Chinese Journal of Animal Nutrition >

2024 , Vol. 36 >Issue 4: 2612 - 2622

DOI: https://doi.org/10.12418/CJAN2024.225

RESEARCH PAPER

A Study on Optimal Dietary Crude Protein Level of Adult Manis javanica

  • HE Huibing , 1, 2 ,
  • WANG Kai 2 ,
  • XU Xuelin 2 ,
  • AN Fuyu 2 ,
  • LI Yongzheng 2 ,
  • WANG Xianghe 2 ,
  • LI Rui 3 ,
  • ZHOU Xihong 3 ,
  • YIN Yulong 3 ,
  • WEI Gongqing , 1 ,
  • HUA Yan , 2
Expand
  • 1 Secondary Laboratory of Medicinal Animal Breeding, Administration of Traditional Chinese Medicine of Jilin Province, College of Animal Science and Technology, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China
  • 2 Guangdong Provincial Key Laboratory of Silviculture, Protection and Utilization, Guangdong Academy of Forestry, Guangzhou 510520, China
  • 3 Institute of Subtropical Agriculture, Chinese Academy of Sciences, Changsha 410125, China
**WEI Gongqing, professor, E-mail: ;
HUA Yan, senior engineer, E-mail:

*Contributed equally

Received date: 2023-10-31

  Online published: 2024-04-15

Fold

Abstract

This experiment was conducted to investigate the effects of dietary crude protein level on body weight, average daily feed intake, fecal score, blood biochemical and antioxidant indices and nutrient apparent digestibility of captive adult Manis javanica, to determine the dietary optimal crude protein level for adult Manis javanica. According to a 6×6 Latin square design, 6 healthy adult Manis javanica (3 males and 3 females) with similar body weight were selected, and fed the experimental diets with the crude protein levels of 40% (group Ⅰ), 42% (group Ⅱ), 44% (group Ⅲ), 46% (group Ⅳ), 48% (group Ⅴ) and 50% (group Ⅵ), respectively. The experiment was divided into 6 stages, with each stage lasting 14 days, including a pre-trial period of 7 days and a trial period of 7 days. The results showed as follows: 1) there were no significant differences in the initial body weight, final body weight and average daily feed intake among all groups (P>0.05). 2) There were no significant differences in the fecal score and moisture content among all groups (P>0.05). 3) There were no significant differences in the contents of albumin, urea nitrogen, glucose, triglyceride, cholesterol, low-density lipoprotein cholesterol and high-density lipoprotein cholesterol and activities of alanine aminotransferase, alkaline phosphatase, lactate dehydrogenase and lipase in plasma among all groups (P>0.05), while the plasma total protein content showed a different trend (P=0.060). 4) The serum catalase activity of group Ⅲ was significantly higher than that of groups Ⅱ, Ⅳ and Ⅵ (P<0.01), the serum catalase activity of group Ⅴ was significantly higher than that of group Ⅱ (P<0.01), and the serum catalase activity of group Ⅴ was significantly higher than that of groups Ⅳ and Ⅵ (P<0.05). 5) The crude ash apparent digestibility of group Ⅴ was significantly higher than that of group Ⅱ (P<0.05). In conclusion, under the conditions of this experiment, the dietary optimal crude protein level for captive adult Manis javanica is 44%.

Key words： Manis javanica; crude protein; fecal score; plasma biochemical indices; serum antioxidant indices; apparent digestibility

Cite this article

HE Huibing , WANG Kai , XU Xuelin , AN Fuyu , LI Yongzheng , WANG Xianghe , LI Rui , ZHOU Xihong , YIN Yulong , WEI Gongqing , HUA Yan . A Study on Optimal Dietary Crude Protein Level of Adult Manis javanica[J]. Chinese Journal of Animal Nutrition, 2024 , 36(4) : 2612 -2622 . DOI: 10.12418/CJAN2024.225

马来穿山甲(Manis javanica)隶属鳞甲目(Pholidota),鲮鲤科(Manidae),鲮鲤属(Manis),是极度濒危的国家一级保护动物、国际自然保护联盟(ICUN)濒危物种红色名录“极度濒危”物种,被《濒危野生动植物种国际贸易公约》(CITES)列为附录Ⅰ[1⇓-3]。随着马来穿山甲野外种群数量的不断减少,开展人工救护和繁育成为保护这一极度濒危物种的有效措施。然而,在圈养环境下,人工饲粮中粗蛋白质(CP)等主要营养水平是否满足成年马来穿山甲需求尚不清楚。
蛋白质是动物机体的重要组成成分,是动物进行代谢、生产的基础[4-5]。饲粮中蛋白质是动物生长所需蛋白质的主要来源,是决定饲粮品质的重要营养指标[4-5]。饲粮中适宜的CP含量可维持动物肠道健康,保障动物的消化吸收和免疫防御[6]。野外穿山甲主要以多种蚂蚁和白蚁为食,偶尔采食一些昆虫幼虫和节肢动物[7⇓-9]。在穿山甲野外食物的相关研究中,柯亚永等[10]记录到3种蚁类的CP含量超过干重的50%;李旭等[11]研究发现穿山甲取食蚁类的CP含量占风干重量的30%~70%;Xu等[12]对双齿多刺蚁蚁群的分析发现,其CP含量超过60%。然而在穿山甲的圈养环境下,Wang等[9]报道,10个不同穿山甲保护机构饲料配方及其营养成分存在较大差异,其中CP水平在32.41%~55.11%。
本研究于国家林业和草原局穿山甲保护研究中心进行,该穿山甲保护研究中心自2020年开展穿山甲的救护与繁育工作,救护成功率达80%,多只马来穿山甲成功妊娠并产下幼崽。国家林业和草原局穿山甲保护研究中心马来穿山甲人工饲粮CP水平为44.50%。因此,本试验以国家林业和草原局穿山甲保护研究中心人工饲粮CP水平作为中间值,参考环江香猪、生长貉、藏香猪[13⇓-15]等哺乳动物设6个不同饲粮CP水平,旨在研究饲粮中不同CP水平对圈养的成年马来穿山甲体重、平均日采食量、粪便评分、血液生化指标和抗氧化指标及营养物质表观消化率的影响,以确定成年马来穿山甲饲粮适宜CP水平,为马来穿山甲的人工饲养提供科学参考。

1 材料与方法

1.1 试验动物和试验设计

马来穿山甲作为极度濒危物种,人工圈养种群数量较少。本研究依托国家林业和草原局穿山
甲保护研究中心作为试验基地,试验开展时(2022年8—11月)该中心共有21只马来穿山甲,是国内最大的马来穿山甲人工圈养种群之一。该种群包括哺乳期母甲、幼崽、亚成体、成体,其中成年马来穿山甲共有12只。受试验动物数量限制,因此,本试验只能从成年穿山甲中选择6只(雌、雄各3只)体重相近的健康个体作为试验对象,采用6×6拉丁方设计,设6个饲粮CP水平,分别为40%(Ⅰ组)、42%(Ⅱ组)、44%(Ⅲ组)、46%(Ⅳ组)、48%(Ⅴ组)、50%(Ⅵ组)。试验分为6个阶段,每个阶段14 d,包括预试期7 d和正试期7 d。所有动物试验和样本采集程序均由广东省林业科学研究院批准(00202310-20/8/2022),获广东省野生动物监测救护中心支持和批准(200753-27/8/2022)。

1.2 试验饲粮和饲养管理

试验饲粮参考国家林业和草原局穿山甲保护研究中心饲粮,饲粮组成及营养水平见表1。根据穿山甲饲养管理规定,试验期间所有试验动物单笼饲养,每日清扫,定期消毒;每日16:00饲喂1次,自由采食与饮水,次日09:00记录实际采食量。试验期间对试验动物进行体况监测,并定期进行空腹体重的检测。
表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)

Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets (air-dry basis)%

项目
Items		 组别 Groups
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ
原料 Ingredients
苹果 Apple 20.00 18.80 18.00 17.00 15.00 14.00
蜂蛹 Bee pupa 8.30 6.40 6.60 6.40 7.20 6.80
蚕蛹干 Dried silkworm chrysalis 6.20 7.80 6.40 7.00 6.60 5.60
蚯蚓干 Dried earthworm 1.20 2.70 3.80 5.80 6.00 7.60
黑蚂蚁 Phyllostomus nigricollis 25.00 33.00 35.00 36.20 37.80 39.60
黑水虻幼虫干 Dried black gadfly larvae 15.00 10.40 7.80 6.00 4.40 2.10
面包虫干 Dried bread worms 6.60 3.80 4.80 4.00 3.60 4.80
蟋蟀干 Dried crickets 2.20 4.50 6.20 7.40 9.80 11.00
山楂干 Dried hawthorn 5.50 4.00 4.00 3.50 3.60 3.50
土壤 Soil 10.00 8.60 7.40 6.70 6.00 5.00
合计 Total 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00
营养水平 Nutrient levels
干物质 DM 94.18 94.03 93.48 93.78 93.47 94.00
粗蛋白质 CP 39.75 41.58 43.71 45.91 47.21 49.82
总能 GE/(MJ/kg) 19.50 19.93 19.87 20.01 20.35 20.53
粗脂肪 EE 18.31 16.47 16.49 16.60 15.65 15.18
粗灰分 Ash 16.66 15.86 12.91 14.05 13.09 11.31
钙 Ca 0.57 0.34 0.48 0.24 0.43 0.29
总磷 TP 1.19 1.26 1.28 1.33 1.26 1.26

营养水平均为实测值。

Nutrient levels were all measured values.

1.3 样品采集和指标检测

1.3.1 体重和平均日采食量

每个阶段试验开始和结束时称量体重,并根据记录的实际采食量计算平均日采食量。

1.3.2 粪便评分和水分含量

每天观察并记录穿山甲粪便情况,对穿山甲粪便进行粪便评分。参考Grellet等[16]和Clark等[17]的方法制定粪便评分标准(表2)。将粪便于60 ℃恒温烘干后称重,计算粪便水分含量。
表2 粪便评分标准

Table 2 Fecal score standard

评分
Score		 评分标准
Score standard
1 液状粪便
2 稠状软便伴成形软便
3 成形但软、黏;水分含量高
4 成形、较干燥但不硬、不黏,捡起后地面残留少
5 成形、坚硬或干燥易碎

1.3.3 血液生化和抗氧化指标

每个阶段正试期结束的第2天上午,空腹采集穿山甲血液2~3 mL,分别置于1.5 mL离心管和肝素处理管中,3 000×g离心10 min后取上清装于1.5 mL离心管中,收集血清和血浆,-80 ℃保存,用于血液生化和抗氧化指标检测。
将制备好的血浆送往中国科学院亚热带农业生态研究所,进行血浆生化指标的测定。使用全自动生化分析仪(Cobas C311,瑞士Roche公司),试剂来自瑞士Roche公司,检测指标包括血浆葡萄糖(GLU,04404483190)、甘油三酯(TG,20767107322)、总蛋白(TP,03183734190)、白蛋白(ALB,03183688122)、尿素氮(UN,04460715190)、胆固醇(CHOL,03039773190)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C,03038866322)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C,04399803190)含量及丙氨酸氨基转移酶(ALT,20764957322)、碱性磷酸酶(ALP,03333701190)、乳酸脱氢酶(LDH,03004732122)、脂肪酶(LIP,03029590322)活性。
将制备好的血清送往南京博研生物有限公司,进行血清抗氧化指标的测定。使用来自南京博研生物有限公司的试剂盒,检测指标包括血清还原型谷胱甘肽(GSH,BYSH-0206W)、氧化型谷胱甘肽(GSSG,BYSH-0207W)、丙二醛(MDA,BYSH-0109W)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GPx,BYSH-0204W)、过氧化氢酶(CAT,BYSH-0105W)、超氧化物歧化酶(SOD,BYSH-0103W)活性。

1.3.4 营养物质表观消化率

正试期采用全收粪法收集每只穿山甲每天饲喂前的所有粪便,作为该个体前1天的完整排粪量,连续收集7 d,称重并做好记录,置于60 ℃烘箱中烘干后保存备用。正试期内每天收集饲粮样品30 g,置于60 ℃烘箱中烘干后保存备用。
饲粮和粪便中的干物质(DM)含量参照《饲料中水分的测定》(GB/T 6435—2006)测定,粗灰分(Ash)含量参照《饲料中粗灰分的测定》(GB/T 6438—2007)测定,CP含量参照《饲料中粗蛋白的测定凯氏定氮法》(GB/T 6432—2018)测定,粗脂肪(EE)含量参照《饲料中粗脂肪的测定》(GB/T 6433—2006),钙(Ca)含量参照《饲料中钙的测定》(GB/T 6436—2018)测定,总磷(TP)含量参照《饲料中总磷的测定分光光度法》(GB/T 6437—2018)测定,总能(GE)通过HXR-6000型全自动氧弹测热仪(湖南华兴能源科技有限公司)进行测定。相关指标计算公式如下:
DM表观消化率(%)=100×(DM采食量-粪便中DM排出量)/DM采食量;
GE表观消化率(%)=100×(摄入GE-粪便GE)/摄入GE;
各营养物质表观消化率(%)=100×(该营养物质摄入量-粪便中该营养物质排出量)/该营养物质摄入量。

1.4 数据统计与分析

数据经Excel 2021整理后,由Shapiro-Wilk检验确认数据的正态分布,采用GraphPad Prism 9.0软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA),多重比较采用Tukey法进行。当数据不符合正态分布时,采用Kruskal-Wallis检验显著性。结果以“平均值±标准误(mean±SE)”表示,P<0.01为差异极显著,P<0.05为差异显著,0.05≤P<0.10表示有差异趋势。

2 结果

2.1 饲粮CP水平对成年马来穿山甲体重和平均日采食量的影响

由表3可知,各组之间初重、末重和平均日采食量均无显著差异(P>0.05)。
表3 饲粮CP水平对成年马来穿山甲体重和平均日采食量的影响

Table 3 Effects of dietary crude protein level on body weight and average daily feed intake of adult Manis javanica

项目
Items		 组别 Groups P值
P-value
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ
初重 IBW/kg 6.92±0.73 6.84±0.74 6.86±0.70 6.88±0.71 6.90±0.76 6.86±0.75 0.999
末重 FBW/kg 6.94±0.76 6.85±0.76 6.85±0.69 6.85±0.75 6.95±0.78 6.87±0.71 0.999
平均日采食量
ADFI/(g/d)		 220.62±9.53 226.40±9.29 228.72±7.20 229.38±10.24 228.32±10.17 223.52±11.37 0.954

同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05),不同大写字母表示差异极显著(P<0.01),相同小写字母或无字母表示差异不显著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01), while with the same small letter or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

2.2 饲粮CP水平对成年马来穿山甲粪便评分和水分含量的影响

由表4可知,成年马来穿山甲的粪便评分在3.3~3.8,粪便水分含量在60%~67%,各组之间粪便评分和水分含量均无显著差异(P>0.05)。
表4 饲粮CP水平对成年马来穿山甲粪便评分和水分含量的影响

Table 4 Effects of dietary crude protein level on fecal score and moisture content of adult Manis javanica

项目
Items		 组别 Groups P值
P-value
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ
粪便评分 Fecal score 3.48±0.04 3.63±0.12 3.59±0.10 3.47±0.16 3.50±0.13 3.50±0.15 0.911
粪便水分含量
Fecal moisture
content/%		 65.02±1.47 62.53±1.99 63.79±1.57 63.73±2.63 63.40±2.38 64.88±1.79 0.943

2.3 饲粮CP水平对成年马来穿山甲血浆生化指标的影响

由表5可知,各组之间血浆ALB、UN、GLU、TG、CHOL、LDL-C和HDL-C含量及ALT、ALP、LDH、LIP活性均无显著差异(P>0.05),但血浆TP含量存在差异趋势(P=0.060)。
表5 饲粮CP水平对成年马来穿山甲血浆生化指标的影响

Table 5 Effects of dietary crude protein level on plasma biochemical indices of adult Manis javanica

项目
Items		 组别 Groups P值
P-value
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ
总蛋白 TP/(g/L) 89.82±1.55 96.23±2.48 97.11±3.22 88.92±3.03 97.35±1.71 91.40±2.44 0.060
白蛋白 ALB/(g/L) 41.19±3.27 48.56±2.48 42.41±2.11 42.13±2.08 44.02±1.91 38.16±3.27 0.147
丙氨酸氨基转移酶
ALT/(U/L)		 43.21±2.57 41.01±1.55 50.45±7.98 55.51±7.46 39.37±5.67 42.80±2.53 0.359
碱性磷酸酶
ALP/(U/L)		 125.24±11.36 115.45±8.03 116.61±7.89 113.10±12.89 128.52±16.51 107.20±8.40 0.882
乳酸脱氢酶
LDH/(U/L)		 209.73±16.75 223.47±12.31 224.61±8.63 195.96±26.22 202.84±14.35 214.17±20.07 0.826
尿素氮 UN/(mmol/L) 9.10±0.73 9.39±0.13 11.73±0.91 11.00±0.88 10.23±0.71 9.61±0.47 0.192
葡萄糖
GLU/(mmol/L)		 4.89±0.25 5.06±0.20 5.17±0.50 5.45±0.19 5.98±0.13 5.25±0.32 0.155
甘油三酯
TG/(mmol/L)		 0.93±0.13 0.96±0.09 1.16±0.11 0.96±0.08 0.90±0.08 0.81±0.06 0.227
胆固醇
CHOL/(mmol/L)		 3.44±0.43 3.75±0.37 4.81±0.67 4.03±0.42 3.99±0.29 4.40±0.37 0.335
低密度脂蛋白胆固醇
LDL-C/(mmol/L)		 0.98±0.11 1.11±0.10 1.45±0.19 1.19±0.11 1.20±0.10 1.37±0.11 0.156
高密度脂蛋白胆固醇
HDL-C/(mmol/L)		 1.71±0.17 2.28±0.27 2.50±0.46 2.26±0.21 2.62±0.17 2.69±0.36 0.225
脂肪酶 LIP/(U/L) 40.23±4.67 36.18±3.81 51.70±9.30 40.26±3.28 34.64±4.88 31.31±2.65 0.272

2.4 饲粮CP水平对成年马来穿山甲血清抗氧化指标的影响

由表6可知,各组之间血清MDA、GSSG、GSH含量及SOD、GPx活性无显著差异(P>0.05)。Ⅲ组的血清CAT活性极显著高于Ⅱ、Ⅳ、Ⅵ组(P<0.01),Ⅴ组的血清CAT活性极显著高于Ⅱ组(P<0.01),Ⅴ组的血清CAT活性显著高Ⅳ、Ⅵ组(P<0.05)。
表6 饲粮CP水平对成年马来穿山甲血清抗氧化指标的影响

Table 6 Effects of dietary crude protein level on serum antioxidant indices of adult Manis javanica

项目
Items		 组别 Groups P值
P-value
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ
超氧化物歧化酶
SOD/(U/mL)		 161.10±34.07 194.53±26.02 171.05±16.09 186.55±33.04 142.86±40.92 156.25±36.69 0.871
丙二醛
MDA/(nmol/mL)		 52.72±4.13 56.95±3.35 52.32±5.76 57.36±3.39 45.82±5.08 44.23±3.57 0.183
过氧化氢酶
CAT/(U/mL)		 41.93±2.43ABab 36.03±0.85Cc 45.48±1.38Aa 37.81±1.11Bb 44.50±1.30ABa 37.55±1.19Bb <0.001
谷胱甘肽过氧化物酶
GPx/(U/mL)		 792.09±23.41 740.86±38.84 692.91±40.88 700.52±49.07 684.16±34.17 688.35±31.33 0.291
氧化型谷胱甘肽
GSSG/(nmol/mL)		 23.54±2.00 25.26±1.78 22.58±1.64 23.58±0.75 25.60±2.45 25.15±0.86 0.761
还原型谷胱甘肽
GSH/(μmol/mL)		 1.35±0.06 1.35±0.02 1.28±0.06 1.21±0.02 1.28±0.09 1.28±0.08 0.568

2.5 饲粮CP水平对成年马来穿山甲营养物质表观消化率的影响

由表7可知,各组之间DM、EE、CP和GE表观消化率存在差异趋势(0.05≤P<0.10)。Ⅴ组的Ash表观消化率显著高于Ⅱ组(P<0.05)。
表7 饲粮CP水平对成年马来穿山甲营养物质表观消化率的影响

Table 7 Effects of dietary crude protein level on nutrient apparent digestibility of adult Manis javanica%

项目
Items		 组别 Groups P值
P-value
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ
干物质 DM 86.05±0.64 84.47±0.50 86.52±0.62 86.22±0.31 86.73±0.74 86.38±0.45 0.093
粗蛋白质 CP 88.16±0.70 85.70±0.46 88.71±0.67 87.89±0.69 87.06±0.93 87.51±0.47 0.059
粗脂肪 EE 98.68±0.10 98.69±0.09 98.38±0.11 98.27±0.08 98.21±0.18 98.41±0.23 0.093
粗灰分 Ash 68.29±1.35ab 67.64±1.08b 70.19±2.40ab 73.57±1.19ab 75.10±1.58a 71.87±2.00ab 0.022
总能 GE 91.79±0.22 90.47±0.51 91.63±0.55 90.90±0.54 90.44±0.61 89.91±0.34 0.070

3 讨论

3.1 饲粮CP水平对成年马来穿山甲体重和平均日采食量的影响

成年穿山甲的日常饲养管理中,体重、采食量是重要的监测指标。Lin等[18]研究发现,摄食与消化试验期间,中华穿山甲的体重保持在6~9 kg;燕洪美[19]研究表明,饲喂的成年中华穿山甲体重保持稳定。本研究中,不同CP水平饲粮的GE接近,各阶段正试期内马来穿山甲的饲喂量相同,平均体重保持在6.1~7.7 kg,说明本试验所设定的饲粮CP水平能够满足穿山甲的日常需求,并且不存在营养过剩的情况。

3.2 饲粮CP水平对成年马来穿山甲粪便评分和水分含量的影响

本试验中,马来穿山甲饲粮均为粥样饮食,饲料原料与水的重量比例均为1∶1.5,土壤占比在5%~10%。Cabana等[20]研究表明,饲喂成年马来穿山甲基础饲粮和添加土壤的饲粮,其粪便评分未达到理想状态,而饲喂添加几丁质的饲粮的粪便评分更为理想;Clark等[17]研究表明,当食蚁兽和土豚的粪便DM含量分别为40%和35%~40%时,粪便评分较为理想。本研究中,各组粪便水分含量在60%~67%,粪便评分在3.3~3.8,均较为理想。由此可初步推断,饲粮CP水平对成年马来穿山甲的肠道健康无不良影响。

3.3 饲粮CP水平对成年马来穿山甲血浆生化指标的影响

血浆生化指标的变化与动物机体对饲粮中营养物质的吸收与代谢密切相关[4]。血浆TP、ALB、UN含量的变化可反映动物机体蛋白质代谢状况、营养状态[21]。血浆TP含量在一定程度上代表了饲粮中蛋白质的营养水平及动物对蛋白质的消化吸收程度[22]。本试验中,饲粮CP水平对成年马来穿山甲血浆TP、ALB和UN含量无显著影响。程治和等[23]研究表明,饲粮CP水平对肉兔血浆TP含量无显著影响。谭占坤等[24]研究表明,饲粮CP水平对藏猪血浆TP和UN含量无显著影响。以上结果提示,本试验的饲粮CP水平设定合理,成年马来穿山甲的营养状况良好。
GLU含量反映机体对GLU的摄入及利用水平[23];TG和CHOL是脂质在血液中的主要存在形式,TG参与机体物质和能量代谢,其含量反映了机体对脂类吸收、利用和代谢状况[25⇓-27];LDL-C和HDL-C参与CHOL在肝脏内外的代谢运输过程[28]。本研究结果显示,饲粮CP水平对成年马来穿山甲血浆GLU、TG、CHOL、HDL-C、LDL-C含量无显著影响。张相伦等[4]报道,饲粮CP水平对草原红牛血浆GLU、TG、TC含量无显著影响;程治和等[23]研究发现,,饲粮CP水平对肉兔血浆GLU、TG、LDL-C含量无显著影响。以上研究结果提示,本试验饲喂的饲粮能满足马来穿山甲的能量需求和脂类需求。
LDH是衡量肾脏功能的重要指标[29];胰腺损伤是LIP活性增加的最主要原因[30];ALP是衡量肝脏损伤的重要指标[31];ALT活性与蛋白质代谢、肝脏功能密切相关,常作为诊断肝脏功能的指标[32-33]。本研究中,饲粮CP水平对成年马来穿山甲血浆LDH、LIP、ALT、ALP活性无显著影响。刘可园等[34]研究表明,饲粮CP水平对成年比格犬的血浆ALT活性无显著影响。谭占坤等[24]研究表明,饲粮CP水平对藏猪血浆ALT、ALP活性无显著影响。以上结果提示,本试验所设定的饲粮CP水平对马来穿山甲的肝脏、肾脏和胰腺无不良影响。

3.4 饲粮CP水平对成年马来穿山甲血清抗氧化指标的影响

机体抗氧化能力的变化在一定程度上反映动物健康和生理状况[35]。衡量机体抗氧化能力的指标包括SOD、CAT、GPx活性以及GSH、GSSG与MDA含量等,血清SOD、CAT和GPx活性越高代表机体的抗氧化能力越强,MDA含量间接反映机体的抗氧化能力[36]。本研究中,饲粮CP水平对成年马来穿山甲血清MDA、GSSG、GSH含量及SOD、GPx活性无显著影响,对血清CAT活性有极显著影响。王明礼等[37]对乳鸽的研究发现,低CP水平组的血清MDA含量显著低于高CP水平组,而血清CAT活性无显著差异;刘可园等[34]研究表明,随着饲粮CP水平的升高,成年比格犬血清MDA含量和GPx活性显著升高,血清SOD活性显著降低。以上研究结果表明,本研究的饲粮CP水平设置合理,且Ⅲ组和Ⅴ组的机体抗氧化能力较强。

3.5 饲粮CP水平对成年马来穿山甲营养物质表观消化率的影响

营养物质表观消化率是反映动物营养是否均衡的重要指标。本研究结果表明,Ⅲ组的CP表观消化率最高。Jiang等[38]研究表明,妊娠期水貂的CP表观消化率随饲粮CP水平的增加呈线性升高。李伟等[39]研究报道,饲喂17.01% CP水平饲粮的豪猪CP表观消化率显著高于饲喂15.04% CP水平饲粮。高歌等[40]研究表明,饲喂高CP水平饲粮的生长猪CP、DM和GE表观消化率显著高于饲喂低CP水平饲粮。本研究中,饲粮CP水平对成年马来穿山甲DM、GE和EE表观消化率无显著影响;当饲粮CP水平在一定范围内时,成年马来穿山甲Ash表观消化率随着饲粮CP水平的升高而升高,且Ⅴ组显著高于Ⅱ组。刘可园等[34]研究表明,饲粮CP水平对成年比格犬的DM表观消化率无显著影响,Jiang等[38]关于妊娠期水貂的研究发现,饲粮CP水平对DM和EE表观消化率无显著影响。这可能由于饲粮能量水平均在成年马来穿山甲可调节摄入量的范围内,因此对饲粮CP水平变化的敏感度较低。同时,本研究GE和EE表观消化率结果与本研究的血浆生化结果互为映证。

4 结论

饲粮CP水平对成年马来穿山甲的体重、平均日采食量、粪便评分和水分含量及血浆生化指标均无显著影响;Ⅲ组的血清CAT活性最高,提示机体的抗氧化能力较强;Ⅲ组的CP表观消化率最高,Ⅴ组的Ash表观消化率显著高于Ⅱ组。在本试验条件下,圈养成年马来穿山甲的饲粮适宜CP水平为44%。

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