Chinese Journal of Animal Nutrition >

2026 , Vol. 38 >Issue 6: 4219 - 4232

DOI: https://doi.org/10.12418/CJAN2026.339

RESEARCH PAPER

Effects of Different Compound Enzyme Preparation Supplementation in Low-Protein Diets on Performance, Serum Indices, Intestinal Digestive Enzyme Activities and Nutrient Apparent Digestibility of Laying Hens

  • ZHANG Ziheng , 1 ,
  • LI Xiaoli 1 ,
  • HE Wanling , 1, 2, * ,
  • DING Xiaowei 2, 3
Expand
  • 1 College of Animal Science and Technology, Henan University of science and Technology, Luoyang 471023, China
  • 2 Henan Provincial Engineering Technology Research Center for Trace Element Feed Additives in Biological Fermentation, Hebi 456250, China
  • 3 Henan Qibo Industrial Co., Ltd., Hebi 456250, China
* professor, E-mail:

Received date: 2025-12-19

  Online published: 2026-06-13

Fold

Abstract

This experiment was conducted to investigate effects of supplementing different compound enzyme preparations in low-protein diets on performance, serum indices, intestinal digestive enzyme activities and nutrient apparent digestibility of laying hens. A total of 1 080 Hy-Line brown laying hens aged of 58 weeks were randomly divided into six groups with six replicates per group and 30 hens per replicate. The control group was fed a corn-soybean meal basal diet with a crude protein (CP) level of 14.73%. The experimental groups were fed a low-protein diet in which the CP level was reduced by 1 percentage point relative to the basal diet by replacing part of soybean meal with wheat bran, and were supplemented without or with different compound enzyme preparations. Group M0 received the low-protein diet without extra enzyme supplementation, whereas groups M1, M2, M3 and M4 received the low-protein diet supplemented with 0.1% compound enzyme preparations M1 (xylanase 8 000 U/kg + mannanase 150 U/kg + glucanase 600 U/kg), M2 (xylanase 8 000 U/kg + mannanase 150 U/kg + glucanase 600 U/kg + amylase 1 050 U/kg), M3 (xylanase 8 000 U/kg + mannanase 150 U/kg + glucanase 600 U/kg + protease 120 U/kg) and M4 (xylanase 8 000 U/kg + mannanase 150 U/kg + glucanase 600 U/kg + amylase 1 050 U/kg + protease 120 U/kg), respectively. The pre-experimental period lasted for 7 days and the formal experimental period lasted for 84 days. The results showed as follows: 1) the laying rate in groups M1, M2, M3 and M4 was significantly higher than that in group M0 (P<0.05), with no significant difference compared with the control group (P>0.05); the average egg weight in the control group and groups M2, M3 and M4 was significantly higher than that in groups M0 and M1 (P<0.05). 2) Compared with group M0, the serum total protein content in groups M3 and M4 was significantly increased (P<0.05), with no significant difference compared with the control group (P>0.05); the serum uric acid content in groups M1, M2, M3 and M4 was significantly lower than that in the control group and group M0 (P<0.05). 3) Compared with the control group and group M0, the intestinal trypsin activity in groups M3 and M4 was significantly increased (P<0.05), and the amylase activity in groups M2 and M4 was significantly increased (P<0.05); the intestinal lipase activity in group M0 was significantly decreased compared with the control group (P<0.05), whereas that in groups M3 and M4 was significantly increased compared with the control group (P<0.05). 4) Compared with the control group and group M0, the dry matter apparent digestibility in groups M2, M3 and M4 was significantly increased (P<0.05); the crude protein apparent digestibility in groups M3 and M4 was significantly increased (P<0.05); the apparent digestibility of crude fat, ash and calcium in groups M1, M2, M3 and M4 was significantly increased (P<0.05). 5) Compared with group M0, the apparent digestibility of essential amino acids lysine, methionine and threonine in group M4 was significantly increased by 2.35, 1.95 and 3.64 percentage points, respectively (P<0.05), and did not differ significantly from that in the control group (P>0.05). In conclusion, supplementation of compound enzyme preparations can improve the performance of laying hens fed low-protein diets, enhance intestinal digestive enzyme activities, and promote the apparent digestibility of conventional nutrients and amino acids, thereby alleviating the negative effects of low-protein diets. Under the conditions of this experiment, supplementation of 0.1% compound enzyme preparation M4 (containing xylanase, mannanase, glucanase, amylase and protease) shows the optimal effects.

Key words： laying hens; compound enzyme preparation; performance; digestive enzyme activities; nutrient apparent digestibility

Cite this article

ZHANG Ziheng , LI Xiaoli , HE Wanling , DING Xiaowei . Effects of Different Compound Enzyme Preparation Supplementation in Low-Protein Diets on Performance, Serum Indices, Intestinal Digestive Enzyme Activities and Nutrient Apparent Digestibility of Laying Hens[J]. Chinese Journal of Animal Nutrition, 2026 , 38(6) : 4219 -4232 . DOI: 10.12418/CJAN2026.339

随着畜牧业规模化发展不断扩大,养殖业对蛋白质饲料原料的需求持续攀升。当前,我国蛋白质饲料来源主要依赖于大豆、菜籽粕等植物性蛋白质。豆粕作为优质蛋白源,是目前畜牧养殖中主要的蛋白质饲料原料。国家统计局数据显示,2024年我国大豆进口量达1.05亿t,同比增长6.5%,这反映出国内蛋白质饲料原料仍处于严重短缺状态。近年来,低蛋白质饲粮技术因其在节约蛋白质资源方面的潜力而受到广泛关注与应用。常规饲料原料中常含有植酸、非淀粉多糖(non-starch polysaccharides,NSP)及蛋白质抑制因子等多种抗营养因子,这些物质会阻碍动物对饲料营养物质的消化与利用[1]。酶制剂的应用可有效降解此类抗营养因子,提高饲粮中能量与蛋白质的利用率,进而改善家禽生产性能。推广低蛋白质饲粮具有多重重要意义:一方面,能够降低饲料成本,缓解行业对进口蛋白质原料的依赖;另一方面,有助于减少氮排放与氨污染,促进养殖业可持续发展。闫立省等[2]和Zhang等[3]研究表明,低蛋白质饲粮若未能精准补充必需氨基酸以维持合理的能量蛋白质比,将导致蛋鸡通过增加采食量进行补偿,但往往无法完全弥补蛋白质和氨基酸的不足,最终导致产蛋率和蛋重降低,养殖成本上升。因此,通过营养调控手段优化饲粮配方成为缓解相关不良影响的关键途径,其中添加酶制剂是可行且有效的解决方案之一。近年来饲料酶谱研究进展显著,饲粮复合酶研发聚焦精准配比与协同效应。通过针对性组合非淀粉多糖酶、蛋白酶等多种酶制剂,有效降解饲料中抗营养因子,实现营养释放与肠道健康调控的双重目标,提高饲料利用率。本试验旨在探讨低蛋白质饲粮添加复合酶制剂对蛋鸡产蛋后期生产性能、血清指标、肠道消化酶活性及营养物质表观消化率的影响,为酶制剂在蛋鸡生产中的科学应用提供理论依据与数据支持。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验所用复合酶制剂M1、M2、M3和M4为自配而成,具体组成见表1,所使用到的酶制剂包括蛋白酶(10 000 U/g)、木聚糖酶(30 000 U/g)、淀粉酶(5 000 U/g)、甘露聚糖酶(2 000 U/g)和葡聚糖酶(1 800 U/g),由河南岐伯实业有限公司提供。
表1 复合酶制剂组成

Table 1 Composition of compound enzyme preparations

复合酶制剂
Compound enzyme
preparations		 组成
Composition
M1 木聚糖酶8 000 U/kg+甘露聚糖酶150 U/kg+葡聚糖酶600 U/kg
M2 木聚糖酶8 000 U/kg+甘露聚糖酶150 U/kg+葡聚糖酶600 U/kg+淀粉酶1 050 U/kg
M3 木聚糖酶8 000 U/kg+甘露聚糖酶150 U/kg+葡聚糖酶600 U/kg+蛋白酶120 U/kg
M4 木聚糖酶8 000 U/kg+甘露聚糖酶150 U/kg+葡聚糖酶600 U/kg+
淀粉酶1 050 U/kg+蛋白酶120 U/kg

1.2 试验设计

本试验经河南科技大学试验动物伦理委员会批准,批准编号为SYLY-2025ZY0021。
选取1 080只58周龄海兰褐蛋鸡[初始产蛋率无显著差异(P>0.05)]随机分为6个组,每组6个重复,每个重复30只鸡。对照组饲喂粗蛋白质(CP)水平为14.73%的基础饲粮;试验组饲喂在基础饲粮基础上通过麸皮替代部分豆粕使得粗蛋白质水平降低1个百分点的低蛋白质饲粮,并在此基础上分别不添加或添加不同复合酶制剂,其中,M0组不额外添加酶制剂,M1、M2、M3和M4组分别在低蛋白质饲粮基础上添加0.1%复合酶制剂M1、M2、M3和M4。预试期7 d,正试期84 d。基础饲粮为玉米-豆粕型,参照NRC(1994)和《海兰褐饲养管理手册》的蛋鸡营养需要配制;试验组饲粮通过麸皮替代部分豆粕使得饲粮粗蛋白质水平降低1个百分点,代谢能与基础饲粮基本保持一致。试验饲粮组成及营养水平见表2。
表2 试验饲粮组成及营养水平(风干基础)

Table 2 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis) %

项目
Items		 对照组
Control
group		 M0组
Group
M0		 M1组
Group
M1		 M2组
Group
M2		 M3组
Group
M3		 M4组
Group
M4
原料 Ingredients
玉米 Corn 63.37 64.36 64.36 64.36 64.36 64.36
豆粕 Soybean meal 22.77 18.81 18.81 18.81 18.81 18.81
麸皮 Bran 2.97 2.97 2.97 2.97 2.97
豆油 Soybean oil 0.99 0.99 0.99 0.99 0.99 0.99
预混料 Premix1) 4.95 4.95 4.95 4.95 4.95 4.95
石粉 Limestone 7.92 7.92 7.92 7.92 7.92 7.92
合计 Total 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00
营养水平 Nutrient levels2)
代谢能 ME/(MJ/kg) 12.57 12.51 12.51 12.51 12.51 12.51
粗蛋白质 CP 14.73 13.77 13.91 13.82 13.58 13.67
总磷 TP 0.37 0.37 0.38 0.36 0.38 0.36
钙 Ca 4.03 4.58 4.46 4.54 4.37 4.31
蛋氨酸 Met 0.39 0.31 0.32 0.34 0.32 0.34
精氨酸 Arg 0.93 0.83 0.77 0.81 0.82 0.79
组氨酸 His 0.45 0.37 0.36 0.39 0.36 0.39
苏氨酸 Thr 0.60 0.51 0.52 0.54 0.52 0.50
亮氨酸 Leu 1.43 1.25 1.28 1.20 1.31 1.28
异亮氨酸 Ile 0.67 0.50 0.48 0.45 0.49 0.51
缬氨酸 Val 0.72 0.61 0.61 0.63 0.60 0.63
苯丙氨酸 Phe 0.82 0.67 0.64 0.70 0.68 0.72
赖氨酸 Lys 0.83 0.68 0.65 0.68 0.67 0.69
总氨基酸 Total amino acids 14.11 12.56 12.78 13.20 12.74 12.78

1)预混料为每千克饲粮提供 The premix provided the following per kg of diets:VA 7 500 IU,VB1 1.5 mg,VB2 4 mg,VB6 2 mg,VB12 0.02 mg,VD3 2 500 IU,VE 35 mg,VK3 1 mg,烟酸 nicotinic acid 30 mg,叶酸 folic acid 0.55 mg,泛酸 pantothenic acid 10 mg,生物素 biotin 0.16 mg,氯化胆碱 choline chloride 420 mg,Fe 200 mg,Mn 100 mg,Cu 10 mg,Zn 100 mg,NaCl 0.12 g,CaH2PO4 0.19 g,CaCO3 0.74 g,植酸酶 phytase 12 U,DL-蛋氨酸 DL-Met 40.6 mg,L-赖氨酸 L-Lys 12 mg。
2)代谢能根据NY/T 33—2004计算得出,粗蛋白质(GB/T 6432—2018)、总磷(GB/T 6437—2018)、钙(GB/T 6436—2018)和氨基酸(GB/T 18246—2019)为实测值,分别根据对应的国标测定,总氨基酸为实测的18种氨基酸之和。ME was calculated according to NY/T 33—2004. CP (GB/T 6432—2018), TP (GB/T 6437—2018), Ca (GB/T 6436—2018) and amino acids (GB/T 18246—2019) were measured values, which were determined in accordance with the corresponding national standards, respectively. The total amino acids referred to the sum of the 18 measured amino acids.

1.3 饲养管理

本次饲养试验在河南省洛阳市汝阳县养殖基地进行,所有蛋鸡采用3层阶梯式笼养,每天喂料2次(07:00和18:00),试验期间自由采食和饮水,保持充足的光照(自然+人工16 h)。每天16:00收蛋,并记录产蛋情况。

1.4 样品的采集与指标检测

1.4.1 生产性能和蛋品质指标

每天记录各组的产蛋数和蛋重,并对破蛋、软蛋进行记录。每周末称量饲粮的采食情况,以周为单位计算产蛋率、平均蛋重、平均日采食量和料蛋比。
试验第84天,每个重复随机抽取2枚鸡蛋检测蛋品质。蛋壳强度用蛋壳强度测定仪(In-Spec 2200,Instron,美国)测定;蛋白高度、蛋黄颜色和哈氏单位用多功能蛋品质检测仪(QCH,TSS,英国)测定;蛋形指数使用游标卡尺(500-702-20,得力)测定后计算得到;除去蛋壳膜后,蛋壳厚度通过用螺旋测微仪(DL321025B,得力)在蛋壳上、中、下3块区域测定厚度并取平均值;蛋黄重量使用电子秤测得,并通过蛋黄重量与蛋重的比值计算蛋黄相对重量。

1.4.2 血清生化和抗氧化指标

试验结束当天,禁食12 h,每个重复随机挑选1只鸡进行翅下静脉采血,静置30 min后,以1 006×g离心10 min,取血清保存于-20 ℃冰箱待测。血清生化指标包括总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、尿酸(UA)、钙和磷含量,血清抗氧化指标包括总抗氧化能力(T-AOC)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性以及丙二醛(MDA)含量。所有血清指标均采用分光光度计法测定,检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所,按试剂盒说明书进行操作。

1.4.3 肠道消化酶活性检测

试验结束当天,每个重复随机选取1只鸡,屠宰后开腹,剪取十二指肠,将食糜收集入无酶离心管中,放入-80 ℃冰箱保存待测胰蛋白酶、糜蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性。所有消化酶活性均通过试剂盒测定,试剂盒购自南京建成生物工程研究所,按试剂盒说明书进行操作。

1.4.4 营养物质表观消化率

试验第81~84天,采用全收粪法连续采集3 d鸡的粪便,进行收集之前空腹12 h,将收粪板置于鸡笼下以确保粪便完全收集,收集满24 h后把收粪板立即取出,并去除羽毛、饲料碎屑等。每天以组为单位将粪便混匀后进行称重,然后按照粪重10%加入10%硫酸混匀进行固氮处理,并放入-80 ℃冰箱保存待测。饲粮样品经粉碎后过40目筛,粪便样品75 ℃烘干后粉碎过40目筛,然后测定饲粮和粪便样品的营养物质含量,计算营养物质表观消化率。干物质(DM)含量参照GB 5009.3—2016进行检测;粗脂肪(CF)含量参照GB 5009.6—2016进行检测;粗蛋白质含量参照GB/T 6432—2018进行检测;粗灰分(Ash)含量参照GB/T 6438—2007进行检测;钙含量参照GB/T 6432—2018进行检测;磷含量参照GB/T 6437—2018进行检测;17种水解氨基酸含量参照GB/T 18246—2019常规酸水解法进行检测,色氨酸因常规酸水解易降解,其含量参照GB/T 5009.294—2023单独检测。

1.5 数据统计分析

使用Excel 2019软件将试验数据初步处理后,通过SPSS 26.0统计软件进行单因素方差分析,组间差异采用Duncan氏法进行多重比较,所有试验结果均以平均值±标准差表示,以P<0.05表示差异显著,以0.05≤P<0.10表示差异有显著趋势。

2 结果

2.1 低蛋白质饲粮添加复合酶制剂对蛋鸡生产性能的影响

由表3可知,M1、M2、M3和M4组产蛋率均显著高于M0组(P<0.05),与对照组无显著差异(P>0.05);对照组及M2、M3和M4组的平均蛋重显著高于M0、M1组(P<0.05);与M0组相比,对照组和M4组料蛋比有降低趋势(0.05≤P<0.10)。
表3 低蛋白质饲粮添加复合酶制剂对蛋鸡生产性能的影响

Table 3 Effects of compound enzyme preparation supplementation in low-protein diets on performance of laying hens

项目
Items		 对照组
Control
group		 M0组
Group
M0		 M1组
Group
M1		 M2组
Group
M2		 M3组
Group
M3		 M4组
Group
M4		 P值
P-value
产蛋率
Laying rate/%		 87.33
±1.14a		 84.48
±1.50b		 86.86
±1.73a		 86.71
±1.62a		 86.34
±1.46a		 87.20
±1.71a		 0.021
平均蛋重
Average egg weight/g		 65.37
±0.71a		 64.78
±0.78b		 64.70
±0.67b		 65.39
±0.70a		 65.48
±0.68a		 65.03
±0.76a		 0.014
平均日采食量
ADFI/(g/d)		 118.32
±3.58		 119.17
±3.96		 118.83
±4.66		 118.96
±4.11		 118.83
±3.28		 118.90
±3.30		 0.996
料蛋比
F/E		 2.08
±0.07		 2.12
±0.07		 2.10
±0.07		 2.10
±0.09		 2.10
±0.07		 2.09
±0.08		 0.070

同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05),相同小写字母或无字母表示差异不显著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different lowercase letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same small letter or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

2.2 低蛋白质饲粮添加复合酶制剂对蛋鸡蛋品质的影响

由表4可知,与对照组相比,各试验组蛋品质指标均无显著影响(P>0.05),但M1、M2、M3和M4组相比于对照组和M0组的蛋白高度、哈氏单位和蛋黄相对重量均在数值上有所提升。
表4 低蛋白质饲粮添加复合酶制剂对蛋鸡蛋品质的影响

Table 4 Effects of compound enzyme preparation supplementation in low-protein diets on egg quality of laying hens

项目
Items		 对照组
Control
group		 M0组
Group
M0		 M1组
Group
M1		 M2组
Group
M2		 M3组
Group
M3		 M4组
Group
M4		 P值
P-value
蛋壳强度
Eggshell strength/N		 49.33
±7.03		 45.03
±10.10		 53.01
±8.21		 50.67
±4.95		 47.16
±10.69		 46.71
±8.41		 0.389
蛋白高度
Albumen height/mm		 6.38
±2.68		 6.39
±3.09		 7.13
±2.47		 7.04
±2.30		 7.52
±1.31		 6.70
±2.37		 0.901
蛋黄颜色
Yolk color		 6.70
±0.95		 5.90
±1.20		 6.30
±1.16		 6.70
±0.95		 6.30
±1.16		 6.00
±1.05		 0.495
哈氏单位
Haugh unit		 72.06
±27.76		 70.50
±8.94		 80.30
±17.99		 78.97
±18.01		 84.77
±7.94		 75.58
±25.01		 0.759
蛋形指数
Egg shape index		 1.29
±0.03		 1.27
±0.05		 1.26
±0.05		 1.29
±0.03		 1.31
±0.04		 1.30
±0.05		 0.216
蛋壳厚度
Eggshell thickness/mm		 0.39
±0.26		 0.38
±0.03		 0.40
±0.02		 0.40
±0.02		 0.38
±0.03		 0.39
±0.03		 0.568
蛋黄相对重量
Relative weight of
egg yolk/%		 25.01
±1.74		 25.22
±1.89		 25.71
±2.56		 25.31
±1.91		 26.51
±3.76		 25.32
±2.88		 0.817

2.3 低蛋白质饲粮添加复合酶制剂对蛋鸡血清指标的影响

2.3.1 低蛋白质饲粮添加复合酶制剂对蛋鸡血清生化指标的影响

由表5可知,与对照组相比,M0、M1和M2组血清中TP含量显著降低(P<0.05);M3、M4组血清中TP含量显著高于M0组(P<0.05),与对照组无显著差异(P>0.05)。M1、M2、M3和M4组血清中UA含量显著低于对照组和M0组(P<0.05),对照组与M0组无显著差异(P>0.05)。与对照组相比,M0、M1、M2和M3组血清中磷含量显著降低(P<0.05);M4组血清中磷含量显著高于M0组(P<0.05),与对照组无显著差异(P>0.05)。
表5 低蛋白质饲粮添加复合酶制剂对蛋鸡血清生化指标的影响

Table 5 Effects of compound enzyme preparation supplementation in low-protein diets on serum biochemical indices of laying hens

项目
Items		 对照组
Control
group		 M0组
Group
M0		 M1组
Group
M1		 M2组
Group
M2		 M3组
Group
M3		 M4组
Group
M4		 P值
P-value
总蛋白
TP/(g/L)		 45.42
±0.95a		 40.70
±1.10b		 40.38
±0.11b		 41.07
±0.63b		 44.47
±3.16a		 44.13
±1.57a		 <0.001
白蛋白
ALB/(g/L)		 18.64
±1.59		 15.74
±2.14		 15.74
±2.14		 15.74
±0.96		 17.39
±3.17		 17.39
±2.87		 0.366
尿酸
UA/(μmol/L)		 263.83
±27.09a		 285.67
±21.89a		 230.42
±17.39b		 229.29
±27.24b		 227.40
±20.93b		 216.43
±21.20b		 <0.001
甘油三酯
TG/(mmol/L)		 9.03
±1.34		 7.38
±0.60		 7.50
±1.12		 8.18
±0.89		 7.88
±0.96		 8.25
±0.51		 0.209
总胆固醇
TC/(mmol/L)		 3.11
±0.74		 2.45
±0.43		 2.97
±0.41		 2.72
±0.35		 2.85
±0.21		 3.03
±0.32		 0.221
钙
Ca/(mmol/L)		 3.77
±0.13		 3.51
±0.20		 3.74
±0.30		 3.64
±0.19		 3.52
±0.21		 3.74
±0.16		 0.324
磷
P/(mmol/L)		 1.79
±0.02a		 1.09
±0.23c		 1.11
±0.30c		 1.31
±0.10b		 1.33
±0.18b		 1.56
±0.04a		 <0.001

2.3.2 低蛋白质饲粮添加复合酶制剂对蛋鸡血清抗氧化指标的影响

由表6可知,与对照组相比,各试验组血清抗氧化指标均无显著差异(P>0.05);与M0组相比,M4组血清中T-AOC(0.05≤P<0.10)和T-SOD活性(0.05≤P<0.10)有提高的趋势。
表6 低蛋白质饲粮添加复合酶制剂对蛋鸡血清抗氧化指标的影响

Table 6 Effects of compound enzyme preparation supplementation in low-protein diets on serum antioxidant indices of laying hens

项目
Items		 对照组
Control
group		 M0组
Group
M0		 M1组
Group
M1		 M2组
Group
M2		 M3组
Group
M3		 M4组
Group
M4		 P值
P-value
总抗氧化能力
T-AOC/(U/mL)		 15.01
±2.49		 11.31
±2.58		 12.54
±2.94		 13.26
±3.30		 13.15
±3.79		 16.34
±2.78		 0.088
总超氧化物歧化酶
T-SOD/(U/mL)		 205.07
±5.77		 203.48
±4.13		 206.22
±7.61		 207.54
±8.98		 211.67
±7.85		 216.07
±6.77		 0.084
丙二醛
MDA/(nmol/mL)		 8.42
±3.04		 9.69
±1.32		 8.67
±3.77		 8.42
±2.26		 7.91
±2.55		 8.06
±2.63		 0.616
谷胱甘肽过氧化物酶
GSH-Px/(U/mL)		 242.51
±12.32		 228.90
±32.86		 221.37
±25.66		 240.00
±37.48		 276.18
±106.02		 256.12
±79.82		 0.832
过氧化氢酶
CAT/(U/mL)		 1.78
±0.11		 1.63
±0.22		 1.73
±0.08		 1.74
±0.10		 1.73
±0.18		 1.77
±0.12		 0.570

2.4 低蛋白质饲粮添加复合酶制剂对蛋鸡肠道消化酶活性的影响

由表7可知,与对照组相比,M0、M1和M2组肠道胰蛋白酶活性无显著差异(P>0.05),M3和M4组胰蛋白酶活性显著高于对照组和M0组(P<0.05)。与对照组相比,各试验组肠道糜蛋白酶活性均无显著差异(P>0.05)。与对照组相比,M0组肠道淀粉酶活性显著降低(P<0.05),M2、M4组淀粉酶活性显著提高(P<0.05)。与对照组相比,M0组肠道脂肪酶活性显著降低(P<0.05),M3和M4组脂肪酶活性显著提高(P<0.05);与M0组相比,M1、M2、M3和M4组肠道脂肪酶活性均显著提高(P<0.05)。
表7 低蛋白质饲粮添加复合酶制剂对蛋鸡肠道消化酶活性的影响

Table 7 Effects of compound enzyme preparation supplementation in low-protein diets on intestinal digestive enzyme activities of laying hens

项目
Items		 对照组
Control
group		 M0组
Group
M0		 M1组
Group
M1		 M2组
Group
M2		 M3组
Group
M3		 M4组
Group
M4		 P值
P-value
胰蛋白酶
Trypsin/(U/mg prot)		 26.51
±0.86b		 25.09
±1.40b		 25.70
±0.97b		 26.41
±1.44b		 30.97
±2.30a		 30.86
±1.16a		 <0.001
糜蛋白酶
Pepsin/(U/mg prot)		 16.25
±0.30		 15.32
±0.58		 15.89
±0.85		 15.48
±1.09		 16.81
±0.47		 16.98
±0.74		 0.071
淀粉酶
Amylase/(U/g prot)		 400.31
±12.16b		 373.77
±5.15c		 389.78
±12.18bc		 429.97
±18.42a		 392.82
±4.38bc		 437.90
±15.44a		 <0.001
脂肪酶
Lipase/(U/g prot)		 3.75
±0.11b		 3.46
±0.20c		 3.79
±0.12ab		 3.86
±0.11ab		 4.03
±0.11a		 4.01
±0.11a		 0.002

2.5 低蛋白质饲粮添加复合酶制剂对蛋鸡常规营养物质表观消化率的影响

由表8可知,低蛋白质饲粮添加复合酶制剂对蛋鸡干物质、粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分和钙的表观消化率均有显著影响(P<0.05),M1、M2、M3和M4组磷表观消化率与对照组和M0组相比有提高趋势(0.05≤P<0.10)。M2、M3和M4组干物质表观消化率显著高于对照组和M0组(P<0.05),其中M4组最高(70.35%)。M3和M4组粗蛋白质表观消化率显著高于其余各组(P<0.05),且其余各组之间无显著差异(P>0.05)。M1、M2、M3和M4组粗脂肪表观消化率均显著高于对照组和M0组(P<0.05),其中M2组最高(92.99%);M0组粗脂肪表观消化率最低,显著低于对照组(P<0.05)。M1、M2、M3和M4组粗灰分和钙表观消化率均显著高于对照组和M0组(P<0.05),其中M4组均最高。
表8 低蛋白质饲粮添加复合酶制剂对蛋鸡常规营养物质表观消化率的影响

Table 8 Effects of compound enzyme preparation supplementation in low-protein diets on apparent digestibility of conventional nutrients of laying hens %

项目
Items		 对照组
Control
group		 M0组
Group
M0		 M1组
Group
M1		 M2组
Group
M2		 M3组
Group
M3		 M4组
Group
M4		 P值
P-value
干物质 DM 66.15
±1.32cd		 64.82
±0.78d		 67.18
±0.49bc		 68.57
±2.22ab		 69.49
±0.40a		 70.35
±1.22a		 0.001
粗蛋白质CP 42.48
±2.24b		 40.69
±1.34b		 41.49
±0.88b		 42.73
±4.04b		 50.29
±0.65a		 51.58
±2.40a		 0.001
粗脂肪 CF 86.13
±0.54d		 85.11
±0.33e		 88.61
±0.17c		 92.99
±0.49a		 90.69
±0.12b		 90.37
±0.39b		 <0.001
粗灰分 Ash 25.47
±2.91d		 29.24
±1.57d		 35.46
±0.97c		 38.23
±4.36ab		 42.45
±0.75b		 47.89
±2.14a		 <0.001
钙 Ca 38.95
±2.38b		 42.58
±1.27b		 48.63
±2.11a		 49.26
±3.58a		 49.97
±0.65a		 51.51
±0.73a		 <0.001
磷 P 15.61
±3.29		 15.41
±1.88		 17.18
±2.83		 19.33
±3.26		 17.93
±1.07		 22.36
±3.19		 0.070

2.6 低蛋白质饲粮添加复合酶制剂对蛋鸡饲粮氨基酸表观消化率的影响

由表9可知,除半胱氨酸外,低蛋白质饲粮添加复合酶制剂对蛋鸡其余氨基酸表观消化率均有显著影响(P<0.05);除半胱氨酸外,对照组其余氨基酸表观消化率均显著高于M0组(P<0.05),与M4组无显著差异(P>0.05)。对照组和M4组异亮氨酸(Ile)、赖氨酸(Lys)表观消化率显著高于M0、M1、M2和M3组(P<0.05),M4组与对照组间无显著差异(P>0.05)。与对照组相比,M0、M1和M3组蛋氨酸(Met)表观消化率显著降低(P<0.05),而M2和M4组无显著变化(P>0.05)。与对照组相比,M0、M1和M3组苏氨酸(Thr)表观消化率显著降低(P<0.05),而M2和M4组无显著变化(P>0.05);与M0组相比,M1、M2、M3和M4组Thr表观消化率均显著提高(P<0.05)。与对照组相比,M0、M1、M2、M3组色氨酸(Trp)表观消化率显著降低(P<0.05),M4组无显著差异(P>0.05)。
表9 低蛋白质饲粮添加复合酶制剂对蛋鸡氨基酸表观消化率的影响

Table 9 Effects of compound enzyme preparation supplementation in low-protein diets on apparent digestibility of amino acids of laying hens %

项目
Items		 对照组
Control
group		 M0组
Group
M0		 M1组
Group
M1		 M2组
Group
M2		 M3组
Group
M3		 M4组
Group
M4		 P值
P-value
必需氨基酸 Essential amino acids
精氨酸 Arg 94.01
±0.23a		 92.52
±0.17d		 93.20
±0.10bc		 93.60
±0.45ab		 93.01
±0.09c		 93.63
±0.26ab		 <0.001
组氨酸 His 90.13
±0.39a		 89.13
±0.24bc		 88.97
±0.17c		 89.75
±0.72ab		 89.94
±0.13a		 89.64
±0.43ab		 0.003
异亮氨酸 Ile 84.54
±0.60a		 81.71
±0.41c		 82.09
±0.27bc		 82.96
±1.21b		 82.46
±0.23bc		 85.05
±0.61a		 <0.001
亮氨酸 Leu 89.89
±0.40a		 88.40
±0.26c		 89.10
±0.16b		 90.07
±0.70a		 89.71
±0.13ab		 89.71
±0.42ab		 0.002
赖氨酸 Lys 88.91
±0.43a		 86.62
±0.30c		 86.94
±0.20bc		 87.78
±0.86b		 87.67
±0.16b		 88.97
±0.45a		 <0.001
蛋氨酸 Met 85.65
±0.56ab		 84.47
±0.34cd		 83.75
±0.25d		 85.02
±1.05bc		 83.64
±0.21d		 86.42
±0.56a		 <0.001
苯丙氨酸 Phe 89.44
±0.41a		 87.41
±0.28b		 87.71
±0.18b		 88.94
±0.78a		 88.85
±0.14a		 89.31
±0.44a		 <0.001
苏氨酸 Thr 81.84
±0.71a		 77.82
±0.49c		 80.12
±0.30b		 81.20
±1.33ab		 80.34
±0.25b		 81.46
±0.76ab		 <0.001
色氨酸 Trp 88.43
±0.35a		 85.27
±1.33c		 85.86
±1.42bc		 85.59
±1.51c		 86.04
±0.84bc		 87.86
±0.58ab		 0.018
缬氨酸 Val 81.13
±0.74ab		 77.79
±0.49d		 79.42
±0.31c		 80.31
±1.39bc		 79.16
±0.27c		 81.75
±0.75a		 <0.001
非必需氨基酸 Nonessential amino acids
丙氨酸 Ala 79.76
±0.79a		 76.98
±0.51b		 78.24
±0.33b		 79.80
±1.42a		 78.19
±0.28b		 80.00
±0.83a		 0.003
天冬氨酸 Asp 85.53
±0.57a		 81.07
±0.42e		 83.24
±0.25cd		 84.14
±1.12bc		 82.70
±0.23d		 85.13
±0.61ab		 <0.001
半胱氨酸 Cys 80.82
±0.75		 81.19
±0.41		 81.57
±0.28		 80.87
±1.35		 81.43
±0.24		 81.90
±0.75		 0.478
谷氨酸 Glu 89.11
±0.42a		 86.76
±0.30b		 87.44
±0.19b		 88.41
±0.82a		 87.56
±0.16b		 88.54
±0.47a		 <0.001
甘氨酸 Gly 36.00
±2.49ab		 16.78
±1.85d		 31.44
±1.03b		 34.62
±4.61ab		 24.07
±0.98c		 38.25
±2.54a		 <0.001
脯氨酸 Pro 88.54
±0.45a		 86.80
±0.29b		 88.13
±0.18a		 88.83
±0.79a		 88.00
±0.16a		 88.26
±0.48a		 0.002
丝氨酸 Ser 86.37
±0.53a		 83.46
±0.37c		 85.33
±0.22ab		 85.84
±1.00ab		 84.79
±0.20b		 85.52
±0.59ab		 0.001
酪氨酸 Tyr 89.16
±0.42ab		 87.99
±0.27cd		 87.57
±0.19d		 88.61
±0.80bc		 88.46
±0.15bc		 89.90
±0.41a		 <0.001

3 讨论

3.1 低蛋白质饲粮添加复合酶制剂对蛋鸡生产性能和蛋品质的影响

蛋鸡的生产性能作为评估饲粮中添加复合酶制剂效果的主要指标,现有关于复合酶制剂对蛋鸡生产性能影响的相关研究,程志斌等[4]研究发现,玉米-豆粕型饲粮添加0.1% NSP酶可提高产蛋率,但差异未达显著;然而高振涛[5]研究发现,饲粮添加不同水平复合酶制剂后均能显著提高产蛋率并降低料蛋比,其中200 mg/kg添加水平效果提升最明显。Novak等[6]报道,饲喂添加淀粉酶、蛋白酶和木聚糖酶的饲粮能够提高产蛋重。这与本试验中添加复合酶制剂M2、M3和M4能够显著提高饲喂低蛋白质饲粮蛋鸡产蛋率和平均蛋重的结果一致,表明复合酶制剂能够提高蛋鸡的生产性能。
蛋品质直接决定了鸡蛋的商业价值,蛋品质的改善有助于延长鸡蛋的贮藏期,并提高其在卫生监管及食品加工领域的利用价值。魏涛[7]研究发现,添加复合酶制剂对产蛋后期蛋鸡的蛋壳厚度、蛋黄颜色、哈氏单位有所改善但不显著;张依量等[8]研究同样表明,添加NSP酶后对蛋品质有一定的提升效果。这与本试验结果相似,在本试验中,M1、M2、M3和M4组相比于对照组和M0组的蛋白高度、哈氏单位和蛋黄相对重量均在数值上有所提升,但差异不显著,这表明添加复合酶制剂对蛋品质有一定的改善作用,由于其效果受饲粮组成、酶制剂种类及动物生理状态等多因素调控,作用机制仍需进一步系统研究。

3.2 低蛋白质饲粮添加复合酶制剂对蛋鸡血清生化指标的影响

血液是动物机体代谢的重要媒介,血液各成分含量变化能够反映机体健康和代谢状况。于翔宇等[9]研究表明,饲粮添加复合酶制剂使蛋鸡血清TP含量极显著提高;王俊花等[10]试验结果显示,饲粮添加酶制剂能极显著提高伊犁鹅血清TP含量。这与本试验结果相似,在本试验中,M3、M4组血清中TP含量显著高于M0组,与对照组无显著差异,这表明复合酶制剂对机体蛋白质合成和代谢有促进作用。UA是氨基酸代谢和嘌呤代谢的最终产物,是排泄氮的主要形式,其含量能反映机体蛋白质的代谢情况。Rehman等[11]研究发现,添加3种不同复合酶制剂的试验组血清UA含量显著降低;刘伟等[12]研究同样表明,玉米-豆粕型饲粮加入含有蛋白酶的复合酶制剂可显著降低50日龄肉鸡血清UA含量,这些结果与本试验一致。血清UA含量降低,意味着蛋鸡的代谢废物减少,肝脏、肾脏负担减轻,整体生理状态更健康,同时减少环境污染。

3.3 低蛋白质饲粮添加复合酶制剂对蛋鸡血清抗氧化指标的影响

抗氧化功能对维持动物正常代谢及健康至关重要,尤其对于处于产蛋后期,氧化应激敏感性增加的蛋鸡,氧化损伤会直接影响产蛋量与蛋品质量,如蛋壳质量下降、稀蛋白增多及哈氏单位下降等。杨华等[13]研究发现,饲粮添加复合酶制剂提高了肉鸡血清T-AOC及SOD和GSH-Px活性,降低了MDA含量。张恒硕[14]研究发现,添加复合酶制剂能够降低蛋鸡血清MDA含量并增强其T-AOC。MDA含量作为细胞脂质过氧化损伤的关键指标,其降低与SOD、GSH-Px等活性的提高,均表明机体的抗氧化防御系统增强。研究发现,当热应激条件下肉鸡机体的抗氧化防御系统增强时,相关酶活性会提高,从而利于清除ROS,并减少脂质过氧化[15]。同样,添加复合酶制剂可通过增强抗氧化功能,缓解氧化应激,进而改善肠道健康及蛋白质合成,最终改善动物生产性能。本试验发现,与M0组相比,添加复合酶制剂M4有提高血清T-AOC、T-SOD活性的趋势,并能够在数值上降低血清MDA含量,但对蛋鸡抗氧化指标提升效果均不显著。复合酶制剂对蛋鸡抗氧化功能的改善属于间接效应,其核心靶点在于降解饲粮抗营养因子、优化营养物质的消化吸收效率,进而通过改善机体代谢状态间接调控抗氧化系统,本次试验结果与前人研究的不一致,可能与饲养环境、复合酶制剂组成与添加剂量有关。

3.4 低蛋白质饲粮添加复合酶制剂对蛋鸡肠道消化酶活性的影响

所有动物都需要消化酶来分解饲粮中营养物质,饲粮中NSP会抑制内源性酶活,降低营养物质的利用效率。而酶制剂的添加能够刺激内源消化酶的分泌[16],加快将饲粮中营养物质分解为小分子的过程,使得更多的营养物质能够进入肠道并被吸收[17]。艾晓杰等[18]试验结果证明,酶制剂可提高十二指肠内容物中消化酶活性,促进动物机体对营养物质的消化利用效率。耿丹等[19]在肉鸡饲粮中添加复合酶制剂,结果显著提高了42日龄肉鸡小肠内淀粉酶和蛋白酶的活性。Wen等[20]研究发现,添加外源酶制剂能提高产蛋后期蛋鸡十二指肠蛋白酶和脂肪酶活性。上述发现与本试验结果相似,在本试验中,M3和M4组胰蛋白酶活性显著高于对照组和M0组;M2和M4组淀粉酶活性显著提高对照组和M0组;M1、M2、M3和M4组脂肪酶活性均显著高于M0组。消化酶既可以由动物本身产生,也可以由胃肠道中微生物代谢产生,这是肠道内消化酶的另一个重要来源,如单胃动物家禽不能内源性合成NSP水解所需的酶,需要依赖肠道微生物分解。饲粮添加酶制剂可以为消化道微生物提供部分营养物质,使得微生物对饲粮中营养物质发挥更强的分解作用,为机体提供短链脂肪酸同时调节肠道微生物组成,进而影响肠道消化酶活性[21]。赖宝色等[22]报道指出,添加复合酶制剂可改善肠道微生物组成,提高有益菌丰度,增强蛋鸡消化能力,从而验证了这一观点。这表明饲粮中添加复合酶制剂可以通过降解抗营养因子,提高内源酶活性以及微生物调节等多种机制系统性的增强动物的消化能力。

3.5 低蛋白质饲粮添加复合酶制剂对蛋鸡常规营养物质表观消化率的影响

饲粮营养物质表观代谢率能反映饲粮品质,这直接影响养殖经济效益[23]。在饲粮中添加复合酶制剂可以提高肠道转运蛋白基因的表达,能够促进单糖吸收,提高蛋白质消化产物的吸收效率,有助于改善氮平衡并促进合成代谢[24]。目前,有关酶制剂对蛋鸡常规营养物质表观消化率影响的研究很多,如Amerah等[25]研究发现木聚糖酶、淀粉酶和蛋白酶之间存在协同作用,能够显著提高营养物质消化率,从而提高肉仔鸡的生长性能。王玲[26]研究发现,添加复合酶制剂后能够显著提高肉雏鸡饲粮中干物质、粗脂肪、粗蛋白质和粗灰分的消化率。常丹萍[27]试验结果显示,在蛋鸡玉米-杂粕型饲粮中添加复合纤维素酶能够显著提高粗蛋白质表观利用率,对钙、磷表观利用率同样有提升的趋势。本试验结果发现,低蛋白质饲粮添加复合酶制剂能够显著提高蛋鸡对干物质、粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分和钙的表观消化率,与上述研究保持一致,其中添加复合酶制剂M4对常规营养物质表观消化率提升效果最好。

3.6 低蛋白质饲粮添加复合酶制剂对蛋鸡氨基酸表观消化率的影响

氨基酸消化率是评价蛋白质品质的关键指标,同时也是反映机体消化系统功能状态及代谢水平的重要参数。提高氨基酸消化率有助于优化蛋白质摄入质量,改善消化系统健康,并提升整体营养物质利用效率。补充外源酶制剂可通过降低抗营养因子的不利影响,促进饲粮中氨基酸的充分释放与利用。Rutherfurd等[28]研究表明,饲粮添加复合酶制剂可使氨基酸的回肠消化率提高;另一项研究指出,玉米-大豆型饲粮添加含有木聚糖酶、蛋白酶和淀粉酶的复合酶能够提高肉鸡回肠氨基酸消化率[29]。在本试验中,除半胱氨酸外,低蛋白质饲粮添加复合酶制剂对蛋鸡其余氨基酸表观消化率均有显著影响,其中对照组这些氨基酸表观消化率均显著高于M0组,与M4组无显著差异,这说明M4组氨基酸表观消化率在所有试验组最佳,与饲喂正常蛋白质饲粮效果接近,表明复合酶制剂M4对促进氨基酸消化具有更优效果。在本试验中,与M0组相比,M1、M2、M3和M4组Thr表观消化率均显著提高,其中M4组提高了3.64个百分点。Thr作为黏蛋白合成的重要前体,其代谢状态与肠道黏蛋白的分泌密切相关[30]。黏蛋白在保护肠道上皮屏障、抵御内源酶及消化液机械损伤方面发挥关键作用。因此,蛋白酶可能通过提高Thr表观消化率,进一步调节黏蛋白代谢,从而形成促进氨基酸消化与吸收的良性循环。在本试验中,对照组和M4组Ile、Lys表观消化率显著高于M0、M1、M2和M3组,对照组和M4组Met表观消化率显著高于M0、M1和M3组。Ile和Met在机体蛋白质合成过程中具有重要作用[31-32]。因此,这2种氨基酸消化率的提高有助于改善整体蛋白质代谢效率。粗蛋白质和氨基酸消化率提高,能够促进机体利用氨基酸参与蛋合成、免疫球蛋白生成以及其他蛋白质合成等生理代谢途径,进而提高体内循环氨基酸利用效率。

4 结论

综上所述,添加复合酶制剂可以提高饲喂低蛋白质饲粮蛋鸡的生产性能、肠道消化酶活性和常规营养物质及氨基酸的表观消化率,从而降低低蛋白质饲粮对蛋鸡造成的负面影响。本试验条件下,低蛋白质饲粮添加0.1%复合酶制剂M4(含木聚糖酶、甘露聚糖酶、葡聚糖酶、淀粉酶和蛋白酶)的作用效果最佳。

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