Effects of Lemairamin on Performance, Serum Biochemical Indicators and Follicle Development of Laying Hens in Late Laying Period

BAI Guangyi; PAN Qi; QIAO Bin; YAO Huawei; CHAI Baoguo; LI Dengyun

doi:10.12418/CJAN2026.337

2026 , Vol. 38 >Issue 6: 4197 - 4206

DOI: https://doi.org/10.12418/CJAN2026.337

RESEARCH PAPER

Effects of Lemairamin on Performance, Serum Biochemical Indicators and Follicle Development of Laying Hens in Late Laying Period

BAI Guangyi ^,¹ ,
PAN Qi ² ,
QIAO Bin ¹ ,
YAO Huawei ¹ ,
CHAI Baoguo ¹ ,
LI Dengyun ^,¹^,^*

Expand

¹ Henan Muxiang Biotechnology Co., Ltd., Zhengzhou 450000, China
² Dehui Animal Disease Prevention and Control Center, Changchun 130061, China

* intermediate animal husbandry engineer, E-mail: 413136415@qq.com

Received date: 2025-11-05

Online published: 2026-06-13

Fold

Abstract

This experiment aimed to investigate the regulatory effects of dietary added with lemairamin (WGX-50) on performance, serum biochemical indicators and follicle development of laying hens in late laying period. A single-factor randomized experimental design was adopted. A total of four hundred and eighty 60-week-old healthy Hy-Line Brown laying hens with similar initial body weight [(2.01±0.07) kg] and no significant differences in laying performance (P>0.05) were randomly divided into four groups, with 8 replicates per group and 15 hens per replicate. Each group was fed the basal diet supplemented with 0 (control), 0.5, 1.0 and 2.0 mg/kg WGX-50, respectively. The pre-test period lasted for 2 weeks, and the formal test period lasted for 8 weeks. The results showed as follows: 1) compared with the control group, the laying rate and average egg weight in the 0.5, 1.0 and 2.0 mg/kg WGX-50 supplemented groups exhibited an increasing tendency, while the average daily feed intake showed a decreasing tendency, but no significant differences were observed (P>0.05). The feed-to-egg ratio in the 1.0 and 2.0 mg/kg WGX-50 supplemented groups was significantly decreased compared with the control group (P<0.05). 2) Compared with the control group, the serum total antioxidant capacity (T-AOC), glutathione peroxidase (GSH-Px) and superoxide dismutase (SOD) activities in the 1.0 and 2.0 mg/kg WGX-50 supplemented groups were significantly increased (P<0.05), while the malondialdehyde (MDA) content was significantly decreased (P<0.05). 3) Compared with the control group, the serum interleukin-1β (IL-1β) content in the 0.5, 1.0 and 2.0 mg/kg WGX-50 supplemented groups was significantly decreased (P<0.05), and the serum tumor necrosis factor-α (TNF-α) content in the 1.0 and 2.0 mg/kg WGX-50 supplemented groups was significantly decreased (P<0.05). 4) Compared with the control group, the serum follicle-stimulating hormone (FSH) and estradiol (E₂) contents in the 1.0 and 2.0 mg/kg WGX-50 supplemented groups were significantly increased (P<0.05). 5) Compared with the control group, the total number of follicles in the ovary in the 0.5, 1.0, and 2.0 mg/kg WGX-50 supplemented groups was significantly increased (P<0.05); the numbers of small yellow follicles (SYF) and large white follicles (LWF) in the 1.0 mg/kg WGX-50 supplemented group were significantly increased (P<0.05); the diameter of F1 hierarchical follicles in the 1.0 and 2.0 mg/kg WGX-50 supplemented groups was significantly increased (P<0.05); and the diameter of F3 hierarchical follicles in the 1.0 mg/kg WGX-50 supplemented group was significantly increased (P<0.05). In conclusion, dietary supplemented with WGX-50 exerts positive effects on improving the performance, antioxidant capacity, anti-inflammatory capacity and follicle development of laying hens in late laying period. Under the conditions of this experiment, the appropriate dietary WGX-50 supplemented amount is 1.0 to 2.0 mg/kg.

Key words： lemairamin; laying hens; performance; antioxidant capacity; immune function; reproductive hormones

Cite this article

BAI Guangyi , PAN Qi , QIAO Bin , YAO Huawei , CHAI Baoguo , LI Dengyun . Effects of Lemairamin on Performance, Serum Biochemical Indicators and Follicle Development of Laying Hens in Late Laying Period[J]. Chinese Journal of Animal Nutrition, 2026 , 38(6) : 4197 -4206 . DOI: 10.12418/CJAN2026.337

产蛋后期是蛋鸡养殖效益的关键期,也面临着生理机能衰退与持续生产需求的突出矛盾。蛋鸡因日龄增长与长期高产,机体抗氧化功能、免疫能力及代谢水平全面下降,这不仅导致其生殖系统功能退化、产蛋性能降低,更成为制约养殖效益与蛋品安全的核心瓶颈。此外,常见应激源如热应激对产蛋鸡的负面影响包括生长速度下降、产蛋量下降、家禽与鸡蛋的质量和安全性下降^[1]。近年来研究发现,花椒叶中的酚类、黄酮类、生物碱等活性成分具有抗氧化和抗菌特性,具有良好的保健功能^[2],在缓解上述生产困境方面显示出良好潜力。Bandaru等^[3]研究发现,含3,4-二甲氧基肉桂酰基的酰胺衍生物,其抗氧化活性[清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、羟基自由基]的核心单元是肉桂酰基。而花椒素(lemairamin,别名WGX-50)系统命名为(E)-N-[4-二甲氧基苯基)乙基]-3-苯基丙烯酰胺,其分子结构中的肉桂酰基含“苯环-双键-羰基”共轭体系,可通过氢原子/电子转移清除自由基,表现出一定的抗氧化功能。此外,WGX-50具有天然安全、无药物残留的特点,符合绿色健康养殖的发展需求。然而,目前相关研究多集中于花椒叶、花椒籽等副产物,针对WGX-50在蛋鸡生产中应用效果的研究较少。因此,本试验旨在系统解析饲粮中添加WGX-50(0.5~2.0 mg/kg)对产蛋后期蛋鸡生产性能、血清生化指标和卵泡发育的影响,以期为WGX-50在畜禽生产中的开发与资源化利用提供参考。

1 材料与方法

1.1 伦理声明

本试验所有试验方案及试验动物使用操作均经河南牧业经济学院实验动物伦理委员会批准(批准编号:HNUAHE ER 221111111300)。

1.2 试验材料

本试验所用WGX-50粉末由上海交通大学魏冬青教授团队实验室提供,外观为白色粉末,其中WGX-50含量≥99.0%。

1.3 试验设计

采用单因素随机试验设计,选取480只初始体重[(2.01±0.07) kg]接近且产蛋性能无显著差异(P>0.05)的60周龄健康海兰褐蛋鸡,随机分为4个组,每组设8个重复,每个重复15只蛋鸡。各组分别饲喂在基础饲粮中添加0(对照)、0.5、1.0和2.0 mg/kg WGX-50的试验饲粮。试验共10周,其中预试期2周,正试期8周。基础饲粮以玉米和豆粕为主要原料,参考《鸡饲养标准》(NY/T 33—2004)配制,饲粮组成及营养水平见表1。按照试验设计的添加量,将WGX-50采用逐级混匀的方式添加到基础饲粮中配成试验饲粮,试验饲粮均为粉料,试验期间每周配制1次。

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)

Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) %

项目 Items	含量 Content
原料 Ingredients
玉米 Corn	64.00
豆粕 Soybean meal	19.00
小麦麸 Wheat bran	3.00
石粉 Limestone	9.00
预混料 Premix¹⁾	5.00
合计 Total	100.00
营养水平 Nutrient levels²⁾
代谢能 ME/(MJ/kg)	11.94
粗蛋白质 CP	16.32
蛋氨酸 Met	0.42
钙 Ca	3.52
总磷 TP	0.58

1)预混料为每千克饲粮提供 Premix provided the following per kg of the diet: VA 10 000 IU,VD₃ 3 000 IU,VE 30 IU,VK₃ 4.8 mg,VB₁ 3 mg,VB₂ 9.6 mg,VB₆ 6 mg,VB₁₂ 0.3 mg,生物素 biotin 1.67 mg,D-泛酸 D-pantothenic acid 18 mg,叶酸 folic acid 1.5 mg,烟酸 nicotinic acid 60 mg,Cu (CuSO₄·5H₂O) 8 mg,Fe (FeSO₄·H₂O) 60 mg,Mn (MnSO₃·H₂O) 65 mg,Zn (ZnSO₄·H₂O) 80 mg,I (KI) 0.35 mg,Se (Na₂SeO₃) 0.30 mg。
2)代谢能根据《中国饲料成分及营养价值表(2024年第35版)》计算获得,其余为实测值。粗蛋白质(GB/T 6432—2018)、钙(GB/T 6436—2018)、总磷(GB/T 6437—2018)及蛋氨酸(GB/T 18868—2024)均按照相应国家标准进行测定。ME was calculated according to the Tables of Feed Composition and Nutritive Values in China (35th edition, 2024), while the others were measured values. CP (GB/T 6432—2018), Ca (GB/T 6436—2018), TP (GB/T 6437—2018) and Met (GB/T 18868—2024) were determined in accordance with the corresponding national standards.

1.4 饲养管理

饲养试验在许昌鹏远禽业有限公司进行。蛋鸡采用笼养模式饲养,自由采食与饮水,每天07:30和15:30各饲喂1次,16:00收集鸡蛋。每天09:00和17:00清粪。鸡舍温度控制在25 ℃左右,相对湿度保持在60%~65%。每日观察蛋鸡的健康状况,并于每日第1次饲喂前清理剩余饲粮并称重记录。

1.5 样品采集与指标测定

1.5.1 生产性能

试验期内,每日07:00开始称量剩余饲料量,16:00开始人工捡蛋,记录总产蛋数、总蛋重、每日采食量。计算产蛋率、平均蛋重、平均日采食量、料蛋比。

平均日采食量(g/d)=总采食量/(产蛋鸡只数×试验天数);

产蛋率(%)=[总产蛋数/(产蛋鸡只数×试验天数)]×100;

料蛋比=总采食量/总蛋重;

平均蛋重(g)=总蛋重/总产蛋数。

1.5.2 血清生化指标

试验结束时,从各组每个重复随机选取1只鸡,空腹禁食12 h后进行翅静脉采血,将采集到的血液样本在室温条件下45°倾斜静置60 min,1 300×g离心10 min,将血清分装于1.5 mL EP管中,-20 ℃保存待测。试验测定的血清生化指标包括抗氧化指标、免疫指标和生殖激素指标,其中血清抗氧化指标包括总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量;血清免疫指标包括白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)含量;血清生殖激素指标包括促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E₂)含量。血清生化指标均采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)通过酶标仪(Tecan Infinite F50 microplate reader,帝肯,瑞士)测定。检测所用试剂盒购自南京建成生物工程研究所,测定时按照试剂盒说明书操作步骤严格执行。

1.5.3 卵泡数量及大小测定

试验期最后1 d,从各组每个重复随机选取1只鸡,在完成产蛋后的3 h内通过颈动脉放血法处死,立即解剖并剥离完整双侧卵巢,在0.9%生理盐水中分离所有卵泡,用游标卡尺测量等级卵泡F1、F2和F3的直径,统计小黄卵泡(small yellow follicles, SYF)数量、大白卵泡(large white follicles, LWF)数量及总卵泡数量。

1.6 数据处理与分析

数据先用Excel 2019进行初步处理,然后采用SPSS 26.0软件进行统计分析。对符合正态分布的连续变量数据进行单因子方差分析(one-way ANOVA),若差异达到显著性水平,则进一步采用Duncan氏法进行组间多重比较。统计显著性水平设定为P<0.05。结果均以“平均值±标准误”表示。

2 结果与分析

2.1 WGX-50对产蛋后期蛋鸡生产性能的影响

由表2可知,与对照组相比,0.5、1.0、2.0 mg/kg WGX-50添加组的产蛋率和平均蛋重在数值上有所增加,平均日采食量在数值上有所下降,但差异未达到显著水平(P>0.05);与对照组相比,1.0、2.0 mg/kg WGX-50添加组的料蛋比显著降低(P<0.05)。

表2 花椒素对产蛋后期蛋鸡生产性能的影响

Table 2 Effects of WGX-50 on performance of laying hens in late laying period

项目 Items	WGX-50添加量 WGX-50 supplemented amount/(mg/kg)				P值 P-value
项目 Items	0	0.5	1.0	2.0	P值 P-value
产蛋率 Laying rate/%	83.16±1.23	84.96±1.94	86.34±1.88	85.49±2.77	0.728
平均蛋重 Average egg weight/g	56.63±1.59	56.81±1.95	57.66±1.98	57.72±1.90	0.963
平均日采食量 ADFI/(g/d)	102.31±1.43	102.18±2.10	101.32±1.91	101.76±2.81	0.987
料蛋比 F/E	2.15±0.02^a	2.11±0.04^ab	2.05±0.04^b	2.06±0.03^b	0.040

	同行数据肩标有相同字母或无字母表示差异不显著(P>0.05),不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。下表同。
	In the same row, values with the same letter or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

2.2 WGX-50对产蛋后期蛋鸡血清抗氧化指标的影响

由表3可知,与对照组相比,1.0、2.0 mg/kg WGX-50添加组的血清T-AOC及GSH-Px活性显著提高(P<0.05);与对照组相比,0.5、1.0、2.0 mg/kg WGX-50添加组的血清SOD活性显著提高(P<0.05),MDA含量显著下降(P<0.05)。

表3 花椒素对产蛋后期蛋鸡血清抗氧化指标的影响

Table 3 Effects of WGX-50 on serum antioxidant indicators of laying hens in late laying period

项目 Items	WGX-50添加量 WGX-50 supplemented amount/(mg/kg)				P值 P-value
项目 Items	0	0.5	1.0	2.0	P值 P-value
总抗氧化能力 T-AOC/(U/mL)	4.47±0.24^b	4.78±0.27^b	6.68±0.44^a	6.60±0.35^a	<0.001
谷胱甘肽过氧化物酶 GSH-Px/(U/mL)	1 072.12±14.14^b	1 121.69±24.49^ab	1 173.71±28.33^a	1 167.76±17.52^a	0.012
超氧化物歧化酶 SOD/(U/mL)	107.04±2.60^b	112.62±1.51^a	114.72±1.53^a	114.38±1.28^a	0.024
丙二醛 MDA/(nmol/mL)	10.38±0.46^a	9.35±0.25^b	8.76±0.37^b	8.53±0.19^b	0.004

2.3 WGX-50对产蛋后期蛋鸡血清免疫指标的影响

由表4可知,与对照组相比,0.5、1.0、2.0 mg/kg WGX-50添加组的血清IL-1β含量显著降低(P<0.05),1.0、2.0 mg/kg WGX-50添加组的血清TNF-α含量显著降低(P<0.05);与对照组相比,0.5、1.0、2.0 mg/kg WGX-50添加组的血清IL-6含量在数值上有所下降,血清IgA、IgG、IgM含量在数值上有所提高,但差异未达到显著水平(P>0.05)。

表4 花椒素对产蛋后期蛋鸡血清免疫指标的影响

Table 4 Effects of WGX-50 on serum immune indicators of laying hens in late laying period

项目 Items	WGX-50添加量 WGX-50 supplemented amount/(mg/kg)				P值 P-value
项目 Items	0	0.5	1.0	2.0	P值 P-value
白细胞介素-1β IL-1β/(ng/L)	12.41±0.35^a	9.66±0.19^b	8.27±0.37^c	8.13±0.30^c	<0.001
白细胞介素-6 IL-6/(ng/L)	17.68±3.74	16.27±2.60	15.33±2.77	15.19±2.25	0.438
肿瘤坏死因子-α TNF-α/(pg/mL)	91.78±1.92^a	88.39±1.62^ab	85.38±1.03^b	85.78±1.33^b	0.026
免疫球蛋白A IgA/(g/L)	56.03±2.59	58.32±1.87	62.52±3.67	65.32±4.26	0.207
免疫球蛋白G IgG/(g/L)	108.74±2.90	123.28±5.91	114.55±3.76	124.28±6.81	0.130
免疫球蛋白M IgM/(g/L)	283.52±10.93	301.13±12.77	303.79±14.49	322.72±14.95	0.262

2.4 WGX-50对产蛋后期蛋鸡血清生殖激素指标的影响

由表5可知,与对照组相比,1.0、2.0 mg/kg WGX-50添加组的血清FSH和E₂含量显著提高(P<0.05);与对照组相比,0.5、1.0、2.0 mg/kg WGX-50添加组的血清LH含量在数值上有所提高,但未达到显著差异(P>0.05)。

表5 花椒素对产蛋后期蛋鸡血清生殖激素指标的影响

Table 5 Effects of WGX-50 on serum reproductive hormone indicators of laying hens in late laying period

项目 Items	WGX-50添加量 WGX-50 supplemented amount/(mg/kg)				P值 P-value
项目 Items	0	0.5	1.0	2.0	P值 P-value
促卵泡激素 FSH/(mIU/mL)	2.24±0.07^b	2.36±0.06^b	3.19±0.06^a	3.26±0.01^a	<0.001
黄体生成素 LH/(mIU/mL)	2.73±0.08	2.85±0.09	2.91±0.07	2.93±0.04	0.236
雌二醇 E₂/(ng/mL)	131.27±2.34^c	151.37±7.15^b	172.34±4.06^a	168.56±2.27^a	<0.001

2.5 WGX-50对产蛋后期蛋鸡卵巢中卵泡数量及大小的影响

由表6可知,与对照组相比,0.5、1.0、2.0 mg/kg WGX-50添加组总卵泡数量显著增加(P<0.05),1.0 mg/kg WGX-50添加组的SYF和LWF数量显著增加(P<0.05),1.0、2.0 mg/kg WGX-50添加组的等级卵泡F1直径显著增大(P<0.05),1.0 mg/kg WGX-50添加组等级卵泡F3直径显著增大(P<0.05)。

表6 花椒素对产蛋后期蛋鸡卵巢中卵泡数量及大小的影响

Table 6 Effects of WGX-50 on number and size of ovarian follicles of laying hens in late laying period

项目 Items	WGX-50添加量 WGX-50 supplemented amount/(mg/kg)				P值 P-value
项目 Items	0	0.5	1.0	2.0	P值 P-value
卵泡数量 Numbers of follicles/个
总卵泡 Total follicles	52.33±1.43^c	58.33±1.52^b	65.17±2.15^a	62.17±1.25^ab	<0.001
小黄卵泡 SYF	11.67±0.33^b	13.50±0.76^ab	14.67±0.61^a	13.83±0.87^ab	0.035
大白卵泡 LWF	10.83±0.31^b	12.33±0.84^ab	14.00±0.77^a	12.67±0.76^ab	0.037
卵泡大小 Sizes of follicles/cm
等级卵泡F1直径 Diameter of F1 hierarchical follicle	3.50±0.09^b	3.65±0.15^ab	3.93±0.10^a	3.78±0.09^a	0.045
等级卵泡F2直径 Diameter of F2 hierarchical follicle	3.08±0.15	3.20±0.09	3.20±0.06	3.17±0.08	0.827
等级卵泡F3直径 Diameter of F3 hierarchical follicle	2.50±0.06^b	2.60±0.06^b	2.90±0.10^a	2.78±0.14^ab	0.029

3 讨论

3.1 WGX-50对产蛋后期蛋鸡生产性能的影响

蛋鸡进入产蛋后期后,同时面临生理机能衰退与持续生产压力的双重挑战,直接导致产蛋率下滑、料蛋比升高,严重影响养殖效益。正因如此,如何稳定并延长产蛋周期已成为行业关注的焦点。目前,直接研究WGX-50对蛋鸡生产性能影响的公开报道确实有限,但与其成分相关的花椒籽和花椒粉在蛋鸡饲粮中的应用已积累一定成果。大量研究发现,在蛋鸡饲粮中添加不同水平的花椒籽(粉)能显著改善蛋鸡产蛋性能^[4-6]。李兴来等^[7]研究发现,饲粮中添加3%花椒籽饼替代麸皮可显著提高蛋鸡的产蛋率,显著降低蛋鸡的料蛋比和破蛋率,该蛋鸡生产性能的提升可能与花椒籽饼中的有效成分提升了蛋鸡的抗氧化能力和改善了肠道菌群结构有关。在本试验中,与对照组相比,0.5、1.0、2.0 mg/kg WGX-50添加组的产蛋率在数值上分别提高2.16%、3.82%和2.73%,但差异未达到显著水平;0.5、1.0、2.0 mg/kg WGX-50添加组的料蛋比在数值上分别降低1.86%、4.65%和4.19%,其中1.0、2.0 mg/kg WGX-50添加组的料蛋比显著降低。结果表明,饲粮中添加1.0和2.0 mg/kg WGX-50可有效降低料蛋比,从而改善产蛋后期蛋鸡的生产性能。

3.2 WGX-50对产蛋后期蛋鸡血清抗氧化指标的影响

产蛋作为高代谢过程,在蛋鸡产蛋后期常伴随抗氧化系统失衡,此时氧化应激成为诱发多种疾病的关键因素。随着日龄增长,在环境因素与机体代谢的共同作用下,蛋鸡血清及肝脏中的活性氧水平不断升高。若机体内源性抗氧化物不足以中和过量的自由基和过氧化物,将打破活性氧的生成与清除平衡,造成抗氧化系统失衡并引发氧化应激,从而损害蛋鸡的生理机能。研究表明,花椒叶中富含黄酮类和总多酚等具较强抗氧化活性的成分^[8]。付康等^[9]研究发现,花椒叶在蛋鸡抗氧化方面表现出积极作用,其可提高蛋鸡血清中SOD活性。李宁等^[10]报道,在京粉6号蛋鸡饲粮中添加2%花椒籽能有效增强血清T-AOC。李兴来等^[11]进一步指出,花椒叶可提高肝脏和蛋黄的T-AOC,其机制可能与黄酮类成分抑制黄嘌呤氧化酶活性、减少活性氧生成有关,从而为蛋鸡提供有效的抗氧化保护,维持其健康与生产性能。此外,陈星等^[12]在肉鸡研究中发现,使用2.5%花椒籽粕替代豆粕可显著提高血清T-AOC,以及SOD和GSH-Px活性,同时显著降低MDA含量,这表明花椒副产物有助于增强机体抗氧化功能。而WGX-50的抗氧化作用可能源于其分子结构中的肉桂酰基,该基团可清除自由基。这不仅有助于维持血清抗氧化平衡、降低MDA生成,还能减轻脂质、蛋白质和DNA等生物大分子的氧化损伤。还有研究指出,花椒提取物GX-50可保护中波紫外线损伤的皮肤成纤维细胞,其机制涉及自由基清除与抗氧化作用,以及激活转化生长因子-β(TGF-β)信号通路以促进胶原蛋白表达^[13]。在本试验中,与对照组相比,1.0、2.0 mg/kg WGX-50添加组的血清T-AOC及GSH-Px活性显著提高;0.5、1.0、2.0 mg/kg WGX-50添加组的血清SOD活性显著提高,MDA含量显著下降。这与上述研究结论一致,其机制可能与WGX-50上调内源性抗氧化酶的表达与活性,系统性增强机体抗氧化能力有关。

3.3 WGX-50对产蛋后期蛋鸡血清免疫指标的影响

炎症因子在炎症反应中发挥关键的调控作用,通过细胞间信号传递调节免疫平衡,防止过度炎症,从而维持组织稳态。李宁等^[10]研究表明,使用2%花椒籽替代玉米可显著降低蛋鸡血清中IL-1β和干扰素-γ(IFN-γ)含量,同时显著提高白细胞介素-4(IL-4)含量,增强蛋鸡免疫力。此外,多项动物试验揭示了花椒籽油的多重药理活性。在烫伤大鼠模型中,花椒籽油通过抑制核因子-κB抑制蛋白α(IκBα)磷酸化及后续的核因子-κB p65亚基(NF-κB p65)磷酸化,有效阻断了核因子-κB(NF-κB)信号通路的过度激活,通过促进胶原合成和抗炎级联反应促进了创面愈合^[14]。同样,在哮喘小鼠模型中,花椒籽油也显示出对NF-κB信号通路的抑制作用,表现为肺部炎症关键介质(细胞因子与趋化因子)的表达受到遏制,并由此缓解了肺部炎症和组织损伤^[15]。在肺上皮细胞模型中,花椒籽油可通过抑制Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/NF-κB信号通路,减轻脂多糖(LPS)诱导肺上皮细胞发生的炎症反应^[16]。从花椒果皮中分离得到的烷基酰胺类物质如四氢花椒醇,可抑制LPS刺激的小鼠RAW 264.7巨噬细胞中一氧化氮(NO)的生成,从而发挥抗炎作用^[17]。此外,Zhang等^[18]研究发现,针对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的斑马鱼结肠炎模型,WGX-50显现出良好的治疗效果,能够有效抑制促炎因子的生成,并抑制中性粒细胞向损伤部位募集,表明其具有明确的抗炎作用。此外,β淀粉样蛋白诱导的阿尔茨海默病小鼠模型中,Gx-50对相关神经炎症具有显著的抑制作用,其核心机制是通过靶向TLR4介导的NF-κB/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路,减少小胶质细胞过度活化及促炎介质[TNF-α、IL-1β、NO、前列腺素E₂(PGE₂)]的释放,从而减轻脑内神经炎症损伤^[19]。在本试验中,与对照组相比,0.5、1.0、2.0 mg/kg WGX-50添加组的血清IL-1β含量显著降低,1.0、2.0 mg/kg WGX-50添加组的血清TNF-α含量显著降低,说明WGX-50能够缓解机体因氧化应激引发的炎症反应,其可能通过抑制促炎因子产生,调节机体免疫平衡,进而下调炎症相关因子表达来发挥作用。

免疫球蛋白是参与体液免疫的核心功能蛋白,由浆细胞合成并分泌。其中,IgA主要在呼吸道、消化道等黏膜部位发挥免疫防御功能^[20];IgG是适应性免疫应答中至关重要的血清抗体,其核心功能包括对抗病原微生物和解除毒素的毒性;IgM则在初次免疫应答中最早产生,可快速启动免疫反应^[21]。赵建飞等^[22]发现,饲粮中添加2%花椒叶粉可显著增加肉鸭回肠中分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量,提示花椒叶粉可能通过调节分泌型免疫球蛋白的分泌,改善肠道免疫功能。陈星等^[12]在肉鸡研究中发现,使用2.5%花椒籽粕替代豆粕可显著提高血清IgA与IgM含量。而马尹鹏等^[23]研究表明,饲粮中不同水平添加的花椒粉对黄羽肉鸡免疫机能的影响较小。在本试验中,各组间血清IgA、IgM和IgG含量均无显著差异,表明饲粮中添加WGX-50对蛋鸡免疫功能未产生负面影响,其对蛋鸡免疫功能的相关机制还需进一步研究。

3.4 WGX-50对产蛋后期蛋鸡血清生殖激素和卵泡发育的影响

蛋鸡产蛋后期生产性能出现下降,其根本原因在于调控生殖功能的下丘脑-垂体-卵巢轴(HPO轴)因氧化应激和炎症损伤而出现整体性衰退,具体表现为机体FSH和LH分泌紊乱、E₂含量降低、卵泡闭锁增加导致的可用卵泡储备减少,以及卵泡发育同步性下降。蛋鸡卵泡的正常发育与存活极易受到氧化应激和炎症损伤的影响^[24]。氧化应激被认为是诱发蛋鸡卵泡闭锁和卵巢衰老的关键因素,卵泡的退化可由活性氧和炎症因子诱导的颗粒细胞凋亡引发,该过程在卵泡功能衰竭中起着核心作用,可引起有腔卵泡数量减少,最终导致蛋鸡产蛋性能下降^[25-26]。因此,缓解氧化应激有助于改善卵巢功能,延长家禽产蛋周期。研究表明,饲粮中添加天然抗氧化剂紫檀芪,可显著提高低产蛋鸡的产蛋率(最高提升42.7%),并增强卵巢、肝脏和血清的抗氧化能力,其作用机制主要与激活沉默信息调节因子1(SIRT1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路,从而强化机体抗氧化防御体系有关^[27]。还有研究发现,饲粮中添加具有抗氧化作用的姜黄素可优化繁殖内分泌环境,表现为卵巢组织FSH、E₂与孕酮(P₄)含量的显著上升,并伴随卵泡发育的改善^[28]。白藜芦醇(RES)则被证实能通过多通路协同作用改善蛋鸡卵巢功能与生产性能:一方面激活Nrf2-抗氧化反应元件(ARE)信号通路缓解氧化应激,另一方面调控NF-κB信号通路抑制炎症反应,同时通过SIRT1-叉头蛋白O1(FoxO1)信号通路减少颗粒细胞凋亡来减缓卵泡闭锁进程,进而促成了产蛋性能与蛋品质的同步优化^[29]。

在本试验中,与对照组相比,1.0、2.0 mg/kg WGX-50添加组的血清FSH和E₂含量及等级卵泡F1直径显著提高,0.5、1.0、2.0 mg/kg WGX-50添加组总卵泡数量显著增加,1.0 mg/kg WGX-50添加组的SYF和LWF数量及等级卵泡F3直径显著增加。WGX-50对下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴的调控作用,可通过其对小胶质细胞功能的双重调控实现。Shi等^[30]研究证实,Gx-50作为α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nAChR)激动剂,可通过激活Janus激酶2(JAK2)/信号转导与转录激活因子3(STAT3)和磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路,显著抑制小胶质细胞过度活化,减少TNF-α、IL-1β等促炎因子释放,从而减轻神经炎症对下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)神经元的损伤。另有关于阿尔茨海默病小鼠模型的研究表明,Gx-50可显著下调β-淀粉样蛋白诱导的TNF-α、IL-1β、NO及PGE2表达,并有效抑制NF-κB信号通路活化^[19],进一步佐证其强效抗炎活性。已有研究证实,下丘脑小胶质细胞中NF-κB信号通路异常活化会诱导促炎因子大量释放,直接抑制GnRH分泌并损伤GnRH神经元功能,进而扰乱HPG轴稳态^[31]。结合Collado-Sole等^[32]在《Science》中揭示的机制,小胶质细胞核因子-κB受体活化因子(RANK)信号是维持GnRH神经元功能及HPG轴稳态的关键,而慢性炎症可干扰该信号通路的正常运作。由此推测,WGX-50的抗炎作用可间接保护小胶质细胞RANK信号的生理活性,保障其对GnRH神经元的结构支持与功能调控,促进GnRH脉冲式分泌,进而增强垂体合成与释放FSH、LH的能力,但具体机制还有待进一步研究。同时,WGX-50还可能通过减轻氧化应激与炎症对卵泡颗粒细胞的损伤,显著降低卵泡闭锁率,增加总卵泡、SYF和LWF数量,并促进E₂的合成与分泌,这对卵泡发育具有积极调控作用。综上所述,WGX-50能通过调控繁殖内分泌环境(提升FSH、E₂等关键激素含量)、改善卵泡发育状态(优化卵泡发育进程),发挥对蛋鸡繁殖性能的积极调控作用,这可能与抗氧化特性有关。

4 结论

① 饲粮中添加WGX-50可改善产蛋后期蛋鸡的生产性能,增强机体抗氧化能力,缓解炎症反应,促进生殖激素分泌及卵泡发育。

② 本试验条件下,饲粮中WGX-50适宜添加量为1.0~2.0 mg/kg。

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