RESEARCH PAPER

Effects of Supplementary Feeding of L-Citrulline on Growth Performance and Semen Quality of Lambs

  • FAN Chen ,
  • ZHAO Guodong ,
  • YIMING Sulaiman , *
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  • College of Animal Science, Xinjiang Agricultural University, Urumchi 830052, China
*professor, E-mail:

Received date: 2024-12-04

  Online published: 2025-10-15

Abstract

This experiment aimed to investigate the effects of supplementary feeding of L-citrulline on the growth performance and semen quality of lambs. Thirty purebred male Turpan Black Sheep lambs with similar body weights, in good development and being single lambs were selected and randomly divided into six groups, namely the control group, group Ⅰ, group Ⅱ, group Ⅲ, group Ⅳ, and group Ⅴ. Each lamb was supplemented with 0, 4, 8, 12, 16, and 20 g of L-citrulline per day, respectively. The experimental period was 180 days. Blood was collected every 60 days to detect the contents of growth hormone (GH) and testosterone (T) in the serum. The changes in body weight, body length, body height, chest circumference, and cannon circumference of the lambs were measured on days 0, 30, 60, 90, 120, 150, and 180. The increase in the testicular circumference and length of the lambs on days 90 to 180 was measured. The semen quality was detected on day 180 of the experiment. The results showed that from days 0 to 30, the body weight gain of the lambs in groups Ⅰ, Ⅱ, and Ⅲ increased significantly by 46.24%, 27.60%, and 37.28%, respectively compared with the control group (P<0.05). The body length gain of the lambs in group Ⅲ was significantly higher by 31.01% and 29.15%, respectively compared with the control group and group Ⅴ (P<0.01). The chest circumference gain of the lambs in group Ⅲ was significantly higher by 23.46% and 15.52% respectively compared with the control group and group Ⅴ (P<0.05). From days 31 to 60, the body weight gain of the lambs in groups Ⅰ, Ⅱ, and Ⅲ increased significantly by 33.54%, 34.93%, and 28.26%, respectively compared with the control group (P<0.05). The body length gain of the lambs in group Ⅲ was significantly higher by 25.00% and 19.33%, respectively compared with the control group and group Ⅴ (P<0.01). The chest circumference gain of the lambs in group Ⅲ was significantly higher by 23.46%, 19.57%, and 33.50%, respectively compared with the control group, group Ⅳ, and group Ⅴ (P<0.01). From days 61 to 90, the body weight gain of the lambs in the control group, group Ⅰ, and group Ⅲ increased significantly by 49.27%, 43.68%, and 47.29%, respectively compared with group Ⅴ (P<0.01). The cannon circumference gain of the lambs in group Ⅲ was significantly higher than that in the control group and group Ⅴ (P<0.05). From days 91 to 120, the body weight gain of the lambs in group Ⅰ increased significantly by 33.49% and 31.95%, respectively compared with the control group and group Ⅴ (P<0.05). The body height gain of the lambs in group Ⅲ were significantly higher than those in the control group (P<0.05). In each experimental stage, the testicular length gain of the lambs in group Ⅲ was significantly higher than that in the control group and group Ⅴ (P<0.05). Meanwhile, the contents of GH and T in the serum of group Ⅲ were significantly higher than those in the control group and group Ⅴ (P<0.05). Through the comparison of semen quality, it was found that the semen density, viability, motility, straight-line movement rate, curvilinear movement rate of the lambs in group Ⅲ, as well as the total antioxidant capacity, catalase, glutathione peroxidase activity, and nitric oxide content in the seminal plasma, were significantly higher than those in the control group and group Ⅴ (P<0.05). In conclusion, supplementary feeding of L-citrulline can promote the growth of lambs, enhance the antioxidant capacity of the body, and improve semen quality. Under the conditions of this experiment, the optimal supplementary feeding amount of L-citrulline is 12 g per day per animal.

Cite this article

FAN Chen , ZHAO Guodong , YIMING Sulaiman . Effects of Supplementary Feeding of L-Citrulline on Growth Performance and Semen Quality of Lambs[J]. Chinese Journal of Animal Nutrition, 2025 , 37(10) : 6916 -6928 . DOI: 10.12418/CJAN2025.563

L-瓜氨酸是一种非蛋白质氨基酸,在机体内的氮循环中发挥着至关重要的作用,并作为代谢过程中的中间产物参与精氨酸、一氧化氮(NO)等的代谢[1]L-瓜氨酸在反刍动物的瘤胃中不会被降解,而是通过肠上皮细胞的吸收作用进入门静脉,继而传输至肾脏,在肾脏中被吸收并用于精氨酸的合成过程[2]。在琥珀酸、精氨酸琥珀酸裂解酶和精氨酸酶的作用下,瓜氨酸-精氨酸-鸟氨酸和尿素环化酶被激活,在巨噬细胞中,NO经由精氨酸酶与诱导型一氧化氮合酶介导发生代谢过程,这一代谢过程广泛影响从神经调节到外周器官功能的多个生理层面,并与繁殖活动存在潜在关联,因此,NO也被称为“性气体”。在男性生殖系统中,NO对睾丸、附睾和输精管的功能至关重要[3]。口服L-瓜氨酸补充剂能够增加血浆和组织中L-精氨酸和NO的浓度[4]L-瓜氨酸能够增强机体免疫力、维持胆固醇、平衡血糖水平以及清除体内自由基[5]。研究结果显示,补喂L-瓜氨酸能够显著提高仔猪、马驹体重和体尺增长,提高马驹的免疫能力,增强马驹血液抗氧化水平[6-7]。同时,L-瓜氨酸的补充有助于清除公马及小鼠体内的自由基,增强其血清抗氧化能力并改善精液品质[8-9],此现象是由于L-瓜氨酸在体内通过尿素循环转化为精氨酸,进而增强了机体抗氧化能力[10]。研究发现,随着集约化养殖方式的推广,畜禽的生产效率得到了显著提升。但是,由于畜舍环境温度的升高以及活动范围的缩减,导致种畜的精液品质和繁殖性能降低[11]。因此,本试验以0~6月龄吐鲁番黑羊为研究对象,通过补喂不同剂量的L-瓜氨酸探究其对羔羊生长性能及精液品质的影响,为今后绵羊健康高效养殖提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

L-瓜氨酸购自北京索莱宝科技有限公司,纯度≥99.00%;无水葡萄糖、无水柠檬酸、Tris购自上海Sigma公司;青霉素钠、硫酸链霉素购自美国Amresco公司;总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、NO试剂盒购自南京建成生物工程研究所,生长激素(GH)、睾酮(T)试剂盒购自上海酶联科技生物有限公司;姬姆萨染色试剂盒购自上海生工生物工程技术服务有限公司。
精液稀释液:称取3.04 g Tris、1.136 g无水葡萄糖、1.554 g无水柠檬酸,加入青霉素(终浓度为 1 000 IU/mL)、链霉素(终浓度为 1 000 IU/mL),用去离子水溶解并定容至100 mL,充分溶解混匀后用0.22 μm过滤器过滤,调整pH为7.2,4 ℃冰箱密封保存。

1.2 试验方法

1.2.1 试验设计、饲养管理及试验饲粮

本试验所有动物试验程序均经新疆农业大学动物试验伦理委员会的批准(No:2020032)。
选取30只体重[(5.89±1.24) kg]相近、发育良好的纯种单羔吐鲁番黑羊初生公羔,随机分为6组,分别为对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组、试验Ⅳ组、试验Ⅴ组,单栏饲养。每天每只分别补喂0、4、8、12、16、20 g的L-瓜氨酸(将L-瓜氨酸用胶囊包被后进行补饲)。试验期为2023年3月1日至2023年8月27日,为期180 d。
每天早晨补喂1次,正常哺乳,饲养管理和疾病预防均按常规管理进行,对试验羔羊定期进行驱虫、防疫。初生羔羊于出生后60日龄断奶,断奶前后试验动物均在相同的饲养条件下饲喂,每天09:30和17:30采用全混合日粮(TMR)投料车投料饲喂。每次采食时间控制在1 h以内,采食前后对羔羊饲喂槽中的饲粮进行称重。
TMR组成及营养水平见表1。饲粮的干物质(DM)含量参考GB/T 6435—2014的方法进行测定,粗蛋白质(CP)含量参考GB/T 6423—2018的方法进行测定,中性洗涤纤维(NDF)含量参考GB/T 20806—2022的方法进行测定,酸性洗涤纤维(ADF)含量参考NY/T 1459—2022的方法进行测定,钙(Ca)含量参考GB/T 13885—2017的方法进行测定,磷(P)含量参考GB/T 6437—2018的方法进行测定。
表1 TMR组成及营养水平(干物质基础)

Table 1 Composition and nutrient levels of TMR (DM basis) %

原料Ingredients 含量Content 营养水平Nutrient levels2) 含量Content
苜蓿干草Alfalfa hay 25.45 粗蛋白质CP 10.43
麦草干草Wheat grass hay 32.64 中性洗涤纤维NDF 46.78
青草干草Green grass hay 27.31 酸性洗涤纤维ADF 34.59
预混料Premix1) 12.28 钙Ca 1.34
碳酸氢钠NaHCO3 1.24 磷P 0.21
氯化钠NaCl 1.08 代谢能ME/(MJ/kg) 9.84
合计Total 100.00

1)预混料为每千克饲粮提供The premix provided the following per kg of the diet: VA 16.34 mg, VB12 5.33 mg, VB2 321.62 mg, VB6 1.71 mg, VD 3.1 mg, VE 813.42 mg, 生物素 biotin 4.76 mg, 泛酸pantothenic acid 5.13 mg, 烟酰胺 nicotinamide 13.17 mg, Cu (as copper sulfate) 45.13 mg, Fe (as ferrous sulfate) 108.45 mg, Mn (as manganese sulfate) 168.73 mg, Zn (as zinc sulfate) 257.42 mg, I (as potassium iodide) 30.42 mg, Se (as sodium selenite) 39.48 mg, Co (as cobalt chloride) 4.35 mg。2)代谢能为计算值[12],其他营养水平为实测值。ME was a calculated value[12], while the other nutrients were measured values.

1.2.2 生长性能的测定

试验组和对照组所有羔羊每间隔30 d逐个称重,测量体高、体长、胸围、管围并做好记录。

1.2.3 睾丸发育状况的测定

试验第90、120、150、180天测量各组睾丸周径与直径并做好记录。

1.2.4 血清样本的采集

分别在试验第0(试验当天)、60、120、180天晨饲前,采用普通采血管颈静脉采集血液,经1 400×g离心15 min,吸取上清液分装至3 mL冻存管,保存在-20 ℃冰箱中用于后续试验。

1.2.5 血清中激素含量的测定

血清中GH、T含量严格按照试剂盒说明书方法并用酶标仪(Bio-Rad公司,美国)进行检测。

1.2.6 精液采集及射精量

试验第180天时通过电刺激方法采集各组精液至有刻度的集精杯中,记录射精量后快速带回实验室,使用2.5 mL离心管在25 ℃室温环境下用稀释液进行10倍等温稀释,在显微镜下进行精液品质评估。

1.2.7 精子密度、活率、活力及运动速率的测定

利用计算机辅助精子分析系统(CASA)进行检测,将红宝石计数板置于精子分析仪37 ℃恒温载物台上预热,取10 μL(1∶30~50稀释)精液滴在红宝石计数板中,每个样品观察5个视野,自动测定精子密度、活率、活力和曲线运动速率(VCL)、直线运动速率(VSL)、平均路径速度(VAP)。

1.2.8 精子畸形率的测定

采用姬姆萨染色法评价精子畸形率。取20 μL(1∶59稀释比例,即取10 μL原精液与590 μL 0.9%生理盐水混合)的精液置于载玻片一端,均匀涂抹后自然风干。随后,使用中性福尔马林固定液固定15 min,之后用清水冲洗以去除固定液,并再次自然风干。在涂抹的样本上滴加约500 μL的吉姆萨染色液,确保涂抹样本与染色液充分接触,于室温下放置40~60 min(需注意涂抹样本不得干燥,可使用湿盒以保持湿润)。之后,用清水冲洗去除染色液,并再次自然风干以备检查。每个样本需制备2个涂抹样本,每个涂抹样本需观察超过500个精子,并计算2个涂抹样本的平均值。精子畸形率计算公式如下:
精子畸形率(%)=(畸形精子数/精子总数)×100。

1.2.9 精子质膜完整率的测定

运用低渗膨胀试验(HOST)来评估精子质膜完整性。若精子尾部弯曲并形成圆环状,则表明精子细胞膜完整;反之,若细胞膜受损,则不会出现圆环状弯曲。具体操作步骤如下:首先将精液样本在4 000×g下离心2 min,去除上层清液,随后使用磷酸盐缓冲液(PBS)进行4次清洗。之后,取10 μL精子悬液加入80 μL的HOST溶液(由0.9 g果糖和0.49 g柠檬酸钠溶解于100 mL去离子水中配制而成)中,在37 ℃条件下孵育30 min。最后,取10 μL混合液滴于载玻片上,在精子分析仪下观察并统计出现尾部弯曲的精子数量,总计观察400个精子。质膜完整率计算公式如下:
质膜完整率(%)=(弯尾精子数/总精子数)×100。

1.2.10 精子顶体完整率的测定

采用吉姆萨染色法进行评估。将精液涂片干燥后,使用甲醇进行固定,持续时间为3~5 min。将配制好的染色液用PBS稀释至10~20倍。固定后的涂片需用染色液染色5 min;染色完成后,涂片应以流水冲洗并晾干,随后使用油镜进行观察,并计数200个精子。根据精子顶体的形态和损伤程度,可将精子顶体分类为顶体完整、顶体轻度肿胀、顶体破坏以及顶体完全脱落4种类型。顶体完整率计算公式如下:
顶体完整率(%)=(顶体完整精子数/总精子数)×100。

1.2.11 精清抗氧化指标的测定

精清中T-AOC、CAT、GSH-Px活性及NO含量的测定均遵循试剂盒说明书的指导,并采用酶标仪(Bio-Rad公司,美国)进行检测。

1.3 数据分析

试验结果均以平均值±标准差表示。采用SPSS 23.0统计软件的one-way ANOVA程序进行单因素方差分析,采用Duncan氏法进行多重比较。P<0.05表示差异显著,P<0.01表示差异极显著,P>0.05表示差异不显著。

2 结果

2.1 L-瓜氨酸对羔羊体重增长及平均日采食量的影响

表2可知,在补喂L-瓜氨酸后,在第0~30天,试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组的羔羊体重增长量较对照组分别显著提高了46.24%、27.60%、37.28%(P<0.05),其余各组之间与对照组相比无显著差异(P>0.05);在第31~60天,试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组的羔羊体重增长量较对照组分别显著提高了33.54%、34.93%、28.26%(P<0.05);在第61~90天,对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组羔羊体重增长量较试验Ⅴ组分别极显著提高了49.27%、43.68%、41.16%、47.29%(P<0.01);在第91~120天,试验Ⅰ组羔羊体重增长量较对照组和试验Ⅴ组分别显著提高了33.49%、31.95%(P<0.05);其余各组之间无显著差异(P>0.05);在第121~150天,对照组和试验Ⅲ组体重增长量较试验Ⅳ组分别极显著提高了126.16%、108.96(P<0.01);在第151~180天,试验Ⅲ组羔羊体重增长量与对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅳ组和试验Ⅴ组分别显著提高了57.63%、44.13%、35.52%、60.42%(P<0.05),与试验Ⅱ组无显著差异(P>0.05)。
表2 L-瓜氨酸对羔羊体重增长及平均日采食量的影响

Table 2 Effects of L-citrulline on body weight gain and average daily feed intake of lambs

项目
Items
时间
Time
组别Groups
对照Control





体重增长
Body weight
gain/kg
第0~30天Days 0 to 30 6.92±1.24Bc 10.12±0.24Aa 8.83±0.83ABab 9.50±1.28Aab 8.27±1.41ABbc 7.98±1.39ABbc
第31~60天Days 31 to 60 6.44±1.91b 8.60±1.06a 8.69±0.90a 8.26±1.04a 7.81±1.23ab 6.32±1.31b
第61~90天Days 61 to 90 8.27±2.07Aa 7.96±1.27Aa 7.82±1.04ABa 8.16±0.77Aa 6.91±1.03Bab 5.54±1.04Bb
第91~120天Days 91 to 120 4.30±1.13b 5.74±10.89a 5.23±0.88ab 5.31±0.61ab 5.49±1.17ab 4.35±0.64b
第121~150天Days 121 to 150 6.31±0.85Aa 4.57±1.41ABCbc 5.03±1.35ABab 5.83±0.92Aab 3.35±0.39BCcd 2.79±0.73Cd
第151~180天Days 151 to 180 2.88±0.95Bb 3.15±0.52ABb 3.62±1.14ABab 4.54±0.50Aa 3.35±0.53ABb 2.83±0.63Bb





平均日采食量
ADFI/g
第0~30天Days 0 to 30 52.38±0.65ab 52.35±0.76b 51.86±0.55ab 52.76±0.91ab 53.44±1.32a 52.34±1.00ab
第31~60天Days 31 to 60 258.26±2.22Bc 259.34±1.38Bbc 262.02±1.52ABb 265.03±2.85Aa 260.56±2.59Bbc 257.82±2.31Bc
第61~90天Days 61 to 90 779.34±5.79Dd 817.88±4.17Cc 831.18±6.24BCb 882.95±7.43Aa 842.79±7.46Bb 769.80±5.53Dd
第91~120天Days 91 to 120 963.50±21.55Ccd 977.70±16.53Cc 1 047.10±25.30Bb 1 129.96±19.79Aa 1 025.06±44.64Bb 934.75±7.21Cd
第121~150天Days 121 to 150 1 247.57±35.47Dd 1 384.17±42.01Cc 1 515.39±36.48Bb 1 649.92±35.13Aa 1 557.67±28.60Bb 1 288.91±63.08Dd
第151~180天Days 151 to 180 1 535.64±8.14BCd 1 564.91±25.49Bc 1 664.84±24.91Ab 1 693.88±14.18Aa 1 658.42±24.25Ab 1 506.83±15.18Ce

同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05),不同大写字母表示差异极显著(P<0.01),相同字母或无字母表示差异不显著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different lowercase superscript letters mean significant difference (P<0.05), with different uppercase superscript letters mean extremely significant difference (P<0.01), while with the same or no superscript letters mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

在补喂L-瓜氨酸后,在第0~30天,试验Ⅳ羔羊平均日采食量显著高于试验Ⅰ组(P<0.05)。在第31~60、151~180天,试验Ⅲ组羔羊平均日采食量显著高于其他各组(P<0.05)。在第61~90、91~120、121~150天,试验Ⅲ组羔羊平均日采食量极显著高于其他各组(P<0.01)。

2.2 L-瓜氨酸对羔羊体尺增长的影响

表3可知,在第0~30天,试验Ⅲ组羔羊体长增长量较对照组和试验Ⅴ组分别极显著提高了31.01%、29.15%(P<0.01),其余各组之间无显著差异(P>0.05);第31~60天,试验Ⅲ组羔羊体长增长量较对照组和试验Ⅴ组分别极显著提高了25.00%、19.33%(P<0.01);第61~90天,试验Ⅲ组羔羊体长增长量较对照组和试验Ⅳ组分别显著提高了25.80%、27.42%(P<0.05),其余各组之间无显著差异(P>0.05);在第91~120天、第121~150天、第151~180天,各组间体长增长量无显著差异(P>0.05)。
表3 L-瓜氨酸对羔羊体尺增长的影响

Table 3 Effects of L-citrulline on body size growth of lambs cm

项目
Items
时间
Time
组别Groups
对照Control






体长增长
Body length
growth
第0~30天Days 0 to 30 8.32±1.24Bb 9.32±0.91ABab 9.78±0.72ABab 10.90±1.71Aa 10.26±1.76ABa 8.44±0.88Bb
第31~60天Days 31 to 60 8.00±0.85Cc 9.06±0.57ABCab 9.44±0.34ABa 10.00±0.54Aa 9.08±0.87ABCab 8.38±0.88BCbc
第61~90天Days 61 to 90 6.28±1.22b 7.40±1.01ab 6.98±0.87ab 7.90±0.49a 6.20±0.63b 6.94±0.80ab
第91~120天Days 91 to 120 4.70±0.63 5.04±0.95 5.66±0.73 5.04±0.47 5.24±0.54 4.74±0.67
第121~150天Days 121 to 150 3.78±0.68 4.12±0.46 3.78±0.19 3.86±0.75 3.72±0.97 4.22±0.47
第151~180天Days 151 to 180 2.82±0.98 3.32±0.77 3.74±0.62 2.82±0.54 3.20±0.92 3.24±1.08





体高增长
Body height
growth
第0~30天Days 0 to 30 8.78±0.98b 9.62±1.38ab 9.66±0.48ab 10.38±0.97a 8.98±1.07ab 9.08±0.99ab
第31~60天Days 31 to 60 8.38±1.07 8.06±0.83 8.42±0.68 8.54±1.37 8.48±0.84 7.48±0.97
第61~90天Days 61 to 90 4.78±0.97 4.96±0.66 4.58±0.72 4.90±0.31 4.80±0.32 4.80±0.48
第91~120天Days 91 to 120 3.24±0.36b 3.36±0.56ab 3.18±0.23b 3.82±0.34a 3.16±0.39b 3.28±0.37b
第121~150天Days 121 to 150 3.24±0.36 3.36±0.56 3.18±0.23 3.82±0.34 3.16±0.39 3.28±0.37
第151~180天Days 151 to 180 2.80±0.66 3.42±0.44 3.16±0.63 3.04±0.38 2.92±0.64 2.82±0.31






胸围增长
Bust growth
第0~30天Days 0 to 30 8.44±1.00Bb 9.70±0.62ABab 10.42±1.48ABa 10.84±0.58Aa 9.92±1.41ABab 9.02±0.46Bb
第31~60天Days 31 to 60 8.88±0.51Ccd 10.08±0.82ABb 10.20±0.25ABab 11.00±0.81Aa 9.20±0.51BCc 8.24±0.69Cd
第61~90天Days 61 to 90 9.42±0.66ABab 9.58±0.91ABa 9.76±1.23ABa 10.06±0.80Aa 9.24±0.84ABab 8.28±0.65Bb
第91~120天Days 91 to 120 7.16±0.98ABbc 8.12±0.41ABab 8.42±1.06Aa 8.18±0.87ABab 7.02±0.77ABbc 6.84±0.26Bc
第121~150天Days 121 to 150 2.28±0.27b 2.42±0.49b 2.42±0.31b 3.30±0.76a 2.88±0.26ab 2.92±0.79ab
第151~180天Days 151 to 180 1.96±0.38b 2.30±0.29ab 2.52±0.38a 2.30±0.31ab 2.12±0.22ab 2.42±0.54ab





管围增长
Tube
circumfer-
ence growth
第0~30天Days 0 to 30 0.64±0.13Bc 0.64±0.11Bc 0.72±0.08ABbc 0.82±0.08ABab 0.86±0.05Aa 0.84±0.09Aab
第31~60天Days 31 to 60 0.48±0.08 0.50±0.10 0.50±0.10 0.52±0.08 0.48±0.04 0.50±0.16
第61~90天Days 61 to 90 0.32±0.11Bb 0.32±0.13Bb 0.38±0.11ABb 0.58±0.15Aa 0.40±0.12ABb 0.40±0.07ABb
第91~120天Days 91 to 120 0.26±0.05Bb 0.46±0.11Aa 0.36±0.11ABab 0.36±0.11ABab 0.30±0.07ABb 0.26±0.11Bb
第121~150天Days 121 to 150 0.18±0.08 0.28±0.08 0.24±0.05 0.30±0.07 0.28±0.08 0.18±0.11
第151~180天Days 151 to 180 0.16±0.05Bb 0.18±0.08ABb 0.18±0.08ABb 0.30±0.07Aa 0.18±0.04ABb 0.18±0.04ABb
在第0~30天,试验Ⅲ组羔羊体高增长量较对照组显著提高18.22%(P<0.05),其余各组之间无显著差异(P>0.05);在第91~120天,试验Ⅲ组羔羊体高增长量与试验Ⅰ组无显著差异(P>0.05),显著高于其他各组(P<0.05);在其余试验期内各组之间体高增长量均无显著差异(P>0.05)。
在第0~30天,试验Ⅲ组羔羊胸围增长量较对照组和试验Ⅴ组分别极显著提高了23.46%、15.52%(P<0.01),其余各组之间无显著差异(P>0.05);在第31~60天,试验Ⅲ组羔羊胸围增长量较对照组、试验Ⅳ和试验Ⅴ组分别极显著提高了23.84%、19.57%、33.50%(P<0.01);在61~90天,试验Ⅲ组羔羊胸围增长量较试验Ⅴ组极显著提高了21.50%(P<0.01),与其他各组之间无显著差异(P>0.05);在第91~120天,试验Ⅱ组胸围增长量较对照组、试验Ⅳ组和试验Ⅴ组分别显著提高了17.60%、19.94%、23.10%(P<0.05);在第121~150天,试验Ⅲ组羔羊胸围增长量较对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组分别显著提高了44.73%、36.36%、36.36%(P<0.05),与其他2组无显著差异(P>0.05);在第151~180天,试验Ⅱ组羔羊胸围增长量较对照组显著提高了28.57%(P<0.05),与其他各组无显著差异(P>0.05)。
在第0~30天,试验Ⅳ组羔羊管围增长量较对照组和试验Ⅰ组分别极均极显著提高34.38%(P<0.01),较试验Ⅱ组显著提高了19.44%(P<0.05);在第31~60天、第121~150天,各组之间管围增长量无显著差异(P>0.05);在第61~90天,试验Ⅲ组羔羊管围增长量较对照组和试验Ⅰ组均极显著提高81.25%(P<0.01),显著高于其他2组(P<0.05);在第91~120天,试验Ⅰ组羔羊管围增长量较对照组和试验Ⅴ组均极显著提高76.92%(P<0.01),较试验Ⅳ组显著提高53.33%(P<0.05);在第151~180天,试验Ⅲ组羔羊管围增长量均显著高于其他各组(P<0.05)。

2.3 L-瓜氨酸对羔羊睾丸发育的影响

表4可知,在睾丸周径增长量方面,在第91~120天,试验Ⅱ组、试验Ⅲ组均极显著高于试验Ⅴ组(P<0.01);在第121~150天,试验Ⅲ组较对照组极显著提高53.33%(P<0.01),显著高于其他各组(P<0.05);在第151~180天,试验Ⅲ组较对照组极显著提高了31.40%(P<0.01),较试验Ⅴ组显著提高了21.51%(P<0.05)。
表4 L-瓜氨酸对羔羊睾丸发育的影响

Table 4 Effects of L-citrulline on testicular development of lambs cm

项目
Items
时间
Time
组别Groups
对照Control



睾丸周径增长
Testicular
circumference
growth
第91~120天Days 91 to 120 1.88±0.34ABbc 2.36±0.76ABab 2.54±0.15Aa 2.48±0.33Aa 2.10±0.19ABabc 1.58±0.40Bc
第121~150天Days 121 to 150 1.50±0.25Bb 1.96±0.23ABa 1.98±0.16ABa 2.30±0.23Aa 1.92±0.44ABa 2.04±0.42ABa
第151~180天Days 151 to 180 1.72±0.28Bc 1.96±0.15ABabc 2.04±0.18ABab 2.26±0.11Aa 1.98±0.31ABabc 1.86±0.19ABbc



睾丸长度增长
Testicular length
growth
第91~120天Days 91 to 120 1.50±0.20Cd 1.82±0.16BCbc 2.08±0.15ABab 2.20±0.19Aa 1.82±0.26BCbc 1.70±0.16Ccd
第121~150天Days 121 to 150 1.42±0.16Cd 1.94±0.17ABb 1.86±0.11Bbc 2.16±0.21Aa 1.70±0.16Bc 1.74±0.11Bbc
第151~180天Days 151 to 180 1.70±0.16Bb 1.76±0.27ABb 2.00±0.20ABa 2.06±0.11Aa 1.74±0.11ABb 1.66±0.15Bb
在睾丸长度增长量方面,在第91~120天,试验Ⅲ组与试验Ⅱ组无显著差异(P>0.05),极显著高于其他各组(P<0.01);在第121~150天,试验Ⅲ组较试验Ⅰ组显著提高11.34%(P<0.05),极显著高于其他各组(P<0.01);在第151~180天,试验Ⅲ组与试验Ⅱ组无显著差异(P>0.05),较试验Ⅰ组和试验Ⅳ组分别显著提高17.05%、18.39%(P<0.05),较对照组和试验Ⅴ组分别极显著提高21.18%、24.10%(P<0.01)。

2.4 L-瓜氨酸对羔羊精液品质和抗氧化指标的影响

表5可知,试验Ⅲ组射精量、活力较试验Ⅱ组分别显著提高9.72%、2.57%(P<0.05),极显著高于其他各组(P<0.01);试验Ⅲ组精子密度较试验Ⅰ组、试验Ⅱ组分别显著提高3.25%、2.24%(P<0.05),极显著高于其他各组(P<0.01);试验Ⅲ组精子活率极显著高于其他各组(P<0.01);对照组畸形率较试验Ⅲ组显著提高3.64%(P<0.05),与其他各组之间无显著差异(P>0.05);试验Ⅲ组质膜完整率与试验Ⅱ组无显著差异(P>0.05),较试验Ⅳ组显著提高2.85%(P<0.05),极显著高于其他各组(P<0.01);试验Ⅲ组顶体完整率较试验Ⅱ组显著提高2.04%(P<0.05),极显著高于其他各组(P<0.01);试验Ⅲ组精子直线运动速率较试验Ⅳ组显著提高1.56%(P<0.05),极显著高于其他各组(P<0.01);试验Ⅲ组精子曲线运动速率与试验Ⅳ组相比无显著差异(P>0.05),极显著高于其他各组(P<0.01);试验Ⅲ组精子平均路径速度较试验Ⅳ组、试验Ⅴ组显著提高2.67%、2.99%(P<0.05),极显著高于其他各组(P<0.01)。
表5 L-瓜氨酸对羔羊精液品质和抗氧化指标的影响

Table 5 Effects of L-citrulline on semen quality and antioxidant indices of lambs

项目
Items
组别Groups
对照Control
射精量Volume of ejaculation/mL 1.26±0.11Bc 1.38±0.08Bbc 1.44±0.11ABb 1.58±0.08Aa 1.28±0.08Bc 1.34±0.11Bbc
密度Density/(108个/mL) 19.84±0.27Bc 20.30±0.23ABbc 20.50±0.48ABab 20.96±0.30Aa 19.74±0.75Bc 19.88±0.43Bc
精子活力Sperm motility/% 80.99±1.92Bc 82.27±0.96Bbc 82.97±1.36ABb 85.10±1.39Aa 82.70±0.97Bbc 81.77±0.66Bbc
精子活率Sperm viability/% 82.44±0.75Cd 84.22±0.87CBbc 84.97±1.20Bb 87.10±1.39Aa 84.58±1.16Bbc 83.18±1.05BCcd
精子畸形率Sperm abnormality rate/% 7.69±0.28a 7.52±0.10ab 7.54±0.16ab 7.42±0.09b 7.61±0.09ab 7.66±0.19ab
质膜完整率Plasma membrane integrity rate/% 79.16±1.05Bb 79.66±1.98Bb 80.68±0.92ABab 82.53±1.67Aa 80.24±1.76ABb 79.58±0.74Bb
顶体完整率Acrosome integrity rate/% 79.57±0.58Cd 80.83±1.38BCbcd 82.28±1.53ABb 83.96±1.33Aa 81.41±0.90BCbc 79.77±1.23Ccd
直线运动速率VSL/(μm/s) 77.18±0.97Ee 77.95±1.19DEde 79.69±0.75BCc 82.59±1.14Aa 81.32±0.76ABb 79.04±0.60CDcd
曲线运动速率VCL/(μm/s) 71.18±1.11Bb 72.34±1.33Bb 73.25±1.55Bb 78.08±0.79Aa 77.14±2.05Aa 72.20±2.23Bb
平均路径速度VAP/(μm/s) 63.08±1.24Cd 64.35±1.19BCcd 65.36±1.47Bbc 68.18±1.05Aa 66.41±0.83ABb 66.20±1.35ABb
过氧化氢酶CAT/(U/mL) 53.88±0.52Dd 54.47±0.58CDcd 55.74±0.54Bb 56.96±0.43Aa 55.87±0.65ABb 55.19±0.95BCbc
总抗氧化能力T-AOC/(U/mL) 0.516±0.003Dc 0.519±0.003CDbc 0.522±0.001BCb 0.528±0.003Aa 0.526±0.002ABa 0.520±0.003CDb
谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px/(U/mL) 5 152±184Cd 5 712±166Bc 5 904±131Bbc 6 512±166Aa 6 032±166Bb 5 280±219Cd
一氧化氮NO/(μmol/L) 4.40±0.18Cd 5.14±0.25Bc 5.71±0.68Bb 6.84±0.40Aa 5.23±0.34Bbc 4.36±0.34Cd
试验Ⅲ组精清CAT活性较试验Ⅳ组显著提高1.95%(P<0.05),极显著高于其他各组(P<0.01),试验Ⅲ组精清T-AOC与试验Ⅳ组有显著差异(P<0.05),极显著高于其他各组(P<0.01);精清GSH-Px活性、NO含量极显著高于其他各组(P<0.01)。

2.5 L-瓜氨酸对羔羊血清激素含量的影响

表6可知,在试验第0天,各组之间血清中T、GH含量无显著差异(P>0.05);在第60天,试验Ⅲ组血清中T含量极显著高于其他各组(P<0.01),GH含量较试验Ⅳ组显著提高2.23%(P<0.05),极显著高于其他各组(P<0.01);在第120天,试验Ⅲ组血清中T含量与试验Ⅳ组无显著差异(P>0.05),极显著高于其他各组(P<0.01),GH含量与试验Ⅳ组无显著差异(P>0.05),较试验Ⅰ、Ⅱ组分别显著提高8.30%、6.58%(P<0.05),极显著高于其他2组(P<0.01);在第180天,试验Ⅲ组血清中T含量极显著高于其他各组(P<0.01),GH含量较试验Ⅰ组显著提高4.66%(P<0.05),极显著高于其他4组(P<0.01)。
表6 L-瓜氨酸对羔羊体内激素含量的影响

Table 6 Effects of L-citrulline on hormone contents of lambs ng/mL

项目
Items
时间
Time
组别Groups
对照Control







睾酮
T
第0天
Day 0
1.39±0.04 1.36±0.02 1.36±0.04 1.36±0.04 1.37±0.03 1.36±0.05
第60天
Day 60
4.09±0.19Bb 3.93±0.05Bb 4.40±0.41Bb 5.23±0.51Aa 4.16±0.33Bb 4.31±0.05Bb
第120天
Day 120
5.07±0.10Cc 5.37±0.34Cc 6.50±0.08Bb 7.81±0.23Aa 7.54±0.23Aa 6.07±0.65Bb
第180天
Day 180
8.82±0.16De 9.53±0.05Cd 11.02±0.31Bb 12.03±0.15Aa 10.65±0.41Bc 9.52±0.15Cd







生长激素
GH
第0天
Day 0
6.41±0.07 6.47±0.06 6.41±0.08 6.46±0.05 6.42±0.06 6.41±0.09
第60天
Day 60
8.93±0.04Dd 9.12±0.11CDc 9.19±0.07BCc 9.61±0.14Aa 9.40±0.08ABb 9.11±0.17CDc
第120天
Day 120
11.32±0.31Bc 11.81±0.38ABb 12.00±0.18ABb 12.79±0.36Aa 12.22±0.29ABab 11.76±0.70Bb
第180天
Day 180
10.71±0.24Cc 11.58±0.11ABb 11.48±0.35Bb 12.12±0.39Aa 11.30±0.25Bb 10.64±0.18Cc

3 讨论

精氨酸作为一种必需氨基酸,在反刍动物的氮代谢(如蛋白质、NO、多胺和肌酸的合成)、血液流动、营养物质利用和免疫调节中起着核心作用,精氨酸缺乏可导致动物生长迟缓、肠道和生殖功能障碍、免疫和神经细胞发育受损[13],饲粮所提供的L-瓜氨酸能够被有效地被动物机体吸收利用,在肾脏、大脑、肌肉以及其他一些组织中转化为精氨酸和NO[10]。精氨酸在大脑中能够通过代谢转化为鸟氨酸,而鸟氨酸在鸟氨酸转氨酶的作用下进一步转化为谷氨酸,从而促进生长激素的释放。此外,位于下丘脑和垂体区域的一氧化氮合成酶也能够促进生长激素的分泌[14]
Urschel等[15]研究表明,为哺乳期的仔猪补充瓜氨酸,能够满足机体对精氨酸的需求,进而促进其体重增加,促进生长发育。反刍动物瘤胃中含有许多不同种类的细菌,可以广泛降解精氨酸和其他氨基酸[16],因此,在断奶后的反刍动物饲粮中直接添加精氨酸会使精氨酸在瘤胃中被消化降解,无法到达小肠,使精氨酸无法被门静脉吸收利用,为了保证精氨酸的利用,通常在饲粮中添加过瘤胃保护性精氨酸,使精氨酸在小肠中吸收利用[17]。饲粮中添加过瘤胃保护性精氨酸能促进母羊的乳腺发育和新生羔羊的生长速度[18]。这一研究表明,羔羊不能合成足够的精氨酸来满足其最佳发育或最大生长性能和饲料效率的代谢需求。
作为精氨酸合成的前体物质,瓜氨酸在机体内以接近100%的效率转化为精氨酸,不会被瘤胃微生物降解,作为尿素循环中的中间产物,瓜氨酸不仅能提高机体的抗氧化能力,而且能够改善体内精氨酸含量和NO水平[19]。Hassan等[20]研究发现,在饲粮中添加过瘤胃保护性精氨酸(每天7 g/头)3个月,能够显著提高羔羊的生长性能和饲料利用率。张海雷等[21]研究表明,补喂L-瓜氨酸能够显著提高哺乳期羔羊的体重增加。在本试验中,补喂L-瓜氨酸后,试验组羔羊的体重、体尺增长量均高于对照组,这表明L-瓜氨酸能够促进羔羊生长发育,在本试验中,补喂每天每只12 g的L-瓜氨酸能够显著提升羔羊血清中的生长激素含量并能改善羔羊的生长性能,这可能是由于添加L-瓜氨酸后促进了机体内精氨酸的合成,从而促进了生长激素的释放,进而促进了羔羊生长性能的提高。在本试验中,随着L-瓜氨酸补饲量的升高,羔羊生长速度呈现先增后减的变化趋势,这可能是由于L-瓜氨酸在体内代谢过程中产生的氨等含氮废物会转化为尿素排出体外。当L-瓜氨酸摄入过量时导致含氮废物积累,进而引起酸中毒[16]
随着集约化养殖的普及,畜禽生产效率大幅提高,但由于养殖密度的提高,导致种畜的精液品质和繁殖性能降低,这可能与机体氧化应激有关[11]。金亚倩等[22]研究表明,限位饲养会使公羊产生应激,影响精液品质,通常为了缓解应激,反刍动物生产中常添加高精料饲粮维持高生长性能,但随着精料比例的升高,机体抗氧化能力开始下降,且精料水平越高,机体抗氧化能力越弱,采食过量精料会导致动物体内产生酸中毒,进而影响动物精子发生,降低精液品质[23-24]。Liu等[25]研究发现,L-瓜氨酸能够改善机体内的氮平衡,促进肌肉蛋白质的合成及沉积,缓解机体损伤,并增强机体的抗氧化能力。赵国栋等[26]发现,补喂L-瓜氨酸提高公鼠精子密度及活力,提高小鼠血清中CAT活性、T-AOC,增强机体抗氧化能力。本试验结果表明,试验Ⅱ组和试验Ⅲ组精子密度、活率、顶体完整率、直线运动速率均显著高于对照组,说明补喂L-瓜氨酸能够提高精液品质。刘志强等[27]研究发现,补喂12 g/d的L-瓜氨酸能够极显著提高公羊精子密度以及精浆中CAT活性、NO含量。本试验研究结果表明,给羔羊每头每天补喂12 g的L-瓜氨酸后,精子密度以及精浆CAT活性、T-AOC、GSH-Px活性、NO含量均极显著高于对照组,表明补喂L-瓜氨酸能够提高抗氧化能力,从而改善精液品质,这可能是由于L-瓜氨酸在生物体内可能通过参与精氨酸及NO的代谢途径,进而对精子的生成过程产生影响[28]
睾丸的主要结构为曲细精管,各条曲细精管盘旋其间,共同构成睾丸的内部结构,T能够渗入曲精细管内,促进精子的产生[29]。魏冬芹[30]研究发现,添加精氨酸能够显著提高公猪的睾丸体积和睾丸重量,同时添加精氨酸后公猪生殖细胞排列更紧密,生精上皮厚度显著增加,生精小管内精原细胞数目显著增加,Fan等[31]研究发现,补喂L-瓜氨酸可以促进公羊生精小管以及生殖细胞发育。同时De等[32]研究发现,精氨酸酶抑制剂通过抑制精氨酸酶途径使L-精氨酸增加,从而增加生殖细胞数量。试验Ⅲ组血清的T含量以及睾丸周径与睾丸长度增长量均极显著高于对照组,这可能是由于补喂L-瓜氨酸促进了羔羊体内T的分泌,促进了睾丸生精细胞的发育,增加生精细胞的发育,进而促进精子生成。同时,补喂L-瓜氨酸提高了羔羊体内的抗氧化水平,进而使得精子细胞免受脂质过氧化的危害,从而改善精液品质。Chen等[33]研究发现,公猪添加0.8%~11.0%的L-精氨酸可以显著提高公猪的精子数目和精液抗氧化能力。这说明精氨酸能够显著改善雄性动物的繁殖性能可能与精氨酸促进精原细胞增殖相关。在本试验中,试验Ⅲ组羔羊血清中T含量,精子密度、活率、活力以及精液抗氧化能力均极显著高于对照组,这可能是由于补喂L-瓜氨酸增加了公羊体内精氨酸以及NO水平,进而增强了机体抗氧化能力,在一定程度上改善了精液品质。
动物的生长性能与肠道健康状况紧密相关[34]。Fan等[31]研究发现,补喂L-瓜氨酸可以促进公羊胃肠道菌群变化,促进胃肠道对营养物质的消化吸收。孙召君等[6]研究发现,瓜氨酸可以在仔猪体内合成精氨酸和NO,抑制下丘脑生长激素抑制激素的释放并促进生长激素的释放。在本试验中,虽然试验Ⅲ组羔羊生长性能以及精液品质均显著高于对照组,但未进行胃肠道菌群检测以及血液、胃肠道内容物的代谢分析,无法深度剖析补喂L-瓜氨酸对羔羊生长性能以及精液品质的影响,此外若对L-瓜氨酸代谢通路进行分析,可以深入研究L-瓜氨酸对动物生长以及繁殖性能的调控机制,有助于优化畜牧业生产效率和动物健康管理。故在之后的研究中将从瓜氨酸代谢通路以及胃肠道菌群方面进行研究,为L-瓜氨酸在动物生长发育以及精液品质方面的研究提供参考依据。

4 结论

在本试验条件下,补喂L-瓜氨酸能够增加羔羊平均日采食量,提高生长性能,促进睾丸发育,提高血清中GH以及T含量,增强精清抗氧化性能,改善精液品质。在本试验条件下,L-瓜氨酸最佳补饲量为每天每只12 g。
[1]
MA Y H, ZENG Z C, KONG L C, et al. Determination of N-carbamylglutamate in feeds and animal products by high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry[J]. Molecules, 2019, 24(17):3172.

[2]
GILBREATH K R, NAWARATNA G I, WICKERSHAM T A, et al. Ruminal microbes of adult steers do not degrade extracellular L-citrulline and have a limited ability to metabolize extracellular L-glutamate[J]. Journal of Animal Science, 2019, 97(9):3611-3616.

[3]
DU S S, SUN S H, LIU L Y, et al. Effects of histidine supplementation on global serum and urine 1H NMR-based metabolomics and serum amino acid profiles in obese women from a randomized controlled study[J]. Journal of Proteome Research, 2017, 16(6):2221-2230.

[4]
MOINARD C, NICOLIS I, NEVEUX N, et al. Dose-ranging effects of citrulline administration on plasma amino acids and hormonal patterns in healthy subjects:the Citrudose pharmacokinetic study[J]. British Journal of Nutrition, 2008, 99(4):855-862.

[5]
CRENN P, COUDRAY-LUCAS C, THUILLIER F, et al. Postabsorptive plasma citrulline concentration is a marker of absorptive enterocyte mass and intestinal failure in humans[J]. Gastroenterology, 2000, 119(6):1496-1505.

DOI PMID

[6]
孙召君, 陈楠, 范苗, 等. 瓜氨酸添加水平对仔猪生长性能及内脏器官指数的影响[J]. 畜牧与兽医, 2012, 44(4):41-43.

SUN Z J, CHEN N, FAN M, et al. Effects of citrulline supplemental level on growth performance and visceral organ index of piglets[J]. Animal Husbandry & Veterinary Medicine, 2012, 44(4):41-43. (in Chinese)

[7]
李海, 黄新新, 李鹏, 等. 补喂L-瓜氨酸对0-3月龄纯血马生长发育、血浆蛋白水平及抗氧化能力的影响[J]. 中国畜牧杂志, 2021, 57(9):155-158,163.

LI H, HUANG X X, LI P, et al. Effects of L-citrulline supplementation on growth and development,plasma protein levels and antioxidant capacity of 0-3-month-old horses[J]. Chinese Journal of Animal Science, 2021, 57(9):155-158,163. (in Chinese)

[8]
赵国栋, 李晓斌, 李婷婷, 等. L-瓜氨酸对游泳力竭小鼠生长性能及血清生化指标影响的研究[J]. 中国畜牧兽医, 2020, 47(4):1035-1040.

DOI

ZHAO G D, LI X B, LI T T, et al. Study of L-citrulline on growth performance of swimming exhausted and serum biochemical effect of mice[J]. China Animal Husbandry & Veterinary Medicine, 2020, 47(4):1035-1040. (in Chinese)

[9]
李晓斌, 赵国栋, 李海, 等. 补喂L-瓜氨酸对种公马精液品质、精清和血浆抗氧化能力的影响[J]. 新疆农业科学, 2021, 58(4):778-784.

DOI

LI X B, ZHAO G D, LI H, et al. Effects of supplementary L-citrulline on the semen quality and the anti-oxidation ability of seminal plasma and plasma of stallion[J]. Xinjiang Agricultural Sciences, 2021, 58(4):778-784. (in Chinese)

[10]
WU G Y, KNABE D A, KIM S W. Arginine nutrition in neonatal pigs[J]. Journal of Nutrition, 2004, 134(Suppl.10):2783S-2790S.

[11]
RASOOLI A, TAHA JALALI M, NOURI M, et al. Effects of chronic heat stress on testicular structures,serum testosterone and cortisol concentrations in developing lambs[J]. Animal Reproduction Science, 2010, 117(1/2):55-59.

[12]
中华人民共和国农业部. 肉羊饲养标准:NY/T 816—2004[S]. 北京: 中国农业出版社, 2004.

Ministry of Agriculture of the PRC. Feeding Standard of meat-producing sheep and goats:NY/T 816—2004[S]. Beijing: China Agricultural Press, 2004. (in Chinese)

[13]
WU G Y, BAZER F W, SATTERFIELD M C, et al. L-arginine nutrition and metabolism in ruminants[J]. Advances in Experimental Medicine and Biology, 2022,1354:177-206.

[14]
WU G, MEININGER C J, KNABE D A, et al. Arginine nutrition in development,health and disease[J]. Current Opinion in Clinical Nutrition and Metabolic Care, 2000, 3(1):59-66.

[15]
URSCHEL K L, SHOVELLER A K, UWIERA R R E, et al. Citrulline is an effective arginine precursor in enterally fed neonatal piglets[J]. Journal of Nutrition, 2006, 136(7):1806-1813.

DOI PMID

[16]
BERGEN W G. Amino acids in beef cattle nutrition and production[J]. Advances in Experimental Medicine and Biology, 2021,1285:29-42.

[17]
WU G Y, BAZER F W, JOHNSON G A, et al. Board-invited review:arginine nutrition and metabolism in growing,gestating,and lactating swine[J]. Journal of Animal Science, 2018, 96(12):5035-5051.

[18]
ASHOUR A M, HUSSEIN H A, FAHMY S. et al. Significance of rumen protected L-arginine-supplementation on certain blood parameters,mammary gland functions and growth rate of newly born lambs[J]. Archives of Agronomy and Soil Science, 2018, 1(2):59-67.

[19]
GILBREATH K R, BAZER F W, SATTERFIELD M C, et al. Ruminal microbes of adult sheep do not degrade extracellular L-citrulline[J]. Journal of Animal Science, 2020, 98(6):skaa164.

[20]
HSAAAN S A, RAHMAN A, AHMED A, et al. Effects of rumen protected arginine supplementation on growth rate,rumen fermentation and blood biochemicals of Awassi lambs[J]. Kahramanmaraş Sütçü Imam Universitesi Doǧa Bilimleri Dergisi, 2011,14:38-45.

[21]
张海雷, 安敏, 杨开伦, 等. 补喂4种氨基酸对哺乳期羔羊生长代谢的影响[J]. 中国饲料, 2022(17):59-64.

ZHANG H L, AN M, YANG K L, et al. Effects of supplementary feeding of 4 amino acids on growth and metabolism of suckling lambs[J]. China Feed, 2022(17):59-64. (in Chinese)

[22]
金亚倩, 刘文忠, 赵俊星, 等. 酿酒葡萄皮渣对单栏饲养方式下公绵羊繁殖性能及睾丸抗氧化性的影响[J]. 畜牧兽医学报, 2016, 47(11):2228-2239.

JIN Y Q, LIU W Z, ZHAO J X, et al. Effect of dietary wine grape pomace on reproductive performance,antioxidant ability of testis in ram[J]. Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica, 2016, 47(11):2228-2239. (in Chinese)

[23]
侯志高, 王振勇, 柴同杰, 等. 不同精粗比日粮对奶牛机体氧化应激和瘤胃内环境稳定性的影响[J]. 畜牧兽医学报, 2008, 39(4):455-459.

HOU Z G, WANG Z Y, CHAI T J, et al. Effects of forage to concentrate ratio on homeostasis of rumen and oxidative stress in cows[J]. Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica, 2008, 39(4):455-459. (in Chinese)

[24]
CALLAGHAN M J, MCAULIFFE P, RODGERS R J, et al. Subacute ruminal acidosis reduces sperm quality in beef bulls[J]. Journal of Animal Science, 2016, 94(8):3215-3228.

PMID

[25]
LIU Z C, GU S R, LU T C, et al. IFI6 depletion inhibits esophageal squamous cell carcinoma progression through reactive oxygen species accumulation via mitochondrial dysfunction and endoplasmic reticulum stress[J]. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2020, 39(1):144.

[26]
赵国栋, 李晓斌, 张涛, 等. L-瓜氨酸对小鼠力竭运动性能及强运动应激后血清抗氧化能力和精液品质的影响[J]. 中国畜牧杂志, 2020, 56(4):128-131.

ZHAO G D, LI X B, ZHANG T, et al. Effects of L-citrulline on exhaustive exercise performance,serum antioxidant capacity and semen quality in mice after strong exercise stress[J]. Chinese Journal of Animal Science, 2020, 56(4):128-131. (in Chinese)

[27]
刘志强, 帕丽旦·玉苏音, 张也, 等. 补喂L-瓜氨酸对公羊精液品质影响的研究[J]. 中国草食动物科学, 2021, 41(3):81-84.

LIU Z Q, PALIDAN·Y, ZHANG Y, et al. Study on the effect of supplementary L-citrulline on the quality of ram semen[J]. China Herbivore Science, 2021, 41(3):81-84. (in Chinese)

[28]
CHERNEY A, EDGELL H, KRUKOFF T L. NO mediates effects of estrogen on central regulation of blood pressure in restrained,ovariectomized rats[J]. American Journal of Physiology:Regulatory, Integrative and Comparative Physiology, 2003, 285(4):R842-R849.

[29]
SUN H M, LV B, ZHU H Q, et al. Selenized glucose improves rat semen quality by improving the gut microbiota and serum metabolome[J]. Food & Function, 2023, 14(11):5105-5119.

[30]
魏冬芹. 饲粮添加精氨酸对后备公猪睾丸发育的影响及机制研究[D].硕士学位论文. 雅安: 四川农业大学, 2020.

WEI D Q. Effects of dietary arginine supplementation on testis development in boars and mechanism[D].Master’s Thesis. Ya’an: Sichuan Agricultural University, 2020. (in Chinese)

[31]
FAN C, AIHEMAITI A, FAN A Y, et al. Study on the correlation of supplementation with L-citrulline on the gastrointestinal flora and semen antifreeze performance of ram[J]. Frontiers in Microbiology, 2024,15:1396796.

[32]
DE A, SINGH M F, SINGH V, et al. Treatment effect of L-norvaline on the sexual performance of male rats with streptozotocin induced diabetes[J]. European Journal of Pharmacology, 2016,771:247-254.

[33]
CHEN J Q, LI Y S, LI Z J, et al. Dietary L-arginine supplementation improves semen quality and libido of boars under high ambient temperature[J]. Animal, 2018, 12(8):1611-1620.

[34]
尹月, 李响, 张喜闻, 等. α-硫辛酸对肉鸡生长性能、血清生化指标及肠道健康的影响[J]. 中国畜牧杂志, 2024, 60(10):280-285,290.

YIN Y, LI X, ZHANG X W, et al. Effects of α-lipoic acid on growth performance,serum biochemical indexes and intestinal health of broilers[J]. Chinese Journal of Animal Science, 2024, 60(10):280-285,290. (in Chinese)

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