样性分析
表4 产蛋期种鹅盲肠微生物Alpha多样性Table 4 Alpha diversity of cecal microbiota of breeding geese during laying period |
| 项目 Items | 生物素添加水平 Biotin supplemental level/(mg/kg) | 均值标准误 SEM | P值 P-value | |
|---|---|---|---|---|
| 0(对照 Control) | 0.2 | |||
| Chao1指数 Chao1 index | 2 597.42 | 2 241.24 | 177.177 | 0.248 |
| ACE指数 ACE index | 2 895.30 | 2 418.88 | 181.593 | 0.576 |
| Shannon指数 Shannon index | 4.88 | 4.63 | 0.502 | 0.951 |
| Simpson指数 Simpson index | 53.38 | 54.46 | 13.499 | 0.573 |
| Coverage指数 Coverage index | 0.99 | 0.99 | 0.000 | 0.860 |
2.3.2 产蛋期种鹅盲肠内容物操作分类单位(OTU)聚类分析
2.3.3 生物素对产蛋期种鹅盲肠微生物群落组成分析
图4 属水平物种分布组成其他:Others;拟杆菌属:Bacteroides;梭杆菌属:Fusobacterium;未分类拟杆菌属:Bacteroidales-unclassified;未分类瘤胃球菌科:Ruminococcaceae-unclassified;未分类拟杆菌属-ge:Bacteroidales-uncultured-ge;脱硫弧菌属:Desulfovibrio;理研菌科-RC9:Rikenellaceae-RC9-gut-group;弯曲杆菌属:Campylobacter;普雷沃氏菌科-Ga6A1:Prevotellaceae-Ga6A1-group;弗雷克氏志贺氏菌:Fournierella;罗伊氏乳杆菌:Lactobacillus;罕见小球菌属:Subdoligranulum;巨单胞菌属:Megamonas;阿克曼氏菌属:Akkermansia;未分类毛螺菌科:Lachnospiraceae-unclassified;麦氏梭状芽孢杆菌:Erysipelatoclostridium;另枝菌属:Alistipes。 Fig.4 Composition of species distribution at genus level |
