Chinese Journal of Animal Nutrition >

2025 , Vol. 37 >Issue 10: 7044 - 7053

DOI: https://doi.org/10.12418/CJAN2025.573

RESEARCH PAPER

Effects of Chitosan Oligosaccharide on Growth Performance, Antioxidant Capacity, Immune Function, Intestinal Digestive Enzyme Activities and Morphology of Growing Male Minks

  • LIU Hongfei ,
  • LI Wenli ,
  • FAN Gaoqiang ,
  • ZHANG Shulei ,
  • CHEN Qiaoyi ,
  • ZHANG Beibei , *
Expand
  • College of Animal Science and Technology, Qingdao Agricultural University, Qingdao 266109, China
*associate professor, E-mail:

Received date: 2025-05-07

  Online published: 2025-10-15

Fold

Abstract

This experiment was conducted to investigate the effects of chitosan oligosaccharide (COS) on growth performance, antioxidant capacity, immune function, intestinal digestive enzyme activities and morphology of growing male minks. A total of 120 healthy 12-week-old red-eyed white male minks with similar body weight [(1 407.41±7.34) g] were randomly divided into 6 groups with 10 replicates per group and 2 minks per replicate. Minks in each group were fed a basal diet supplemented with 0 (control group), 100, 200, 300, 400 and 500 mg/kg COS, respectively. The pre-test period lasted for 1 week, and the formal test period lasted for 8 weeks, which was divided into the early stage (weeks 1 to 4) and the late stage (weeks 5 to 8). The results showed as follows: 1) during the early stage of the experiment, compared with the control group, dietary supplementation with 100 mg/kg COS significantly increased the final weight and average daily gain (ADG) (P<0.05), and significantly decreased the feed-to-gain ratio (F/G) (P<0.05). During the whole experimental period, compared with the control group, dietary supplementation with 100 to 300 mg/kg COS significantly decreased F/G (P<0.05); dietary supplementation with 100, 200 and 400 mg/kg COS significantly increased body length and pelt length (P<0.05). 2) Compared with the control group, dietary supplementation with 100 mg/kg COS significantly increased serum immunoglobulin A (IgA) and immunoglobulin M (IgM) contents (P<0.05); dietary supplementation with 100 to 300 mg/kg COS significantly increased serum complement 4 (C4) content (P<0.05). 3) Compared with the control group, dietary supplementation with 100 and 200 mg/kg COS significantly increased total superoxide dismutase (T-SOD) activity in serum and jejunal mucosa (P<0.05); dietary supplementation with 100 to 500 mg/kg COS significantly decreased serum malondialdehyde (MDA) content (P<0.05); dietary supplementation with 100 to 400 mg/kg COS significantly increased glutathione peroxidase (GSH-Px) activity in jejunal mucosa (P<0.05). 4) Compared with the control group, dietary supplementation with 100 mg/kg COS significantly increased duodenal amylase activity (P<0.05). 5) Compared with the control group, dietary supplementation with 100 and 200 mg/kg COS significantly increased jejunal villus height (P<0.05); dietary supplementation with 100 to 300 mg/kg COS significantly increased jejunal villus height/crypt depth (P<0.05). In conclusion, appropriate dietary COS supplementation can enhance the antioxidant capacity and immune function, increase duodenal digestive enzyme activities and improve jejunal morphological structure of growing male minks, thereby improving their growth performance. Comprehensive consideration, it is suggested that the dietary supplemental level of COS for growing male minks is 100 mg/kg.

Key words： chitosan oligosaccharide; minks; growth performance; antioxidant capacity; immune function; digestive enzyme activity; intestinal morphology

Cite this article

LIU Hongfei , LI Wenli , FAN Gaoqiang , ZHANG Shulei , CHEN Qiaoyi , ZHANG Beibei . Effects of Chitosan Oligosaccharide on Growth Performance, Antioxidant Capacity, Immune Function, Intestinal Digestive Enzyme Activities and Morphology of Growing Male Minks[J]. Chinese Journal of Animal Nutrition, 2025 , 37(10) : 7044 -7053 . DOI: 10.12418/CJAN2025.573

壳寡糖(chitosan oligosaccharide,COS)是由2~20个葡萄糖经β-1,4糖苷键连接而成的碱性氨基寡糖,可由甲壳素和壳聚糖降解制备。COS具有水溶性好、生物相容性高、毒性低等特点,已在医学、食品、化妆品等领域广泛使用[1-2]。此外,COS能够调节肠道微生态、增强免疫和抗氧化功能、改善动物生长性能,因此在饲料添加剂领域备受关注[3]。Zhao等[4]研究表明,饲粮中添加COS可缓解乳鸽的早期断奶应激,通过调节肠道微生物群及辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡相关信号通路维持肠道免疫平衡;侯纪增等[5]研究表明,饲粮中添加COS能提高育肥猪血清总抗氧化能力(T-AOC)和免疫球蛋白水平,改善肉品质并提高其生长性能;皮得金等[6]研究表明,饲粮中添加COS能提高大肠杆菌感染肉鸡的空肠抗氧化能力,增强肠道物理屏障,改善肠道形态;Cheng等[7]研究表明,饲粮中添加COS能提高比格犬的抗氧化能力,增强免疫功能,并通过调节肠道菌群维护肠道健康,进而改善生长性能。上述研究结果表明,COS在动物生产中具有广阔的应用前景。
育成期是水貂生长迅速、对营养物质需求尤为旺盛的时期。此时期天气温度升高,饲粮氧化变质加快,易引起水貂腹泻[8]。因此,开发绿色饲料添加剂以提高饲料利用率、预防疾病发生,对水貂养殖业具有重要意义。目前,关于COS的研究主要集中于畜禽领域,其在育成期水貂饲粮中的研究尚未见报道。本试验旨在探究饲粮中添加不同水平COS对育成期公貂生长性能、抗氧化能力、免疫功能、肠道消化酶活性和形态结构的影响,以期为确定COS在育成期公貂饲粮中的适宜添加水平提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验所用水貂种类为红眼白色公貂,购自山东省烟台市某水貂养殖公司。试验所用COS(纯度93.8%,脱乙酰度91.2%,平均分子质量≤3 000 u)由青岛某生物科技有限公司提供。

1.2 试验设计与饲养管理

动物试验经青岛农业大学动物科技学院实验动物伦理委员会批准(批准编号:DKY20240519)。采用单因素试验设计,选取120只健康、体重[(1 407.41±7.34) g]相近的12周龄红眼白色公貂,随机分为6组,每组10个重复,每个重复2只。各组分别在基础饲粮中添加0(对照组)、100、200、300、400、500 mg/kg COS。预试期1周,正试期8周。正试期分为前期(第1~4周)和后期(第5~8周)。
试验于2024年7—9月在山东省烟台市某水貂养殖场开展。试验开始前,所有水貂均接种犬瘟热和细小病毒疫苗并埋植褪黑素。试验期间,水貂饲养于棚舍内,每日早、晚各饲喂1次,自由采食和饮水。

1.3 试验饲粮

基础饲粮组成及营养水平见表1。饲粮粗蛋白质含量采用凯氏定氮法(GB/T 6432—2018)测定,粗脂肪含量采用乙醚浸提法(GB/T 6433—2006)测定,钙含量采用高锰酸钾滴定法(GB/T 6436—2018)测定,磷含量采用钼黄比色法(GB/T 6437—2018)测定。
表1 基础饲粮组成及营养水平(干物质基础)

Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets (DM basis) %

项目
Items		 含量Content
第1~4周
Weeks
1 to 4		 第5~8周
Weeks
5 to 8
原料Ingredients
鸡架Chicken skeleton 15.00 15.00
毛蛋Unhatched fertilized egg 23.00 23.00
鸡肝Chicken liver 8.00 8.00
鸡头Chicken head 15.00 15.00
安康鱼头Monkfish head 5.00 5.00
海杂鱼Sea fish 12.00 12.00
鳕鱼排Cod steak 10.00 10.00
猪血球蛋白粉
Pork blood globulin powder		 1.00
膨化玉米Extruded corn 5.00 5.00
膨化大豆粕
Extruded soybean meal		 3.00 3.00
豆油Soybean oil 2.00 3.00
预混料Premix1) 1.00 1.00
合计Total 100.00 100.00
营养水平Nutrient levels2)
代谢能ME/(MJ/kg) 17.93 17.98
粗蛋白质CP 36.79 33.25
粗脂肪EE 23.89 25.37
钙Ca 2.57 2.63
磷P 1.52 1.56

1)预混料为每千克饲粮提供 The premix provided the following per kg of diets:VA 6 000 IU,VC 30 mg,VE 37.5 mg,VK3 0.72 mg,VB1 11.4 mg,VB2 7.2 mg,VB6 3.6 mg,VB12 0.019 5 mg,VD3 540 IU,烟酸 nicotinic acid 14.7 mg,泛酸 pantothenic acid 5.7 mg,叶酸 folic acid 0.6 mg,生物素 biotin 0.12 mg,Fe 30 mg,Cu 12.6 mg,氯化胆碱 choline chloride 150 mg,Mn 15 mg,Zn 30 mg。2)代谢能为参照《水貂配合饲料》(LS/T 3403—1992)所得计算值,其余为实测值。ME was a calculated value according to Compound Feed of Mink (LS/T 3403—1992), while the others were measured values.

1.4 样品采集

饲养试验结束后,每组随机选取8只水貂,测量其体长(从鼻尖到尾根的距离),随后在空腹状态下通过心脏采集血液于促凝管中,4 ℃下以1 581×g离心10 min,取上清液于-80 ℃保存待测。采用心脏空气注射法处死水貂后取皮,测量皮重和皮长(从鼻尖到尾根的距离)。将水貂进行解剖后分离全部肠道,截取十二指肠,将十二指肠内容物挤出放入5 mL灭菌管中,-80 ℃保存待测;截取空肠中部1.5 cm肠段,用生理盐水轻柔冲洗后,放入4%多聚甲醛固定液中,常温保存待测;将剩余空肠肠段用消毒剪刀剖开,生理盐水冲洗后,用无菌玻璃片刮取黏膜组织置于2 mL无菌离心管中,-80 ℃保存待测。

1.5 指标测定

1.5.1 生长性能

试验正式开始时、试验中期和试验结束时分别对水貂空腹称重,每周随机选取3 d准确记录给料量和剩料量,计算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。

1.5.2 血清免疫指标

血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、补体3(C3)、补体4(C4)含量均采用上海酶联生物科技有限公司生产的试剂盒进行测定,具体操作步骤按照试剂盒说明书进行。

1.5.3 血清和空肠黏膜抗氧化指标

血清和空肠黏膜总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量、T-AOC采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒进行测定,具体操作步骤按照试剂盒说明书进行。

1.5.4 十二指肠消化酶活性

将十二指肠内容物用生理盐水制备成10%匀浆液,蛋白质含量采用二喹啉甲酸(BCA)法测定(康为世纪生物科技有限公司),胰蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒进行测定。

1.5.5 空肠形态结构

将空肠肠段经石蜡包埋、切片后,采用苏木精-伊红(HE)进行染色,在光学显微镜下,于每张切片中选取10根结构完整、走向平直的肠绒毛,观察其组织结构,并通过Zen 2011(Blue version)软件测量肠绒毛高度和隐窝深度,计算绒毛高度/隐窝深度。

1.6 数据统计与分析

采用SPSS 26.0软件对试验数据进行单因素方差分析和Duncan氏多重比较,并进行线性和二次回归分析。结果用平均值和均值标准误(SEM)表示,以P<0.05为差异显著。

2 结果

2.1 COS对育成期公貂生长性能的影响

由表2可知,试验前期,随着COS添加水平的增加,ADG和F/G呈二次曲线变化(P<0.05),其中ADG呈先升高后降低的趋势,F/G呈先降低后升高的趋势。与对照组相比,100 mg/kg COS组末重和ADG显著提高(P<0.05),F/G显著降低(P<0.05);200和300 mg/kg COS组末重分别提高了1.90%和2.27%,但差异不显著(P>0.05);200、300和400 mg/kg COS组ADG分别提高了14.62%、19.13%和5.38%,F/G分别降低了5.66%、9.29%和6.23%,但差异均不显著(P>0.05)。试验全期,随着COS添加水平的增加,F/G和皮长呈二次曲线变化(P<0.05),其中F/G呈先降低后升高的趋势,皮长呈先升高后降低的趋势。与对照组相比,100、200和300 mg/kg COS组F/G显著降低(P<0.05),400和500 mg/kg COS组F/G分别降低了7.46%和7.75%,但差异不显著(P>0.05);100、200和400 mg/kg COS组体长和皮长显著提高(P<0.05),300和500 mg/kg COS组体长和皮长分别提高了1.60%和3.23%,但差异不显著(P>0.05)。
表2 COS对育成期公貂生长性能的影响

Table 2 Effects of COS on growth performance of growing male minks

项目
Items		 COS添加水平COS supplemental levels/(mg/kg) SEM P值P-value
0(对照组
Control group)		 100 200 300 400 500 壳寡糖
COS		 线性
Linear		 二次
Quadratic
前期Early stage
末重FW/g 1 818.75b 1 916.25a 1 853.33ab 1 860.00ab 1 808.75b 1 798.57b 11.934 0.044 0.080 0.057
平均日增重ADG/g 13.75b 17.59a 15.76ab 16.38ab 14.49b 13.75b 0.413 0.028 0.269 0.009
平均日采食量ADFI/g 215.60 222.45 207.81 215.37 215.49 216.67 1.964 0.505 0.845 0.498
料重比F/G 15.72a 13.13b 14.83ab 14.26ab 14.74ab 15.75a 0.274 0.036 0.403 0.025
后期Late stage
末重FW/g 2 175.63 2 284.44 2 276.11 2 261.11 2 226.00 2 226.50 15.340 0.376 0.840 0.068
平均日增重ADG/g 13.25 14.64 15.60 14.89 15.58 15.31 0.408 0.581 0.154 0.319
平均日采食量ADFI/g 219.54 222.76 227.19 233.80 235.97 232.37 2.362 0.262 0.025 0.413
料重比F/G 18.09 15.86 14.99 16.23 15.66 15.54 0.442 0.434 0.192 0.245
全期Whole stage
平均日增重ADG/g 13.45 15.93 15.44 15.40 15.23 14.68 0.257 0.093 0.433 0.016
平均日采食量ADFI/g 226.86 225.10 229.37 232.20 230.55 232.05 2.386 0.949 0.379 0.895
料重比F/G 16.90a 14.34b 14.38b 14.91b 15.64ab 15.59ab 0.248 0.031 0.657 0.005
体长Body length/cm 46.14c 48.63a 47.86ab 46.88bc 48.00ab 47.63abc 0.238 0.038 0.319 0.185
皮长Pelt length/cm 63.00b 65.43a 64.67a 64.57ab 64.63a 63.88ab 0.230 0.047 0.664 0.012
皮重Pelt weight/g 757.50 772.50 751.25 756.25 748.75 773.75 7.396 0.897 0.925 0.546

同行数据肩标无字母或相同小写字母表示差异不显著(P>0.05),不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。下表同。

In the same row, values with no letter or the same small letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

2.2 COS对育成期公貂血清免疫指标的影响

由表3可知,随着COS添加水平的增加,血清C4含量呈二次曲线变化(P<0.05),且呈先升高后降低的趋势。与对照组相比,100 mg/kg COS组血清IgA、IgM含量显著提高(P<0.05),200、300、400和500 mg/kg COS组血清IgA和IgM含量均无显著变化(P>0.05);100、200和300 mg/kg COS组血清C4含量显著提高(P<0.05)。饲粮中添加不同水平COS对育成期公貂血清IgG和C3含量无显著影响(P>0.05)。
表3 COS对育成期公貂血清免疫指标的影响

Table 3 Effects of COS on serum immune indices of growing male minks

项目
Items		 COS添加水平COS supplemental levels/(mg/kg) SEM P值P-value
0(对照组
Control group)		 100 200 300 400 500 壳寡糖
COS		 线性
Linear		 二次
Quadratic
免疫球蛋白A
IgA/(μg/mL)		 651.59b 733.28a 680.08b 665.24b 665.29b 662.61b 7.412 0.014 0.229 0.163
免疫球蛋白M
IgM/(μg/mL)		 1 526.27b 1 827.41a 1 652.31b 1 578.57b 1 536.11b 1 580.98b 26.450 0.011 0.143 0.146
免疫球蛋白G
IgG/(g/L)		 14.58 16.19 15.43 15.65 15.48 15.41 0.211 0.421 0.611 0.397
补体3 C3/(μg/mL) 112.71 122.05 120.50 116.98 115.56 116.51 1.236 0.285 0.873 0.138
补体4 C4/(μg/mL) 98.22b 104.12a 103.43a 102.33a 101.11ab 100.87ab 0.533 0.020 0.754 0.004

2.3 COS对育成期公貂血清抗氧化指标的影响

由表4可知,随着COS添加水平的增加,血清MDA含量呈线性和二次曲线变化(P<0.05),血清T-SOD活性呈二次曲线变化(P<0.05),且呈先升高后降低的趋势。与对照组相比,100和200 mg/kg COS组血清T-SOD活性显著提高(P<0.05),100、200、300、400和500 mg/kg COS组血清MDA含量均显著降低(P<0.05)。饲粮中添加不同水平COS对育成期公貂血清GSH-Px活性和T-AOC无显著影响(P>0.05)。
表4 COS对育成期公貂血清抗氧化指标的影响

Table 4 Effects of COS on serum antioxidant indices of growing male minks

项目
Items		 COS添加水平COS supplemental levels/(mg/kg) SEM P值P-value
0(对照组
Control group)		 100 200 300 400 500 壳寡糖
COS		 线性
Linear		 二次
Quadratic
总抗氧化能力
T-AOC/(U/mL)		 4.72 5.41 4.92 5.33 5.20 4.87 0.188 0.887 0.890 0.399
总超氧化物歧化酶
T-SOD/(U/mL)		 55.37c 65.42a 63.47ab 61.49abc 57.81bc 58.80abc 0.996 0.023 0.681 0.013
谷胱甘肽过氧化物酶
GSH-Px/(U/mL)		 5 307.82 5 652.55 5 441.98 5 375.12 5 527.57 5 652.41 103.763 0.916 0.571 0.884
丙二醛
MDA/(nmol/mL)		 20.83a 12.99b 13.68b 12.47b 13.18b 12.80b 0.841 0.014 0.009 0.029

2.4 COS对育成期公貂十二指肠消化酶活性的影响

由表5可知,随着COS添加水平的增加,十二指肠淀粉酶活性呈二次曲线变化(P<0.05),且呈先升高后降低的趋势。100 mg/kg COS组十二指肠淀粉酶活性显著高于400、500 mg/kg COS组和对照组(P<0.05)。饲粮中添加不同水平COS对育成期公貂十二指肠脂肪酶和胰蛋白酶活性无显著影响(P>0.05)。
表5 COS对育成期公貂十二指肠消化酶活性的影响

Table 5 Effects of COS on duodenal digestive enzyme activities of growing male minks

项目
Items		 COS添加水平COS supplemental levels/(mg/kg) SEM P值P-value
0(对照组
Control group)		 100 200 300 400 500 壳寡糖
COS		 线性
Linear		 二次
Quadratic
胰蛋白酶
Trypsin/(U/mg prot)		 918.75 1 108.94 1 100.63 1 087.77 975.59 1 001.74 40.065 0.711 0.998 0.187
脂肪酶
Lipase/(U/g prot)		 11.83 12.52 11.90 9.67 11.55 12.46 0.750 0.906 0.901 0.530
淀粉酶
Amylase/(U/mg prot)		 2.56b 3.59a 3.20ab 3.21ab 2.84b 2.67b 0.096 0.011 0.355 0.004

2.5 COS对育成期公貂空肠形态结构的影响

由表6可知,随着COS添加水平的增加,空肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度呈二次曲线变化(P<0.05),且均呈先升高后降低的趋势。与对照组相比,100和200 mg/kg COS组空肠绒毛高度显著提高(P<0.05),100、200和300 mg/kg COS组空肠绒毛高度/隐窝深度显著提高(P<0.05)。
表6 COS对育成期公貂空肠形态结构的影响

Table 6 Effects of COS on jejunum morphology of growing male minks

项目
Items		 COS添加水平COS supplemental levels/(mg/kg) SEM P值P-value
0(对照组
Control group)		 200 200 300 400 500 壳寡糖
COS		 线性
Linear		 二次
Quadratic
绒毛高度
Villus height/μm		 879.64b 987.29a 1 016.09a 956.29ab 944.05ab 950.70ab 11.921 0.028 0.460 0.008
隐窝深度
Crypt depth/μm		 408.23 372.73 398.14 390.12 398.80 399.92 4.020 0.172 0.721 0.191
绒毛高度/隐窝深度
V/C		 2.22b 2.53a 2.52a 2.46a 2.37ab 2.39ab 0.029 0.036 0.609 0.007

2.6 COS对育成期公貂空肠黏膜抗氧化指标的影响

由表7可知,随着COS添加水平的增加,空肠黏膜T-SOD和GSH-Px活性呈二次曲线变化(P<0.05),且均呈先升高后降低的趋势。与对照组相比,100和200 mg/kg COS组空肠黏膜T-SOD活性显著提高(P<0.05),100、200、300和400 mg/kg COS组空肠黏膜GSH-Px活性显著提高(P<0.05)。饲粮中添加不同水平COS对育成期公貂空肠黏膜T-AOC和MDA含量无显著影响(P>0.05)。
表7 COS对育成期公貂空肠黏膜抗氧化指标的影响

Table 7 Effects of COS on jejunal mucosa antioxidant indices of growing male minks

项目
Items		 COS添加水平COS supplemental levels/(mg/kg) SEM P值P-value
0(对照组
Control group)		 100 200 300 400 500 壳寡糖
COS		 线性
Linear		 二次
Quadratic
总抗氧化能力
T-AOC/(U/mg prot)		 1.26 1.46 1.62 1.61 1.46 1.34 0.058 0.421 0.745 0.035
总超氧化物歧化酶
T-SOD/(U/mg prot)		 42.41c 63.48a 58.21ab 52.15abc 53.47abc 48.30bc 2.000 0.030 0.858 0.013
谷胱甘肽过氧化物酶
GSH-Px/(U/mg prot)		 17.76c 23.64ab 24.52a 22.17ab 22.73ab 20.10bc 0.589 0.007 0.533 <0.001
丙二醛
MDA/(nmol/mg prot)		 1.52 1.34 1.33 1.31 1.36 1.38 0.063 0.954 0.624 0.621

3 讨论

3.1 COS对育成期公貂生长性能的影响

本试验结果表明,试验前期,饲粮中添加100 mg/kg COS显著提高了育成期公貂的末重和ADG,显著降低了F/G;试验全期,饲粮中添加100 mg/kg COS显著提高了育成期公貂的体长和皮长,饲粮中添加100~300 mg/kg COS显著降低了F/G。魏琳琳等[9]研究发现,饲粮中添加200 mg/kg COS可显著提高肉鸡ADG及降低F/G。张小栋等[10]研究发现,饲粮中添加30和45 mg/kg COS可显著提高断奶仔猪末重和ADG,显著降低F/G。研究表明,COS能有效抑制鱼产品中腐败菌的繁殖[11]。因此,COS可能通过延缓饲粮变质和抑制肠道有害菌定植来提高水貂对饲粮的利用率。此外,随着添加水平的增加,COS对水貂生长性能的影响呈先升高后降低的趋势,这与徐小龙等[12]的研究结果相似,其原因可能是COS不易被哺乳动物的胃肠道分解,添加过量时会造成消化负担[13]。试验后期,COS对育成期公貂生长性能的影响不显著,这可能是由于试验后期气温升高易引发热应激,也可能与水貂日龄增大、自身生长潜力逐渐降低有关。

3.2 COS对育成期公貂免疫功能的影响

免疫球蛋白是免疫功能的关键标志物,其在血清中的含量可反映机体免疫系统的强弱,含量提高通常表明免疫能力增强[14]。补体可通过激活经典途径和旁路途径发挥溶菌、抗病毒的作用,还能调节吞噬细胞的吞噬能力并参与免疫复合物的清除,其在血清中的含量提高意味着机体非特异性免疫功能增强[15]。韩晓东[16]研究表明,饲粮中添加30 mg/kg COS可显著提高育肥猪血清IgG、IgM和C4含量。Zhao等[17]研究表明,饲粮中添加160 mg/kg COS可显著提高断奶仔猪血清C4含量。王子平[18]研究表明,饲粮中添加100、150和200 mg/kg COS均可显著提高肉兔血清IgG、IgA、IgM和C4含量。本试验结果表明,饲粮中添加100 mg/kg COS可显著提高育成期公貂血清IgA、IgM含量,其原因可能是COS所带的正电荷能与巨噬细胞、T淋巴细胞表面的负电荷相互作用,从而激活免疫细胞信号传导,促进B细胞增殖及免疫球蛋白的分泌[19]。本试验结果还表明,随着COS添加水平的增加,血清IgA、IgM和C4含量均呈先升高后降低的趋势,这表明添加适量COS能提高育成期水貂的免疫功能。

3.3 COS对育成期公貂抗氧化能力的影响

夏季气温升高易诱发动物氧化应激,产生的自由基会对细胞组织造成损伤,从而增加水貂的疾病易感性[20]。超氧化物歧化酶(SOD)、MDA、GSH-Px均是与生物体内氧化还原过程密切相关的重要物质。其中,SOD是生物体内清除活性氧的关键酶,能够及时清除体内过多的自由基;MDA是脂质过氧化的终产物,其含量可间接反映细胞的损伤程度[21];GSH-Px是生物体内清除过氧化物的重要酶类之一[22]。肖云玉等[23]研究发现,在断奶仔猪饲粮中添加50、100和150 mg/kg COS能显著提高血清T-AOC及GSH-Px活性。Lin等[24]研究发现,150 μg/mL COS提高了脂多糖刺激下牛乳腺上皮细胞的SOD活性。本试验中,饲粮中添加100和200 mg/kg COS显著提高了育成期公貂血清和空肠黏膜T-SOD活性,且100与200 mg/kg COS组之间无显著差异;此外,添加100~400 mg/kg COS显著提高了空肠黏膜GSH-Px活性,添加100~500 mg/kg COS显著降低了血清MDA含量。上述结果表明COS具有抗氧化活性,这可能是由于COS分子结构中的氨基能与生物体内的自由基反应形成稳定物质[25]。此外,COS的分子链短、溶解性好,使其分子内氢键形成能力减弱,增强了氨基和羟基的活性,更易于清除自由基[26]。

3.4 COS对育成期公貂十二指肠消化酶活性的影响

消化酶在促进食物消化和营养物质吸收方面发挥着关键作用,其活性水平反映了消化系统的功能状态,也被视为评定机体营养状况的重要依据[27]。胰蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶对营养物质的吸收至关重要。Zhang[28]研究发现,饲料中添加1、3和5 g/kg COS均可显著提高泥鳅肠道胰蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性。Su等[29]研究发现,饲料中添加0.05%、0.10%和0.20% COS均显著提高了红鳍东方鲀肠道蛋白酶和脂肪酶活性。Wang等[30]研究发现,在妊娠晚期和哺乳期母猪饲粮中补充100 mg/kg COS可显著提高21日龄仔猪空肠胰蛋白酶和乳糖酶活性。本试验中,随着COS添加水平的增加,育成期公貂十二指肠淀粉酶活性呈先升高后降低的趋势,且饲粮中添加100 mg/kg COS可显著提高十二指肠淀粉酶活性。这表明添加适量COS可以提高水貂对碳水化合物的消化能力。

3.5 COS对育成期公貂空肠形态的影响

肠道是营养物质吸收的主要部位,绒毛高度和隐窝深度是反映肠道吸收能力的指标,绒毛高度/隐窝深度反映了肠道的健康程度[31]。本试验结果表明,饲粮中添加100和200 mg/kg COS显著提高了育成期公貂空肠绒毛高度,添加100~300 mg/kg COS显著提高了空肠绒毛高度/隐窝深度。Li等[32]研究发现,饲粮中添加30 mg/kg COS可显著降低肉鸡空肠隐窝深度,提高十二指肠绒毛高度和空肠绒毛高度/隐窝深度。Zhao等[4]研究发现,饲粮中添加100、150、200和250 mg/kg COS均显著提高了断奶乳鸽的空肠绒毛高度和面积并降低绒毛高度/隐窝深度。COS改善肠道形态的原因可能在于其能够促进肠道黏液分泌、维持肠道屏障完整性,进而促进了肠道的健康发育[33]。本试验中,空肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度均随COS添加水平的增加呈先升高后降低的趋势,表明COS对水貂肠道形态的改善存在最佳剂量。COS是一种天然碱性聚合物,剂量过高会影响胃内酸性环境,降低蛋白质和其他营养物质的消化率,导致肠道上皮细胞增殖所需的营养供应不足,最终导致绒毛高度下降[34]。

4 结论

饲粮中添加适量COS能够增强育成期公貂的抗氧化能力和免疫功能,提高十二指肠消化酶活性及改善空肠形态结构,进而提升其生长性能。综合考虑,建议育成期公貂饲粮中COS添加水平为100 mg/kg。

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