1 材料与方法
1.1 伦理声明
1.2 试验动物和试验设计
1.3 试验饲粮和饲养管理
表1 试验饲粮组成及营养水平(风干基础)Table 1 Composition and nutrient levels of the experimental diets (air-dry basis) |
| 项目 Items | 组别 Groups | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| NP | LP-Met | LP | LP+Met1 | LP+Met2 | LP+Met3 | |
| 原料 Ingredients | ||||||
| 玉米 Corn | 43.758 | 48.550 | 48.550 | 48.550 | 48.550 | 48.550 |
| 小麦 Wheat | 13.000 | 13.000 | 13.000 | 13.000 | 13.000 | 13.000 |
| 玉米胚芽粕 Corn germ meal | 4.000 | 4.000 | 4.000 | 4.000 | 4.000 | 4.000 |
| 豆粕 Soybean meal | 22.850 | 17.460 | 17.460 | 17.460 | 17.460 | 17.460 |
| 棉籽粕 Cottonseed meal | 5.000 | 5.000 | 5.000 | 5.000 | 5.000 | 5.000 |
| 菜籽粕 Rapeseed meal | 6.000 | 6.000 | 6.000 | 6.000 | 6.000 | 6.000 |
| 大豆油 Soybean oil | 1.750 | 1.078 | 1.078 | 1.078 | 1.078 | 1.078 |
| L-赖氨酸盐酸盐 L-Lys·HCl | 0.135 | 0.315 | 0.315 | 0.315 | 0.315 | 0.315 |
| L-蛋氨酸 L-Met | 0.104 | 0.042 | 0.131 | 0.231 | 0.331 | 0.431 |
| L-苏氨酸 L-Thr | 0.012 | 0.100 | 0.100 | 0.100 | 0.100 | 0.100 |
| L-异亮氨酸 L-Ile | 0.098 | 0.098 | 0.098 | 0.098 | 0.098 | |
| 氯化钠 NaCl | 0.300 | 0.300 | 0.300 | 0.300 | 0.300 | 0.300 |
| 磷酸氢钙 CaHPO4 | 1.335 | 1.550 | 1.550 | 1.550 | 1.550 | 1.550 |
| 石粉 Limestone | 1.104 | 1.855 | 1.766 | 1.666 | 1.566 | 1.466 |
| 乙氧基喹啉 Ethoxyquin (60%) | 0.050 | 0.050 | 0.050 | 0.050 | 0.050 | 0.050 |
| 青蒿粉 Artemisia annua powder | 0.120 | 0.120 | 0.120 | 0.120 | 0.120 | 0.120 |
| 防霉剂 Antifungal agent | 0.050 | 0.050 | 0.050 | 0.050 | 0.050 | 0.050 |
| 植酸酶 Phytase | 0.002 | 0.002 | 0.002 | 0.002 | 0.002 | 0.002 |
| 氯化胆碱 Choline chloride (50%) | 0.200 | 0.200 | 0.200 | 0.200 | 0.200 | 0.200 |
| 维生素预混料 Vitamin premix1) | 0.030 | 0.030 | 0.030 | 0.030 | 0.030 | 0.030 |
| 矿物质预混料 Mineral premix2) | 0.200 | 0.200 | 0.200 | 0.200 | 0.200 | 0.200 |
| 合计 Total | 100.000 | 100.000 | 100.000 | 100.000 | 100.000 | 100.000 |
| 营养水平 Nutrient levels3) | ||||||
| 净能 NE/(MJ/kg) | 8.47 | 8.47 | 8.47 | 8.47 | 8.47 | 8.47 |
| 粗蛋白质 CP | 21.32 | 19.80 | 19.79 | 19.70 | 19.80 | 19.89 |
| 赖氨酸 Lys | 1.11 | 1.10 | 1.12 | 1.16 | 1.12 | 1.15 |
| 蛋氨酸 Met | 0.44 | 0.37 | 0.45 | 0.54 | 0.63 | 0.72 |
| 苏氨酸 Thr | 0.73 | 0.73 | 0.74 | 0.77 | 0.76 | 0.76 |
| 异亮氨酸 Ile | 0.72 | 0.76 | 0.74 | 0.76 | 0.75 | 0.76 |
1)维生素预混料为每千克饲粮提供 The vitamin premix provided the following per kg of diets:VA 12 000 IU,VD3 3 000 IU,VE 30 mg,VK3 4.8 mg,VB1 3 mg,VB2 9.6 mg,VB6 6 mg,VB12 0.3 mg,烟酸 nicotinic acid 60 mg,泛酸钙 calcium pantothenate 18 mg,叶酸 folic acid 1.5 mg,生物素 biotin 1.8 mg。 | |
2)矿物质预混料为每千克饲粮提供 The mineral premix provided the following per kg of diets:Fe 80 mg,Cu 7 mg,Zn 80 mg,Mn 60 mg,I 0.7 mg,Se 0.15 mg。 | |
3)净能依据《中国饲料成分及营养价值表(2021年第32版)》中各原料对应数值计算得到,其他营养水平均为实测值。NE was calculated on basis of the values of each ingredient in Tables of Feed Composition and Nutritive Values in China (32nd edition, 202l), while nutrient levels of the others were measured values. |
1.4 样品采集
1.5 指标测定及方法
表2 引物序列Table 2 Primer sequences |
| 基因 Genes | 引物序列 Primer sequences (5'—3') |
|---|---|
| β-肌动蛋白 β-actin | F:CCGTGCTGTGTTCCCATCTA R:TCTGGGCTTCATCACCAACG |
| 磷脂酰乙醇胺N-甲基转移酶 PEMT | F:CGGCCTGGATTACAGCGAG R:TGCTCCCATCTTGCTACCAC |
| 甘氨酸N-甲基转移酶 GNMT | F:TGCCAGACTTCAAAGGGGAC R:GTAGTTGCGGTGGTCGATGA |
| S-腺苷同型半胱氨酸水解酶 SAHH | F:CCATGGGTCACCCTAGCTTC R:GGCCTGCTTCTCACTCAGTT |
| 甲硫氨酸亚砜还原酶 MSR | F:AGGCTGGCTTGCTGAGTTAG R:CCTGGACCGACCATCACAAA |
| 甲硫氨酸合酶 MS | F:TATTGGCGAACGCTGCAATG R:GAAGGTCCATCCAGCATCCC |
| 腺苷脱氨酶 ADA | F:GGGATTTCCGCATCAAAGCC R:CACCACCTCTGGAGACCAAC |
1.6 数据处理和分析
2 结果与分析
2.1 不同蛋白质水平饲粮或不同蛋氨酸水平低蛋白质饲粮对黄羽肉鸡生长性能和胴体品质的影响
表3 不同蛋白质水平饲粮或不同蛋氨酸水平低蛋白质饲粮对黄羽肉鸡生长性能和胴体品质的影响Table 3 Effects of diets with different protein levels or low-protein diets with different Met levels on growth performance and carcass quality in yellow-feather broilers |
| 项目 Items | 组别 Groups | 均值标准误 SEM | P值 P-value | |||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| NP | LP-Met | LP | LP+Met1 | LP+Met2 | LP+Met3 | t检验 t test | 方差分析 ANOVA | 线性 Linear | 二次 Quadratic | |||
| 平均日采食量ADFI/g | 43.35 | 43.14a | 43.01a | 41.64b | 42.40ab | 42.05ab | 0.184 | 0.508 | 0.043 | 0.027 | 0.049 | |
| 平均日增重ADG/g | 24.23 | 23.01 | 23.95 | 23.19 | 23.75 | 23.43 | 0.138 | 0.373 | 0.162 | 0.518 | 0.441 | |
| 料重比 F/G | 1.79 | 1.88a | 1.80b | 1.80b | 1.79b | 1.80b | 0.008 | 0.600 | <0.001 | 0.002 | <0.001 | |
| 胸肌率 Breast muscle Percentage/% | 10.49 | 10.26 | 10.16 | 9.79 | 10.22 | 10.20 | 0.122 | 0.435 | 0.774 | 0.950 | 0.654 | |
| 腿肌率 Thigh muscle percentage/% | 13.39* | 12.23 | 11.41 | 12.16 | 12.78 | 12.36 | 0.156 | 0.004 | 0.097 | 0.155 | 0.351 | |
| 腹脂率Abdominal fat percentage/% | 1.31* | 1.86 | 1.70 | 2.00 | 1.66 | 1.47 | 0.092 | 0.047 | 0.458 | 0.214 | 0.310 | |
NP组数据肩标“*”表示与LP组相比差异显著(P<0.05)。LP-Met组、LP组、LP+Met1组、LP+Met2组和LP+Met3组之间,同行数据肩标不同字母表示差异显著(P<0.05),相同字母或无字母表示差异不显著(P>0.05)。下表同。 | |
Values in the NP group with “*” superscript represented significant difference compared with the LP group (P<0.05). Among LP-Met, LP, LP+Met1, LP+Met2 and LP+Met3 groups, values in the same row with different letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same letter or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below. |
表4 低蛋白质饲粮蛋氨酸水平与1~30日龄黄羽肉鸡生长性能回归分析Table 4 Regression analysis of Met level of low-protein diets with growth performance in yellow-feather broilers aged from 1 to 30 days |
| 项目 Item | 模型 Models | 回归方程 Regression equations | 决定系数 R2 | P值 P-value | 饲粮适宜水平 Dietary optimal level/% |
|---|---|---|---|---|---|
| 料重比 F/G | 单斜率折线模型 | Y=-0.471X+2.035,X<0.55; Y=0.119 9X+1.71,X≥0.55 | 0.534 | <0.001 | 0.55 |
| 二次响应面模型 | Y=1.646X2-1.984X+2.376 | 0.504 | <0.001 | 0.60 |
2.2 不同蛋白质水平饲粮或不同蛋氨酸水平低蛋白质饲粮对黄羽肉鸡血清免疫球蛋白和抗氧化指标的影响
表5 不同蛋白质水平饲粮或不同蛋氨酸水平低蛋白质饲粮对黄羽肉鸡血清指标的影响Table 5 Effects of diets with different protein levels or low-protein diets with different Met levels on serum indices in yellow-feather broilers |
| 项目 Items | 组别 Groups | 均值标准误 SEM | P值 P-value | |||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| NP | LP-Met | LP | LP+Met1 | LP+Met2 | LP+Met3 | t检验 t test | 方差分析 ANOVA | 线性 Linear | 二次 Quadratic | |||
| 免疫球蛋白A IgA/(μg/mL) | 104.40 | 63.09 | 162.52 | 103.82 | 45.99 | 109.64 | 13.989 | 0.383 | 0.071 | 0.789 | 0.867 | |
| 免疫球蛋白G IgG/(mg/mL) | 1.37 | 0.86ab | 1.06a | 0.62bc | 0.39c | 0.59bc | 0.066 | 0.596 | 0.008 | 0.007 | 0.025 | |
| 总抗氧化能力 T-AOC/(U/mL) | 7.43 | 9.20bc | 6.78c | 15.27a | 11.56b | 9.60bc | 0.734 | 0.779 | <0.001 | 0.252 | 0.062 | |
| 谷胱甘肽过氧化物酶 GSH-Px/(U/mL) | 4 768 | 4 223d | 5 843c | 7 326b | 6 418bc | 8 439a | 315.9 | 0.074 | <0.001 | <0.001 | <0.001 | |
| 蛋氨酸Met/(μmol/L) | 16.37 | 15.56 | 17.43 | 18.33 | 19.06 | 18.35 | 0.562 | 0.554 | 0.400 | 0.088 | 0.121 | |
2.3 不同蛋白质水平饲粮或不同蛋氨酸水平低蛋白质饲粮对黄羽肉鸡血清游离蛋氨酸含量和肝脏蛋氨酸代谢关键酶相关基因表达的影响
表6 不同蛋白质水平饲粮或不同蛋氨酸水平低蛋白质饲粮对黄羽肉鸡肝脏蛋氨酸代谢相关基因表达的影响Table 6 Effects of diets with different protein levels or low-protein diets with different Met levels on expression of Met-metabolic-related genes in liver of yellow-feather broilers |
| 项目 Items | 组别 Groups | 均值标准误 SEM | P值 P-value | |||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| NP | LP-Met | LP | LP+Met1 | LP+Met2 | LP+Met3 | t检验 t test | 方差分析 ANOVA | 线性 Linear | 二次 Quadratic | |||
| 磷脂酰乙醇胺N-甲基转移酶 PEMT | 0.79 | 0.93 | 1.00 | 1.29 | 2.05 | 1.19 | 0.138 | 0.307 | 0.050 | 0.101 | 0.098 | |
| 甘氨酸N-甲基转移酶 GNMT | 1.26 | 0.91c | 1.00c | 1.74b | 3.11a | 2.06b | 0.187 | 0.285 | <0.001 | <0.001 | <0.001 | |
| S-腺苷同型半胱氨酸水解酶 SAHH | 1.21 | 0.84c | 1.00bc | 2.01a | 2.31a | 1.70ab | 0.162 | 0.658 | 0.004 | 0.004 | 0.002 | |
| 甲硫氨酸亚砜还原酶 MSR | 0.85 | 0.90 | 1.00 | 1.47 | 1.60 | 1.80 | 0.142 | 0.429 | 0.183 | 0.012 | 0.044 | |
| 甲硫氨酸合酶 MS | 0.78 | 1.13b | 1.00b | 2.58a | 2.85a | 2.95a | 0.221 | 0.334 | <0.001 | <0.001 | <0.001 | |
| 腺苷脱氨酶 ADA | 1.27 | 0.92c | 1.00bc | 1.60ab | 1.64a | 1.46abc | 0.097 | 0.207 | 0.031 | 0.011 | 0.011 | |
